Способ сохранения жизнеспособных личинок i возраста н.bovis

 

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной паразитологии, и может быть использовано для предварительного испытания эффективности биологических и химических ларвицидов, получения объектов исследования в разное время года при изучении биологии оводов, взаимоотношений хозяина и паразита , в частности иммунитета у человека и животных. Цель изобретения - повышение эффективности способа. Способ заключается в имплантировании незрелых личинок кроликам двухкратно, причем повторную имплантацию проводят через 250-300 дней и имплантируют одному кролику 15-35 личинок . Способ позволяет сохранить живыми 78,4% личинок, имплантированных кроликам в течение 445 дней. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (51)5 А 01 К 67/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4796736/15 (22) 08.01.90 (46) 07.06.92. Бюл. и 21 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии (72) В.З.Ямов, M.Н.Евстафьев и Г.И.Метелица (53) 638.8(088.8) (56) Glngrich R.Е. Survikal of first-instra larvae

of Hypoderma llneatum Diptera; Oestrldae-implandet in hetегоlogous murine hosts,1,Med. Entomalog., 1970, 7; л.2, р. 256 — 260. (54) СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПО. СОБНЫХ ЛИЧИНОК lВОЗ,РАСТА Н.bovis (57) Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной паразитологии, и может быть использовано . для предварительного испытания эффектив-. ности биологических и химических ларвицидов, получения объекта исследования в различное время года при изучении биологии оводов, паразито-хозяинных взаимоотношений и, в частности, иммунитета у животных и человека.

Цель изобретения — повышение эффективности способа.

Пример. Личинки t возраста Н.bovis после выхода из яиц проникают под кожу и вдоль нервных стволов мигрируют в спиномозговой канал, где находятся в эпидуральном жире; Затем они выходят под кожу и образуют свищ, переходя во ll возраст. Продолжительность развития личинки в организме животных 235-250 дней. Эти паразитологии, и может быть использовано

° для предварительного испытания эффективности биологических и химических ларвицидов, получения объектов исследования в разное время года при изучении биологии оводов, взаимоотношений хозяина и паразита, в частности иммунитета у человека и животных. Цель изобретения — повышение эффективности способа. Способ заключается в имплантировании незрелых личинок кроликам двухкраТно, причем повторную имплантацию проводят через 250 — 300 дней и имплантируют одному кролику 15 — 35 личинок. Способ позволяет сохранить живыми

78,4% личинок, имплантированных кроликам в течение 445 дней. 2 табл. биологические особенности, т..е. продолжительность развития личинки в организме хо-: д .зяина, послужил основанием для повторной . их имплантации.

Личинок собирают с. спиномозговых каналах после убоя крупного рогатого скота.

Отбирают только незрелых, т.е. личинок, не . содержащих в пищеварительном тракте Q протеолитического фермента, который лег- а ко просматривается с наружной стороны личинки в аиде продолговатого темно-зеленого предмета. напоминающего форму личинки, только в 3 — 4 раза меньше ее.

Возраст личинок определяли по методикам К.Я.Грунина и С.д. Орлова, которые позволяют определить с точностью 100%.

Незрелых личинок I возраста H.bovis извлекают из спиномозгового канала крупного рогатого скота после убоя, обмывают

1738191

Таблица 1

Определение оптимального количества личинок 1 возраста

Hypoderma dovis Oe Geer при имплантации кроликам

Обнаружено через 250 дней после импланта ии живых личинок 1 воз аста

Число импланти рованных личинок одному животному

Степень достоверности различий

Количество животных коэффициент вариации среднее квадратичное отклонение в среднем на одном кролике, Д

