Гетероалкиламинозамещенные бициклические азотсодержащие гетероциклы в качестве ингибиторов протеинкиназы р38

Изобретение относится к гетероалкиламинозамещенному производному дигидропиримидо[4,5-d]пиримидинона, выбранному из ряда соединений, отвечающих формуле I

в которой подстрочный символ n обозначает целое число 1; R¹ обозначает С_1-6алкил (замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, C_1-6алкокси и т.д.), пиперидинил-С_0-4алкил [где пиперидинильный фрагмент необязательно монозамещен бензилом, карбамоилом, С_1-4алкансульфонилом, C_1-6алкилом и т.д.], морфолинил-С_0-4алкил, тетрагидропиранил-С_0-4алкил, 2-оксоимидазолидинил-С_0-4алкил, 2-оксопирролидинил-С_0-4алкил или 1,1-диоксотетрагидротиенил-С_0-4алкил, С_3-6циклоалкил (монозамещенный гидрокси, C_1-6алкокси и т.д.), 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил, 2,4-дион-1,3-диазаспиро[4.5]декан-8-ил или (3-гидроксиметил-3-метил)-1,5-диоксаспиро[5.5]ундекан-9-ил; R² обозначает C_1-4алкил, гало; R³ обозначает водород, C_1-6алкил (необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей С_1-4алкокси, пирролидинил, ди(С_1-4алкил)амино и т.д.), фенил, бензил или пиперидинил (необязательно N-замещенный С_1-4алкилом); R⁴ обозначает водород, а также к его индивидуальным изомерам, рацемическим и нерацемическим смесям изомеров, пролекарствам и его фармацевтически приемлемым солям. Также предложена фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении р38 MAP киназы. Композиция включает гетероалкиламинозамещенное производное дигидропиримидо[4,5-d]пиримидинона формулы (I), изомер, рацемическую или нерацемическую смесь изомеров или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем. Технический результат - гетероалкиламинозамещенное производное дигидропиримидо[4,5-d]пиримидинона, обладающее ингибирующей активностью в отношении р38 MAP киназы. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 4 табл., 5 ил.

 

Настоящее изобретение относится к бициклическим азотсодержащим гетероциклам. Объектом изобретения являются некоторые гетероалкиламинозамещенные дигидропиримидо[4,5-d]пиримидиноновые производные, их содержащие фармацевтические препараты, способы их применения в качестве терапевтических средств и способы их получения.

Митогенактивированные протеинкиназы (MAP киназы) относятся к семейству пролиннаправленных серин/треонин киназ, которые активируют свои субстраты путем двойного фосфорилирования. Киназы активируются различными сигналами, включая пищевой и осмотический стресс, УФ-излучение, факторы роста, эндотоксин и воспалительные цитокины. Одна группа MAP киназ представляет собой группу р38 киназ, которая включает различные изоформы (например, р38α, р39β и р38γ). Так же, как и другие киназы, р38α киназы ответственны за фосфорилирование и активацию факторов транскрипции и они сами активируются физическим и химическим стрессами, противовоспалительными цитокинами и бактериальными липополисахаридами. Еще более важно то, что, как было показано, продукты фосфорилирования посредством р38 являются медиаторами продукции воспалительных цитокинов, включая TNF (фактор, вызывающий некроз опухолевых тканей), IL-1 (интерлейкин-1) и циклооксигеназу-2. Каждый из этих цитокинов вовлекается в участие в различных болезненных состояниях и условиях. Так, например, TNF-α является цитокином, продуцируемым в основном активированными моноцитами и макрофагами. Его избыточное и нерегулируемое образование играет важную роль в патогенезе ревматоидного артрита. Совсем недавно было показано, что ингибирование продуцирования TNF может найти широкое применение для лечения воспаления, воспалительного заболевания кишечника, рассеянного склероза и астмы.

TNF причастно и к воздействию вирусных инфекций, таких как ВИЧ, вирус гриппа, вирус герпеса, включая среди прочего вирус простого герпеса типа 1 (ВПГ-1), вирус простого герпеса типа 2 (ВПГ-2), цитомегаловирус (ЦМВ), вирус ветряной оспы (ВВО), вирус Эпштейна-Барра, вирус герпеса типа б (ГВЧ-6) человека, вирус герпеса типа 7 (ГВЧ-7) человека, вирус герпеса типа 8 (ГВЧ-8) человека, инфекционный бульбарный паралич и ринотрахеит.

Подобным образом IL-1 продуцируется активированными моноцитами и макрофагами и играет роль во многих патофизиологических реакциях, включая ревматоидный артрит, лихорадку и снижение резорбции костной ткани. Ингибирование этих цитокинов ингибиторами р38 киназы эффективно при подавлении, ослаблении и смягчении многих из этих болезненных состояний. По одному из объектов настоящего изобретения предлагаются соединения, отвечающие формуле

в которой подстрочный символ n обозначает целое число от 0 до 3;

R¹ обозначает ацил, гетероалкил, необязательно замещенный арилгетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероалкилкарбонил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкенил, гетерозамещенный циклоалкилалкинил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный гетероциклилспироциклоалкил, -(алкилен)-С(O)-R¹¹ или -(гетероалкилен)-С(O)-R¹¹;

где R¹¹ обозначает алкил, галоалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, гидроксил или алкокси;

R² каждый в каждом случае независимо обозначает алкил, гало, гетероалкил или винил;

R³ обозначает водородный атом, алкил, гетероалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, необязательно замещенный циклоалкил, циклоалкенил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, галоалкил, цианоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, -(алкилен)-С(O)R³¹ или -(гетероалкилен)-С(O)R³¹, где

R³¹ обозначает алкил, галоалкил, гидроксил, алкокси-, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил или необязательно замещенный гетероаралкил, а

R⁴ обозначает водородный атом, алкил или -(алкилен)-С(O)R³¹,

а также их индивидуальные изомеры, рацемические и нерацемические смеси изомеров и их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формулы I и их вышеупомянутые соли являются ингибиторами протеинкиназ и in vivo проявляют неожиданно высокую активность против р38. Интерес представляет то, что соединения формулы I не проявляют активности против тирозинкиназ р56^lck Т-клеток при уровне ниже примерно 10 мкМ. Такие соединения могут быть эффективными при лечении заболеваний, опосредованных противовоспалительными цитокинами, такими, как TNF и IL-1.

Среди используемых в настоящем описании понятий

"алкил" означает линейный насыщенный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от одного до шести углеродных атомов, или разветвленный насыщенный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от трех до шести углеродных атомов, например метил, этил, н-пропил, 2-пропил, трет-бутил, пентил;

"алкилен" означает линейный насыщенный двухвалентный углеводородный радикал, содержащий от одного до шести углеродных атомов, или разветвленный насыщенный двухвалентный углеводородный радикал, содержащий от трех до шести углеродных атомов, например метилен, этилен, пропилен,2-метилпропилен, пентилен;

"алкенилен" означает линейный или разветвленный двухвалентный углеводородный радикал, содержащий от двух до десяти углеродных атомов и также содержащий по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, например -СН=СН-, -СН₂СН=СН-, -С(СН₃)=СН-, -СН₂СН=СНСН₂- и т.п.;

"алкенил" означает линейный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от двух до шести углеродных атомов, или разветвленный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от трех до шести углеродных атомов, включающий по меньшей мере одну двойную связь, например этенил, пропенил; "алкинил" означает линейный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от двух до шести углеродных атомов, или разветвленный одновалентный углеводородный радикал, содержащий от трех до шести углеродных атомов, включающий по меньшей мере одну тройную связь, например этинил, пропинил;

понятие "необязательно замещенный циклоалкил" относится к насыщенному одновалентному циклическому углеводородному радикалу, содержащему от трех до семи кольцевых углеродных атомов;

циклоалкил может быть необязательно независимо замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из алкила, необязательно замещенного фенила или -C(O)R (где R обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную амино-, гидрокси-, алкоксигруппу или необязательно замещенный фенил); более конкретно понятие "циклоалкил" охватывает, например, циклопропил, циклогексил, фенилциклогексил, 4-карбоксициклогексил, 2-карбоксамидоциклогексил, 2-диметиламинокарбонилциклогексил;

"необязательно замещенный циклоалкилалкил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкиленовую группу, а R^b обозначает необязательно замещенную циклоалкильную группу, как она представлена в настоящем описании, например циклопропилметил, циклогексилпропил, 3-циклогексил-2-метилпропил;

"ацил" означает группу -C(O)R', где R' обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, гетероалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный аралкил или необязательно замещенный гетероаралкил;

"алкокси", "арилокси", "аралкилокси" или "гетероаралкилокси" означает радикал -OR, где R обозначает соответственно алкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил или необязательно замещенный гетероаралкил, как они представлены в настоящем описании, например метокси, фенокси, пиридин-2-илметилокси, бензилокси;

"гало" или "атом галогена" означает атом фтора, хлора, брома или иода, предпочтительно фтора или хлора; "галоалкил" означает алкил, замещенный одним или несколькими одинаковыми или разными атомами галогена, например -СН₂Cl, -CF₃, -СН₂CF₃, -СН₂CCl₃, и далее охватывает те алкильные группы, такие, как перфторалкил, в которых все водородные атомы замещены атомами фтора;

"гидроксиалкил" означает алкильный радикал, как он представлен в настоящем описании, замещенный одной или несколькими, предпочтительно одной, двумя или тремя, гидроксильными группами, при условии, что один и тот же углеродный атом не несет больше одной гидроксильной группы; типичными примерами являются 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 3-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 3-гидроксибутил, 4-гидроксибутил, 2,3-дигидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксиэтил, 2,3-дигидроксибутил, 3,4-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил)-3-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)этил, 2-гидрокси-1,1-диметилэтил, 2-(гидроксиметил)пропил, 1,1-(дигидроксиметил)этил, 1-метил-2,3-дигидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксипропил, 1-гидроксиметил-2-метилпропил, 1-гидроксиметилбутил, 1-гидроксиметилпентил, 1-гидроксиметил-3-метилбутил, 1,1-диметил-2-гидроксиэтил, 1-(гидроксиметил)этил, 2,3-(дигидрокси)-1-метилпропил, 2,3-(дигидрокси)-1,1-диметилпропил, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксипропил и 1-(гидроксиметил)пропил, предпочтительно 2-гидроксиэтил, 2,3-дигидроксипропил и 1-(гидроксиметил)-2-гидроксиэтил;

"монозамещенная аминогруппа" означает радикал -NHR, где R обозначает алкильную, гетероалкильную, галоалкильную или необязательно замещенную циклоалкильную, циклоалкилалкильную, арильную, аралкильную, аралкенильную, гетероарильную, гетероаралкильную, гетероаралкенильную, гетероциклильную или гетероциклилалкильную группу, например метиламино-, этиламино-, фениламино-, бензиламиногруппу;

"дизамещенная аминогруппа" означает радикал -NRR', где каждый из R и R' независимо друг от друга обозначает алкил, гетероалкил, галоалкил, циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил, арил, аралкил, аралкенил, гетероарил, гетероаралкил, гетероаралкенил, гетероциклил или гетероциклилалкил, или R и R' совместно с азотным атомом, с которым они связаны, образуют гетероциклическое кольцо; типичные примеры включают диметиламино-, метилэтиламино-, ди(1-метилэтил)аминогруппы, пиперазин-1-ил;

"необязательно замещенный арил" означает одновалентный моноциклический или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий от 6 до 10 кольцевых атомов, каждый из которых независимо замещен одним или несколькими заместителями, предпочтительно одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из алкила, галоалкила, гетероалкила, гало, нитро-, цианогрупп, метилендиокси, этилендиокси, циклоалкила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного гетероарила, галоалкокси, необязательно замещенного фенокси, необязательно замещенного гетероарилокси, -COR (где R обозначает алкил или необязательно замещенный фенил), -(CR'R'')_n-COOR (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R" независимо обозначает водородный атом или алкил, а R обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил) и -(CR'R'')_n-CONR^aR^b (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' независимо обозначает водородный атом или алкил, а каждый из R^a и R^b независимо друг от друга обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил или R^a и R^b совместно с азотным атомом, с которым они связаны, образуют гетероциклическое кольцо); примеры включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил и их производные;

"необязательно замещенный аралкил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкиленовую группу, а R^b обозначает необязательно замещенную арильную группу, как она представлена в настоящем описании, например бензил, фенилэтил, 3-(3-хлорфенил)-2-метилпентил;

"необязательно замещенный аралкенил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкениленовую группу, а R^b обозначает необязательно замещенную арильную группу, как она представлена в настоящем описании, например 3-фенил-2-пропенил;

"необязательно замещенный арилгетероалкил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает гетероалкиленовую группу, а R^b обозначает необязательно замещенную арильную группу, как она представлена в настоящем описании, например 2-гидрокси-2-фенилэтил, 2-гидрокси-1-гидроксиметил-2-фенилэтил;

"необязательно замещенный фенил" означает фенильное кольцо, которое необязательно независимо замещено одним или несколькими заместителями, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из алкила, алкокси, гидроксила, галоалкила, гетероалкила, гало, нитро-, цианогрупп, метилендиокси,этилендиокси, циклоалкила, циклоалкилалкила, -COR (где R обозначает алкил или необязательно замещенный фенил), -(CR'R'')_n-COOR (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' независимо обозначает водородный атом или алкил, a R обозначает водородный атом, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил) и -(CR'R'')_n-CONR^aR^b (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' независимо обозначает водородный атом или алкил, а каждый из R^a и R^b независимо друг от друга обозначает водородный атом, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил или R^a и R^b совместно с азотным атомом, с которым они связаны, образуют гетероциклическое кольцо);

"необязательно замещенный гетероарил" означает одновалентный моноциклический или бициклический радикал, содержащий от 5 до 12 кольцевых атомов, у которого имеется по меньшей мере одно ароматическое кольцо, включающее одно, два или три кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, причем остальные кольцевые атомы приходятся на С и необходимо иметь в виду, что место присоединения гетероарильного радикала обычно находится в ароматическом кольце; это гетероарильное кольцо необязательно независимо замещено одним или несколькими заместителями, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из алкила, галоалкила, гетероалкила, гало, нитро-, цианогрупп, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, -COR (где R обозначает алкил или необязательно замещенный фенил), -(CR'R'')_n-COOR (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' независимо обозначает водородный атом или алкил, а R обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил), -NR^aR^b (где каждый из R^a и R^b независимо друг от друга обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил) и -(CR'R'')_n-CONR^cR^d (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' независимо обозначает водородный атом или алкил, а каждый из R^c и R^d независимо друг от друга обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил или R^c и R^d совместно с азотным атомом, с которым они связаны, образуют необязательно замещенное гетероциклическое кольцо); примеры включают, хотя ими их список не ограничен, пиридил, фуранил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, имидазолил, изоксазолил, пирролил, пиразолил, пиримидинил, бензофуранил, тетрагидробензофуранил, изобензофуранил, бензотиазолил, бензоизотиазолил, бензотриазолил, индолил, изоиндолил, бензоксазолил, хинолил, тетрагидрохинолинил, изохинолил, бензимидазолил, бензизоксазолил, бензотиенил и их производные;

