Штамм бактерий viвriо сноlеrае еlтоr - источник умеренного фага х1 серотипа 1х гетероиммунной категории

 

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и может быть использовано при внутривидовой диагностике возбудителей холеры. Новый лизогенный штамм VIBRIO CHOLERAE ELTOR выделен из воды и депонирован под номером КМ N23 /6901/. Штамм выращивают в бульоне, затем отбирают фильтрат бульонной культуры, который инкубируют с индикаторным штаммом. Из негативных колоний выделяют лизогенные по фагу 6901 клоны индикаторного штамма. Умеренный фаг 6901 относится к III морфологической группе /по Тихоненко/, по серологическим свойствам он принадлежит к XI серотипу классификаций холерных фагов IX иммунной категории. Использование фага новой иммунной категории позволит расширить спектр типируемых вибрионов и тем самым повысить точность эпидемических исследований при холере.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) А1 (51)5 С 12 N 1/20 7/00

«".с с .

:, 1с °

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 44209!4/30-13 (22) 04.05.88 (46) 23.03.90,Бюл. № 11 (71) Всесоюзный научно-исследовательский противочумиьп институт

"Микроб" и Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и

Закавказья (72) Н.М.Остроумова, Г.M.Грижебовский, В„Л,Мороз, Т,Б,Караваева, А,Ф.Брюханов и Г.И.Коровкина (53) 576.8.093.1 (088.8) (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ VIBRIO СНОЬРАЕ

ЕЬТОН вЂ” ИСТОЧНИК УМЕРЕННОГО ФАГА Х:(СЕРОТИЛА IX ГЕТЕРОИММУННОЙ КАТЕГОРИИ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при внутривидовой диагИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при внутривидовой диагностике возбудителей холеры.

Аналогов штамма не выявлено, Новый лизогенный неэпидемический штамм « ibrio cholerae eltor 6901 выделен из воды открытого водоема и депонирован в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института "Микроб" под номером

КМ № 23 (6901) °

Культурально-морфологические признаки, Лодвижные, слегка изогнутые палочки 1,2-2,7 мкм в длину и 0,20,4 мкм в.ширину с одним полярно рас2 ностике возбудителей холеры, Новый лиэо генный штамм Vibrio cholerae

eltor выделен из воды и депонирован под номером КМ № 23 (690 1). Штамм выращивают в бульоне, затем отбирают фильтрат бульонной культуры, который инкубируют с индикаторным штаммом, Из негативных колоний выделяют лиэогенные по фагу 6901 клоны индикаторного штамма, Умеренный фаг 6901 относится к III морфологической группе (по классификации Тихоненко ), по серологическим свойствам он принадлежит к ХТ серотипу холерных фагов

IX иммунной категории. Использова— ние фага новой иммунной категории

Э позволяет расширить спектр типируемых вибрионов и тем самым повысить точность эпидемических исследований при холере, положенным жгутиком, спор и капсул не образуют, грамотрицательны, На твердых питательных средах (агар Мартена, агар Хоттингера

РН 7>6 +0,2) образует через 18 ч вы-ращивания при (37+1) (; круглые, диаметром (4,0+0,3) мм полупрозрачные колонии с голубоватым оттенком, ровным краем, слегка уплотненным центром. На жидких питательных средах (бульон Мартена, IX-ная пептонная вода, бульон Хоттингера (рН 7,8+0,2)

0 через 6 ч выращивания при (37+1) С образует равномерную муть и нежную пленку на поверхности.

1551735

Формула изобретения

Штамм бактерий Vibrio cholerae

eltor KM 11 - 23(6901) — источник умеренного фага XI серотипа IX гетероиммунной категории.

Составитель С,Пиствинона

Редактор Н, Ро гули ч Т ехр ед M. Дидык Корректор А.Обручар

Тираж 499

Заказ 309

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5

"Патент",, г.ужгород, ул. Гагарина,101

Физиолого-биохимические свойства, Тест на оксидаэу положителен, разлагает до кислоты без газа манноэу, глюкозу, сахароэу, маннит, не раэла5 гает арабиноэу, иноэит, лактозу. ферментирует и оки сля ет глюко эу н среде

Хью-Лейфсоза, ферментирует крахмал и желатину, не образует дигидролаэу аргинина, образует декарбоксилаэы лизина и орнитина, Не растет при повышенной (7-107) концентрации хлорида натрия, Гемолизирует эритроциты барана по Грейгу, агглютинирует куриные эритроциты. Не чувствителен к полимиксину.

Серологические свойства, Агглютинируется до титра холерными сыворотками О и Огана, не агглютинируется холерными сыворотками PO и Инаба. 20

Главным отличительным признаком штамма КМ Ф ?3 (6901) является способность спонтанно продуцировать умеренный фаг 6901 ранее неизвестной

TX гетероиммунной категории, который лизирует культуры холерных вибрионов лизогенные по фагам I-V, VII и ЧТТ1 категорий,не лизирует культуры лизогенные по фагу VI иммунной категории, при лизогениэации чувствительной культуры холерных вибрионов создает у нее иммунитет (реэистентность) только к фагам своей иммунной категории и не создает иммунитета к фагам I-VIII иммунных категории, Вследствие этого и может быть испольЗS зован для получения специфической тест-культуры, применяемый при прямом фаготипиронании холерных вибрионов биоварианта эльтор различной эпи40 демической значимости, Умеренный фаг 6901 по электронномикроскопической структуре относит— ся к III морфологической группе по классификации А, С, Тихоненко, По серологическим свойствам он принадлежит к XI серотипу холерных фагон, На газоне индикаторного штамма V, cholerae eltor 570 образует типичные колонии с прозрачным центром, окру1

Производственно-издательский комбинат женным узкой зоной неполного лизиса (3,0 0,5) мм в диаметре, Размножают штамм KM У 23 (69011 на бульоне и arape Мартена рН 7,6+

+0,2, хранят н лиофилизированном состоянии, Пример. Штамм КМ Ф 23 (6901) выращивают на питательном бульоне в течение 18 ч при 37 С. Полученную культуральную жидкость фильтруют через бактериологический фильтр Ф-5.

1 мп фильтрата смешивают с 0,2 мп ° бульонной культуры трехчасового роста индикаторного штамма V,cholerae

eltor 570 и 5 0 мл О, 7_#_-ного агара

Мартена, перемешивают и нь1ливают на

27.-ную агаровую пластинку в чашке

Петри, дают застыть и инкубируют о

18 ч при 37 С. При просмотре чашек отбирают одну типичную негативную колонию фага, Уколом платиновой иглы н центр не1 атинной колонии забирают фагорезистентные вибрионы и переносят н проб,рку с l 0 мл бульона, из которого готовят десятикратные разведения н бульоне, Иэ каждого разнедения нысевают на агаровые пластинки н чашках Петри по О,1 мп и распределяют шпателем по поверхности агара. о

Через 18 ч инкубирования при 37 С на поверхности агара обнаруживают изолированные колонии лизогенных по фагу

6901 570, Лизоreнный клон 570/6901 применяют и качестве тест-культуры в системе других тест-культур, несущих умеренные фаги других восьми гетероиммунных категорий, для определения типа иммунитета умеренных фагон вибрионов эльтор различной эпидемической значимости, Применение новой тест-культуры позволяет повысить точность эпидемических исследований при холере.