Способ получения 3-кето- @ -стероидов,замещенных в положении 7

 

Изобретение относится к замещенным стероидам, в частности к 3-кето лы I стероидам общей формух СИ -СН.-СНСх I I Y С СН-СН-СН -он -он -CHjj -CHj -CHj-C R. где R, С,-С4 - алкил; X + Y образуют группу С-СН2-СН -С(0)-0 или , а Y -(CH2),j-C(0)-OMe, при Me Н или щелочной металл, причем R, находится в а;,-положении, которые проявляют антиальдостероновую активность . Дпя выявления активности среди замещенных стероидов были получены новые I. Их синтез ведут дегидрированием соединения 1, где X-bY - указанная группа, с помощью, например, 2,З-дихлор-5,6-дициано-1,4- бензохинона в среде диоксана в инерт- Hoii атмосфере. Полученный продукт при необходимости обрабатывают щелочью , например КОН (происходит размыкание цикла с получением и ,-CH2-C(0)-OMe). Далее также при необходимости образовавшийся продукт гидролизуют в присутствии кислоты и вьщеляют целевой 1. Испытания 1 показьшают, что они малотоксичны и проявляют лучшую активность, чем известный продукт. 2 табл. О) :с :о

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН>>я> а»

SU ф> ) РГ>»">-7> a q

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H FlATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3366202/23-04 (22) 17.12.81 (31) 8027272 (32) 23.12.80 (33) FR (46) 30.03.87. Бюл. Р 12 (71) Руссель Юклаф (FR) (72) Люсьен Неделек, Весперто Торелли и Даниэль Филиберт (FR) (53) 547.689.6.07(088.8) (56) Патент США 11 4258039, кл. 4241241, опублик. 24.03.81. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 3-КЕТО- 6 -СТЕРОИДОВ, ЗАМЕЩЕННЫХ В ПОЛОЖЕНИИ 7 (57) Изобретение относится к замещенным стероидам, в частности к 3-кето- 6 -стероидам общей формулы 1

Х

СН СН CH С

1 1

С-СН-СН-СН вЂ” СН вЂ” СН вЂ” CM — СН, 1

О=С-СН=С -СН,-С R

C5D 4 С 07 J 5/00//А 61 К 31/57 где R, = С,-С вЂ” алкил; Х + Y = образуют группу С CIlz СН С(О) или

Х = ОН, à Y =-(СН ) -С(0)-ОИе, при

Me = H или щелочной металл, причем

R» находится в -положении, которые проявляют антиальдостероновую активность. Для выявления активности среди замещенных стероидов были получены новые 1. Их синтез ведут дегидрированием соединения 1, где

X+Y — указанная группа, с помощью, например, 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4бензохинона в среде диоксана в инертной атмосфере. Полученный продукт при необходимости обрабатывают щелочью,например КОН (происходит размыкание цикла с получением Х=ОН и

Y=CH<-СН -С(О)-ОМе). Далее также при необходимости образовавшийся продукт гидролизуют в присутствии кислоты и выделяют целевой 1. Испытания 1 показывают, что они малотоксичны и проявляют лучшую активность, чем известный продукт. 2 табл.

1301317

10

Изобретение относится к способу получения новых производных стерои1,4 дов 3-кето- ь -стероидов, замещенных в положении 7, общей формулы

Где R (С С4 алкил !

«о

О

Х и Y вместе группа / . или

\ 15

Х вЂ” радикал гидроксил;

Y — радикал -СН-СН-СО !1е, где Me — атом водорода или атом щелочного металла, причем заместитель R на-! ходится в о -положении, обладающих антиальдостероновой и антиандрогенной активностью.

Цель изобретения — получение новых стероидных соединений, обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед известными структурными аналогами.

Пример I.I| -Лактон l7P †гидрокси 7с -пропил-3-оксо 17о -прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты.

Растворяют в инертной атмосфере

2 r (-лактона 17 -гидрокси 7о -пропил †. †ок 17г -прегн-4-ен 21-карбоновой кислоты и 1,44 г 2,3-дихлор35

-5,6-дициано 1,4-бензохинона в 10 см диоксана. Перемешивают с обратным хо-, лодильником в течение 1 ч 45 мин.