"необязательно замещенный гетероаралкил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкиленовую группу, а R^b обозначает гетероарильную группу, как она представлена в настоящем описании, например пиридин-3-илметил, 3-(бензофуран-2-ил)пропил и т.п.;

"необязательно замещенный гетероаралкенил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкениленовую группу, а R^b обозначает необязательно замещенную гетероарильную группу, как она представлена в настоящем описании, например 3-(пиридин-3-ил)пропен-2-ил и т.п.;

"необязательно замещенный гетероциклил" означает насыщенный или ненасыщенный неароматический циклический радикал, содержащий от 3 до 8 кольцевых атомов, в котором один или два кольцевых атома являются гетероатомами, выбранными из N, О или S(O)_n (где n обозначает целое число от 0 до 2), причем остальные кольцевые атомы приходятся на С, где один или два атома С могут, но необязательно, быть замещенными карбонильной группой; это гетероциклическое кольцо может быть необязательно независимо замещено одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из алкила, галоалкила, гетероалкила, гало, нитро-, цианоалкила, гидроксила, алкокси, амино-, монозамещенной амино-, дизамещенной аминогрупп, необязательно замещенного аралкила, -(CR'R'')_n-COR (где n обозначает целое число от 0 до 5, а R обозначает алкил или необязательно замещенный фенил), -(CR'R'')_n-COOR (где n обозначает целое число от 0 до 5, R' и R'' каждый независимо обозначает водородный атом или алкил, а R обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил), -(CR'R'')_n-CONR^aR^b (где n обозначает целое число от 0 до 5, R' и R'' каждый независимо обозначает водородный атом или алкил, а каждый из R^a и R^b независимо друг от друга обозначает водородный атом, алкил, необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный циклоалкилалкил или R^a и R^b совместно с азотным атомом, с которым они связаны, образуют необязательно замещенное гетероциклическое кольцо) и -S(O)_nR^d [где n обозначает целое число от 0 до 2, a R^d обозначает водородный атом (при условии, что n обозначает 0), алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу или гидроксиалкил]; более конкретно понятие "гетероциклил" охватывает тетрагидропиранил, пиперидино, N-метилпиперидин-3-ил, пиперазино, N-метилпирролидин-3-ил, 3-пирролидино, 2-оксопирролидин-1-ил, морфолино, тиоморфолино, тиоморфолино-1-оксид, тиоморфолино-1,1-диоксид, 1,1-диоксотетрагидротиофен-3-ил, пирролинил, имидазолинил, 2-оксоимидазолинил и их замещенные производные, подобные 1-(фенилметил)пиперидин-4-илу, 1-(аминокарбонилметил)пиперидин-4-илу, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-илу, 1-(гидроксиэтил)пиперидин-4-илу, 1-(2,3-дигидроксипропил)пиперидин-4-илу, 1-(2-цианоэтил)пиперидин-4-илу, 1-(1-цианометил)пиперидин-4-илу, 1-(аминокарбонилметил)пиперидин-4-илу, 1-(этоксикарбонил)пиперидин-4-илу, 1-(2-трифторэтил)пиперидин-4-илу, пиперидин-4-илу, 1-метилпиперидин-3-илу и 1-метилпиперидин-4-илу;

"необязательно замещенный гетероциклилалкил" означает радикал -R^aR^b, где R^a обозначает алкиленовую группу, а R^b обозначает гетероциклическую группу, как она представлена в настоящем описании, например тетрагидропиран-2-илметил, 4-метилпиперазин-1-илэтил, 3-пиперидинилметил, 1-(диметиламинокарбонилметил)пиперидин-4-илметил, 1-(2-метоксикарбонилэтил)пиперидин-4-илметил, 1-(2-трифторэтил)пиперидинил-4-илметил, 1-(цианометил)пиперидинил-4-илметил, 1-(аминокарбонилметил)пиперидинил-4-илметил, 1-(гидроксикарбонилметил)пиперидинил-4-илметил, 2-(пиперидин-1-ил)этил, 3-(пиперидин-1-ил)пропил, 2-(морфолин-1-ил)этил, 3-(морфолин-1-ил)пропил, 2-(2-оксоимидазолидон-1-ил)этил, 2-(2-оксопирролидин-1-ил)этил и пирролидин-1-илэтил;

"гетероалкил" означает алкильный радикал, как он представлен в настоящем описании, с одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из -OR^a, -NR^bR^c и -S(O)_nR^d (где n обозначает целое число от 0 до 2), у которых R^a обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, алкоксикарбонил, необязательно замещенный арилоксикарбонил, карбоксамидогруппу или моно- или диалкилкарбамоил; R^b обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил или необязательно замещенный гетероаралкил; R^c обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, алкилсульфонил, алкилкарбонил, алкоксикарбонил, необязательно замещенный арилоксикарбонил, карбоксамидогруппу или моно- или диалкилкарбамоил; R^d обозначает водородный атом (при условии, что n обозначает 0), алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, циклоалкилалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу или гидроксиалкил; когда R^a обозначает только водородный атом, понятие "гетероалкил" распространяется на подгруппу, которая подпадает под приведенное в дальнейшем понятие "гидроксиалкил"; примеры включают 2-метоксиэтил, бензилоксиметил, тиофен-2-илтиометил, 2-гидроксиэтил, 2,3-дигидроксипропил, 3-амино-2,2-диметилпропил, 3-диметиламинопропил, 3-метилкарбониламинопропил, 3-амино-2-гидроксипропил, 2-этокси-1-этоксиметилэтил, 2-диэтиламиноэтил, 2-метилтиоэтил, 3-диметиламиноэтил, 3-диметиламино-2,2-диметилпропил и 2-гидроксиэтил;

"гетероалкилен" означает линейный насыщенный двухвалентный углеводородный радикал, содержащий от одного до шести углеродных атомов, или разветвленный насыщенный углеводородный радикал, содержащий от трех до шести углеродных атомов, с одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из -OR^a, -NR^bR^c и -S(O)_nR^d (где n обозначает целое число от 0 до 2), у которых R^a, R^b, R^c и R^d имеют такие же значения, как указанные в настоящем описании для гетероалкильного радикала; примеры включают, хотя ими их список не ограничен, 2-гидроксиэтан-1,1-диил, 2-гидроксипропан-1,1-диил и т.п.;

"гетерозамещенный циклоалкил" означает циклоалкильный радикал, который необязательно независимо замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из гидроксила, гидроксиимино- (=NOH), алкокси-, амино-, монозамещенной амино-, дизамещенной амино-, оксогрупп (=O), -OC(O)R^a (где R^a обозначает водородный атом, алкил, галоалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, гидроксил, алкокси или необязательно замещенный фенил), -OR^b (где R^b обозначает гидроксиалкил, галоалкил, алкенил или алкоксиалкил), -SO_nR^c [где n обозначает целое число от 0 до 2, a R^c обозначает водородный атом (при условии, что n обозначает 0), алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу или гидроксиалкил] и -NS(O)₂R^d (где R^d обозначает алкил, галоалкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу или гидроксиалкил); примеры включают, в частности, хотя ими их список не ограничен, 4-гидроксициклогексил, 2-аминоциклогексил, (2-метоксиэтокси)циклогексил, 4-оксоциклогексил, 4-(метансульфониламино)циклогексил, аллилоксициклогексил и т.п.;

"гетероалкилзамещенный циклоалкил" означает циклоалкильный радикал, который может быть необязательно замещенным одним, двумя или тремя гетероалкильными группами, как они представлены в настоящем описании; примеры включают 1-гидроксиметилциклопент-1-ил, 2-гидроксиметилциклогекс-2-ил;

"гетероциклилспироциклоалкил" означает спирорадикал, включающий циклоалкильное кольцо и гетероциклическое кольцо, каждое из которых содержит от 5 до 8 кольцевых атомов, причем оба кольца содержат всего один общий углеродный атом, и необходимо иметь в виду, что гетероциклилспироциклоалкильный радикал присоединен через циклоалкильное кольцо; спирорадикал образуется, когда два водородных атома при одном и том же углеродном атоме циклоалкильного радикала замещены гетероциклильной группой, как она представлена в настоящем описании, и могут быть необязательно замещенными алкилом, гидроксилом, гидроксиалкилом или оксогруппой; примеры включают 1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-ил, 1,3-диазаспиро[4,5]декан-8-ил, 2,4-дион-1,3-диазаспиро[4,5]декан-8-ил, 1,5-диоксаспиро[5,5]ундекан-9-ил, (3-гидроксиметил-3-метил)-1,5-диоксаспиро[5,5]ундекан-9-ил;

понятие "уходящая группа" применяют в том значении, которое обычно ассоциируется с ней в химии органического синтеза, т.е. в значении атома или группы, способной к замещению нуклеофилом и охватывающей группу гало (такую, как атом хлора, брома, иода), алкенсульфонилокси, аренсульфонилокси, алкилкарбонилокси (например, ацетокси), арилкарбонилокси, мезилокси, тозилокси, трифторметансульфонилокси, арилокси (например, 2,4-динитрофенокси), метокси, N,O-диметилгидроксиламиногруппу и т.п.;

понятие "изомерия" применимо к соединениям, которые отвечают одинаковым химическим формулам, но характеризуются разными свойствами или последовательностью связей между атомами, или расположением атомов в пространстве; изомеры, которые разнятся расположением атомов в пространстве, носят название "стереоизомеров"; стереоизомеры, которые не являются зеркальными копиями друг друга, называют "диастереоизомерами", а стереоизомеры, которые являются совмещающимися зеркальными копиями друг друга, называют "энантиомерами" или иногда оптическими изомерами;

углеродный атом, связанный с четырьмя неодинаковыми заместителями, называют "хиральным центром";

понятие "хиральный изомер" применимо к соединению с по меньшей мере одним хиральным центром; у него имеются две энантиомерные формы с противоположной хиральностью и он может существовать либо в виде индивидуального энантиомера, либо в виде смеси энантиомеров; смесь, включающая равные количества индивидуальных энантиомерных форм с противоположной хиральностью, называют "рацемической смесью"; у соединения, которое располагает более чем одним хиральным центром, имеются 2^n-1 энантиомерных пар, где n обозначает число хиральных центров; соединения с более чем одним хиральным центром могут существовать либо в виде индивидуального диастереомера, либо в виде смеси диастереомеров, называемой "диастереомерной смесью"; при наличии одного хирального центра стереоизомер может характеризоваться абсолютной конфигурацией (R или S) такого хирального центра; абсолютной конфигурацией называют расположение в пространстве заместителей, связанных с хиральным центром; имеющиеся в виду заместители, связанные с хиральным центром, располагают в определенном порядке в соответствии с Правилом последовательности Кана, Инголда и Прелога [см. работы Cahn и др. Angew. Chem. Inter., издание 1966 г., 5, 385; список опечаток на с.511; Cahn и др. Angew. Chem., 1966, 78, 413; Cahn и Ingold, J. Chem. Soc. (London) 1951, 612; Cahn и др. Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116];

понятие "геометрические изомеры" применимо к диастереомерам, которые обязаны своим существованием заторможенному вращению вокруг двойных связей; эти конфигурации различают добавлением к их названиям приставок цис- и транс- или Z и Е, которые указывают на то, что группы находятся на той же или противоположной стороне плоскости сравнения, которую можно называть общей для стереоизомеров, например двойной связи в молекуле или с целью обозначить положения заместителей в кольцах относительно друг друга в соответствии с Правилом Кана, Инголда и Прелога;

"фармацевтически приемлемый наполнитель" означает наполнитель, который может быть использован при приготовлении фармацевтической композиции, которая в общем безвредна, нетоксична и ни с биологической, ни с какой-либо иной точки зрения не является нежелательной, и охватывает наполнители, которые приемлемы для применения в ветеринарии, равно как для применения человеком с фармацевтическими целями;

понятие "фармацевтически приемлемый наполнитель", используемое в настоящем описании и формуле изобретения, охватывает как один, так и больше одного такого наполнителя;

"фармацевтически приемлемая соль" соединения означает соль, которая фармацевтически приемлема и которая обладает целевой фармацевтической активностью исходного соединения; такие соли включают:

(1) кислотно-аддитивные соли, полученные с использованием минеральных кислот, таких, как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или полученные с использованием органических кислот, таких, как уксусная кислота, пропионовая кислота, капроновая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфокислота, этансульфокислота, 1,2-этандисульфокислота, 2-гидроксиэтансульфокислота, бензолсульфокислота, 4-хлорбензолсульфокислота, 2-нафталинсульфокислота, 4-толуолсульфокислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсульфокислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п., и

(2) соли, образующиеся, когда кислотный протон, содержащийся в исходном соединении, либо замещается металлическим ионом, например ионом щелочного металла, ионом щелочно-земельного металла или алюминиевым ионом, либо образует координационную связь с органическим основанием, таким, как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и т.п.;

"пролекарства" означает любые соединения, которые, когда такие пролекарства вводят в организм млекопитающего субъекта, in vivo выделяют активное исходное лекарственное вещество, соответствующее формуле (I);

пролекарства соединений формулы (I) готовят модификацией функциональных групп, имеющихся у соединений формулы (I), таким образом, чтобы модифицирующие группы были способны in vivo отщепляться с выделением исходного соединения; пролекарства включают соединения формулы (I), у которых гидроксильная, амино- или сульфгидрильная группа [в соединениях формулы (I)] связана с любой группой, которая in vivo способна отщепляться с восстановлением соответственно свободной гидроксильной, амино- или сульфгидрильной группы; примеры пролекарств включают, хотя ими их список не ограничен, сложные эфиры (в частности, ацетатные, формиатные и бензоатные производные), карбаматы (в частности, N,N-диметиламинокарбонил) гидроксильных функциональных групп в соединениях формулы (I) и т.п.; понятие "защитная группа" относится к группировке атомов, которая, когда она связана с реакционноспособной группой в молекуле, маскирует, уменьшает или подавляет эту реакционную способность; примеры защитных групп можно найти в работах T.W. Greene and P.O. Futs, Protective Groups in Organic Chemistry (Wiley, издание 2-ое, 1991), и Harrison, Harrison и др., Compendium of Synthetic Organic Methods, тома 1-8 (John Wiley and Sons. 1971-1996); типичные аминозащитные группы включают формильную, ацетильную, трифторацетильную, бензильную, бензилоксикарбонильную (БЗК), трет-бутоксикарбонильную (БОК), триметилсилильную (ТМС), 2-триметилсилилэтансульфонильную (СЭС), тритильную и замещенную тритильную группы, аллилоксикарбонил, 9-флуоренилметилоксикарбонил (ФМОК), нитровератрилоксикарбонил (НВОК) и т.п.; типичные гидроксилзащитные группы включают те, у которых гидроксильная группа либо ацилирована, либо алкилирована, такие, как остатки бензилового и тритилового эфиров, равно как и остатки алифатических эфиров, тетрагидропираниловых эфиров, триалкилсилиловых эфиров и аллиловых эфиров;

"лечение" или "излечение" заболевания включает:

(1) профилактику заболевания, то есть предотвращение развития клинических симптомов заболевания у млекопитающих, которые могут подвергаться воздействию или оказаться предрасположенными к заболеванию, но еще не подвержены и не проявляют симптомов заболевания;

(2) ингибирование заболевания, т.е. задержку или ослабление развития заболевания или его клинических симптомов, или

(3) ослабление заболевания, т.е. мероприятие, вызывающее регрессию заболевания или его клинических симптомов;

"терапевтически эффективное количество" означает то количество соединения, которого, когда его вводят в организм млекопитающего для лечения заболевания, достаточно для эффекта такого лечения заболевания; "терапевтически эффективное количество" обычно варьируется в зависимости от соединения, болезненного состояния, при котором проводят лечение, серьезности заболевания, при котором проводят лечение, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, пути введения в организм, мнения оказывающего помощь практикующего врача и других факторов.

