Штамм дрожжей lеuсоsроridiuм gеliduм-продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот
Изобретение относится к микробиологической промьппленности и представляет собой новый штамм дрожжей Leucosporidium gelidum ВКПМ Y-527 - продуцент ЛИПИДОВ с высоким содержанием ненасьщенных жирных кислот. Предлагаемый шт амм при вырапщвании на аэрируемой питательной среде, содержащей непищевое сырье - этанол в качестве источника углерода, а также источники азота, фосфора, минеральные соли и микроэлементы, позволяет получить биомассу, содержащую до 60% ЛИПИДОВ, в состав которых входит 90% (к сумме кислот) ненасыщенных жирных кислот, йодное число этих липидов
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
Ai (19) (И) (51) 4 С 12 N 1/16 С 12 Р 7/64
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4085169/28-13 (22) 22.04.86 (46) 07,09.87. Бюл, ¹ 33 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ, Московская сельскохозяйственная академия им, К. А, Тимирязева и МГУ им. N. В, Ломоносова (72) Л, Д, Балашова, А, П. Белов, С, А, Зайцев, Н, Б, Градова, И. П, Бабьева, Е ° Г, Давидова и Е, Е. Азиева (53) 576.8,078(088.8) (56) Прикладная биохимия и микробиология. 1982, т, 18, № 5, с. 622-626, Известия АН СССР, Серия биологическая, 1984, № 6, с, 938-941, S, of agriculture and food chemistry, 1948, ч, 35, № 1, р, 59-65, Авторское свидетельство СССР № 1212053, кл, С 12 N 1/16, 1985. (54) ШТАММ ДРОЖЖЕЙ LEUCOSPORIDIUM GELIDUN — ПРОДУЦЕНТ ЛИПИДОВ С ВЫСОКИМ
СОДЕРЖАНИЕМ НЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штамм дрожжей
Leucosporidium gelidum BKIIM Y-527 продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот.
Предлагаемый штамм при выращивании на аэрируемой питательной среде, содержащей непищевое сырье — этанол в качестве источника углерода, а также источники азота, фосфора, минеральные соли и микроэлементы, позволяет получить биомассу, содержащую до 60% липидов, в состав которых входит 90% (к сумме кислот) ненасыщенных жирных кислот, иодное число этих липидов (161) превышает иодное число подсолнечного масла (120), К достоинствам липидов этого штамма относится высокое содержание триглицеридов (60% к липндам), практически полное отсутствие жирных кислот с нечетным числом атомов углерода, Кроме того, предлагаемый штамм высокопродуктивен, обладает экономическим коэффициентом использования этанола — до
75%, Предлагаемый штамм может быть использован как продуцент липидов, способных заменить растительные масла, и кормового белка из этанола.
Морфологические признаки. Клетки о при 12 С на жидком сусле. ональные, единичные или парами, Размер клеток (2,2-5,9)х(4,8-9,2) мкм, Пленки и кольца не образуют, образуют осадок, через месяц — осадок и толстые мицелиальные кольца, Культуральные признаки. На солодовом сусло-агаре размер клеток (2,25,9)х(3,8-13,5) мкм. Рост мягкий, полублестящий, гладкий, периферия сильно,мицелиальная и морщинистая, Мицелий истинный, разветвленный с регулярно встречающимися септами на концах, много терминальных и интеркалярных клеток, единичных, парами, короткими цепочками, Образует хламиИзобретение относится к микробиологической промышленности и предстан— ляет собой новый штамм.,дрожжей с высоким содержанием липидов высокой с1епени ненасыщенности, способных по своему составу служить заменителем растительного масла, используемого, в частности, для технических целей, Цель изобретения — получение штамма, обладающего при росте на этаноле высоким содержанием липидов с высокой степенью ненасыщцнностии.
Постанленная цель достигается селекцией нового штамма дрожжей, полученного в результате многоступенчатого отбора высокопродуктивных нариантов в условиях непрерывного культивирования на среде с этанолом.
Штамм дрожжей Leucosporidium gelidum выделен из дерново-подзолистых почв. Почвенную суспензию высевают на сусло-агар с молочной кислотой (4 мг/мл), инкубируют в холодильнике при 5 С 30 сут и выделяют развившийся тип колонии дрожжей. Затем проверяют способность расти на среде с этанолом, В результате отбирают штамм облигатно-психрофильных дрожжей, который идентифицирован по определителю "Ieasts, à taxonomic study"
ed by Lodder 1970, как относящийся к виду Leucosporidium gelidum, Полученный штамм Leucosporidium
gelidum депониронан во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером BKIIN Y-527 ° Штамм хранится также в коллекции микроорганизмов института ВНИИ синтезбелок под номером ВСБ-931, Штамм непатогенен) 35567
2 до-споры размером (5, 4-! О, 8) х (б, 513,5) мкм.