Охлаждают льдом 10 мин, отсасывают осадок, прополаскивают его диоксаном ., Органический слой промывают 10%ным водным раствором тиосульфата натрия, а затем 1 н. раствором гидрата окиси аммония. Промывные воды зано- 45 во экстрагируют.этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат соединенные органические слои и отгоняют досуха под уменьшенным давлением. Получают

2,8 г сырого продукта, который хрома- 50 тографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол — этиловый эфир уксусной кислоты.

Собирают 1 4 г продукта, который кристаллизуют в 5 см этилового эфиз ра и отсасывают.

Получают 1,3 r продукта, который можно перекристаллиэовать в изопропаноле. Т.пл. 202 С.

Вычислено, %: С 78,49; H 8,96.

Сг Нэа С = 382,52 .

Найдено, %: С 78,6; Н 9,1.

Вращательная способность (с ) о

О

+3 + 2 (k = 0,8% в хлороформе).

Пример 2.1! -Лактон 7 †(3-хлорпропил) 17 р -гидрокси 3-оксо

17го -прегна-1,4-дней 21-карбоновой кислоты.

Растворяют в инертной атмосфере

3, 5 г It -лактона 7 g — (3 — хлорпропил) !

7 Р -гидрокси 3-оксо 17о(, -прегн-4-ен

21-карбоновой кислоты и 2,3 г 2,3-дихлор-5,6-дициано 1,4-бензохинона в

17,5 см диоксана . 3

Перемешивают с обратным холодильником в течение 3 ч, затем охлаждают льдом в течение 10 мин, отсасывают осадок, прополаскивают диоксаэ ном и разбавляют фильтрат 30 см эти-. лового эфира уксусной кислоты.

Промывают органический слой 10%ным водным раствором тиосульфата натрия, а затем 0,5 н. раствором гидрата окиси аммония. Заново экстрагируют этиловым эфиром уксусной кисло. ты, сушат, отфильтровываЮт и отгоняют досуха под уменьшенным давлением.

Получают 4,7 г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бенэол — этиловый эфир уксусной кислоты (8:2).,Собирают 2,4 г масла, которое кристаллизуют в 5 см этилового эфира. з

Получают 2,3 r продукта (т.пл. о, I96 C), который можно перекристаллиэовать в изопропаноле для получения 1,9 г чистого продукта. Т.пл.

196 C.

Вычислено, %: С 72,01; H 7,98;

Сl 8,50.

С Нэ С!ОЙ = 416,97.

Кайдено, %: С 72,0; Н 8,1;

С1 8,7.

Вращательная способность (oL)>

+4 «+ 1„5 (k = 0,8% в СНС!э)

П р и M е р 3. Ig -Лактон 7 — (бут.

-3-енил) !7 -гидрокси 3-оксо !7ю —

-прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты.

Растворяют в инертной атмосфере

4,7 г -лактона 7-Ы.-(бут-3-енил)

l7 P -гидрокси 3-оксо 17оС -прегн-4-ен

21-карбоновой кислоты и 3,5 г 2,3-дихлор-5,6-дициано 1,4-бензохинона в э

23,5 см диоксана. Перемешивают с обратным холодильником в течение

3 130131

2 ч 30 мин, охлаждают льдом, отсасывают осадок, прополаскивают его диоксаном. ь

Разбавляют фильтрат 30 см этилового эфира уксусной кислоты, промывают 10%-ным водным раствором тиосульфата натрия, затем 0,5 н. раствором . гидрата окиси аммония, а затем водой.

Экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, фильтруют и пе- 10 регоняют под уменьшенным давлением.

Получают 5,2 г масла, которое хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол — этиловый эфир уксусной кислоты (8:2). Собирают 15

1,8 г продукта, который кристаллизуют в эфире.

Получают 1,7 г целевого продукта.

Т.пл. 197 С.

Вычислено, .: С 79,15; Н 8,69. 20

С26НЭ4ОЭ = 394,53

Найдено, Х: С 79,3; Н 8,8.

Вращательная способность (ос в

-7 + 1 (k = 0,9Х в СНС1 ).

Пример 4. Соль калия 17P — 25

-гидрокси 3-оксо 7а -пропил 17oL— прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты.

2 г полученного в примере 1 $ -лактона 17 -гидрокси 7о -пропил 3-оксо 30

17< -прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты вводят в суспенэию в 11,2 см

0,45 ч. этанолового раствора едкого кали и 11,2 смэ воды. Нагревают с обратным холодильником 15 мин, пе- 35 регоняют досуха под уменьшенным з давлением и прибавляют 50 см ацетона. Охлаждают льдом и отсасывают целевой продукт.