По одному из объектов настоящего изобретения предлагаются соединения, отвечающие формуле

В основном варианте соединений формулы (I) R¹ обозначает ацил, гетероалкил, необязательно замещенный арилгетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероалкилкарбонил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкенил, гетерозамещенный циклоалкилалкинил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный гетероциклилспироциклоалкил, группу -(алкилен)-С(O)-R¹¹ или -(гетероалкилен)-С(O)-R¹¹, где R¹¹ обозначает алкильную, галоалкильную, гидроксильную, алкокси-, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, необязательно замещенную циклоалкильную, необязательно замещенную циклоалкилалкильную, необязательно замещенную арильную, необязательно замещенную аралкильную, необязательно замещенную гетероарильную или необязательно замещенную гетероаралкильную группу. В предпочтительном варианте R¹ обозначает ацил, гетероалкил, необязательно замещенный арилгетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероалкилкарбонил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкенил, гетерозамещенный циклоалкилалкинил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, -(алкилен)-С(O)-R¹¹ или -(гетероалкилен)-С(O)-R¹¹ , где R¹¹ обозначает алкильную, галоалкильную, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, гидроксил или алкокси.

В более предпочтительном случае вышеприведенного основного варианта и предпочтительного варианта R¹ обозначает гетероалкил, необязательно замещенный арилгетероалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, предпочтительнее гетероалкил или гетерозамещенный циклоалкил. В том случае, когда R¹ обозначает гетероалкил, предпочтительный алкил замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из -OR^a и -NR^bR^c, где R^a обозначает водородный атом, R^b обозначает водородный атом или алкил, а R^c обозначает водородный атом, алкил или алкилкарбонил. Конкретными группами R¹ являются 3-амино-2,2-диметилпропил, 3-диметиламинопропил, 3-метилкарбониламинопропил и 3-амино-2-гидроксипропил. В предпочтительном варианте гетероалкила R¹ обозначает гидроксиалкил.

В предпочтительном варианте гетероалкила, где R¹ обозначает гидроксиалкил (R^a обозначает водородный атом), такую группу предпочтительнее выбрать из 2-гидроксиэтила, 2-гидроксипропила, 3-гидроксипропила, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропила, 2-гидроксибутила, 3-гидроксибутила, 4-гидроксибутила, 2,3-дигидроксипропила, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксиэтила, 2,3-дигидроксибутила, 3,4-дигидроксибутила, 2-(гидроксиметил)-3-гидроксипропила, 1-(гидроксиметил)этила, 2-гидрокси-1,1-диметилэтила, 2-(гидроксиметил)пропила, 1,1-(дигидроксиметил)этила, 1-метил-2, 3-дигидроксипропила, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксипропила, 1-гидроксиметил-2-метилпропила, 1-гидроксиметилбутила, 1-гидроксиметилпентила, 1-гидроксиметил-3-метилбутила, 1,1-диметил-2-гидроксиэтила, 1-(гидроксиметил)этила, 2,3-(дигидрокси)-1-метилпропила, 2,3-(дигидрокси)-1,1-диметилпропила, 1-(гидроксиметил)-2-гидроксипропила и 1-(гидроксиметил)пропила. Тем не менее в других предпочтительных вариантах R¹ обозначает группу, содержащую тетраэдрический углеродный атом, связанный с азотным атомом, более предпочтительно включающую низшие алкильные группы, связанные с этим углеродным атомом. Более предпочтительными гидроксиалкилами в R¹ являются 1-гидрокси-2-метил-2-пропил и 1-гидрокси-2-пропил.

В том варианте, в котором R¹ обозначает "гетерозамещенный циклоалкил", предпочтительная циклоалкильная группа необязательно независимо замещена одним, двумя или тремя, предпочтительнее одним, заместителями, выбранными из гидрокси, гидроксиимино- (=NOH), алкокси-, амино-, моноалкилзамещенной амино-, диалкилзамещенной амино-, оксогрупп (=O), -OC(O)R^a (где R^a обозначает водородный атом, алкил, амино-, моноалкилзамещенную амино-, диалкилзамещенную аминогруппу), -OR^b (где R^b обозначает гидроксиалкил, алкенил или алкоксиалкил), -SO_nR^c [где n обозначает целое число от 0 до 2, предпочтительно 2, а R_c обозначает водородный атом (при условии, что n обозначает 0) или алкил] и -NS(O)₂R^d (где R^d обозначает алкил, амино-, моноалкилзамещенную амино- или диалкилзамещенную аминогруппу). Более предпочтительным гетерозамещенным циклоалкилом является 4-гидроксициклогексил, 2-аминоциклогексил, (2-метоксиэтокси)циклогексил, 4-оксоциклогексил, 4-(метансульфониламино)циклогексил, аллилоксициклогексил, 2-гидроксициклогексил, 4-метоксициклоалкил, 4-метилкарбонилоксициклогексил, 2,3-дигидроксипропилоксициклогексил, 4-(гидроксиимино)циклогексил, 4-(метилсульфониламино)циклогексил, 4-(диметиламиносульфониламино)циклогексил, 4-формилоксициклогексил, 4-(метоксикарбонилокси)циклогексил, 4-(аминокарбонилокси)циклогексил или 4-(N-метилкарбонилокси)циклогексил, причем наиболее предпочтителен 4-гидроксициклогексил (включая цис- и транс-4-гидроксициклогексил).

Когда R¹ обозначает "необязательно замещенный гетероциклил", предпочтительное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним, двумя или тремя, предпочтительнее одним, заместителями, выбранными из алкила, галоалкила, гетероалкила, предпочтительно гидроксиалкила, цианоалкила, аралкила, предпочтительно фенилалкила, -(CR'R'')_n-COR (где n обозначает целое число от 0 до 5, а R обозначает алкил), -(CR'R'')_n-COOR (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' обозначает водородный атом, а R обозначает водородный атом или алкил), -(CR'R'')_n-CONR^aR^b (где n обозначает целое число от 0 до 5, каждый из R' и R'' обозначает водородный атом, а каждый из R^a и R^b независимо друг от друга обозначает водородный атом или алкил) и -S(O)_nR^d [где n обозначает целое число от 0 до 2, предпочтительно 2, a R^d обозначает водородный атом (при условии, что n обозначает 0) или алкил]. Более конкретно понятие "гетероциклил" охватывает тетрагидропиранил, пиперидино, пиперазино, N-метилпирролидин-3-ил, 3-пирролидино, 2-оксопирролидин-1-ил, морфолино, тиоморфолино, тиоморфолино-1-оксид, тиоморфолино-1,1-диоксид, 1,1-диоксотетрагидротиофен-3-ил, пирролинил, имидазолинил и 2-оксоимидазолидинил, которые необязательно замещены так, как указано выше, причем более предпочтительны пиперидиновые производные, такие, как N-метилпиперидин-3-ил, 1-(фенилметил)пиперидин-4-ил, 1-(аминокарбонилметил)пиперидин-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, 1-(гидроксиэтил)пиперидин-4-ил, 1-(2,3-дигидроксипропил)пиперидин-4-ил, 1-(2-цианоэтил)пиперидин-4-ил, 1-(1-цианометил)пиперидин-4-ил, 1-(аминокарбонилметил)пиперидин-4-ил, 1-(этоксикарбонил)пиперидин-4-ил, 1-(2-трифторэтил)пиперидин-4-ил, 1-(диметиламинокарбонилметил)пиперидин-4-ил, 1-(2-метоксикарбонилэтил)пиперидин-4-ил и 1-(гидроксикарбонилметил)пиперидин-4-ил.

Когда R¹ обозначает "необязательно замещенный гетероциклилалкил", предпочтительными значениями гетероциклической группы являются те, которые приведены для "гетероциклила" в дальнейшем при определении значений R¹. Наиболее предпочтительными гетероциклилалкилами являются 1-(диметиламинокарбонилметил)пиперидин-4-илметил, 1-(2-метоксикарбонилэтил)пиперидин-4-илметил, 1-(2-трифторэтил)пиперидинил-4-илметил, 1-(цианометил)пиперидинил-4-илметил, 1-(аминокарбонилметил)пиперидинил-4-илметил, 1-(гидроксикарбонилметил)пиперидинил-4-илметил, 2-(пиперидин-1-ил)этил, 3-(пиперидин-1-ил)пропил, 2-(морфолин-1-ил)этил, 3-(морфолин-1-ил)пропил, 2-(2-оксоимидазолидин-1-ил)этил и 2-(2-оксопирролидин-1-ил)этил.

Когда R¹ обозначает "гетероалкилзамещенный циклоалкил", циклоалкильный радикал может быть необязательно замещенным одним, двумя или тремя, предпочтительно одним, гетероалкилами, предпочтительно гидроксиалкильными группами, как они представлены в настоящем описании.

Предпочтительными примерами таких групп являются 1-гидроксиметилциклопент-1-ил и 2-гидроксиметилциклогекс-2-ил.

Когда R¹ обозначает "необязательно замещенный гетероциклилспироциклоалкил", его предпочтительными примерами являются 1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-ил, 1,3-диазаспиро[4,5]декан-8-ил, 2,4-дион-1,3-диазаспиро[4,5]декан-8-ил, 1,5-диоксаспиро[5,5]ундекан-9-ил и (3-гидроксиметил-3-метил)-1,5-диоксаспиро[5,5]ундекан-9-ил.

Что касается формулы I, то R² обозначает алкил, гало, гетероалкил или винил и может быть связан с фенильным кольцом по месту любой из остальных пяти валентностей, которая в противном случае занята водородным атомом. Подстрочной литерой n обозначено целое число от 0 до 3, указывающее, что фенильное кольцо замещено группами R² в количестве от одной до трех. В тех вариантах, в которых имеются две или три группы R², каждая из них может быть независимой от другой (других). В предпочтительном варианте соединений формулы I и в предпочтительном варианте упомянутых выше значений R¹ n обозначает 1 или 2, а каждый R² обозначает гало или алкил, преимущественно метил, а более предпочтительной группой R² является гало. В рамках этого варианта предпочтительны те случаи, когда -(R²)_n обозначает 2-гало или 2,6-дигало, более предпочтительно 2-хлор или 2,6-дихлор, или когда -(R²)_n обозначает 2-метил.

В соединениях формулы (I) R³ обозначает водородный атом, алкил, гетероалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероаралкил, необязательно замещенный циклоалкил, циклоалкенил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, галоалкил, цианоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкилалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, -(алкилен)-С(O)R³¹ или -(гетероалкилен)-С(O)R³¹, где R³¹ обозначает алкил, галоалкил, гидроксил, алкокси-, амино-, монозамещенную амино-, дизамещенную аминогруппу, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероарил или необязательно замещенный гетероаралкил.

В предпочтительном варианте значения R³ выбирают из водородного атома, алкила, гетероалкила, арила, преимущественно фенила, аралкила, преимущественно фенилметила, циклоалкила, галоалкила, цианоалкила, гетерозамещенного циклоалкила, гетероциклила и -(алкилен)-С(O)R³¹, где R³¹ обозначает алкил, гидроксил, алкокси-, амино-, моноалкилзамещенную амино- или диалкилзамещенную аминогруппу.

В более предпочтительном варианте значения R³ выбирают из водородного атома, алкила, циклоалкила, галоалкила, гетероалкила, гетероциклила и гетерозамещенного циклоалкила. Более предпочтительный R³ обозначает водородный атом, алкил, галоалкил или гетероалкил. В особенно предпочтительном варианте R³ обозначает водородный атом. В другом особенно предпочтительном варианте R³ обозначает метил. Тем не менее в другой группе особенно предпочтительных вариантов R³ обозначает галоалкил, преимущественно 2,2,2-трифторэтил, или R³ обозначает гетероалкил, причем особенно предпочтительными гетероалкильными группами являются 2-этокси-1-этоксиметилэтил, 2-диэтиламиноэтил, 2-метилтиоэтил, 3-диметиламиноэтил, 3-диметиламино-2,2-диметилпропил и 2-гидроксиэтил.

В соединениях формулы (I) R⁴ обозначает водородный атом, алкил или -алкилен-С(O)R³¹. В предпочтительном варианте, в особенности, если иметь в виду упомянутый выше основной и предпочтительный вариант значений R¹, R⁴ обозначает водородный атом. Когда R⁴ обозначает -алкилен-С(O)R³¹, предпочтительным вариантом этого радикала является -СН₂CONH₂.

Помимо представленных выше соединений объем настоящего изобретения включает все фармацевтически приемлемые соли этих соединений вместе с пролекарственными формами этих соединений и все изомеры, находятся ли они в чистой хиральной форме или в виде рацемической смеси, или в смеси другой формы.

Кроме того, другие предпочтительные варианты составляют сочетания предпочтительных вышеописанных групп. В одной группе основных, предпочтительных и более предпочтительных значений R¹ этим радикалом R¹ является гетероалкил, R² обозначает гало или метил, R³ обозначает метил, а n обозначает 1 или 2.

В другой группе значений, в которой R¹ обозначает гетерозамещенный циклоалкил, R² обозначает гало или метил, R³ обозначает метил, а n обозначает 1 или 2, R¹ обозначает преимущественно гидроксициклоалкил, включая цис- и транс-гидроксициклоалкил, в частности цис- или транс-4-гидроксициклогексил.

В еще одном ряде значений, в котором R¹ обозначает гетероциклил или гетероциклилалкил, R² обозначает гало или метил, R³ обозначает метил или водородный атом, а n обозначает 1 или 2, или R² обозначает гало или метил, R³ обозначает гетероалкил, а n обозначает 1 или 2.

