Способ получения противоопухолевого средства на основе производного хинолинкарбоновой кислоты

 

C0lO3 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 А 61 К 31/47

УДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ДОМСТВО СССР

СПАТЕНТ СССР) ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ПАТЕНТУ

1 (1) 4203218/.14 (2) 27.08.87 (,6) 30.08.93. Бюл. N 32 (1) 901254 (2) 28.08.86 (3)US (1) Е.И, Дюпон де Немур энд Компани (US) (2) Чиэн-Чин BY(US) (6) Патент ЕР )ч) 0133244, к . А 61 К31/47, 19.04.84.

4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУОЛЕВОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ ПPOЗВОДНОГО ХИНОЛИНКАРБОНОВОЙ

ИСЛОТЫ

7) Использование; изобретение относится медицине, а именно к химико-фармацевческой промышленности и касается спооба полученив противоопухолевого

Изобретение относится к медицине, а менно к химико-фармацевтической проышленности и касается получения стаильных и при хранении препаратов, а менно противоопухолевого средства на осове производного хинолинкарбоновой ислоты.

В настоящем изобретении было открыо, что желчные соли, которые представляют обой основные продукты распада холестеина в человеке, являются полезными солюилизаторами, предотвращающими саждение солей фенилхинолинкарбоновых ислот во время получения объемного расора и при воспроизведении из сублимиронного состояния. Лекарственные створы. полученные с этими солюбилизарами, являются стабильными и их можно гко высушить вымораживанием, чтобы лучить тонкие асадки без изменения дей„„59„„1837878 АЗ средства на основе хинолинкарбоновой кислоты. Целью изобретения является повышение стабильности. Сущность изобретения заключается в добавлении производного хинолин карбоновой кислоты, а именно — натриевой соли 6-фтор-2-(2фтор-1,1 -бифенил-4-ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты к холату натрия в соотношении 1:0,8 — 0,16 и натриевой соли 2 1,1 -бифен ил-4-ил)-5-хлор-3-метил-4-хин олин ка рбоновой кислоты к дезоксихолату натрия в соотношении 1:0,5, затем добавляют глицин и гидроокись натрия,,о рН 9,0.— 9,5, проводят стерилизующую фильтрацию, лиофильно высушивают замораживанием и затем досушивают. Положительный эффект предложения заключается в повышении сроков хранения при выдерживании до 6 месяцев, 4 табл, ственности, После воспроизведения с помощью воды для инъекции раствор остается прозрачным и пригодным для внутривенного введения. Последующие исследования также показали, что имеется небольшое изменение активности и то ичности лекарства, если лекарство и жепчносопевые солюбилизаторы растворяют вместе в растворе.

Высушенный вымораживанием порошковый препарат, описанный в настоящем изобретении, состоит по существу из активного противоопухолевого ингредиента, соли фенилхинолинкарбоновой кислоты, предпочтительно натриевой соли 6-фтор-2(2 -фторо-1,1 - бифенил-4-ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты, либо натриеэой соли 2-(1,1 -бифенип-4-лп)-5-хпоро-3-метип4-хинопинкарбоновой кислоты, либо натриевой соли 2-(1,1 -бифенип-4-ип)-5-хпоро-31837878 метил-4-хинолинкарбоновой кислоты, и стабилизирующей системы. Стабилизирующая система состоит по существу иэ желчносолевогосолюффбилизаторэифармацевтически допустимого буфера или основания, которые могут довести значение рН до величины

8,5-11 в водном растворе.

Несмотря на то, что можно использовать любую соль фенилхинолинкарбоновых кислот, описанную в ЕР— 133244-А1, предпочтительными кислотными солями являются те, которые описаны выше, Описание таких кислот в ЕР-133244 приложено здесь для ссылки.

Желчные соли, используемые в стабилизирующей системе, предпочтительно представляют собой халат натрия или дезоксихолат натрйя. Можно также испольэовать соли других щелочных металлов (лития, калия) или органические соли. Полезны также соли других желчных кислот. Они включают дегидрохолевую кислоту, липохолевую кислоту, гидродеэоксихолевую кислоту, хенодеэоксихрлевую кислоту, гликодезоксихолевую кислоту, теуродезоксихолевую кислоту, гликохолевую кислоту и таурохолевую кислоту.

Любое фармацевтически допустимое основание или буфер можно использовать в композициях, которое будет давать первоначальное водное значение рН или рН при водном воспроизведении в диапазоне примерно 8,5-11, предпочтительно рН примерно 9. Полезные буферы и основания включают, глутамат натрия, фосфат натрия, глицин, гидроокись натрия, триэтаноламин и карбонат натрия, Предпочтительными материалами являются глицин или гидроокись натрия. Особенно предпочтительным является глицин.