Физиологические признаки. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, галактозу, 5
L-арабинозу, ксилозу, раффинозу, инозит, рамноэу, адонит, сорбит, маннит, сорбозу, рибит, этанол, Сбраживает сахарозу, глюкозу, мальтозу, Азотно О кислый калий ассимилирует, разжижает желатину„ Уреазная активность обнаружена ° На безнитаминной среде не растет. Культура способна расти при
0-20 С и рН усо лония выращивания при 13-15 С и, рн 5,5, Предлагаемый штамм способен расти на стандартных питательных средах, таких как среда "9M", содержащих источники азота, фосфора н виде солей, а также источник углерода в виде синтезированного этанола. Культура синтезирует биомассу, содержащую до 307 белка и до 607. липидон.
Аминокислотный состав белка, 7.: аргинин 2,1; гистидин 1,1; лизин
4,9; аспарагиновая кислота 8,0; глютаминовая кислота ll 4 треонин 4,1; серин 4,7; глицин 5,9; аланин 5,3; пролин 2,3; цистин 0,9; метионин 1,2; валин 6,2; изолейцин 3,8; лейцин 6,1; тирозин 2,6; фенилаланин 3,1, Жирно-кислотный состав липидов, 7:
С1, следы; С„, следы; С „ь о 5,0;
С 6., 4 9; С)62 1,4, С1в о 0 8;
С ц., 30 7; C1,8)г 485; Сз;3 8 7, !
Сумма ненасыщенных кислот
94,2 мас,7. Теоретическое иодное число 161,5 °
40 Таким образом, предлагаемый штамм отличается от известного размером и формой клеток, способностью, ассимио лируя этанол, расти при 15 С и рн 5,5, образовывать биомассу с высоким со45 держанием ненасыщенных жирных кислот.
Пример l ° Штамм Leucospori dium gelidum ВКПМ Y-527 выращивают в колбах 750 мл на круговой качалке со скоростью вращения 200 об/мин при ис50 пользовании питательной среды состава, г/л: этанол 7,8; NaH>P0+ 7,0;
КН РО 6,8; 11Н Н РО 2,0; МАМБО 0,7, Дрожжевой экстракт 0,5. Процесс недут при температуре культивирования
55 15 С и рН 5,5. Выход биомассы 80 мас.7. при содержании белка до 15 мас ° 7 и липидов до 757, Зкстрагированные известным способом липиды имеют в своем состане
Формула изобретения
Пример 2, Непрерывное выращивание штамма Leucosporidium gelidum осуществляют в ферментере емкостью 1 л в составе питательной среды, r/ë: КС1.12,9; MgS0+x7H Штамм дрожжей Leucosporidium ge1idum ВКПМ Y-527 — продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщен-. 1 ных жирных кислот. Составитель И. Тареева Редактор И. Горная Техред B.Кадар Корректор А. Обручар Заказ 4018/22 Тираж 499 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 11 3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 1335567 (к липидам): фосфолипидов 6,5; х7Н<О 0,78; ZnSO x7H О 0,44; МпБО х моноглицеридов 0,31; диглицеридов х5Н О 0,04; Н> РО „,„„, 12 мл; акт. ил 4,0; многоатомных спиртов 0,4; сте- 0 5 г/л (0 05 мас. ). В качестве исринов 7,0; свободных жирных кислот > точника углерода используют этанол в 20,1; триглицеридов 58,0; восков . количестве 1,5 об,, Коэффициент ско0,7; эфиров-стеринов 3,0; теоретичес- рости протока Д = 0,05 при рН 5,5 и кое йодное число 161,5 ед. Т " 15 С, При этом выход биомассы Жирно-кислотный состав: C,ä сле- составляет до 70 мас.Х содержание ды; С,g, следы; С C16: 1,4; С„,о 0,8; С,.„ 30,7; 60 мас,, содержащих 90 . ненасыщенС,z. 48,5; С . 8,7. Сумма ненасы- ных жирньйс кислот. щенных кислот 94,2 мас., 