Особенно предпочтительные соединения выбирают из ряда 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, 3-(2-хлорфенил)-7-(тетрагидропиран-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, 7-[1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, 3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метоксициклогексил)метиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и их фармацевтически приемлемых солей.

По другому объекту настоящего изобретения предлагаются способы получения описанных выше соединений.

Согласно одному из способов соединения формулы I могут быть получены по методу, включающему

(а) обработку соединения формулы II

в которой n, R² и R³ имеют значения, представленные для соединений приведенной выше формулы I, при условии, что любая имеющаяся препятствующая реакционноспособная группа находится в необязательно защищенной форме, a L обозначает уходящую группу,

амином формулы III

в которой R¹ и R⁴ имеют значения, представленные для соединений приведенной выше формулы I, при условии, что любая имеющаяся препятствующая реакционноспособная группа находится в необязательно защищенной форме, и, когда это необходимо, деблокирование любой защищенной реакционноспособной группы, содержащейся в реакционном продукте.

Когда это необходимо, такое соединение можно превращать в его фармацевтически приемлемую соль.

Согласно другому способу соединения формулы I могут быть получены по методу, включающему

(а) обработку соединения формулы IV

в которой Х обозначает гало, R обозначает алкил, а R² и R³ имеют значения, представленные для соединений приведенной выше формулы I,

в присутствии основания с получением соединения формулы V

(б) обработку соединения формулы V окислителем, а затем амином формулы R¹R⁴-NH (в которой R¹ и R⁴ имеют значения, представленные для соединений приведенной выше формулы I) с получением соединения формулы (I).

Когда это необходимо, полученное соединение можно (но необязательно) превращать в его фармацевтически приемлемую соль.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены по самым разнообразным способам с применением методов, которые хорошо известны специалистам в данной области техники. Если обратиться к вышеупомянутым способам, то соединения по настоящему изобретению получают так, как более подробно проиллюстрировано на схеме 1 или представлено в общем на схеме 4.

В результате обработки соединения формулы Ia (где R обозначает алкильную, арильную или аралкильную группу) первичным амином (R³-NH₂) получают соединение формулы Ib. Эту реакцию удобно проводить в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ациклическом или простом циклическом эфире (таком, как тетрагидрофуран), галоидированном алифатическом углеводороде, в частности в дихлорметане, необязательно галоидированном ароматическом углеводороде, формамиде, низшем алканоле или воде. Реакцию целесообразно проводить при температуре от примерно -20 до примерно 120°С.

В результате восстановления соединения формулы Ib получают спирт формулы Ic. Это восстановление, как правило, проводят с использованием алюмогидрида лития по методу, который хорошо известен специалистам в данной области техники (например, в растворителе, который инертен в условиях восстановления, предпочтительно в ациклическом или циклическом простом эфире, в частности в тетрагидрофуране, при температуре от примерно -20 до примерно 70°С, предпочтительно при температуре от примерно 0°С до примерно комнатной температуры).

Окисление спирта формулы Ic на следующей стадии обеспечивает возможность получения карбоксальдегида формулы Id. Окисление, как правило, проводят с использованием диоксида марганца, хотя можно также применять множество других методов [см., например, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, изд. 4-ое, March, John Wiley & Sons, New York (1992)]. В зависимости от используемого окислителя реакцию удобно проводить в растворителе, который инертен в данных конкретных условиях окисления, предпочтительно в галоидированном алифатическом углеводороде, в частности в дихлорметане, или в необязательно галоидированном ароматическом углеводороде. Окисление целесообразно проводить при температуре от примерно 0 до примерно 60°С.

Реакцией карбоксальдегида формулы Id с замещенным анилином (R²)_n-С₆Н_5-nNH₂ получают соединение формулы Ie. Эту реакцию можно проводить в присутствии кислоты, например ароматической сульфоновой кислоты, предпочтительно 4-толуолсульфоновой кислоты, с азеотропным удалением воды, образующейся во время реакции. Эту реакцию удобно проводить в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ароматическом углеводороде, в частности в толуоле или ксилоле, или в необязательно галоидированном ароматическом углеводороде, и при температуре от примерно 70 до примерно 150°С, преимущественно при температуре кипячения растворителя, для содействия упомянутому азеотропному удалению воды.

Восстановление соединения формулы Ie с получением соединения формулы If можно проводить с использованием, например, гидридных восстановителей, таких, как боргидрид натрия, алюмогидрид лития и триацетоксиборгидрид натрия, в условиях, которые хорошо известны специалистам в данной области техники. В предпочтительном варианте соединение формулы Ie не очищают, а реакционную смесь, в которой его получают, концентрируют и полученный концентрат растворяют в растворителе, который в условиях восстановления инертен, предпочтительно в ациклическом или простом циклическом эфире, в частности в тетрагидрофуране или необязательно галоидированном ароматическом углеводороде, или низшем алканоле, а затем обрабатывают вышеупомянутыми восстановителями. Восстановление целесообразно проводить при температуре от примерно -10 до примерно 100°С, предпочтительно при примерно 0°С.

Циклизацией соединения формулы If получают бициклический азотсодержащий гетероцикл формулы Ig. Циклизацию можно проводить реакцией соединения If с карбонилирующим агентом, таким, как фосген или трихлорметилхлорформиат (или эквивалент фосгена), целесообразно в присутствии третичного органического основания, предпочтительно три(низший)алкиламина, в частности триэтиламина. Более конкретно циклизацию проводят в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ациклическом или простом циклическом эфире, в частности в тетрагидрофуране, необязательно галоидированном ароматическом углеводороде или галоидированном алифатическом углеводороде. Эту реакцию удобно проводить при температуре от примерно -20 до примерно 50°С, предпочтительно от примерно -20 до 0°С.

Окисление соединения Ig надкислотой, такой, как 3-хлорпербензойная кислота, или продуктом Oxone^® (моноперсульфатная тройная соль калия) в водном апротонном растворителе, таком, как тетрагидрофуран, обеспечивает получение сульфона (Ih) (или, если необходимо, его соответствующего сульфоксида путем регулирования условий окисления), который можно превращать в самые разнообразные целевые соединения. Как правило, окисление соединения Ig проводят в растворителе, который в условиях окисления инертен, предпочтительно в галоидированном алифатическом углеводороде, в частности в хлороформе или дихлорметане, и при температуре от примерно -20 до примерно 50°С, предпочтительно от примерно 0°С до примерно комнатной температуры.

Наконец, обработка соединения Ih амином (R¹R⁴-NH) обеспечивает получение целевых соединений формулы I. Реакцию можно проводить в присутствии или в отсутствие растворителя. К растворителям, которые могут быть использованы, относятся полярные апротонные растворители, включая простые эфиры, такие, как диметоксиэтан, диметоксиэтиловый эфир и тетрагидрофуран, и такие полярные апротонные растворители, как диметилформамид и N,N-диметилпирролидон. Эту реакцию удобно проводить при температурах от примерно 0 до примерно 200°С, более предпочтительно от примерно комнатной температуры до примерно 150°С.

Таким образом, по настоящему изобретению предлагается способ получения соединения формулы I обработкой соединения общей формулы Ii амином (R¹R⁴-NH).

У соединения Ii символы R², R³ и R⁴ и подстрочный символ n имеют значения, приведенные выше со ссылкой на формулу I. Литера L обозначает уходящую группу, которой может быть атом галогена, низшая алкенсульфонильная группа (например, метансульфонил, метансульфинил или трифторметансульфонил) или ароматическая сульфонильная или сульфинильная группа (например, бензолсульфонил, бензолсульфинил или 4-толуолсульфонил). Другие приемлемые уходящие группы специалистам в данной области техники известны, их можно найти, например, в ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, изд. 4-ое, March, John Wiley & Sons, New York (1992). Приемлемыми аминами (R¹-NH₂) являются те, у которых R¹ обозначает любую из групп R¹ упомянутых для формулы I.

В другом варианте может быть получен бициклический азотсодержащий гетероцикл, а R³ может быть введен на более поздней стадии синтеза, как показано на схеме 2.

Соединение IIa, исходный материал на схеме 2, может быть получено реакцией замещения из технически доступных соединений формулы Ia с получением соединений формулы Ib, как это представлено выше на схеме 1. Вкратце, обработка меркаптосоединения приемлемым амином обеспечивает возможность получения соединения формулы Ib (R³ обозначает Н). За стадиями, приведенными на схеме 1, может следовать превращение соединения Ib (R³ обозначает Н) в соединение IIa.

В результате циклизации соединения IIa получают бициклический азотсодержащий гетероцикл формулы IIb. Эту циклизацию можно проводить реакцией соединения IIa с фосгеном или трихлорметилхлорформиатом (или эквивалентом фосгена), как правило, в присутствии третичного органического основания, предпочтительно три(низший)алкиламина, в частности триэтиламина. Более конкретно циклизацию проводят в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ациклическом или простом циклическом эфире, в частности в тетрагидрофуране, необязательно галоидированном ароматическом углеводороде или галоидированном алифатическом углеводороде. Обычно реакцию проводят при температуре от примерно -20 до примерно 50°С, предпочтительно при температуре от примерно 0°С до примерно комнатной температуры.

Введение группы R³ с целью получить соединение формулы IIc может быть осуществлено в самых разнообразных условиях. Так, например, соединение IIb можно обрабатывать гидридом щелочного металла, в частности гидридом натрия, с последующей реакцией с соединением общей формулы R³-L, в которой R³ имеет любые из значений в соответствии с указанными выше в настоящем описании для R³, за исключением водородного атома, арила или гетероарила, а L обозначает уходящую группу (например, гало, метансульфонатную, трифторметансульфонатную и т.п.). N-замещение обычно осуществляют в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в формамиде, в частности в N-метилпирролидиноне или диметилформамиде, в ациклическом или простом циклическом эфире или необязательно галоидированном ароматическом углеводороде. Эту реакцию целесообразно проводить при температуре от примерно 50 до примерно 200°С, предпочтительно при температуре от примерно 50 до примерно 150°С. По другому варианту алкилирование можно проводить с неорганическим основанием, таким, как карбонат калия, в формамидном растворителе, таком, как N-метилпирролидинон, при температурах от примерно 0 до примерно 25°С.

Альтернативный и предпочтительный метод введения R³ включает алкилирование по пиримидиноновому азотному атому в условиях реакции Mitsonobu. В этом методе спирт общей формулы R³-ОН совмещают с соединением общей формулы IIb в присутствии, например, трифенилфосфина и диэтилазодикарбоксилата или дифенилпиридилфосфина и трет-бутилазодикарбоксилата [см. Tetrahedron Lett., 40: 4497-4500 (1999)]. Алкилирование обычно проводят в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ациклическом или циклическом простом эфире, при температурах от примерно -20 до примерно 100°С, предпочтительно при температурах от примерно 0 до примерно 30°С (или при комнатной температуре). Что касается других методов алкилирования, то для реакции в этих условиях наиболее приемлемы первичные и вторичные спирты.

После введения R³ с целью получить целевые соединения формулы I могут быть осуществлены стадии окисления и замещения (для введения R¹ R⁴-N-), как в общих чертах представлено выше на схеме 1.

Тем не менее по другим вариантам эти соединения могут быть получены изменением на обратный порядка осуществления стадий алкилирования и замещения, благодаря чему меняется на обратный порядок введения -R³ и -NR¹R⁴, показанный на схеме 3.

Следовательно, соединение формулы IIa может быть циклизовано с получением соединения IIb (как ранее показано на схеме 2). Окисление соединения IIb до соединения IIIa обеспечивает возможность получения шаблона для последующих стадий замещения и алкилирования. Таким образом, обработка соединения IIIa с использованием R¹-NH₂ в условиях, описанных выше, дает возможность получить соединение IIIb, которое можно алкилировать с использованием соединения R³-L (у которого L имеет значения, упомянутые выше) или R³-ОН в условиях реакции Mitsunobu, которая описана ранее, для получения целевых соединений формулы I.

На схеме 4 представлен альтернативный способ получения соединений формулы I.

Соединение Ia, исходный материал на схемах 1 и 4, технически доступно. Обработкой соединения формулы Ia подходящим аминирующим агентом или нуклеофилом, как это представлено на схеме 1, получают соединение формулы Ib.

Путем обработки соединения формулы Ib замещенным или незамещенным фенилизоцианатом получают амидное соединение формулы IVa. Эту реакцию проводят в инертном органическом растворителе, предпочтительно в ароматическом углеводороде, таком, как толуол и ксилолы, при температуре от примерно 0 до примерно 150°С.

В результате восстановления соединения формулы IVa получают спирт формулы IVb. Это восстановление проводят с использованием алюмогидрида лития по методу, который хорошо известен специалистам в данной области техники (в частности, в инертном органическом растворителе, таком, как ациклический или циклический простой эфир, в частности в тетрагидрофуране, при температуре от примерно -60 до примерно 90°С, предпочтительно от примерно -20°С до примерно комнатной температуры).

Реакцией спирта формулы IVb с галоидирующим агентом получают соединение формулы IVc, в которой Х обозначает атом брома, хлора или иода, предпочтительно брома. Несмотря на возможность применения самых разнообразных методов галоидирования [см., например, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, изд. 4-ое, March, John Wiley & Sons, New York (1992)], эту реакцию можно проводить с использованием трибромида фосфора или пентахлорида фосфора, получая соответственно соединение брома или хлора. Эту реакцию удобно проводить в растворителе, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в ациклическом или простом циклическом эфире, в частности в тетрагидрофуране, или галоидированном алифатическом углеводороде, при температуре от примерно 0 до примерно 60°С.

В результате циклизации соединения формулы IVc получают бициклический азотсодержащий гетероцикл формулы IVd. Циклизацию можно проводить в присутствии основания, предпочтительно гексаметилдисилазана. Циклизацию, как правило, проводят в среде растворителя, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в полярном органическом растворителе, таком, как 1-метил-2-пирролидинон, N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид и диметилсульфоксид, при температуре от примерно 10 до примерно 200°С в течение от примерно 1 до примерно 50 ч. В предпочтительном варианте реакционную смесь выдерживают в течение от примерно 1 до примерно 10 ч при температуре от примерно 60 до примерно 150°С.

Наконец, обработкой соединения Id окислителем, таким, как N-хлорсукцинимид или хлор с водой, и амином (R¹R⁴-NH) через сульфоксидное промежуточное соединение формулы А получают целевые соединения формулы I. Реакцию окисления/замещения in situ проводят в среде растворителя, который в реакционных условиях инертен, предпочтительно в полярном апротонном органическом растворителе, таком, как 1-метил-2-пирролидинон, N,N-диметилформамид и тетрагидрофуран. Эту реакцию целесообразно проводить при температуре от примерно 0 до примерно 120°С, более предпочтительно при комнатной температуре.