Количества материалов в композициях основываются на лекарстве, т.е. на соли фенилхинолинкарбоновой кислоты. На каждую 1 часть по весу лекарства требуется не менее примерно 0,1 части по весу желчной соли, как правило, предпочтительное весовое отношение лекарства к желчной соли находится в пределах от примерно 1:0,1 до

1;0,8.

Изобретение далее будет проиллюстрировано с помощью следующих примеров.

Пример 1. Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 6-фторо-2-(2 -фторо-1,1 -бифенил-4ил)-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.

Каждая 10 мл ампула содержала названное соединение (100 мг), холат натрия (40 мг) и глицин (40 мг).

Для изготовления 250 ампул:

Названное соединение {25 г) суспендировали в растворе халата натрия (10 r) и глицина (10 r) в воде для инъекций (950 мл).

Значение рН полученной суспенэии довели до 9,0-9,5 с помощью 1 н. раствора NaOH, и смесь перемешивали до тех пор, пока она не стала прозрачной. Затем раствор довели до

1000 мл путем добавления воды для инъекций, а затем смесь отфильтровали через фильтр 0,22 микрона. Каждую 10 мл ампулу асептически заполнили 4 мл отфильтрованного раствора.

Ампулы поместили в лиофилиэатор и замораживали при температуре от -40 до—

45 С в течение двух часов. Включили конденсатор; и температуре дали опуститься до -60 С, Затем ампулы откачивали при давлении 50 — 100 миллиторр при 200С в течение 24 ч. Наконец, ампулы сушили при

450С в течение еще двух часов, чтобы получить тонкий белый осадок, который воспроизводили с помощью воды для инъекции {4 мл) до стабильного раствора для внутривенного использования.

Данные о 24-часовой стабильности воспроизведенного раствора названного соединения приведены в табл. 1., Концентрации лекарства определяли с . помощью жидкостной хроматографии высокого давления. Среднее значение получено на основе четырех отдельных аликвот, взя тых иэ композитного образца.

Пример 2, Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 2-(1,1 -бифенил-4-ил)-5-хлора-3-метил4- хинолинкарбоновой кислоты.

Каждая 10 мл ампула содержала назван. ное соединение (100 мг), деэоксихолат натрия (50 мг) и глицин (50 мг).

Этот препарат получили по способу, аналогичному описанному в примере 1. Получили порошок с аналогичными свойствами, Пример 3, Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 6-фторо-2-(2 -фторо-1;1 -бифенил-4-ил)3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.

Каждая 10 мл ампула содержала названное соединение (1 00 мг), халат натрия (80 мг) и гидроокись натрия (в достаточном количестве, чтобы довести значение рН до 9,0), Этот препарат получили способом, аналогичным тому, какой .описан в примере 1.

Получили порошок с аналогичными свойствами.

Пример 4, Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 6-фторо-2-(2 -фторо-1,1-бифенил-4ил)-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.

1837878

Каждая 20 мл ампула содержала названн е соединение (500 мг), холэт натрия (80 мг) и лицин (80 мг), Для изготовления 250 ампул:

Названное соединение(125 г) суспендир вали в растворе холата натрия (20 г) и глицина (20 r) в воде для инъекций (1195 мл).

3 ачение рН полученной суспензии довели д 9,0 — 9,5 с помощью 1 н. раствора NaQH, и с есь перемешивали до тех пор, пока она не с ала прозрачной. Затем раствор довели до

2 00 мл путем добавления воды для инъекц и при перемешивании, а затем отфильтр вывали через фильтр 0,22 микрона.

К ждую 20 мл ампулу асептически заполнил S мл отфильтрованного раствора.

Ампулы поместили в лиофилизатор и зам раживали при температуре от — 40 до—

4 С в течение шести часов. Включили к нденсэтор, и температуре дали опуститьс до — 60 С. Затем ампулы откачивали при д влении 50 — 100 миллиторр при 20 С в теч ние 24 ч. Наконец ампулы высушивали п и 45 С в течение еще четырех часов, чтоб получить тонкий белый осадок, который в спроизводили с помощью воды для инъе ций (8 мл) до стабильного раствора для в утривенного использования.

Пример 5. Изучение стабильности в сушенной вымораживанием натриевой с ли 6-фторо-2-(2-фторо-1,1-бифенил-4и )-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.

Названное соединение приготовили т к, как описано в примере 1. Высушенный в мораживанием порошок запаяли в 10 мл а пулах и хранили при различных условиях дття наблюдения стабильности, Кат показано в табл. 2 приготовленные образцы были х мически стабильными, Однако, при визуа ьном осмотре было отмечено проявление с етло-коричневого цвета под действием избыточного света.

