Способ определения степени тяжести сердечной недостаточности у больных с ревматическим пороком сердца

 

Изобретение относится к кардиологии , в частности к диагностике сердечной недостаточности. Цель изобретения - повышение точности способа. В крови пациента определяют общее содержание жирных кислот, соотношение фракций жирных кислот и глицерина. По величине соотношения жирных кислот и глицерина и по величине индекса ненасыщенности по сравнению с нормой определяют степень тяжести недостаточности и контролируют эффективность лечения. По мере нарастания сердечной недостаточности содержание жирных кислот значительно увеличивается, а содержание глицерина падает. При третьей стадии сердечной недостаточности индекс ненасыщенности увеличивается до 6,4. i (Л N9 00 О СП 4iik

СОКИ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 G 01 N 33/92

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

Il0 ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3939352/28-14 (22) 26.06 ° 85 (46) 30 12,86. Бюл. В 48 (71) Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И,М.Сеченова (72) И.В.Неверов, В.Т.Новиков и P.Ï.Ñïèíîâà (53) 616.17 (088.8) (56) Таганович А.Д. Особенности обмена липидов при пороке митрального клапана. Дис. канд. биол. наук, Ростов на Дону, 1980, Ф,.SU„„1280547 А 1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ У БОЛЬНЫХ С РЕВМАТИЧЕСКИМ ПОРОКОМ СЕРДЦА (57) Изобретение относится к кардиологии, в частности к диагностике сердечной недостаточности. Цель изобретения — повышение точности способа.

В крови пациента определяют общее содержание жирных кислот, соотношение фракций жирных кислот и глицерина.

По величине соотношения жирных кислот и глицерина и по величине индекса ненасьпценности по сравнению с нормой определяют степень тяжести недостаточности и контролируют эффективность

Ф лечения. По мере нарастания сердечной щ недостаточности содержание жирных кислот значительно увеличивается, а содержание глицерина падает. При третьей стадии сердечной недостаточности индекс ненасьпценности увеличивается до 6,4.

1280547 .

Изобретение относится к кардиологии, в частности к диагностике сердечной недостаточности.

Цель изобретения — повышение точности диагностики сердечной недоста- 5 точности.

Способ осуществляют следующим образом.

Производят биохимическое обследование пробы крови пациента. Определя10 ют общее содержание жирных кислот, соотношение фракций жирных кислот (насыщенных, мононенасыщЕнныхх, полиненасыщенных) и глицерина, и по величине отношения жирных кислот к гли!

5 церину, и по величине индекса ненасыщенности по сравнению с нормой опре-; деляют степень тяжести сердечной недостаточности и контролируют эффективность лечения.

Содержание жирных кислот неуклонно нарастает, а содержание глицерина падает по мере утяжеления сердечной недостаточности, Величина отношения 25 жирные кислоты / глицерин увеличивалась от 102 у здоровых людей до 270 при третьей стадии сердечной недостаточности.

По мере нарастания сердечной не- 30 достаточности существенно нарастает относительное содержание полиненасыщенных жирных кислот и уменьшается содержание насыщенных жирных кислот, Индекс ненасыщенности увеличивается от 3,6 у здоровых людей до 6,4 .у бо-, льных третьей стадией сердечной недостаточности, При сердечной недостаточности у больных с ревматическими порбками 40 сердца уже на ранних стадиях недостаточности кровообращения выявляют изменения содержания жирных кислот, глицерина, которые определяют как синдром нарушения йх утилизации. 45

Пример ы. Больной К-н, 26 лет.

Диагноз: ревматизм, неактивная фаза, ревматический митральный порок сердца: стеноз левого атриовентрикулярного отверстия, недостаточность клапа- 5р нЬв аорты, Порок выявлен с 1979 г., клинических признаков сердечной недостаточности нет. Диагноз установлен на основании клинического исследования: характерной аускультативной кар-55 тины сердца, записи ЭКГ, фонокардиограммы, эхокардиограммы, рентгенологического исследования сердца, лег" . ких, подтвердившего отсутствие недостаточности по.малому кругу, Переферических отеков нет. Печень не увеличена, т.е. нет застойных явлений по большому кругу кровообращения.

Проводят определение содержания жирных кислот ЖК, фракций жирных кис лот, глицерина по следующим методикам.

А. Определение содержания жирных кислот в сыворотке крови. Для этого

0,2 мл сыворотки крови больного переносят в пробирку с притертой пробкой, в которую предварительно наливают .