Специалисту в данной области техники понятно, что предусмотрена возможность внесения в вышеприведенные схемы некоторых модификаций, которые включены в объем настоящего изобретения. Так, например, некоторые стадии включают защиту и деблокирование реакционноспособных функциональных групп, которые несовместимы с данными конкретными реакционными условиями.

По другому объекту настоящего изобретения предлагаются фармацевтические композиции, включающие соединения формулы I.

Соединения формулы I и фармацевтически приемлемые соли основных соединений формулы I с кислотами могут быть использованы как лекарственные средства, например в форме фармацевтических препаратов. Фармацевтические препараты можно вводить в организм энтерально, например перорально в форме таблеток, таблеток с покрытием, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий, интраназально, например в форме интраназальных спреев, или ректально, например в форме суппозиториев. Однако их можно также вводить парентерально, например, в форме растворов для инъекций.

При приготовлении фармацевтических препаратов соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли можно совмещать с фармацевтически инертными органическими или неорганическими носителями. В качестве таких носителей при изготовлении таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул могут быть использованы, например, лактоза, кукурузный крахмал и его производные, тальк, стеариновая кислота и ее соли и т.п. Приемлемыми носителями для изготовления мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, твердые жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п., однако в случае мягких желатиновых капсул в зависимости от природы действующего вещества обычно никакие носители не требуются. При приготовлении растворов и сиропов приемлемыми носителями являются, например, вода, полиолы, сахароза, инвертный сахар, глюкоза и т.п. Приемлемыми для изготовления суппозиториев носителями являются, например, натуральные или отвержденные масла, воски, твердые жиры, полужидкие и жидкие полиолы и т.п.

Кроме того, фармацевтические препараты могут включать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, корригенты, соли для варьирования осмотического давления, буферы, маскирующие добавки и антиоксиданты. Они могут также включать другие терапевтически ценные вещества, отличные от соединений формулы I, и их вышеупомянутые фармацевтически приемлемые соли.

Лекарственные средства, которые содержат соединения формулы I или фармацевтически приемлемые соли основных соединений формулы I с кислотами в сочетании с фармацевтически приемлемым материалом-носителем, также являются объектом настоящего изобретения. Другим объектом изобретения является способ приготовления таких лекарственных средств, который включает придание одному или нескольким из этих соединений или их солям формы галенова препарата для введения в организм вместе с совместимым фармацевтически приемлемым носителем. При необходимости в состав такого лекарственного средства можно вводить одно или несколько других терапевтически ценных веществ, которые можно добавлять в процессе приготовления этого лекарственного средства.

Как сказано выше, соединения формулы I и их вышеупомянутые фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в соответствии с изобретением в качестве терапевтически активных веществ, в частности в качестве противовоспалительных средств или для профилактики отторжения имплантата после хирургической операции по трансплантации. Дозу можно варьировать в широких интервалах и в каждом конкретном случае она, что очевидно, должна соответствовать индивидуальным потребностям. Обычно ежедневная доза при введении в организм взрослого человека должна составлять от примерно 0,1 до примерно 100 мг/кг, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 5 мг/кг. Ежедневную дозу можно вводить в виде дозы на один прием или в виде дробных доз. Кроме того, когда для этого существуют показания, приведенный выше верхний предел может быть превышен.

Наконец, объектом изобретения является также применение соединений формулы I и их вышеупомянутых фармацевтически приемлемых солей для приготовления лекарств, преимущественно для лечения и профилактики воспалений, иммунологических, онкологических, бронхолегочных, дерматологических и сердечно-сосудистых заболеваний, для лечение астмы, расстройств центральной нервной системы или диабетических осложнений, или для предотвращения отторжения трансплантата после хирургической операции по трансплантации.

Соединения формулы I могут быть использованы, хотя ими их список не ограничивается, для лечения у человека или других млекопитающих любых расстройств или болезненных состояний, которые у таких млекопитающих обостряются или вызваны чрезмерным или нерегулированным продуцированном TNF и/или IL-1, или р38 киназы. Таким образом, по настоящему изобретению предлагается способ лечения цитокинопосредованных заболеваний, который включает введение в организм эффективного для подавления активности цитокинов количества соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли, или его таутомера.

Более конкретно соединения формулы I могут быть использованы для лечения артрита, болезни Крона, синдрома раздраженной толстой кишки, респираторного дистресс-синдрома взрослых, хронического воспаления легких, остеопороза или болезни Альцгеймера. Соединения формулы I могут быть использованы, хотя ими их список не ограничивается, для лечения у субъекта воспаления или как жаропонижающее средство при лечении лихорадки. Соединения по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения артрита, включая, хотя ими их список не ограничивается, ревматоидный артрит, спондилоартропатию, подагрический артрит, остеоартрит, системную красную волчанку и подростковый артрит, остеоартрит, подагрический артрит и другие артритные состояния. Такие соединения могут быть использованы для лечения легочных заболеваний или воспаления легкого, включая респираторный дистресс-синдром взрослых, легочный саркоидоз, астму, силикоз и хроническое воспаление легких. Соединения также могут быть использованы для лечения вирусных и бактериальных инфекций, включая сепсис, септический шок, грамотрицательный сепсис, малярию, менингит, вторичную кахексию как результат инфекции или злокачественного заболевания, вторичную кахексию к синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД), СПИД, предСПИД (состояние предшествующее синдрому приобретенного иммунодефицита, ARC (СПИД-связанный комплекс), пневмонию и вирус герпеса. Соединения могут быть также использованы для лечения заболеваний, связанных с резорбцией костной ткани, таких, как остеопороз, а также эндотоксического шока, синдрома токсического шока, повреждение от повторных переливаний, аутоиммунных заболеваний, включая реакцию трансплантат против хозяина и отторжение аллотрансплантата, сердечно-сосудистые заболевания, включая атеросклероз, тромбоз, застойную сердечную недостаточность и кардиальное повреждение от повторных переливаний, почечное повреждение от повторных переливаний, заболевания печени и нефрит, и миалгию как результат инфекции.

Предлагаемые соединения могут быть также использованы для лечения гриппа, рассеянного склероза, рака, диабета, системной красной волчанки (СКВ), состояний, связанных с кожными заболеваниями, такими, как псориаз, экзема, ожоги, дерматит, келоидные образования и рубцовые образования на ткани. Соединения по изобретению могут быть также использованы для лечения желудочно-кишечных заболеваний, таких, как воспаление кишечника, болезнь Крона, гастрит, синдром раздраженной толстой кишки и неспецифический язвенный колит. Эти соединения можно применять, по-видимому, при лечении офтальмологических заболеваний, таких, как ретинит, ретинопатия, увеит, фотофобия глаз и острые повреждения глазной ткани. Соединения по изобретению могут быть также использованы для лечения ангиогенезиса, включая неоплазию; метастаз; офтальмологических заболеваний, таких, как отторжение роговичного имплантата, глазная реваскуляризация, почечная реваскуляризация, включая реваскуляризацию в результате травмы или инфекции, диабетическую ретинопатию, ретролентальную фиброплазию и реваскулярную глаукому; язвенные заболевания, такие, как язва желудка; патологические, но не злокачественные заболевания, такие, как гемагиомы, включая инвантильные гемагиомы, ангиофиброму носоглотки и бессосудистый некроз кости, диабетическую нефропатию и кардиомиопатию, и заболевания женской репродуктивной системы, такие, как эндометриоз. Соединения по изобретению могут быть также использованы для предотвращения продуцирования циклооксигеназы-2 и, как полагают, соединения по настоящему изобретению могут быть также использованы для профилактики и лечения рака, преимущественно рака толстой кишки. Предполагают, что соединения по настоящему изобретению могут быть эффективными при профилактике и лечении болезни Альцгеймера.

Помимо применения этих соединений при лечении человека, они эффективны также в ветеринарии при лечении домашних животных, экзотических животных, сельскохозяйственных животных, включая млекопитающих, грызунов и т.п., более предпочтительно для лечения таких животных, как лошади, собаки и кошки.

Предлагаемые соединения могут быть также использованы в совместной терапии (частично или полностью вместо других традиционных противовоспалительных средств), в частности вместе со стероидами, ингибиторами циклооксигеназы-2, НСПВС (нестероидные противовоспалительные средства), DMARDS, иммуносупрессивными средствами, ингибиторами 5-липоксигеназ, антагонистами лейкотриена В₄ и ингибиторами гидролаз лейкотриена А₄.

Понятие "расстройство, опосредованное TNF", используемое в настоящем описании, относится к любым или ко всем расстройствам или болезненным состояниям, в которых участвует TNF, причем либо сам TNF контролирует процесс, либо с помощью TNF высвобождаются другие монокины, такие, как, например, IL-1, IL-6 или IL-8, хотя ими их список не ограничивается. Поэтому болезненное состояние, при котором, например, IL-1 является главным компонентом и продуцирование которого или активность усиливается и секретируется как реакция на TNF, должно рассматриваться как расстройство, опосредованное TNF.

Понятие "расстройство, опосредованное р38", используемое в настоящем описании, относится к любым или ко всем расстройствам или болезненным состояниям, в которых участвует р38, когда-либо сам р38 контролирует процесс, либо с помощью р38 высвобождаются другие факторы, такие, как, например, IL-1, IL-6 и IL-8, хотя ими их список не ограничивается. Поэтому болезненное состояние, при котором, например, IL-1 является главным компонентом и продуцирование которого или активность резко усиливается и секретируется как реакция на р38, следует рассматривать как расстройство, опосредованное р38.

Так как TNF-β является близким структурным гомологом TNF-α (также известным как кахектин) и так как каждый из них вызывает подобные биологические ответы и связывается с теми же самыми рецепторами клеток, синтез как TNF-α, так и TNF-β ингибируется соединениями по настоящему изобретению, и, таким образом, они относятся, если не указано иное, ко всей группе "TNF".

ПРИМЕРЫ

Приведенные ниже примеры предназначены для иллюстративных целей, а не для ограничения объема настоящего изобретения.

Во всех случаях, если не указано иное, в приведенных ниже примерах температура указана в градусах Цельсия (°С); процессы проводили при комнатной температуре или температуре окружающей среды (как правило, в интервале примерно от 18 до 25°С; выпаривание растворителя проводили с использованием роторного испарителя под пониженным давлением (как правило, от 4,5 до 30 мм рт.ст.) при температуре бани вплоть до 60°С; за ходом реакций, как правило, следили по результатам ТСХ, а продолжительность реакции указана только для иллюстративных целей; точки плавления не корректировали; продукты демонстрировали удовлетворительные данные ¹Н-ЯМР- и/или микроанализов; выход продуктов указан только для иллюстративных целей; также использованы следующие общепринятые аббревиатуры: t_пл (температура плавления): л (литр, литры), мл (миллилитры), ммоль (миллимоль), г (граммы), мг (миллиграммы), мин (минуты) и ч (часы).

ДЭАД обозначает диэтилазодикарбоксилат,

ДИАД обозначает диизопропилазодикарбоксилат,

ДМПМ обозначает 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)-пиримидинон.

Пример 1

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метансульфонил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, используя в качестве исходного соединения этил-4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилат.

1.1. Получение дин-5-карбоксилата этил-4-метиламино-2-метилтиопирими

Раствор 20 г (86 ммолей) этил-4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата (фирма Aldrich Chemical Co., Милуоки, шт. Висконсин, США) в 250 мл дихлорметана охлаждали до 0°С и обрабатывали медленным добавлением 35 мл (281 ммоля) 33%-ного раствора метиламина в этаноле. После перемешивания в течение 30 мин добавляли 150 мл воды и фазы разделяли. Органическую фазу сушили над сульфатом магния и фильтровали. Фильтрат выпаривали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 19 г (выход 97%) этил-4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата.

1.2. Получение 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола

9 г (237 ммолей) алюмогидрида лития перемешивали в 300 мл сухого тетрагидрофурана и обрабатывали добавлением по каплям раствора 34 г (143 ммоля) этил-4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата в 300 мл сухого тетрагидрофурана и оставляли стоять в течение 15 мин. Смесь охлаждали на льду и осторожно обрабатывали добавлением по каплям 18 мл воды. По каплям вводили тридцать шесть миллилитров 2 М раствора гидроксида натрия, а затем 48 мл воды. Образовавшуюся суспензию перемешивали в течение 17 ч при комнатной температуре, а затем фильтровали. Остаток на фильтре дважды промывали с использованием каждый раз 100 мл этилацетата и объединенные фильтраты и промывные жидкости выпаривали под пониженным давлением. Остаток суспендировали в 200 мл дихлорметана/гексана (в соотношении 2:1) и твердое вещество выделяли и сушили с получением в виде желтого твердого вещества 23,5 г (выход 86%) 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола.

1.3. Получение 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида

20 г (108 ммолей) 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола и 1 л дихлорметана объединяли с перемешиванием и обрабатывали 87 г (1 молем) диоксида марганца. Образовавшуюся суспензию перемешивали в течение 24 ч, а затем фильтровали через вспомогательное фильтровальное вещество. Остаток на фильтре промывали 100 мл дихлорметана и объединенные фильтрат и промывные жидкости выпаривали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 15,8 г (выход 80%) 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида.

1.4. Получение 5-(2,6-дихлорфенил)аминометил-4-метиламино-2-метилтиопиримидина

Смесь 6 г (32,8 ммоля) 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида, 5,5 г (33,9 ммоля) 2,6-дихлоранилина и 1 г (5,3 ммоля) 4-толуолсульфокислоты в 70 мл толуола в течение 17 ч выдерживали при температуре кипения с азеотропным удалением воды. Смесь концентрировали под пониженным давлением до остаточного объема примерно 10 мл, а затем обрабатывали 120 мл этанола. Образовавшуюся суспензию нагревали до 75°С и обрабатывали в течение 15 мин 6,2 г (160 ммолей) гранул борогидрида натрия. Смесь перемешивали в течение дальнейших 15 мин и охлаждали до комнатной температуры. Под пониженным давлением удаляли растворитель и остаток в течение 1 ч перемешивали в смеси 200 мл 2 М раствора гидроксида натрия и 200 мл этилацетата. Фазы разделяли, органическую фазу сушили над сульфатом магния и фильтровали. В результате выпаривания фильтрата под пониженным давлением и экспресс-хроматографии остатка с использованием диэтилового эфира/гексана в соотношении 3:7 для элюирования в виде белого твердого вещества получали 5,2 г (выход 48%) 5-(2,6-дихлорфенил)аминометил-4-метиламино-2-метилтиопиримидина.

