Способ определения чувствительности микрофлоры кишечника к антибактериальным препаратам

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для выбора рациональной антибиотикотерапии. Цель изобретения повышение точности способа за счет выявления одновременного влияния ан-/ тибактериальных препаратов на всю кишечную микрофлору. Сущность.способа сводится к тдму, что безбактериальным мышам интрагастрально вводят 0,2- 0,3 мл испражнений больного, суспендированных в растворе Хенкса. При этом анализируют ка:чественный и количественный состав микрофлоры кишечника мьшей до введения исследуемого материала и испражнений больного. Затем вводят через 20-30 ч после заражения различные сочетания антибактериальных препаратов. Далее делают посевы содержимого кишечника мышей,изучают качественный и количественный состав микрофлоры.По изменению состава микрофлоры по сравнению с исходным определяют чувствительность микрофлоры к препаратам и отбирают наиболее эффективные из них для лечения. (Л 00 4

СОЮЗ СОВЕТСКИХ, СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК, (19) (11) (51) 4 С 12 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3899007/23-13 (22) 04 ° 04,85 (46) 30.09.87. Бюл. N - 36 (71) 2-й Московский государственный медицинский институт им.Н.И,Пи-, рогова (72) В,M. Коршунов, Н.А,Синицына, Г.А. Гинодман и Н,Н. Володин (53) 576,8.098.35(088.8), (56) Авторское свидетельство СССР

N 951786, кл. А 61 В 10/00, 1980.

Навашин С,N. Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. M.: Мед., 1982, с. 495.

Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования/Под ред. N.Î. Биргера, М,: Мед, 1982, с. 180-216.. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЪНОСТИ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА К АНТИБАКТЕРИАЛЬНЬК ПРЕПАРАТАМ (57) Изобретение относится к медицин-, ской микробиологии и может быть использовано для выбора рациональной антибиотикотерапии. Цель изобретения повышение точности способа sa счет выявления одновременного влияния ан-с тибактериальных препаратов на всю кишечную микрофлору. Сущность. способа сводится к тому, что безбактериальным мышам интрагастрально вводят 0,20,3 мл испражнений больного, суспендированных в растворе Хенкса. При этом анализируют качественный и количественный состав микрофлоры кишечника мышей до введения исследуемого материала и испражнений больного. 3атем вводят через 20-30 ч после заражения различные сочетания антибактериальных препаратов. Далее делают посевы содержимого кишечника мышей,изучают качественный и количественный состав микрофлоры,По изменению состава микрофлоры по сравнению с исходным определяют чувствительность микрофлоры к препаратам и отбирают наиболее эффективные из них для лечения.

91 2

19,3, 19,5, 19,6 r, находящимся в гнотобиологическам изоляторе, вводят по 0,2 мл супернатанта разведенных

1:5 испражнений больного M. (основной диагноз: хрониосепсис) ° Через

20 ч первой мыши интрагастрально начинают вводить гентамицин 10 мг/кг+

+ нистатин 100 мг/кг; второй — зритромицин 10 мг/кг + полимиксин

100 мг/кг + нистатин; третьей — цефамезин 100 мг/кг + невиграмон

100 мг/кг + нистатин 100 мг/кг, Антибиотики вводят животным однократно в день, в течение 2 сут. Микрофлору испражнений животных исследуют перед контаминацией декантантом испражнений больного, перед назначением антибиотиков и на следующий день после отмены антибиотиков, Количественный и качественный состав микрофлоры испражнений больного исследуют в день контаминации кишечника безбактериальных животных реципиентов путем посева различных разведений исследуемого материала на соответствующие селективные питательные среды.

Результаты опытов показывают, что условно патогенная микрофлора кишечника M-ва наиболее чувствительна к цефамезину + невиграмону, которые в то же время подавляют рост молочнокислых представителей нормальной микрофлоры менее значительно по сравнению с другими использовавшимися в опыте антибиотиками.

Через 10, 20 и 30 ч после контаминации безбактериальных мышей микрофлорой испражнений больного у каждо—

ro животного исследуют состав микрофлоРы и сопоставляют с количественным и качественным составам микрофлоры больного.

Пример 2. Трем безбактериальны мышам линии СВА с массой тела, 13411

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к лабораторным способам определения чувствительности всей микрофлоры кишеч5 ника к антибактериальным препаратам.