Получают 2 r продукта. Г,пл. 280 С.

Этот продукт растворяется в теплой смеси вода — ацетон (1:1). Фильтр руют, прибавляют 70 см ацетона, леденят и отсасывают. 45

Получают 1,7 г целевой соли калия в виде моногидрата. Т.пл. 280 С.

Вычислено, : С 68,45; Н 8,04.

С Н КО4 = 438,63 (продукт, высушенный при 100 С). 50

Найдено, .: С 68,2; Н 8,0.

Вычислено, .: С 65,75; Н 8,17.

С Нэз К04 И2С (невысушенный) . 25 Эз

Найдено, Х: С 65,5; Н 8,2.

Вращательная способность (oCJ = 55

-20 . 1О (k =- l в воде).

Пример 5. Соль калия 7оа — (3-хлорпропил) 17Р -гидрокси 3-оксо

7 4

17 -прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты.

Действуя, как указано в примере 4, но исходя из 0,84 г полученного в примере 2 продукта, получают 0,62 г целевого продукта. Т.пл. 230 С. о .

Вычислено, : С 60,29; Н 7,43;

Сl 7,12.

С Нэ4С1К04 = 4731094 (сольват в

5 воды)

Найдено, Х: С 60,4; Н 7,0;

С1 7,2 .

K.фишер: 4,7-5,2Х воды.

Вращательная способность(о ) о

Р— 22,5+ 1,5 (k = l, l в воде).

Пример 6. Соль калия 7ю — †(бут-3-энил)17(3 -гидрокси 3-оксо

17Ж -прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты, Действуя, как указано в примере 4, но исходя иэ 1,16 г полученного в примере 3 продукта, получают 0 634 г целевого продукта. Т.пл. 270 С.

Вычислено, Х: С 67,93; Н 7,89.

С26НЭ К04 1/2 Н20 = 459,65

Найдено, Х: С 67,6; Н 7,8.

К.Фишер: 1,9-2,1Х воды.

Вращательная способность (М,) — -3241 (k = 1Х в воде). о

Пример 7,IS -Пактон 17Р -гидрокси 7 -пропил 3-оксо 17еС -прегна-1,4-диен 21-карбоновой кислоты.

10,г g -лактона 17 -гидрокси-7— К-пропил 3-оксо 17 -прегн-4-ен .

21-карбоновой кислоты вводят в сусэ пензию в инертной атмосфере в 60 5 см метанолового раствора едкого калия и 60,5 см воды. Нагревают с обратным холодильником в течение 15 мин и получают раствор соли калия (раствор А). Отдельно готовят буферный раствор, содержащий 13,6 г первичного фосфата натрия в 1,9 л воды.

Прибавляют 60 см 1 н. раствора едэ кого натра и доводят рН до 7,2 прибавкой 6,1 см 1 н ° раствора едкого натра (раствор В).

Смешивают 1,5 л раствора В с раствором A а затеи прибавляют 50 мг

2-метил-1,4-нафтохинона, 100 см э ферментативной мази Arthrobacter

simplex u lO г гифлосуперцела.

Суспензию перемешивают под барботированием воздуха в течение 24 ч при 33 4 1 С.

Затем подкисляют при помощи э

100 см 5 н. соляной кислоты и перемешивают 30 мин при комнатной тем!

30!3!

5 пературе. Прибавляют 400 см этилоаого эфира уксусной кислоты, перемешивают 15 мин, фильтруют на гифпосуперцеле и прополаскивают этиловым эфиром уксусной кислоты. 5

Декантируют фильтрат, промывают

10/-ным водным раствором тиосульфата натрия, затем водным раствором бикарбоната натрия, а затем водой.

Заново экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, фильтруют и отгоняют досуха под уменьшенным давлением. Получают 9,5 r целевого продукта.

Осадок гифлосуперцела вводится за- !5 ново в суспензию в 150 см метанола в течение 30 мин при перемешивании.

Отфильтровывают, концентрируют фильтрат под уменьшенным давлением, разбавляют водой и экстрагируют эти- 20 ловым эфиром уксусной кислоты. Сушат, фильтруют и получают 0,6 г целевого продукта. Новая экстракция гифлосуперцела смесью хлористый метилен — метанол (1:1) позволяет рекуперировать 140 мг продукта.

