Способ отбора штаммов грибов friсноdеrма - антагонистов фитопатогенных грибов

 

Изобретение относится к микробиологии и фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, используемых для защиты растений от болезней. Целью изобретения является отбор более активных штаммов. Способ отбора штаммов грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, заключается в том, что на плотную агаровую среду засевают два штамма грибов вида FRICHODERMA, культивируют совместно и отбирают штаммы, образующие при совместном культивировании валикообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов. Способ позволяет отобрать более активные штаммы грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСГ1УБЛИН

„.,30„„1671684 A 1

Щ)5 С 12 15 1/14, А 01 И 63/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

Г10 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, К А ВТОРСНОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Штаммы высевают на картофельноглюкозный агар (1 л воды, 200 r картофеля, 15 r глюкозы, 15 г агар-агара) в чашки Петри попарно на расстоянии

7 см друг от друга.

Для посева используют швейную иг-!! !! лу, вставленную в держатель ушком вверх. Иглу обмакивают в суспензию (1 10 спор/мл), при этом инокулюм

;эадерлжвается в ушке", после чего производят посев на агариэованную сре"

5 (21) 4722440/13 (22) 30.06 .89 (46) 23.08.91. Бюл. 11! 31 (71) Научно-исследовательский институт овощного хозяйства (72) В.Б.Беляева, Е.А.Худякова, В.Ш.Коган и В.И.Ключников (53) 576.8(088.8) (54) СПОСОБ ОТБОРА ЫТАИМОВ ГРИБОВ

ТК?СНОРЕК!5А — АНТАГОНИСТОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ (57) Изобретение относится к микробиологии и фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов Тг спооег"

ma — антагонистов фитопатогенных гри4

Изобретение относится к микробиологии и фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов Trichoderma — антагонистов фитопатогенных грибов, используемых для защиты растений от болезни.

Целью изобретения является отбор более активных штаммов.

Способ отбора штаммов грибов

Trichoderma — антагонистов фитопатогенных грибов заключается в том, что

4. на плотную агаровую среду методом встречных колоний засевают два штамма гриба вида Trichoderma в частности

Trichoderma 1ignorum и Тrichoderma

harzianum, культивируют совместно, просматривают выращенные колонии к отбирают штаммы, обраэуюпц е при совместном культивировании волнообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний гриоов. бов, используемых для защиты растении от болезней. Целью изобретения является отбор более активных штаммов. Способ отбора штаммов грибов Trichoder na — антагонистов фитопатогенных грибов, заключается в том, что на плотную агаровую сречу засевают два штамма грибов вида Тг сйо 5еппа, культивируют совместно и отбирают штаммы, образующие при совместном культивировании валикообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов. Способ позволяет отобрать более активные штаммы грибов Trichoderma — антагонистов фитопатогенных грибов. 4 табл .

Пример 1. Используют штамм

Тгдсйойегiпа vi ridae u Trichoderma

harzianum, различающиеся происхолдением; подбор пар произволен. Исследуе- мы мые штаммы грибов представлены в табл. 1. Штаммы СК-85 и У относятся к виду Trichoderma harzianum, а все остальные штаммы — к Trichoderma

СЬ ч1г>чае.

1671684 ду. Чашки Петри устанавливают в термостат и культивируют посеянные колонии

О при 5 С в течение 5 дн. Затем чашки просматривают и отбирают пары штаммов грибов с б типом взаимоотношений (табл. 1). Различные штаммы триходер— мы по разному взаимодействуют друг с другом.

Из грибов рода Trichoderma исполь- зованы Trichodcrma harzianum (СК-85 и У) и Trichnderma viridae (остальные).

Анализ полученных данных позволяет выделить шесть типов взаимоотношений: фунгистатический алиментарный антагонизм, проявляющийся в нарастании колонии изолята на колонию друго1 о изолята и прекращении роста послед ней (1); фунгистатический антибиотический антагонизм, при котором рост одного из изолятов замедляется на некоторьм расстоянии от колонии другого изолята (2); фунгистатический территориальный антагонизм, при котором рост одного иэолята ограничивается колонией другого изолята по всей поверхности чашки (3); взаимный антагонизм, при котором задерживается рост обоих изолятов (4); индифферентные отношения, при" этом колония одного изолята нарастает на

35 колонию другого изолята с сохранением активного роста либо образуются рав ные по размеру колонии (5); стимуляция, образование на границе соприкосновения колоний иэолятов характерных валикообразных утолщений (6) .

Исследуют штаммы грибов, имеющих разпичные взаимоотношения, на антагонистические свойства по отношению 45 к фитопатоген1«.м грибам, таким как

Fusarium oxysporum, Fusarium culmorum.

Для этого штаммы грибов Trichoder50 ша высевают попарно друг с другом методом встречных колоний в различных сочетаниях, одновременно те же штаммы высевают с фитопатогенными грибами указанных видов (известным способом, . Ытаммы культивируют при 25 С

1 К. 55 в течение 5 дн. Затем иэ выросшей колонии, на границе их соприкоснове-, ния, выделяют изоляты штаммов трихо— дермы. Выделенные изоляты проверяют на антагонистическую активность ме— тодом блоков по методике ВИЗР. Полученные результаты представлены в табл. 2 — 4.