Цель изобретения — повышение точности способа за счет выявления одновременного влияния антибактериальных препаратов на всю кишечную микро- 10 флору.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Три здоровых мыши линии СВА с массой тела 18,5; 19,0 15 и 18,8 г, находясь в обычных условиях, в течение 3 дней получают интрагастрально амикацин 500 мг/кг, амниокс 300 тыс. ед/кг и нистатин

300 тыс.ед/кг. Корм и воду животные получают стерильные. На 3 день наружные покровы мышей обрабатывают 0,57ным раствором хлоргексидина, после чего животных вводят в стерильный н гнотобиологический изолятор. 25

Гнотобиологический изолятор стерилизуют аэрозолями 14 -ного раство— ра перуксусной кислоты в течение

60 мин, После введения в изолятор мыши получают еще в течение двух дней антибиотики в тех же дозах, стерильный корм и питье, Через 24 ч после отмены антибактериальных препаратов безбактериальным мышам интрагастрально вводят декантат испражнений больного Г. с диагнозом: гранулирующая рана голени; первой мыши 0 1 мл, второй мыши

0,2 мл и третьей мыши 0,3 мл. Декантат испражнений получают следующим образом. Навеску испражнений ro40 могенизируют в стерильной фарфоровой ступке, добавив в нее стерильный раствор Хенкса в соотношении 1:5. Гомогенат переносят в стерильную пробирку, которую в. свою очередь помещают в сосуд со льдом. Через 5 мин после этого надосадок переносят в, другую пробирку и используют его для контаминации безбактериальных мышей, Пример 3. Трем бактериальным мышам линии СВА с массой тела 19,6, 19,9 и 20,0 r, находящимся в гнотобиологическом изоляторе, однократно интрагастрально вводят по 0,3 мл декантата разведенных стерильным физиологическим раствором 1:5 испражнений больного К-го (диагноз: рубцовый стеноз пищевода). Через 30 ч первой мыши интрагастрально вводят пилимиксин 100 мг/кг + эритромицин 1.0 мг/кг

+ нистатин 100 мг,/кг; второй мыши— невиграмон !00 мг/кг + цефамизин

100 мг/кг + нистатин 100 мг/кг; третьей мыши — невиграмон 100 мг/кг +

+ гентамицин 10 мг/кг + нистатин

100 г/кг. Антибиотики вводят однократно в день на протяжении 7 дней.

Изучают качественный и количественный состав микрофлоры больного перед контаминацией мышей, а также микрофлоры мышей перед контаминацией их кишечника, перед началам введения антибиаСоставитель Г. Смирнова

Техред Л.Сердюкова

Корректор С. Шекмар

Редактор Н, Киштулинец

Заказ 4400/30

Тираж 499

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

13 тиков и на следующий день после их отмены.

Результаты опыта показывают, что аэробная условно патогенная микрофло— ра кишечника больного Ка-ского наиболее чувствительна к антибиотиковому коктейлю, состоящему из полимиксина, эритромицина, нистатина. Кроме того, этот антибиотиковый коктейль по сравнению с другими использовавшимися антибактериальными препаратами в значительно меньшей степени подавляет рост и размножение в кишечнике молочнокислых бактерий, Пример 4. Больной В., 3 лет с хрониосепсисом, в течение 2 лет лечился по поводу стафилококковой инфекции различными антибактериальными препаратами: ампициллин, гентамицин, оксациллин, фузидин, линкомицин. Несмотря на это, у больного отмечались периодические подъемы температуры, дисфункция кишечника, пиурия. Ребенок не набирал в весе. При обследовании на дисбактериоз в кишечнике

6 количество лактобактерий составляло (10, а бифидобактерий — (10 микробных тел на 1 г исследуемого материала. В кишечнике доминировали стафилококки. Произведен подбор антибактериальных препаратов для СД на животных. Наиболее эффективным по данным опыта является сочетание ристомицина и нистатина. У больного в результате СД ристомицином в течение

5 дней удалось добиться снижения содержания стафилококка в кишечнике

41191 более чем в 10 4 раз. Количество лактобактерий, наоборот, повысилось до 10 кл/г, бифидобактерий — до

10 кл/г. Рецидива заболевания в последующие 6 мес не было.

Использование способа позволяет более точно подбирать антибиотики для индивидуального лечения больных де10 тей.

Формула изобретения

Способ определения чувствительности микрофлоры кишечника к антибакте-" риальным.препаратам, включающий определение исходного состава микрофлоры исследуемого материала,контактирование его с антибактериальными препаратами, инкубирование посевов и учет результатов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления одновременного влияния антибактериальных препа25 ратов на всю кишечную микрофлору, исследуемый материал, представляющий декантат испражнений в растворе Хэнкса, в количестве 0,2 — 0,3 мл однократно интрагастрально вводят безбактериальным мышам, через 20-3 0 ч вводят антибактериальные препараты, затем высевают содержимое кишечника животньгх, после инкубирования посевов исследуют качественный и количественный состав микрофлоры и по его изме нению по сравнению с исходным определяют чувствительность микрофлоры к антибактериальным препаратам.