Способ определения антибиотической активности препаратов

 

Изобретение относится к области медицины. Для повышения чувствительности способа при определении активности тетрациклина, окситетрациклина и рифямпицина в качестве тест-организма используют периодическую культуру Photobacterium leignathi в стадии нарастания интенсивности свечения . Активность антибиотиков определяют по иэмеиени интенсивности свечения после их добавления в пробу культуры. Активность тетрациклина и окситетрациклина определяют в диапазоне ед/мл, активность рифампицина-в интервале ед/мл. 1 ил. оэ о:) сд СП о: со

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН,Л0„„1 35569 А1 (51) 4 С 12 Q 1/04; G 01 Н 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCKOIVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

СЛ

С

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЭОВРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3859043/28-14, 3861608/28-14 (22) 27.02.85 (46) 07.09.87. Бюл, Ф 33 (71) Красноярский государственный университет и Институт биофизики

СО АН СССР (72) И, Р. Виделец, Н, И. Луцкая и А. Н. 01еидеров (53) 612,015 (088. 8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 1164258, кл, С 12 Q 1/06, 17,07.84. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ (57) Изобретение относится к области медицины. Для повышения чувствительности способа при определении активности тетрациклина, окситетрациклина и рифампицина в качестве тест-организма используют периодическую культуру Photobacteriua leignathi в стадии нарастания интенсивности свечения. Активность антибиотиков определяют по изменению интенсивности свечения после их добавления в пробу культуры, Активность тетрациклина и окситетрациклииа определяют в диапазоне 1(Г - 10 ед/мл, активность рифампицина в интервале 10 -2 ед/мл, 1 ил.

1 133556

Изобретение относится к медицине, в частности к способам испытания химических соединений с использованием микроорганизмов и ферментов, и может

r) быть применено в медицинской промышленности и медицине для определения биологической активности низких концентраций антибиотиков, Цель изобретения — повышение чувствительности способа при определении активности тетрациклина, окси-. тетрациклина и рифампицина, Поставленная цель достигается благодаря тому, что в качестве тесторганиэма используют периодическую культуру Photobacterium leignathi в стадии нарастания интенсивности

1 свечения, а активность антибиотиков определяют по изменению интенсивности свечения после добавления в пробу антибиотика, 11а чертеже показана зависимость изменения нарастания интенсивности свечения от концентрации добавляемо- 25

ro тетрациклина, окситетрациклина и рифампицина.

Способ осуществляется следующим образом, Из культуры Photobacterium leig- ЗО

nathi штамм 1715, выращенной в течение ночи на твердой полусинтетической среде, делают засев в колбу объемом 250 мл, содержащую жидкую полусинтетическую среду, культивируют в течение 2 ч при 29 С на качалке до стадии экспоненциального нарастания интенсивности свечения. Затем 1 мл этой культуры разводят в 50 раэ свежей полусинтетической средой и выдер40 живают еще 30 мин на качалке, дважды измеряя интенсивность люминесценции, Убедившись в высокой удельной скорости нарастания свечения, используют данную культуру в качестве индикаторной.

9 2

Пробы культуры объемом 0,9 мл разливают по кюветам люминометра, регистрируют свечение от всех кювет .(Т ), добавляют в кюветы по 0,1 мл стандартного раствора антибиотика (каждая концентрация в трех повторах), В три кюветы добавляют испытуемый препарат, активность которого нужно определить, Регистрируют свечение всех кювет спустя 30 мин с момента контакта антибиотика с тест-культурой (Т9,) . Вычисляют отношение 1 /l,, усредняют по повторностям и строят калибровочную зависимость по концентрациям стандартного препарата.

Определение активности испытуемого препарата проводят по калибровочному графику, на котором находят точку> соответствующую среднему значению I /I испытуемого образца, а, Зо о опустив перпендикуляр на ось абсцисс, находят соответствующую концентрацию антибиотика °

Активность тетрациклина и окситетрациклина можно определять в диапазоне 10 — 10 ед/мл, активность

-L рифампицина — в интервале 10

2 ед/мл. формула изобретение

Способ определения антибиотической активности препаратов путем инкубации их с Photobacterium leignathi с последующей оценкой активности по .снижению ийтенсивности свечения бактерий, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности при определении активности тетрациклина, окситетрациклина и рифампицина, используют периодическую культуру бактерий, а добавление препарата проводят в стадии нарастания свечения культуры.

1335569

12

ed/ û

1,б

1,2

Составитель Л. Сабурова Редактор И, Горная Техред В.Кадар Корректор А, Обручар

Заказ 4018/22 Тираж 499 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4