Антагонистическая активность штаммов триходермы (известншй способ) приведена в табл. 2.

Антагонистическая активность штаммов триходермы после их совместного культивирования друг с другом приведена в табл. 3.

Как видно из приведенных в табл.2 и 3 данных, у штаммов с 6 типом взаимодействия после их совместного культивирования повышается антагонистическая активность по сравнению со штаммами, отобранными известным способом, а у штаммов с другими типами взаимоотношений антагонистическая активность остается на известном уровне либо становится ниже.

Ытаммы, образующие валикообразные утолщения, проявляют наиболее высокую антагонистическую активность по ото ношению к фитопатогенным грибам. От бирают штаммы, образующие при совме- стном культивировании соприкосновений колоний и исследуют антагонистические свойства их по отношению к фитопатогенным грибам Fusarium oxysporum и Fusarium culmorum.

Антагонистическая активность штаммов Trichoderma viridae приведена в табл. 4.

Как видно иэ табл. 4, способ позволяет не только отобрать йаиболее активные штаммы грибов рода Tricho

derma, но и повысить их активйость.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ отбора штаммов грибов Trichoderma-антагонистов фитопатогенных грибов путем посева методом встречных колоний штамма гриба рода Trichoderma и исследуемого гриба на поверхность плотной агаризованной среды с после дующим культивированием и отбором гриба-антагониста по характеру роста, отличающийся тем, что, с целью отбора более активных штаммов, в качестве исследуемого гриба используют грибы рода Trichoderma, а отбор штаммов-антагонистов осуществляют по образованию валикообраэного утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов.

16 7! 684 б л и и а !

Т а 1 ип взаимоотношений

Радиус колоВариант иий, см

Истокский — 119/80

СК вЂ” 85 — 119/80

СК-85 — Л-17

СК-85 — !ц

СК-85 — ТК-1 3

СК-85 — СЛ-81

119/80-TK-13

1 19 /80 — Jl-1 7

119/80 — Ы

1 19/80 — СЛ-81

Л-1 7 — ТК-1 3

Омский — У

Омский — Истокский

У-Истокский

Л-17 — Ы

Ш вЂ” СЛ-81

Т К-1 3 — СЛ-8 1

ТК-1 3 — Ш

СЛ-81 — Л-1 7

3,5 — 3,5

3,5-3,5

3,8-3,2

5,5 — 1,5

4,0-3,0

4,0-3 0

3,0-3,0

4,5-2,0

3,5 — 3,5

3,5 — 3,0

2,5-3,7

3,0-3,7

35-35

3 6 — 3,1

1, 8-4,0

3,0-3,0

3, 1-3,0

3,5-3,5 блица 2

Т а

Повтор- Радиус зонь! подавления после совместного ность культивирования с патогеном, мм

119/80

Fusarium culmorum 1

3

40,3

39,7

41,0

43,5

40 0

Истокский

То же

СК-85

Л-17

Штамм Патоген

?

4

1

3

5

2

4

29,2

32 0

33,0

32,7

35 0

34,3

34 5

35 0

33,0

31,5

29,8

31,0

32,5

29,0

6

1

2

4

5

7

5

2

4

5! (> /1684

Продолжение табл.2

2 3

Гu sаr i um сulmo r rn 1

1 )C ) 1 .3

5

1 ) ТК-13 То же

Таблица 3

Повтор- Радиус зоны подавленость ния, мм

Fusarium

culmorum

3

Полное подавление ский

Истокский

То же

То же

СК-85 CK-85 — ill

Fusarium

culmorum

То же у — Истокский

ТК-13 (IL.-13 — Ш

Штамм Говместно куль- Тип взаи- Патоген тивируемые моотношештаммы ний

119/80 119/80 — Исток — 6

Л-17 Л-17 — ТК-13 2

2

4.

1

3

5

2

4

2

4

1

3

26,3

24,8

25,0

26,2

28,4

27,8

26,8

27,3

27,5

30,0

29,5

29,2

27,8

28,2

27,5

26,8

28,2

27,3

27,0

17,5

16,8

16,2

16,5

16,5

18,3

20,5

19,8

20,7

21,5

16 71684

Т а б л и ii; a

Радиус зоны подавления, мм

Повторность

Фитопатоген

Итамм

У

После совме— стного культивироваПосле совместного культивирования с патония геном (извест ный) 119/80 F. oxysporum

119/80 F.culmorum

Истокский -"Составитель Т. Поля нская

Редактор И.Дермак Техред М.Дидык Корректор С.Шекмар

Заказ 2803 Тираж 364 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.ужгород, ул. Гагарина, 101

2

4

1

3

5

?

4

42, 5 Полное

44,0 подавле41,0 ние

41,7, 43,5

40,3 То же

39,7

41,0

40,5

40,0

29,2

32,0

33,0

32,7

35,0