Соединяют три партии (т.е. 10,2 г), растворяют их в 300 см этилового

9 о, эфира уксусной кислоты при 50 С и прибавляют 41,5 г активированного 30 угля. Перемешивают 5 мин и отфильтровывают на гифлосуперцеле. Отгоняют фильтрат досуха под уменьшенным давлением.

35 з

Забирают кристаллы в 25 см изопропилового эфира, отсасывают и собирают 9,6 г чистого продукта. T.пл.

202 С.

Продукт идентичен продукту при- щ мера 1.

Пример 8. $-Лактон 17Р-гидрокси 7М. -пропил 3-оксо 17< -прегна-I 4-диен 21-карбоновой кислоты.

1 г -лактона 17 Р -гидрокси 7Ф-пропил 3-оксо !7-0);прегн-4-ен 21-карбоновой кислоты в 10 см безводЭ ного толуола и 1,1 селенового ангидрида в бензоле нагревают при IOO С в инертной атмосфере. После 1 ч пере- 5р мешивания полученный раствор разбавляют 30 см этилового эфира уксусной кислоты, промывают водой и водным раствором бикарбоната натрия. Заново экстрагируют водные слои этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, фильтруют и перегоняют досуха под уменьшенным давлением.

Получают 1,25 г масла которое хроматографируют на двуокиси кремния элюируя смесью бензол — этиловый эфир уксусной кислоты (8:2) .

Получают 850 мг целевого продукта. Т.пл. 202 С.

Продукт идентичен продукту примера 1.

Пример 9.I| -J)aKTQH 7g -бутил.

-17 р -гидрокси 3-оксо 17с -прегна-),4-диен 21-карбоновой кислоты.

Действуя, как указано в примере

7, но исходя из 2 г )) -лактона 7 -бутил 17Р -гидрокси 3-оксо-17 -прегн-4-ен 21-карбоновой кислоты,получают 1,6 г целевого продукта (чистого) °

Т.пл. 183 С.

Вычислено, Ж: С 78,74; Н 9,15.

С Нз О = 396,5

Найдено, Е: С 79,0; Н 9,3.

Вращательная способность fk) о

Э

-9,5+2 (k = 0,7Х в СНС) ) .

Пример 10. f -Лактон 70 — (2-метилпропил) 17 Р -гидрокси 3-оксо-172 -прегна-),4-диен 21 карбоновой кислоты, Действуют, как указано в примере

7, но исходя из 1 г I) -лактона 7 †(2-метилпропил) 17Р -гидрокси 3-оксо

17- -прегн-4-ен 21-карбоновой кислоты, получают 0,9 г целевого продукта (первая партия).

Собирают осадок гифлосуперцела хлористым метиленом, фильтруют, промывают фильтрат при помощи водного раствора бикарбоната натрия, сушат, фильтруют и упаривают досуха, получают 0,2 r продукта (вторая партия).

Обе партии соединяют, очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол — этиловый эфир уксусной кислоты (8:2). Собирают 0,925 г продукта, который можно перекристаллизовать в изопропаноле.

T.ïë. 245 С.

Вычислено, 7.: С 78,74; Н 9,15.

С 6 з С = 396, 5

Найдено, Е: С 78,9; Н 9,4. (oLJp — — +6,5+ 2 (k = 0,5Х в СНС)з ) ..

Пример 11. 17Р -Окси-7ос-пропил-3-оксо-)70 -прегна-),4-диен-21-.

-карбоновая кислота.

Растворяют 500 мг 17 Р -окси-7k—

-пропил-3-оксо-)7К-прегна-1,4-диен-2)—

-карбоксилата калия в 15 мл. воды, раствор охлаждают приблизительно до .о

+5 С, добавляют при перемешивании

12 мл О,l н. соляной кислоты и продолжают перемешивание еще в течение

1301317

В момент проведения диуреэа животные получали водно-солевую перегрузку интраперитонеальным путем в количестве 5 мл 97-ного физиоло5 гического раствора (на одно животное) и 1 мг/кг моноацетата альдостерона в виде 2,5%-ного спиртового раствора подкожно.

Затем крыс поместили по две в клетку для диуреэа беэ еды и питья на 4 ч.