1.5. Получение 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метилтио-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Перемешиваемый раствор 12 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле, 23 ммоля) в 100 мл толуола, охлажденный на льду, обрабатывали добавлением по каплям раствора 5 г (15,2 ммоля) 5-(2,6-дихлорфенил)аминометил-4-метиламино-2-метилтиопиримидина и 4 мл (29 ммоля) триэтиламина в 80 мл тетрагидрофурана. После перемешивания в течение 1 ч смесь обрабатывали 100 мл насыщенного водного раствора хлорида аммония и фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали 100 мл тетрагидрофурана, объединенные органические растворы сушили над сульфатом магния и фильтровали. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 4,8 г (выход 89%) 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метилтио-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (сульфид 1.1).

1.6. Получение 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метансульфонил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Раствор 5 г (14,1 ммоля) 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метилтио-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (соединение 1.1) в 200 мл дихлорметана охлаждали на льду и обрабатывали 10 г (28,9 ммоля) 3-хлорпербензойной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч, затем обрабатывали 2 мл диметилсульфоксида и оставляли стоять в течение 10 мин. Далее добавляли 100 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и фазы разделяли. Органическую фазу сушили над сульфатом магния и фильтровали. В результате концентрирования фильтрата под пониженным давлением в виде белого твердого вещества получали 5 г (выход 92%) 3-(2,6-дихлорфенил)-7-метансульфонил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (сульфон 1.2).

С использованием на вышеописанной стадии 1.4 2-хлоранилина вместо 2,6-дихлоранилина получали родственное соединение, 3-(2-хлорфенил)-7-метансульфонил-1-метил-3,4-дигидропиримидин-2(1Н)-он (сульфон 1.3).

Аналогичным путем с использованием на вышеописанной стадии 1.4 о-толуидина вместо 2,6-дихлоранилина получали 7-метансульфонил-З-орто-толил-1-метил-3,4-дигидропиримидин-2(1Н)-он (сульфон 1.4).

Пример 2

Соединение 1-7

Данный пример иллюстрирует процесс получения 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1,1-диметилэтиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, в ходе проведения которого реакцию замещения ведут в отсутствие растворителя.

0,200 г (0,57 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 0,11 мл (1,2 ммоля) 2-амино-2-метил-1-пропанола. Смесь выдерживали при 100-110°С в течение 1 ч и по истечении этого времени ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием гексана/ацетона в соотношении 25:15. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до остатка в виде масла, который вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 0,150 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1,1-диметилэтиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

С заменой 2-амино-2-метил-1-пропанола на необходимый амин R¹R⁴ NH получали дополнительные соединения по изобретению, перечисленные в таблице 1-3.

Пример 3

Соединение 1-13

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-((1S,2R)-2-гидрокси-1-гидроксиметилпропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,800 г (2,27 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 3 мл 2-метоксиэтилового эфира и 0,480 г (4,56 ммоля) D-аллотреонинол-((2R,3S)-2-амино-3-гидроксибутанола). Смесь выдерживали при 100°С в течение одного часа, по прошествии которого температуру повышали до 130°С, так как реакция не завершалась. По истечении 30 мин реакция завершалась, и смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали под вакуумом и остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола/изопропиламина в соотношении 70:5:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали до остатка в виде масла, который вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 0,448 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-((1S,2R)-2-гидрокси-1-гидроксиметилпропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

С заменой D-аллотреонинола необходимым амином R¹R⁴NH получали дополнительные соединения по изобретению, перечисленные в таблицах 1-3.

Пример 4

Соединение 1-2

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,200 г (0,57 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 0,09 мл (1,13 ммоля) D,L-2-амино-1-пропанола и выдерживали при 100-110°С в течение 30 мин. Далее реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и смесь очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 9:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до остатка в виде масла, который вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 0,142 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 5

Соединение 1-3

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидроксипропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,200 г (0,57 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 0,09 мл (1,17 ммоля) 1-амино-2-пропанола и выдерживали при 100-110°С в течение 30 мин. Далее реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и смесь очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 9:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до остатка в виде масла, который вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 0,165 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидроксипропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 6

Соединение 3-28

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(2,3-дигидрокси-1,1-диметилпропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d] пиримидин-2(1Н)-она.

Получение 3-амино-3-метилбутан-1,2-диола

В раствор 20 мл (0,2 моля) 3-метил-2-бутен-1-ола в 800 мл воды вводили 42,5 г (0,5 моля) бикарбоната натрия. Раствор охлаждали до 5°С и порциями в течение 1 ч добавляли 54 г (0,22 моля) 3-хлорпербензойной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч, затем насыщали хлоридом натрия и экстрагировали дихлорметаном. Слои разделяли, органический слой сушили над карбонатом калия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали экспресс-хроматографией, используя в качестве элюента гексан/этилацетат в соотношении 2:1, с получением в виде масла 10,02 г (3,3 -диметилоксиранил)метанола.

Раствор 10 г (98 ммолей) (3,3-диметилоксиранил)метанола в 735 мл дихлорметана объединяли с раствором 50 мл (169,4 ммоля) изопропоксида титана в 100 мл дихлорметана и раствором 40,6 мл (235 ммолей) аминодифенилметана в 100 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Добавляли 10%-ного раствора гидроксида натрия в рассоле и суспензию перемешивали в течение еще 12 ч, фильтровали и промывали 0,2 М соляной кислотой. Слои разделяли и органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией в колонке, используя в качестве элюента гексан/этилацетат в соотношении 4:1, с получением 5,1 г 3-(бензгидриламино)-3-метилбутан-1,2-диола.

5,1 г (17,9 ммоля) 3-(бензгидриламино)-3-метилбутан-1,2-диола и 1,2 г гидроксида палладия в 25 мл метанола встряхивали в атмосфере водорода в аппарате Парра под давлением 49 фунтов/кв.дюйм в течение 18 ч. Суспензию фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток суспендировали в гексане, перемешивали в течение 2 мин и гексановый слой декантировали. Остаток концентрировали под вакуумом с получением 1,74 г 3-амино-3-метил-1,2-бутандиола.

Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(2,3-дигидрокси-1,1-диметилпропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

700 мг (1,7 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 500 мг (2,1 ммоля) 3-амино-3-метил-1,2-бутандиола и 2 мл 2-метоксиэтилового эфира. Смесь выдерживали при 100°С в течение 6 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 99:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом, получая в остатке в виде масла указанное в заглавии соединение, которое вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 256 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(2,3-дигидрокси-1,1-диметилпропиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 7

Соединение 3-43

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклогексил)амино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

500 мг (1,2 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 602 мг (4,6 ммоля) 1-амино-1-циклогексанметанола [полученного согласно изложенному в J. Med. Chem., 1966, 9(6) 911-920] и 1 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 120°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 98:2. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до твердого остатка, который растирали в порошок с водой, отфильтровывали, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 328 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклогексил)амино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-а]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 8

Соединение 3-45

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Получение 1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламина

В смесь 50,3 г (322,1 ммоля) 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она и 89,5 г (100,3 ммоля) гидроксиламингидрохлорида в 450 мл воды порциями вводили 102,4 (966,2 ммоля) карбоната натрия. Реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при комнатной температуре, а затем экстрагировали этилацетатом.

Органический слой промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 68,2 г сырого 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-оноксима.

В раствор 68 г (400 ммолей) 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-оноксима в 200 мл этанола в виде суспензии в 52 мл этанола вводили никель Ренея. Образовавшуюся смесь встряхивали в атмосфере водорода под давлением 50 фунтов/кв.дюйм в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 57,5 г 1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламина.

Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

3,6 г (10 ммолей) сульфона 1.3 объединяли с 6,4 г (41 ммоль) 1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламина в 20 мл 1-метил-2-пирролидинона и выдерживали при 100°С в течение 5 ч. Далее реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом и водой. Слои разделяли и органический слой промывали водой и рассолом, сушили сульфатом натрия, концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 0,5% гидроксида аммония в этилацетате. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением в виде не совсем белого твердого вещества 1,3 г 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 9

Соединение 3-47

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(3-гидроксиметил-3-метил-1,5-диоксаспиро[5.5]ундец-9-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,30 г (0,70 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 8), 0,17 г (0,91 ммоля) моногидрата п-толуолсульфокислоты и 0,84 г (7,0 ммоля) 1,1,1-трис(гидроксиметил)этана в 40 мл толуола кипятили с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли этилацетатом и насыщенным водным бикарбонатом натрия. Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали рассолом, сушили, концентрировали под пониженным давлением и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 50-60% ацетона в гексане. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали с получением в виде белой пены 0,32 г указанного в заглавии соединения. В результате добавления 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире получали соль, которую отфильтровывали, выделяя 160 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(3-гидроксиметил-3-метил-1,5-диоксаспиро[5.5]ундец-9-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 10

Соединение 3-46

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Раствор 6,0 г (14 ммолей) 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 8) в 60 мл 80%-ной уксусной кислоты выдерживали при 65°С в течение ночи. Далее реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой, этилацетатом и рассолом. Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и рассолом, сушили и концентрировали под пониженным давлением. Остаток растворяли в хлороформе и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 4% метанола/дихлорметана с получением в виде белой пены 2,2 г указанного в заглавии соединения. Часть указанного в заглавии соединения (0,30 г, 0,78 ммоля) растворяли в этилацетате, затем обрабатывали 1 М соляной кислотой в диэтиловом эфире с получением 150 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в виде белого осадка, который отфильтровывали, промывали этилацетатом и концентрировали под пониженным давлением.

Пример 11

Соединение 3-50

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(4-гидроксииминоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,31 г (0,80 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 10) и 0,22 г (3,2 ммоля) гидроксиламингидрохлорида в 5 мл пиридина выдерживали при 65°С в течение 90 мин. Далее реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и этилацетатом и фазы разделяли. Органическую фазу фильтровали, сушили под пониженным давлением и суспендировали в метаноле. В результате добавления 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире получали гидрохлоридную соль 3-(2-хлорфенил)-7-(4-гидроксииминоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в виде желтой пены, которую концентрировали под пониженным давлением.

Пример 12

Соединение 3-54

Данный пример иллюстрирует получение 8-[6-(2-хлорфенил)-8-метил-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2-иламино]-1,3-диазаспиро[4.5]декан-2,4-диона.

Смесь 0,33 г (0,86 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 10), 0,084 г (1,3 ммоля) цианида калия и 0,25 г (2,6 ммоля) карбоната аммония в 25 мл воды/этанола в соотношении 1:1 перемешивали при 65°С в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли 40 мл воды и оставляли кипеть в течение 15 мин, а затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в 100 мл охлажденной льдом воды. Смесь фильтровали и остаток суспендировали в метаноле. В результате добавления 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире получали соль в жидкой среде, которую концентрировали в токе азота, выделяя в виде желтого порошка 39 мг гидрохлоридной соли 8-[6-(2-хлорфенил)-8-метил-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2-иламино]-1,3-диазаспиро[4.5]декан-2,4-диона.

Пример 13

Соединение 3-42

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-аллилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

2,6 г (7,48 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 1,63 г (14,2 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола в 10 мл 1-метил-2-пирролидинона и перемешивали при 120°С в течение 4 ч, а затем выливали в воду, экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом магния и выпаривали под вакуумом. Остаток очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 2-4% метанола/дихлорметана, получая в виде масла вещество на 1-метил-2-пирролидиноновой основе. Это вещество в виде масла вновь растворяли в этилацетате, промывали водой, сушили над сульфатом магния и выпаривали под вакуумом с получением в виде не совсем белой пены 2,80 г (7,21 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Часть (0,274 г, 0,706 ммоля) 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в 0,119 г (1,06 ммоля) трет-бутоксида калия в 5 мл тетрагидрофурана. В этот раствор добавляли 0,061 мл (0,706 ммоля) аллилбромида, после чего выдерживали при 50°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 10-25% ацетона/гексанов. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом. Концентрат растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, затем промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили с получением 0,102 г гидрохлоридной соли 7-(транс-4-аллилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 14

Соединения 3-38 и 3-39

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метоксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метоксициклогексил)метиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,300 г (0,773 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она (полученного по изложенному в примере 13) объединяли с 0,174 г (1,55 ммоля) трет-бутоксида калия в 5 мл теграгидрофурана. В этот раствор добавляли 0,053 мл (0,851 ммоля) метилиодида, после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Дополнительно добавляли 0,053 мл (0,851 ммоля) метилиодида и 0,174 г (1,55 ммоля) трет-бутоксида калия, а затем, по прошествии 4 ч, дополнительно 0,350 г (3,12 ммоля) трет-бутоксида калия. Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 25-35% ацетона/гексанов, получая смесь двух продуктов. Выделяли каждую из отдельных фракций колонки и концентрировали под вакуумом. Каждый из отдельных концентратов растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили с получением 0,049 г 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метоксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 0,217 г 3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метоксициклогексил)метиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 15

Соединение 3-40

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(2-метоксиэтокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,300 г (0,773 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 13) объединяли с 0,174 г (1,55 ммоля) трет-бутоксида калия в 2 мл тетрагидрофурана. В этот раствор добавляли 0,15 мл (1,55 ммоля) 2-бромэтилметилового эфира, после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Дополнительно добавляли 0,174 г (1,55 ммоля) трет-бутоксида калия и температуру постепенно повышали до 80°С. Реакционный остаток вновь растворяли в 2 мл N,N-диметилформамида, добавляли дополнительно 0,348 г (3,10 ммоля) трет-бутоксида калия и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Добавляли 0,031 г (0,773 ммоля) гидрида натрия (60%-ный в масле) и реакционную смесь перемешивали в течение одного дня при 100°С и в последующий день при 140°С, а затем охлаждали до комнатной температуры.

Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом магния и выпаривали под вакуумом. Остаток очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 25-50% ацетона/гексанов. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом, концентрат растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили с получением 0,040 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(2-метоксиэтокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 16

Соединение 3-41

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метилкарбонилокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,200 г (0,516 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 13) растворяли в 2 мл дихлорметана и объединяли с 0,074 мл (1,03 ммоля) ацетилхлорида. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 1-5% метанола/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом. Концентрат растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили с получением 0,200 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метилкарбонилокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 17

Соединение 3-44

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(2,3-дигидроксипропокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,40 г (0,935 ммоля) свободного основания, 7-(транс-4-аллилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она (полученного по изложенному в примере 13) растворяли в 4,9 мл трет-бутанола и в этот раствор добавляли раствор 2,91 г в 4,9 мл продукта AD-mix β (фирма Aldrich Chemicals) с последующей выдержкой при 100°С в течение 2 дней, а затем при 80°С в течение 3 дней. Реакционную смесь выливали в насыщенный рассол, экстрагировали этилацетатом, сушили сульфатом магния и выпаривали под вакуумом. Сырой остаток очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 3-5% метанола/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом. Концентрат растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, затем промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили с получением 0,019 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(2,3-дигидроксипропокси)циклогексиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 18

Соединение 3-59

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

605 мг (1,71 ммоля) сульфона 1.3 объединяли с 1,61 г (14,1 ммоля) транс-1,4-диаминоциклогексана и 5 мл 1-метил-2-пирролидона. Реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 4 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли 50 мл этилацетата. Органический слой последовательно промывали водой и рассолом, сушили и концентрировали под вакуумом с получением в виде бледно-желтой пены 654 мг (выход 99%) продукта в форме свободного основания. Это свободное основание растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 М раствором HCl/Et₂O с получением в виде белого порошка гидрохлоридной соли 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 19

Соединение 3-57

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-метилсульфониламидоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

В раствор 88 мг (0,227 ммоля) 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 18) в 8 мл дихлорметана вводили 0,40 мл (0,29 ммоля) триэтиламина и 60 мг (0,34 ммоля) метансульфонового ангидрида. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией с использованием в качестве элюента 5% метанола/дихлорметана, получая в виде белого порошка 86 мг (выход 81%) продукта в форме свободного основания. Это свободное основание растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 М раствором HCl/Et₂O с получением в виде белого порошка гидрохлоридной соли 7-(транс-4-метилсульфониламидоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 20

Соединение 3-58

Данный пример иллюстрирует получение 7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоиламидо)циклогексиламино]-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

В раствор 171 мг (0,442 ммоля) 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 18) в 15 мл дихлорметана вводили 0,11 мл (0,79 ммоля) триэтиламина и раствор 0,31 г (0,21 ммоля) диметилсульфамоилхлорида в 5 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч и концентрировали под вакуумом. В результате очистки хроматографией с использованием в качестве элюента 5% метанола/дихлорметана в виде белого порошка получали 143 мг (выход 65%) продукта в форме свободного основания. Это свободное основание растворяли в этилацетате и обрабатывали HCl/Et₂O с получением в виде белого порошка гидрохлоридной соли 7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоиламидо)циклогексиламино]-3-(2-хлорфенил)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 21

Соединение 3-9

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она.

300 мг (0,903 ммоля) сульфона 1.4 объединяли с 312 мг (2,71 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола, перемешивали при 120°С и за ходом процесса следили с помощью ТСХ (5% метанола/дихлорметан). Когда реакция завершалась, смесь концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией с использованием 5-10% метанола/дихлорметана, получая 263 мг (0,716 ммоля, выход 79%) указанного в заглавии соединения, которое растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O, осаждая HCl соль 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 22

Соединение 3-23

Данный пример иллюстрирует получение 7-((R,R)-2,3-дигидрокси-1-метилпропиламино)-3-орто-толил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

455 мг (1,37 ммоля) сульфона 1.4 и 180 мг (1,71 ммоля) (R,R)-3-амино-1,2-бутандиола в 1 мл 1,2-диметоксиэтана выдерживали при 100°С в течение 2 ч в аргоновой атмосфере. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли дихлорметаном/метанолом в соотношении 9:1 и очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюентов дихлорметана/метанола в соотношении 96:4 и дихлорметана/метанола в соотношении 9:1 с получением в виде бесцветного масла 175 мг указанного в заглавии соединения, которое растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. 1,0 М соляной кислоты в диэтиловом эфире. Осадок собирали фильтрованием под вакуумом, промывали этилацетатом и сушили под вакуумом с получением в виде белого твердого вещества 190 мг 7-((R,R)-2,3-дигидрокси-1-метилпропиламино)-3-орто-толил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 23

Соединение 3-33

Данный пример иллюстрирует получение 7-(2,3-дигидрокси-1,1-диметилпропиламино)-3-орто-толил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

400 мг (1,2 ммоля) сульфона 1.4 объединяли с 305 мг (2,1 ммоля) 3-амино-3-метил-1,2-бутандиола и 1 мл 1-метил-2-пирролидинона. Реакционную смесь выдерживали при 100°С в течение 4 ч, а по прошествии этого времени ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 99:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде масла указанного в заглавии соединения, которое вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 71 мг гидрохлоридной соли 7-(2,3-дигидрокси-1,1-диметилпропиламино)-3-орто-толил-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 24

Соединение 2-9

Данный пример иллюстрирует получение 7-(1-бензилпиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

1 г (3 ммоля) сульфона 1.4 объединяли с 687 мг (3,6 ммоля) 4-амино-1-бензилпиперидина и 1 мл 2-метоксиэтилового эфира. Смесь выдерживали при 120°С в течение 4 ч, а по прошествии этого времени ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 97:3. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде масла продукта, который вновь растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 198 мг гидрохлоридной соли 7-(1-бензилпиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 25

Соединение 2-8

Данный пример иллюстрирует получение 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

В трехгорлую колбу в азотной атмосфере загружали 3,0 г 10%-ного палладия на угле и с помощью шприца в азотной атмосфере вводили 3,0 г (6,78 ммоля) 7-(1-бензилпиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 24) в 60 мл метанола. Далее одной порцией добавляли 2,1 г (34 ммоля) формиата аммония. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин, до завершения реакции. Катализатор отфильтровывали через броунмиллерит и промывали метанолом. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 1,937 г (выход 81%) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 26

Соединение 2-14

Данный пример иллюстрирует получение (R)-7-[1-(2,3-дигидроксипропил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,2 г (0,586 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 25), 0,264 г (0,92 ммоля) пиперидин-L-изопропилиденглицерин-γ-тозилата и 0,12 г (1,1 ммоля) карбоната калия в 5 мл N,N-диметилформамида выдерживали при 100°С в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляли 75 мл воды, экстрагировали толуолом/этилацетатом в соотношении 1:1 и слои разделяли. Органический слой промывали водой и рассолом, сушили, фильтровали, концентрировали под пониженным давлением и очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента этилацетата/метанола/изопропиламина в соотношении 95:5:0,2. Далее фракции колонки, содержавшие продукт (0,157 г, 0,34 ммоля), растворяли в 10 мл изопропанола, 1 мл воды и 0,2 мл концентрированной соляной кислоты и кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, до завершения гидролиза. Смесь концентрировали под пониженным давлением, остаток растворяли в метаноле и раствор вновь концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола/изопропиламина в соотношении 18:2:0,5, получая 90 мг продукта, который растворяли в 1,5 мл этилацетата и 1,5 мл метанола. В результате добавления 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире получали 113 мг (выход 72,5%) гидрохлоридной соли (R)-7-[1-(2,3-дигидроксипропил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 27

Соединение 2-13

Данный пример иллюстрирует получение 7-[1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,1 г (0,284 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 25), 0,024 мл (0,34 ммоля) 2-бромэтанола и 0,047 мл (0,34 ммоля) триэтиламина в 10 мл толуола и 1,5 мл ДМПМ выдерживали при 100°С в течение 17 ч. Под пониженным давлением выпаривали растворитель и остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента этилацетата/метанола/изопропиламина в соотношении 40:10:2, получая 70 мг (выход 52%) 7-[1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 28

Соединение 2-15

Данный пример иллюстрирует получение 7-[1-(2-цианоэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,184 г (0,52 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 25), 1,5 мл акрилонитрила, 0,5 мл триэтиламина, 0,5 мл 1-метил-2-пирролидинона и 5 мл тетрагидрофурана выдерживали при 75°С в течение 1,5 ч до завершения реакции. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением и очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 10% метанола в этилацетате, получая 0,157 г (выход 75%) продукта. К 75 мг продукта, растворенного в этилацетате, добавляли 1 М соляной кислоты, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и остаток отфильтровывали в азотной атмосфере с получением гидрохлоридной соли 7-[1-(2-цианоэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 29

Соединение 2-16

Данный пример иллюстрирует получение 7-[1-(2-цианоэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

52 мг (1,28 ммоля) 7-[(1-этоксикарбонилпиперидин-4-ил)амино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в 5 мл дихлорметана с 0,88 мл (6,18 ммоля) иодтриметилсилана и кипятили с обратным холодильником в течение ночи, а затем реакцию гасили 1 мл метанола и смесь выпаривали под вакуумом. Сухой остаток повторно растворяли в метаноле, к раствору добавляли 1,28 мл 0,5 М метоксида натрия/метанола, после чего смесь вновь выпаривали под вакуумом и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 10-40% метанола/дихлорметана с 1% гидроксида аммония. Фракции колонки, содержавшие 7-пиперидин-4-иламино-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он, объединяли и концентрировали под вакуумом.

0,035 г (0,099 моля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 1 мл N,N-диметилформамида объединяли с 0,014 мл (0,199 ммоля) бромацетонитрила и перемешивали при 40°С в течение ночи, затем очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 3-10% (гидроксида аммония/метанола в соотношении 1:9)/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом. Продукт растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, затем промывали диэтиловым эфиром, отфильтровывали и сушили с получением 0,007 г гидрохлоридной соли 7-[1-(2-цианометил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 30

Соединение 2-20

Данный пример иллюстрирует получение 7-[1-(2-метоксикарбонилэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,19 г (0,54 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(lH)-она (полученного по изложенному в примере 25), 1,0 мл метилакрилата, 0,5 мл триэтиламина, 0,5 мл 1-метил-2-пирролидинона и 5 мл тетрагидрофурана выдерживали при 75°С в течение 17 ч. Реакционную смесь выпаривали под пониженным давлением и остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 5% метанола в дихлорметане, получая 132 мг (выход 56%) продукта. К раствору продукта в этилацетате добавляли 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь выпаривали под пониженным давлением с получением гидрохлоридной соли 7-[1-(2-метоксикарбонилэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 31

Соединение 2-18

Данный пример иллюстрирует получение 7-[(1-карбамоилметилпиперидин-4-ил)карбамоилметиламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,030 г (0,080 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 25) растворяли в 1 мл N,N-диметилформамида с 0,022 г (0,161 ммоля) бромацетамида и перемешивали при 50°С в течение ночи. Перед возвратом реакционной смеси к 50°С для выдержки в течение второй ночи добавляли другую порцию (0,022 г) бромацетамида. Реакционную смесь очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 6-20% (гидроксида аммония/метанола в соотношении 1:9)/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом. Конечный продукт растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), вновь выпаривали досуха, затем промывали диэтиловым эфиром, отфильтровывали и сушили с получением 0,001 г гидрохлоридной соли 7-[(1-карбамоилметилпиперидин-4-ил)карбамоилметиламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 32

Соединение 2-12

Данный пример иллюстрирует получение 7-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,200 г (0,567 ммоля) 7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 25) растворяли в 5 мл пиридина и раствор охлаждали до 0°С с последующим добавлением 0,046 мл (0,596 ммоля) метансульфонилхлорида. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем резко охлаждали смесью воды со льдом и экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты промывали водой и насыщенным водным бикарбонатом натрия, после чего повторно промывали водой и выпаривали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента метанола/дихлорметана в соотношении 1:15. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом и конечный продукт вновь растворяли в минимальном объеме этилацетата и метанола. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 0,124 г гидрохлоридной соли 7-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 33

Соединение 2-17

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(1-цианометилпиперидин-4-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,030 г (0,080 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(пиперидин-4-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо [4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного аналогично примеру 29) растворяли в 1 мл N,N-диметилформамида с 0,011 мл (0,161 ммоля) бромацетонитрила и перемешивали при 50°С в течение ночи. Перед возвратом реакционной смеси к 50°С для выдержки в течение второй ночи добавляли другую порцию (0,011 мл) бромацетонитрила. Реакционную смесь очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 1-20% (гидроксида аммония/метанола в соотношении 1:9)/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом, продукт растворяли в метаноле, обрабатывали 1,0 М соляной кислотой в Et₂O (1,0 экв.), повторно выпаривали досуха, затем промывали диэтиловым эфиром, отфильтровывали и сушили с получением 0,002 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(1-цианометилпиперидин-4-иламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 34

4-Амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксальдегид

34.1. Получение 4-амино-5-карбэтоксипиримидин-2-тиола

272 г (4,0 моля) этоксида натрия (фирмы Lancaster) перемешивали в 1 л этанола и обрабатывали 304 г (4,0 моля) тиомочевины (фирмы Avocado). Добавляли 676 г (4,0 моля) этилэтоксиметиленцианоацетата (фирмы Avocado) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 ч. После охлаждения до комнатной температуры и выдержки в течение ночи реакционную смесь последовательно обрабатывали 2 л воды и 400 мл уксусной кислоты. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 30 минут, охлаждали до комнатной температуры и суспензию фильтровали. Твердое вещество промывали тремя 500-миллилитровыми порциями воды, двумя 500-миллилитровыми порциями ацетона и 500 мл диэтилового эфира. Продукт сушили с получением в виде кремового твердого вещества 473,3 г (выход 60%) 4-амино-5-карбэтоксипиримидин-2-тиола с температурой плавления >250°С.

34.2. Получение 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксилата

Перемешанную суспензию 473 г (2,377 моля) 4-амино-5-карбэтоксипиримидин-2-тиола в 3,5 л этанола обрабатывали 180,4 г (1,307 моля) карбоната калия и 447,1 г (2,615 моля) бензилбромида. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч, затем ей давали остыть до комнатной температуры и выдерживали в течение ночи. Суспензию фильтровали и твердое вещество промывали двумя 500-миллилитровыми порциями этанола, 2 л воды и двумя 500-миллилитровыми порциями воды. Продукт сушили под вакуумом над пентоксидом фосфора при 50°С с получением в виде кремового твердого вещества 416 г (выход 61%) этил-4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксилата с температурой плавления 117-118°С.

34.3. Получение 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-метанола

Раствор 462,4 г (1,6 моля) этил-4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксилата в 2,3 л высушенного над молекулярным ситом тетрагидрофурана в азотной атмосфере с охлаждением льдом медленно с перемешиванием вводили в 1,6 л (1,6 моля) 1 М раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране. Первый раствор добавляли с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру от 18 до 20°С. По завершении добавления смесь нагревали до 60°С и осторожно обрабатывали в течение 1,5 ч 60,8 мл воды. В течение 30 минут добавляли 60,8 мл 15%-ного водного гидроксида натрия, а затем в течение 30 минут вводили 182,5 мл воды. Суспензию перемешивали при 60°С в течение ночи, затем во все еще горячем состоянии фильтровали через вспомогательное фильтровальное вещество Hyflo и твердое вещество промывали двумя 1-литровыми порциями тетрагидрофурана. В результате выпаривания фильтрата досуха в виде не совсем белого твердого вещества получали 392,5 г (выход 99%) 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-метанола, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

34.4. Получение 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксальдегида

Суспензию 392,5 г (1,59 моля) 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-метанола в 7,75 л дихлорметана в азотной атмосфере обрабатывали 1,382 кг (15,9 моля) активированного диоксида марганца (фирма Acros). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем фильтровали через вспомогательное фильтровальное вещество Hyflo. Твердое вещество промывали тремя 1-литровыми порциями дихлорметана и объединенные фильтраты выпаривали с получением в виде бледно-желтого твердого вещества 340,5 г (выход 88%) 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксальдегида с температурой плавления 136-139°С.