0,3 мл дистиллированной воды, Добавляют 2,5 мл экстракционной смеси (4 объема изопропанола, 1 объем гептана и О, 1 объема н. раствора серной кислоты), перемешивают, Через 5 мин прибавляют,1 мл дистиллированной воды и 1,5 мл гептана, затем энергично взбалтывают. Через несколько минут нанамечается гептановая фаза — около

2,2 мл, 1 мл этой фазы переносят в бюкс с притертой пробкой, осторожно добавляют 1 мл индикаторного раствора (4,5 мг натриевой соли метилрота в

100 мл изопропанола). Колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЭК-56 М в кюветах 5 мм на сине-зеленом светофильтре (490 нм) относительно пробы, составленной из равных частей индикаторного раствора и гептана. По найденной экстинции в единицах оптической плотности строят график калибровочной кривой. Калибровочную кривую строят, используя 1 мл стандартного раствора пальмитиновои кислоты (51,8 мл пальмитиновой кислоты растворяют в 100 мл гептана) со следующими концентрациями: 0 05; 0,1; 0,2;

9,3 мэкв на 1 мл гептана и обрабатывают их как пробу. По построенной таким образом калибровочной кривой ведут отсчет количества жирных кислот (неэстерифицированных), которое после умножения на 2,2 дает их содержание ч пробе в мэкв/л, Б. Исследование фракций высших жирных кислот.

Методику проводят в несколько этапов. Приготовление экстрактов. Липиды экстрагировали из сыворотки крови спирто-эфирной смесью 1:3. Для этого к 0,2 мл сыворотки добавляют 5 мл предварительно нагретой спирто-эфирной смеси. экстракт фильтруют, К фильтрату добавляют 0 05 мл 10Х-ного спиртового раствора едкого калия, 1280547 тщательно встряхивают и ставят в водяную баню на 45 мин для гидролиза.

В присутствии щелочи жирные кислоты, образующиеся при расщеплении жиров, нейтрализуются с образованием солей.

К сухому остатку прибавляют 5 мл дистилированной воды (растворение солей жирных..кислот), 0,2 мл концентрированной соляной кислоты. Жирные кислоты экстрагируют 5 мл петролейного 10 эфира в течение суток в холодильнике.

Затем петролейный эфир с растворенными жирными кислотами (верхняя фаза) отсасывают и выпаривают на водяной бане (в ультратермостате при 80 С). 15

Жирные кислоты из сухого остатка экстрагируют 3-4 каплями петролейного эфира и микропипеткой переносят на хроматографическую бумагу, предварительно активированную, Предваритель- 20 ная обработка бумаги.

Размер полос хроматографической бумаги марки "Б †скор" 300 на 135 см.

Для удаления солей тяжелых металлов бумагу обрабатывают 0,57-ным.раствором трилона Б в 507-ном растворе уксусной кислоты в течение 30 мин, 3атем тщательно отмывают водой 2 ч, высушивают и пропитывают 87-ным раствором вазелинового масле в бензоле.

Процесс хроматографии. Разделение фракций жирных кислот проводят в герметичной стеклянной камере. Систему растворителей (967.-ная уксусная кислота, 857-ная муравьиная кислота и дистиллированная вода в соотношении

75:25:2,5) помещают в специальной лодочке, расположенной в верхней части камеры. Край бумаги со стороны линии 40 старта погружают в лодочку, разделение проводят нисходящим путем в течение 4,5 ч в термостате при 37 С. После сушки на воздухе хроматограмму обрабатывают в течение 20 мин раство-. 45 ром уксуснокислой меди (20 мл насыщенного раствора уксуснокислой меди на 480 мл дистиллированной воды) для перевода жирных кислот в медные мыла, промывают водой и окрашивают 27.-ным раствором железистосинеродистого калия в течение 5 мин. В результате на бумаге проявляют три пятна, соответствующие содержанию фракций жирных кислот: на старте — насьпценных, затем — мононенасыщенных и далее — полиненасьпценных, Соотношение фракций в процентах определяли на денситометре "Биан".

В, Определение содержания глицерина крови.

В центрифужную пробирку с 2,25 мл

37-ной трихлоруксусной кислотой вносят 0,25 мл цельной крови. Центрифугируют 10 мин при 5000 тыс. об/мин.

Затем супернатант переносят в 2 пробирки: в первую — 0 5 мл супернатанта и проводят определение содержания глюкозы арто-толуидиновым способом, во вторую чистую пробирку, помещенную в водяную баню, вносят 1 мл супернатанта, прибавляют 0,5 мл смеси заранее приготовленной из 0,2 M молярного раствора перйодат натрия и 1 н.раствора серной кислоты в отношении 1:4, перемешивают и записывают время окислительной реакции. Через 15 мин, для прекращения этой реакции и удаления непрореагировавшего перйодата прибавляют 0,2 мл 1 М раствора арсенида натрия и тщательно перемешивают. После исчезновения желтой окраски от выделившегося йода (5-7 мин) прибавляют

0,1 мл 57-ного феррицианида калия, перемешивают, вносят 1 мл 0,47.-ного раствора фенилгидразина, вновь перемешивают и записывают время начала колориметрической реакции. Через