Пример 6, Противоопухолевая активноостып vivo включенной в рецептуру натриевой с ли 6-фторо-2-(2-фторо-1,1-бифенил 4-ил)- 3етил-4-хинолинкарбоновой кислоты.

Приготовили раствор (1 мл). содержаий названное соединение (25 мг), холат натрия (10 мг) и глицин (10 мг), имеющий т кой же состав, как и воспроизведенный раствор, описанный в примере 1. Затем к в тшеуказанному добавили дистиллированучт воду (4 ыв), чтобы приготовить раствор

5 мг/кг. Последовательными двукратными р эзбавлениями дистиллированной водой р астворэ 50 мг/кг получили остальные три нцентрации. Непрепарированный контольный раствор получили путем раствореия названного соединения в тстиллировэнной воде, и его использовали

55 до тех пор, пока он не перестанет быть прозрачнымм.

Противоопухолевая активносгь включенного в рецептуру и непрепарированного материала по отношению к лейкемии L 1210 в мышах показана в табл. 3. Испытание проводили следующим образом. В день О, мышей CDF1 внутрибрюшинно заражали 1х10

5 клетками мышиной лейкемии L 1210. В день

1 внутрибрюшинно вводили включенное в рецептуру или непрепарированное названное соединение, и инъекции продолжали делать раз в день до дня 9. Мышей наблюдали до тех пор, пока они не умирали, Эти испытания показывают, что холат натрия и глицин не влияют на противоопухолевую активность названного соединения.

Пример 7, Сравнение безопасности препаратов натриевой соли 6-фтора-2-(2фторо-1 -бифенил-4-ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты в дистиллированной воде и в 1% холате натрия/ 1 глицина.

Было проведено сравнительное испытание названного соединения, чтобы оценить возможное различие летательных доз композиций, описанных здесь, и композиций. приготовленных путем растворения в воде.

Названное соединение щ епарировали в виде высушенной вымораживанием композиции, как в примере 1, vi воспроизвели с помощью воды перед инъекцией, Двэ раствора названного соединения парентерально вводили в самок мышей ВэСК1 весом.

17 — 22 грамма в виде однократных дозировок О, 120, 144, 173 и 200 мг/кг. После введения соединения смертность оценивали дважды в день в течение 14 дней.

Величины LD50, соответствующие им доверительные интервалы и наклоны кривых реакции были следующими (см. табл, 4).

Кроме того, десяти самкам мышей

ВеСзРт внутривенно вводили однократную дозу носителя 1 холата натрия/глицина (рН = 9,0) при 10 мл/кг, О результате этого контрольного введения носителя не наблюдалось никакой смертности.

Формула изобретения

Способ получения противоопухолевого средства на основе производного хинолинкарбоновой кислоты, о т л и ч а ю щ и и с. я тем, что, с целью повышения стабильности, в качестве производного хинолинкэрбоновой кислоты используют натриевую соль

6- фтор-2-(2 — фтор-1,1-бифенил-4-ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты или натриевую соль 2-(1,1-GvgeHun-4-ил)-5-хлор-"-метил-4инолинкэрбоновой кислоты, причем натриевую соль 6-фтор-2-(2 - фтор-1,1 -бифенил-41837878

Таблица 1

Таблица 2

Исходная проба: 100,4 мг названного Соединения в 10 мл прозрачном стеклянном пузырьке с резиновой пробкой.

Приведенные цифры показывают процент от исходной пробы.

Таблица

Время выживания; (, Т/С (средний день смерти обработанных мышей/средний день смерти контрольных животных х 100) Контрольные животные, которым вводили носитель, выживали в течение 8,5 дней (0,2 халата натрия, 0,2 глицина в дистиллированной воде)

** Контрольные животные, которым вводили носитель, выживали в течение 9,0 дней (дистиллированная вода). ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты добавляют к холату натрия в соотношении 1;0,8 — 0,16, а натриевую соль 2 1,1 -бифенил-4-ил)5-хлор-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты к дезоксихолату натрия в соотношении 1:0,5 и затем добавляют глицин и гидроокись натрия до рН 9,0 — 9,5, проводят стерилизующую фильтрацию, лиофильно высушивают замораживанием при температуре от -(40-45) до

-60 С и сушат 24 ч при давлении 50-100 млторр

5 и температуре 20 С, а затем высушивают в течение еще 2-4 ч при 45 С.

1837878

Составитель С.Мельникова дактор М.Букреева Техред М.Моргентал Корректор H.Милюкова

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 аказ 2879 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5