Способ сохранения культур клеток животных

 

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способам, позволяющим хранить длительное время культуры жизнеспособных клеток. Целью изобретения является упрощение и удешевление способа . Суспензию клеток в питательной среде с концентрацией 300-500 тыс. в 1 мл расфасовывают в емкости, внутренняя поверхность которых обработана раствором силикона. Клеточную суспензию хранят при рН 7,2-7,4 и температуре 4-20° С (Л со со (X) ГС

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК бр 4 С 12 N 5/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

В1. .1 .(". !;I < л

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3959343/30-13 (22) 10.07.85 (46) 23.09.87. Бюл. Ó 35 (71) Научно-производственная лаборатория по борьбе с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных Всесоюзного Научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. Я.P.Êîâàëåíêî (72) Т.И.Коэыренко, M.И.Яшенкина, Л.Л.Вертелецкий, Л.П.Дьяконов и Г.А.Надточей (53) 578.085 ° 23 (088.8) (56) Гулевич Н.F. и Залкинд С.Я.Вопросы вирусологии, 1950, Р 6, с. 728.

Тезисы докладов I1 Всесоюзной конференции криобиологии и криомедицины, т. I и II, Харьков, 1984.

„„SU„„1339127 д1 (54) СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ КУЛЬТУР КЛЕТОК ЖИВОТНЬ1Х (57) Изобретение относится к области. ветеринарной вирусологии, в частности к способам, позволяющим хранить длительное время культуры жизнеспособных клеток. Целью изобретения является упрощение и удешевление способа. Суспензию клеток в питательной среде с концентрацией 300-500 тыс. в 1 мл расфасовывают в емкости, внутренняя поверхность которых обработана раствором силикона. Клеточную суспензию хранят при рН 7,2-7,4 и температуре 4-20 С

1339127

Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я

Составитель И.Тареева

Редактор A.Шандор Техред М.Дидык Корректор И. Эрдейи

Заказ 4183/17 Тираж 499 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, в частности к способам, позволяющим хранить длительное время культуры клеток с сохранением

5 их жизнеспособности.

Цель изобретения — упрощение и удешевление способа.

Пример 1. Суспензии клеток животных CII3B, ПТ-80 и TR готовят по общепринятой методике, доводят до

500 тыс. в 1 мл, расфасовывают в предварительно обработанные силиконом емкости и хранят при 4 С на сре— де с 10Х сыворотки крови крупного ро- 15 гатого скота. Жизнеспособность клеток во взвеси учитывают через 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30 сут путем подсчета в камере Горяева живых и мертвых клеток и способности формировать монослой при высеве клеток в емкости.

Конечная концентрация культур клеток после 30-ти дневного хранения в емкостях, обработанных силиконом, при

4 С при рН среды 7,2 составляет 220- 25

250 тыс. в 1 мл. При высеве в емкости клетки формируют монослой на 23 сут культивирования в условиях термостата при 37 С, 30

Все три перевиваемые культуры клеток при хранении способны к длительному пассированию в течение двух лет (срок наблюдения).

Пример 2. Суспензии клеток животных СПЭВ, ПТ-80 и TR готовят по общепринятой методике, доводят до концентрации 500 тыс. в 1 мл, расфасовывают в предварительно обработанные силиконом емкости, хранят при 40

20 С на среде с 1О сыворотки крови крупного рогатого скота. Жизнеспособность клеток во взвеси учитывают через 1, 5, 10, 15, 20, 25 и 30 сут путем подсчета в камере Горяева живых и мертвых клеток и способности формировать монослой при высеве клеток в емкости. Конечная концентрация культур клеток после 30-ти дневного хранения в емкостях, обработанных силиконом, при температуре 20 С и рН среды 7,2-7,4 составляет 200-250 тыс. в 1 мл. При высеве в емкости клетки образовывают монослой на 2-3 сутки культивирования в условиях термостата при 37 С.

Все три культуры клеток СПЭВ, ПТ-80 и TR после хранения в силиконированных флаконах при 20 С способны к длительному пассивированию в течение двух лет (срок наблюдения).

Предлагаемый способ является более простым, его технология не требует сложного оборудования.

Способ сохранения культур клеток животных, включающий получение клеточной суспензии в питательной среде, ее расфасовку в емкости с последующим хранением при определенных условиях, отличающийся тем, что, с целью упрощения и удешевления способа, клеточную суспензию получают с концентрацией клеток 300-500 тыс. в

1 мл, расфасовку осуществляют в емкости, внутренняя поверхность которых обработана раствором силикона, клеточную суспензию хранят при рН 7,27,4 и температуре 4-20 С.