20 мин прибавляют 2,3 мл 4 н. раствора соляной кислоты, перемешивают и через 3 мин, применяя зеленый светофильтр и 10 мм кюветы, определяют оптическую плотность с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-56 М, сравнивая розовую окраску исследуемого ра створа с дистиллированной водой. Из полученной оптической плотности вычитают экстинцию, соответствующую фактическому содержанию глюкозы. Для определения глицерина (B мг7) и экстин, ции, соответствующей содержанию глюкозы, определенной орто-толуидиновым методом, строят отдельно две калибровочные кривые: первая — с заданными концентрациями глюкозы (50, 100, 150, 200 MrX) и вторая — с заданными концентрациями глицерина (5, 10, 15, 20 MrX). Среднее содержание глицерина у здоровых людей 4,5+0,14 мг7, При определении содержания жирных кислот, фракций жирных кислот, глицерина получают следующие результаты: жирные кислоты 448 мэкв/л, глицерин

4,33 мг7., фракции жирных кислот: насьпценные 10,87, полиненасьпценные

38,87, коэффициент ЖК/глицерин 103, индекс ненасыщенности 3,6. Делают

1280547 ности. вывод коэффициент ЖК/глицерин (у здоровых людей 102), и индекс ненасыщенности (у здоровых людей 3,6) по сравнению с нормой не изменен. После проведенного курса лечения режим палатный, диета 10 стол, тазепам по 1 табл.

2 раза в день, результаты сохраняются на прежних цифрах: коэффициент ЖК/

/глицерин 102,9; индекс ненасьпценности 3,6. Обследование подтверждает от- lp сутствие сердечной недостаточности у больного, невыявленной и по клинической оценке.

Пример 2. Больная М-ва, 34лет.15

Диагноз: ревматизм, неактивная фаза, ревматический митральный порок сердца, недостаточность митрального клапана, стеноз левого атриовентрикулярного отверстия. Пароксизмальная тахи-20 кардия. Недостаточность кровообращения 1-ой стадии по клинической оцен-, ке. Порок выявлен с 1982 r., после присоединения приступов пароксизмальной тахикардии появились признаки 25 сердечной недостаточности. Диагноз установлен на основании жалоб больной (на одышку при физической нагрузке, сердцебиение, перебои в работе сердца) клинического исследования: характер- .:ф ных изменений звуков сердца, записи

ЭКГ в покое (выявлена гипертрофия левого желудочка), фонокардиограммы, . рентгенологического исследования легких, сердца, при котором обнаружено и 5 изменение размеров сердца, увеличение правого и левого желудочков, корни несколько расширены, однако застойных изменений в легких нет. Отеков нет, печень не увеличена. 40

При осуществлении способа диагно.стики степени тяжести сердечной недо" статочности получают следующие результаты: жирные кислоты 660 мэкв/л, глицерин 4,0 мгХ, коэффициент жирные

45 кислоты/глицерин 165, фракции жирных кислот: насьпценные 9,0Х., ненасьпценные 43Х, индекс ненасьпценности 4,77;

Таким образом коэффициент ЖК/глицерин увеличен до 165 (у здоровых людей 50 равняется 102), индекс ненасьпценности увеличен до 4,77 по сравнению с резу" льтатами:у здоровых людей 3 6, После проведенного курса лечения: дигоксин по 1/2 таблетки 3 раза в день, затем

55 по 1/2 табл. 2 раза в день, оратат калия по 1 таблетки 4 раза в день, 6 фуросемид 1 таблетки 2 раза в неделю, .результаты приблизились к результатам здоровых людей, т.е,: жирные кислоты

512 мэкв/л, глицерин 4,4 мгХ, коэффициент ЖК/глицерин 116 (норма 102), фракции жирных кислот: насыщенные

10,0Х, ненасыщенные 38,2Х, индекс ненасыщенности 3,82. Т.е. коэффициент

ЖК/глицерин после лечения стал равным

116 (норма 102), а индекс ненасьпценности после лечения стал равным 3,82 (норма 3,6). Способ позволяет установить наличие ранней стадии сердечной недостаточности и при повторном определении перед выпиской объективно подтвердить эффективность лечения.

В группе больных с ревматическими пороками с клинически выявленной 1-ой стадией сердечной недостаточности фиксируют изменения коэффициента ЖК/

/глицерин и индекса ненасьпщенности, средние цифры при поступлении: коэффициент ЖК/глицерин 4,7; индекс ненасы щенности 168, которые после лечения стали близки к показателям здоровых людей.

В группах больных ревматическими пороками с клинически выявленными стадиями (2А, 2Б, 3-ей) сердечной недостаточности в изменении показателей способа обнаруживают следующие закономерности в группе 2А ст,: коэфф.

ЖК/глицерин .178, индекс ненасьпценности 5,4; в группе 2Б ст.: коэфф. ЖК/

/глицерин 210,3, индекс ненасыщенности 5,9» в группе 3 ст.: коэфф. ЖК/

/глицерин 270,5, индекс ненасьпценности 6,52), Коэффициент ЖК/глицерин и индекс ненасыщенности — точные показатели степени тяжести сердечной недостаточФормула изобретения

Способ определения степени тяжести сердечной недостаточности у больных с ревматическим пороком сердца путем исследования в крови уровня жирных кислот, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности спо" соба при определении разлИчных ревматических пороков, дополнительно определяют глицерин и по увеличению соотношения первого к второму в сравнении с нормой определяют степень тяжести заболевания.