Штамм бактерий erysipelothrix insioliosa, используемый для получения биопрепаратов против рожи свиней
Изобретение относится к биотехнологии. Цель изобретения - штамм Erusipelothrix insioliosa ВГНКИ 6/24, обладающий высокой иммуногенной активностью и стабильностью и предназначенный для изготовления биопрепаратов против рожи свиней. Штамм ВГНКИ-6 получен путем клонирования исходного штамма из элективных питательных средах и депонирован в коллекции микроорганизмов ВГНКИ ветпрепаратов, регистрационный номер 24. Оптимальный рост штамма наблюдается на питательных средах при добавлении 5-10%-ной нативной сыворотки крови и 3-суточной бульонной культуры штамма ВР-2, инактивированной нагреванием при 60oС. Период зрелости культуры через 48 ч после посева на питательные среды. Штамм стабилен по свойствам, обладает высокой иммуногенной активностью для свиней, но не иммуногенен для белых мышей, 4 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой штамм возбудителя рожи свиней, который может быть использован для производства противорожистых биопрепаратов. Цель изобретения штамм Erysipelothrix insioliosa, обладающий высокой иммуногенной активностью и стабильностью, предназначенный для изготовления противорожистых биопрепаратов. Штамм Erysipelothrix insioliosa ВГНКИ-6/24 получен путем клонирования на элективных питательных средах исходного штамма возбудителя рожи свиней ВР-2. Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов, имеет регистрационный номер 6/24 и характеризуется следующими свойствами. Различные по длине клетки размером 0,1 2-5 мк. Окраска по Граму положительная. На плотных питательных средах формирует гладкие, полупрозрачные, выпуклые колонки с ровными краями, склонные к сливному росту, не мутнеющие при старении. В мясопептонном бульоне равномерное умеренное помутнение без осадка. Оптимальный рост в МПБ, бульоне Хоттингера, на МПА, агаре Хоттингера, рН 7,2-7,4 при 37оС с добавлением 5-10%-ной нативной сыворотки крови крупного рогатого скота, свиньи или лошади и 10%-ной бульонной культуры, штамм ВР-2, выращенной в течение 3 сут и инактивированной нагреванием при 60оС в течение 4 ч. Максимальное накопление микробных клеток в среде через 48 ч после засева. Штамм ВГНКИ-6/24 ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, лактозу, слабо галактозу, мальтозу, не усваивает рафинозу, арабинозу, ксилозу, маннит, дульцин, сорбит. У свиней после внутримышечного введения культуры штамма ВГНКИ-6/24 формируется напряженный иммунитет, у белых мышей ответная реакция на введение штамма отсутствует. Штамм ВГНКИ-6/24 обладает свойствами, характерными для Erysipelothrix insioliosa, однако отличается по ряду биологических свойств. Так, штамм ВГНКИ-6/24 существенно отличается от исходного штамма возбудителя рожи свиней ВР-2 (см. табл. 1). Штамм Erysipelothrix insioliosa ВГНКИ-6/24 обладает высокой иммуногенной активностью при использовании его для иммунизации свиней. П р и м е р 1. Бактериальную массу четырех штаммов: ВГНКИ-6/24, вакционных штаммов К и Ш и штамм ВР-2, применяют для вакцинации поросят. Инъекцию осуществляют однократно внутримышечно в разных дозах. Через 15 дней вакцинированных и группу контрольных (не вакцинированных) поросят заражают введением вирулентного штамма возбудителя рожи свиней С-18 в дозе 1000 ИД (см. табл. 2) Таким образом, применение штамма ВГНКИ-6/24 в дозе 18 мл н. микробных клеток защищает подсвинков от заболевания рожей, в то время как штаммы ВР-2, К и Ш только в дозе 100 млн. микробных клеток. П р и м е р 2. Штамм Erysipelothrix insioliosa ВГНКИ-6/24 применен для иммунизации подсвинков. Штамм вводят животным в дозе 50 млн. микробных клеток. Для сравнения параллельно проводят иммунизацию подсвинков штаммами ВР-2 и матриксом Конева, которые инъецируют в дозах 200 млн. микробных клеток. Активность штамма оценивают по титру антител в полученных сыворотках крови вакцинированных животных, определенному через 15 дней после иммунизации в реакции агглютинации (РА) со штаммами ВГНКИ-6/24 и ВР-2 в качестве антигенов. В сыворотке крови подсвинков, иммунизированных введением штамма ВГНКИ-6/24 в дозе 50 млн. микробных клеток, максимальный титр антител составил 1: 160, а в сыворотке крови животных, иммунизированных штаммов ВР-2 и матриксом Конева в дозе 200 млн. микробных клеток, 1:40. П р и м е р 3. Для проверки реактогенности штамма возбудителя рожи свиней ВГНКИ-6/24 проведено измерение температуры тела вакцинированных разными дозами подсвинков 4-месячного возраста (см. табл. 4). Полученные данные показывают, что реактогенность штамма ВГНКИ-6/24 незначительная и проявляется при введении штамма в дозе 10 млрд. микробных клеток. Проведенные испытания показали, что полученный штамм Erysipelothrix insioliosa ВГНКИ-6/24 обладает высокой иммуногенной активностью, стабильностью, безвредностью, т. е. отвечает всем требованиям, предъявляемым производственным штаммам, что позволяет использовать его для изготовления эффективных противорожистых биопрепаратов.
Формула изобретения
Штамм бактерий Erysipelothrix insioliosa ВГНКИ-6/24, используемый для получения биопрепаратов против рожи свиней.РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 01.02.2004
Извещение опубликовано: 27.11.2004 БИ: 33/2004