2,34+ 0,73

2.1 066 (96,0- 90,6)=5,4

Р >0,99 (90,6- 89,6).--1,0

Р<0,95 (89,6- 75,4)==14,2

Р>0,999 (75,4-33,3)=42,1

Р. >0,999 (96,0 33,3)=62,7 Р>0,999

2,25 = -0,7

1,94 + 0;6

960 й10

90,6 ++ 0,86

89,6+ 0,67

1,52 + 0,48

1,6 +0,50

3,4 + i,07

2,62 +0.82

75,4+ 1,11

29,57 и 9,32

33,3 + 4,37

9,85 + 3,10 раствором пенициллина и стрептомицина с температурой 32 С и рН 7,2 и имплантируют под кожу кроликам по 5-45 экземпляров. каждому. У кроликов предварительно в области грудной клетки выстригают волося- 5 ной покров Зх5 см, дезинфицируют 70 -ным спиртом-ректификатом, делаЮт разрез и ча.стично отпрепарируют кожу, чтобы получился- небольшой карман, куда помещают личинок. Затем разрез кожи заклеивают 10 бактерицидным лейкопластырем. Кроликов помещают в. клетки и содержат в виварии.

Через.100-350 дней этих животных убивают, собирают личинок и имплантируют кроликам по методике, указанной выше, после 15 повторной имплантации кроликов убивают и обнаруживают личинок возраста;

Экспериментально доказано, что оптимальным числом является 15-35 имплантируемых личинок. При имплантации 5 20 личинок, хотя выживаемость их несколько выше, требуется много кроликов, что экономически невыгодно (табл.1), Оптимальными сроками между и И имплантацией является

200-300 дней, Сроки 100-150 дней непри- 25 емлемы, потому что они ненамного увеличи. вают продолжительность жизни личинок в сравнении с известными способами (табл.2).

Предлагаемый метод позволяет сохранить живыми 78,4 личинок, имплантиро- 30 ванных кроликам в течение 445 дней. Пол кроликов практически не влияет на сохранность и жизнеспособность личинок. Возраст кроликов должен быть 6-8 месяцев..

Третью имплантацию личинок возраста проводить экономически и биологически нецелесообразно. Специфическими хозяевами подкожных оводов Н.bovis является крупный рогатый скот. В организме этих животных личинки проходят цикл развития.

Отмечены случаи паразитирования личинок этих насекомых и на других видах животных и даже у человека, но здесь они не достигают полного развития; Для.Н.bovls кролики не являются специфическими . хозяевами, т. е.в естественных условиях личинки этих насекомых в их организме не паразитируют.

Длительное нахождение в организме кроликов (в нашем опыте в течение 445 дней) личинок возраста существенно не отразилось на их физиологическом состоянии (смертность, масса), Исследования, проведенные по возможности третьей имплантации личинок, показали, что это приводит к резкому снижению их массы до 29 и увеличению гибели до 4570.

Формула изобретения

Способ сохранения жизнеспособных личинок возраста Н.bovis, включающий сбор личинок и имплантацию их кроликам, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности способа, для им плантации используют незрелые личинки, причем производят повторную имплантацию через 250 300 дней одному кролику в количестве 15-35 личинок.

1738191

Таблиц а2

Определение оптимальных сроков между I u II имплантацией .. личинок I вОэраста -11ypоdeтma bovis De Сеет кроликам рбки меж-)

2иП (Степень достоверностм различий э

Число лнчйнок, инплантиКоличество животных

Обнаружено, живых личинок I возраста

С ду имплантацией личинок (в днях) Коэффициент вариации.

0 среднем íà t Среднее" мвад-

Одного кропи- ратическсе ка> 8 отклонение рованных одному животному

2эО -0,63 . (88ф0-86,6) 1,4

Рс Oэ95

2, 1+0,66 (86, 6-83,2) 3,4

PT 0i95, 2,1т0,66 (89,6-83,2)6,3

Р 0,99

1,6 0,50 (89, 6-48,0) 41,6 Ръ 0,999 .11,443,59 (48,0"22,4) 22,5

Рт -0,999.

31,9 10,06 (88,0-22,4) 62,6 . P? 0,999

100

25 88,0-0:,80 . 1,&1-0,57

5 . 25 86,6 0,83 1,87- 0,59

150

5 25 83,2+Оь80 1,82+-0,57

200

t,5 Î,48

5 . 25 89,6+0,67

250

25 48,022,44

5 521,73

300

7,15 2,25

22,421 17

5 25

350

Составитель О; Бакулина

Редактор В. Бугренкова Техред-M.Ìîðãåíòàë Корректор H.Êîðîëü

Заказ 1945 Тираж Поднисное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101