По истечении этого времени проводили усиленное мочеиспускание под давлением на мочевой пузырь и измеряли объем собранной мочи.

После тщательной промывки клеток и стеклянной посуды объем мочи составил 50 см . В этом растворе проводили определение натрия и калия мочевого происхождения фотометрией пламени на автоанализаторе.

Ингибирующее действие, 7., при введении продукта в дозе, мг/кг

Продукт подкожном оральном

04 2 10

0,4 1 2

По примеру 4

58

30

58

Известный 22

По примерам 5, 10, ll

49

31

30

Известный

Изучение антиандрогенной активности.

Группы из 5 кастрированных самцов крыс в возрасте примерно 4 недель (вес примерно 100 г) получали одновременно (за две отдельные инъекции) и ежедневно в течение 8 дней подкожно испытуемый продукт и 50 мг

15 мин, Затем остаток обезвоживают, промывают водой и сушат до постоянного в са. Получают 420 мг целевого продукта, Rf = 0,2 (метиленхлорид/этанол 8:2), т.пл. 205 С (разл.).

Вычислено, г .: С 74 13 Н 9 08

Н 0 I,l.

Найдено, Ж: С 74,1; Н 9,0;

Н 0 0,9.

Изучение антиальдостероновой активности.

Изучение проводилось с помощью теста, разработанного Кагава и Маркусом по следующей методике.

Самцы крыс Spraguea Dawley

SPFZFFACREPO весом 180 г были подвергнуты адреналэктомии эа семь дней до диуреза, анестезированы имальгеном (кетамином) интраперитонеально дозой 100 мг/кг, с момента операции и до начала эксперимента получали в качестве питьевой воды физиологический раствор.

За 17 ч до диуреза животным не давали пищи, физиологический раствор заменили на воду с 57 глюкозы.

Продукты вводили орально за 1 ч перед посадкой в клетку.

Полученные результаты, выраженные в процентах ингибирования активности I мг/кг моноацетата альдостерона, введенного подкожно, на логарифм отношения концентрации натрия к кон- . центрации калия (метод Кагава) приведены в табл.1.

Таблица пропионата тестостерона (продукты суспендированы в карбоксиметилцеллюлоэе, содержащей 0,2Х твина, их вводят в объем 0,5 см ).

Животных умертвили через 24 ч после последней обработки, изъяли простату и зафиксировали на 24 ч в IOXном растворе формальдегида (на фиэи9 1ЗО1З ологическом растворе), потом рассекли и взвесили.

Ингибирование увеличения веса . простаты, вызванного пропионатом тестостерона, рассматривается как антиандрогенная активность продуктов.

Полученные результаты приведены в табл.2.

Таблица2

Продукт

Ингибирующее действие, 7, при введении продукта в дозе, мг

l0 30

По примеру 4 10

13

Известный 9

0 1 где R< имеет указанные значения, при необходимости подвергают взаимодействию с гидроокисью щелочного металла с получением соединения об35 щей формулы IV

СН2-СИ -СООТГ.

0 где RI имеет укаэанные значения, а

Me — атом щелочного металла, и затем при необходимости подверга45 ют кислотному гидролизу с помощью кислотного агента для получения целевого продукта формулы I где Y —"

-OH<-СН OOMe, где Me — водород, после чего целевые продукты выделяют.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве гидроокиси щелочного металла используют гидроокись калия.

О где R - С -С -алкил (Ф 4 1

ВНИИПИ Заказ II63/58 Тираж 348

Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Продукты, полученные по предлагаемому способу, являются более активными, чем известные продукты, по целевой активности (антиальдостероновой).

Кроме того, продукт примера 4 является меньшим антиандрогеном, чем известный продукт (антиандрогенная активность является побычным действием, которое стараются по возможности снизить). При испытаниях на токсичность в дозах !2,5-50-200 мг/кг на различных животных не обнаружено признаков клинической интоксикации.

Формула изобретения

5,4

1. Способ получения 3-кето-Ь

-стероидов, эамещенных в положении 7, общей формулы 1!

О бО

Х и Y вместе образуют (группу

\ или

X — гидрогруппа, à Y — СН - СН -COOMe, где Me — водород или атом щелочного металла, причем заместитель Е, находится во -положении, 1 заключающийся в том, что соединение . формулы II где R имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с дегидрирующим агентом и полученный продукт формулы III