Пример 35

3-(2-Хлорфенил)-7-бензилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он

35.1. Получение 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-бензилтиопиримидина

Смесь 5 г (20,4 ммоля) 4-амино-2-бензилтиопиримидин-5-карбоксальдегида, 2,25 мл (21,4 ммоля) 2-хлоранилина и 0,1 г (0,5 ммоля) моногидрата 4-толуолсульфоновой кислоты в 60 мл толуола кипятили с азеотропным удалением воды в течение 3 ч. Смесь охлаждали до 0°С и осадок собирали фильтрацией под вакуумом, промывали гексанами и сушили на воздухе. Затем это твердое вещество растворяли в 100 мл тетрагидрофурана и полученный раствор охлаждали до 0°С. Небольшими порциями в течение 45 минут добавляли 0,735 г (18,8 ммоля) алюмогидрида лития. После того как добавление завершали, смесь перемешивали в течение дальнейших 15 мин и осторожно последовательно обрабатывали 0,8 мл воды, 0,8 мл 15%-ного водного гидроксида натрия и затем 2,4 мл воды. Смесь перемешивали в течение 30 минут, фильтровали через броунмиллерит и фильтрат концентрировали под вакуумом. Твердое вещество перемешивали с диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили на воздухе с получением в виде белого твердого вещества 6,1 г 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-бензилтиопиримидина.

35.2. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-бензилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В перемешанный охлажденный до -10°С раствор 4,3 г (12,1 ммоля) 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-бензилтиопиримидина в 100 мл тетрагидрофурана добавляли 3,1 мл (22,2 ммоля) триэтиламина. Затем этот раствор обрабатывали добавлением по каплям раствора 6,15 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле; 11,8 ммоля). После перемешивания в течение 30 мин добавляли дополнительно 1,0 мл триэтиламина (7,1 ммоля), а затем 2,0 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле; 3,8 ммоля). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, обрабатывали 0,5 мл воды и перемешивали в течение 30 мин. Далее реакционную смесь фильтровали, маточный раствор концентрировали и перемешивали с дихлорметаном. Затем продукт собирали фильтрацией под вакуумом и сушили под вакуумом с получением в виде белого твердого вещества 3,83 г 3-(2-хлорфенил)-7-бензилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (сульфид 8.1).

Пример 36

3-(2-Хлорфенил)-7-бензилсульфонил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-он

Суспензию 1 г (2,61 ммоля) сульфида 8.1 в 10 мл дихлорметана охлаждали на льду и обрабатывали 1,29 г (5,23 ммоля) 70%-ной 3-хлорпербензойной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем обрабатывали 25 мл 10%-ного водного тиосульфата натрия и оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Образовавшуюся реакционную смесь разбавляли 100 мл дихлорметана и фазы разделяли. Органическую фазу промывали 10%-ным водным карбонатом калия, затем рассолом, после чего сушили над сульфатом магния и фильтровали. Концентрацией фильтрата под пониженным давлением в виде белого твердого вещества получали 0,73 г 3-(2-хлорфенил)-7-бензилсульфонил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

С использованием в примере 35 орто-толуидина вместо 2-хлоранилина получали родственное соединение, 7-бензилсульфонил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он (сульфон 9.2).

Пример 37

Соединение 3-26

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

37.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

500 мг (1,31 ммоля) сульфида 8.1 растворяли в 2 мл тетрагидрофурана и объединяли с 0,23 мл (1,96 ммоля) 1-(2-гидроксиэтил)пирролидина, 514 мг (1,96 ммоля) трифенилфосфина и 0,31 мл (1,96 ммоля) ДЭАД. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем добавляли дополнительные количества 1-(2-гидроксиэтил)пирролидина, трифенилфосфина и ДЭАД (дополнительно по 1,96 ммоля каждого). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и подвергали полуочистке хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 2,5-10% метанола/дихлорметана, получая >1 г смеси продукта, 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и остатков исходных материалов.

37.2. Получение 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Окисление 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она осуществляли с использованием 0,94 г (3,92 ммоля) 3-хлорпероксибензойной кислоты в дихлорметане с перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию гасили 1 мл насыщенного водного сульфита натрия и экстрагировали дихлорметаном. Объединенные экстракты сушили и концентрировали под вакуумом с получением 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который использовали без очистки.

37.3. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Сырой 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 6 мл диглима (диметиловый эфир диэтиленгликоля) со 165 мг (1,44 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и перемешивали при 120°С в течение 3 ч. Смесь очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 3-30% метанола/дихлорметана, получая 45 мг (0,096 ммоля) указанного в заглавии соединения. Очищенный продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O с осаждением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 38

Соединение 3-27

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

38.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она

500 мг (1,31 ммоля) сульфида 8.1 растворяли в 2 мл тетрагидрофурана с 0,26 мл (1,96 ммоля) N,N-диэтилэтаноламина, 514 мг (1,96 ммоля) трифенилфосфина и 0,31 мл (1,96 ммоля) ДЭАД и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем добавляли дополнительные количества диэтилэтаноламина, трифенилфосфина и ДЭАД (дополнительно по 1,96 ммоля каждого). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и подвергали полуочистке хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 1-3,5% метанола/дихлорметана, получая >1 г смеси 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и остатков исходных материалов.

38.2. Получение 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Окисление 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она осуществляли с использованием 0,339 г (1,96 ммоля) 3-хлорпероксибензойной кислоты в дихлорметане с перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию гасили 5 мл 10%-ного водного сульфита натрия, смесь выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали дихлорметаном. Объединенные экстракты сушили сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который использовали без очистки.

38.3. Получение 3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Сырой 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 2 мл диглима со 150 мг (1,31 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и перемешивали при 120°С в течение 4 ч. Смесь очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 5-35% метанола/дихлорметана, получая 52 мг (0,110 ммоля) указанного в заглавии соединения. Очищенный продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O с осаждением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-диэтиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 39

Соединение 3-30

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-1-(2-диэтиламиноэтил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

39.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Сульфид 8.1 в 5 мл тетрагидрофурана объединяли с 0,39 мл (3,92 ммоля) N,N-диметилэтаноламина, 1,04 г (3,92 ммоля) трифенилфосфина и 0,62 мл (3,92 ммоля) ДЭАД и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь подвергали полуочистке хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 1-3% метанола/дихлорметана, получая >1 г смеси 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и оставшегося трифенилфосфиноксида.

39.2. Получение 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Окисление сульфида осуществляли с использованием 1,35 г (7,84 ммоля) 3-хлорпероксибензойной кислоты в дихлорметане с перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию гасили 1 мл насыщенного водного сульфита натрия и смесь экстрагировали дихлорметаном. Органические экстракты промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия, сушили сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который использовали без очистки.

39.3. Получение 3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Сырой 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 2 мл диглима с 331 мг (2,87 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и перемешивали при 120°С в течение 4 ч. Смесь очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 10-30% метанола/дихлорметана, получая 180 мг (0,405 ммоля) указанного в заглавии соединения. Очищенный продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O с осаждением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-1-(2-диметиламиноэтил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 40

Соединение 3-22

Данный пример иллюстрирует получение (S)-3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

40.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В суспензию 850 мг (2,22 ммоля) сульфида 8.1 в 10 мл тетрагидрофурана добавляли 411 мг (2,22 ммоля) трет-бутил-4-гидрокси-1-пиперидинкарбоксилата и 878 мг (3,3 ммоля) дифенил-2-пиридилфосфина. По прошествии 5 мин добавляли 768 мг (3,33 ммоля) ди-трет-бутилазодикарбоксилата и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре с вечера пятницы до утра понедельника. Реакционную смесь вводили непосредственно в колонку для экспресс-хроматографии на диоксиде кремния, используя в качестве элюентов гексан/этилацетат в соотношениях с 3:1 по 2:1 и гексан/этилацетат в соотношении 1:1, с получением 930 мг 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

40.2. Получение 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В раствор 920 мг (1,62 ммоля) 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 16 мл дихлорметана, охлажденный до 0°С, добавляли 403 мг (1,64 ммоля) 3-хлорпербензойной кислоты. После одного часа выдержки при комнатной температуре добавляли 5 мл 10%-ного тиосульфата натрия. Спустя 10 мин дихлорметановый слой отделяли и промывали 10%-ным карбонатом калия и рассолом, сушили над сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением в виде белой пены 650 мг 3-(2-хлорфенил)-7-бензилсульфинил-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

40.3. Получение (S)-3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В суспензию 650 мг (1,136 ммоля) 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 0,5 мл 1,2-диметоксиэтана вводили 250 мг (3,33 ммоля) (S)-(+)-2-амино-1-пропанола. Реакционную смесь выдерживали при 100°С в аргоновой атмосфере в течение 2 ч. Реакционную смесь вводили непосредственно в колонку для экспресс-хроматографии на диоксиде кремния, используя в качестве элюента дихлорметан/метанол в соотношениях с 92:8 по 90:10, с получением 300 мг (S)-3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который вновь растворяли в 5 мл дихлорметана и 5 мл трифторуксусной кислоты. По прошествии 5 ч растворители удаляли под вакуумом и добавляли 5 мл этилацетата и 5 мл 10%-ного бикарбоната натрия. Органический слой отделяли, промывали рассолом, сушили над сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением в виде белой пены 130 мг указанного в заглавии соединения, которое растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. соляной кислоты в виде 1,0 М раствора в диэтиловом эфире. Осадок собирали, промывали диэтиловым эфиром и сушили под вакуумом с получением 115 мл гидрохлоридной соли (S)-3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 41

Соединение 3-21

Данный пример иллюстрирует получение (R)-3-(2-хлорфенил)-7-[(2-гидрокси-1-метилэтил)амино]-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

41.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Смесь 600 мг (2,4 ммоля) сульфида 8.1, 619 мг (2,4 ммоля) дифенил-2-пиридилфосфина и 232 мг (0,6 ммоля) 1,3-диэтокси-2-пропанола в азотной атмосфере растворяли в тетрагидрофуране. В этот раствор одной порцией добавляли 542 мг (2,4 ммоля) ди-трет-бутилазодикарбоксилата и образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного дня. Добавляли 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире и после перемешивания смеси в течение 1 ч выпаривали избыток растворителя. Остаток растворяли в диэтиловом эфире и промывали водной соляной кислотой. Органический слой сушили над сульфатом натрия, концентрировали и остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 30%-ного этилацетата в гексане. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 566 мг 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

41.2. Получение 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Суспензию 566 мг (1,1 ммоля) 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 5 мл дихлорметана охлаждали на ледяной бане и добавляли 3-хлорпербензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, концентрировали под вакуумом и остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 98:2. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 425 мг 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

41.3. Получение (R)-3-(2-хлорфенил)-7-[(2-гидрокси-1-метилэтил)амино]-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

425 мг (0,8 ммоля) 7-бензилсульфинил-3-(2-хлорфенил)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 1 мл (R)-2-амино-1-пропанола выдерживали при 140°С в течение 18 ч, по прошествии которых смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 98:2. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде масла вещества, которое повторно растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили, выделяя 156 мг гидрохлоридной соли (R)-3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-метилэтиламино)-1-(2-этокси-1-этоксиметилэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 42

Соединение 3-60

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

42.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

К 0,563 г (1,47 ммоля) сульфида 8.1 в 3 мл сухого N,N-диметилформамида при 0°С добавляли 0,1 г (2,5 ммоля) 60%-ного гидрида натрия. После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 30 мин добавляли 1 мл 2,2,2-трифторметансульфоната и смесь перемешивали в течение ночи. В реакционную смесь добавляли этилацетата и раствор промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Полученный остаток в виде масла растирали в гексанах с выделением 0,65 г сырого 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который использовали непосредственно на следующей стадии без очистки.

42.2. Получение 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

К 0,67 мг 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 7 мл тетрагидрофурана при 0°С добавляли раствор 2,27 г продукта Oxone^® в 7 мл воды. Далее смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Добавляли дополнительно 0,8 г продукта Oxone® в 2 мл воды и смесь перемешивали в течение еще 1 ч. Смесь разбавляли этилацетатом, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали с получением в виде белого твердого вещества 0,65 г сырого 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, который использовали непосредственно на следующей стадии без очистки.

42.3. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

300 мг (0,604 ммоля) 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, 208 мг (3 экв.) транс-4-аминоциклогексанола и 0,3 мл 1-метил-2-пирролидинона выдерживали с перемешиванием при 110°С в течение 20 мин, по прошествии которых смесь охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали с помощью препаративной тонкослойной хроматографии, используя в качестве элюента этилацетат, с получением в виде не совсем белого порошка 155 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2,2,2-трифторэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 43

Соединение 3-32

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

43.1. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(этоксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

2,0 г (5,22 ммоля) сульфида 8.1 в 10 мл N,N-диметилформамида объединяли с 230 мг (5,75 ммоля) гидрида натрия и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, затем добавляли 1,16 мл (10,45 ммоля) этилбромацетата. По прошествии 3 ч реакцию гасили водой и экстрагировали этилацетатом.

Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили, фильтровали, концентрировали под вакуумом и остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 30% ацетона/гексана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 1,438 г 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(этоксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

43.2. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(гидроксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Смесь 1,435 г (3,36 ммоля) 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(этоксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 481 мг (11,5 ммоля) моногидрата гидроксида лития в 10 мл метанола и 30 мл воды кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом/водой. Значение рН водного слоя доводили до 4 и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 1,2 г 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(гидроксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

43.3. Получение 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Через раствор 500 мг (1,13 ммоля) 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(гидроксикарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 885 мг (1,70 ммоля) гексафторфосфата бензотриазол-1-илокситрис(пирролидино)фосфония в 15 мл N,N-диметилформамида в течение двух минут барботировали газообразный диметиламин, затем смесь перемешивали в герметично закрытой пробирке в течение 2 ч. Реакцию в смеси гасили водой и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили, фильтровали, концентрировали под вакуумом и остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 36:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 490 мг 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

43.4. Получение 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В раствор 490 мг (1,13 ммоля) 7-бензилтио-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в хлороформе вводили 780 мг (4,52 ммоля) 3-хлорпербензойной кислоты. Смесь перемешивали в течение 2 ч, затем промывали 10%-ным раствором сульфита натрия в воде и водным раствором бикарбоната натрия, сушили, фильтровали и концентрировали с получением 550 мг 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

43.5. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

550 мг (1,1 ммоля) 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она объединяли с 253 мг (2,2 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола. Смесь выдерживали при 100-105°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 9:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до твердого остатка, который растирали в порошок с метанолом, отфильтровывали, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 90 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(диметиламинокарбонилметил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 44

Соединение 4-1

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-гидроксиметил-1-метилэтиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,500 г (1,21 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 0,253 г (2,41 ммоля) 2-амино-2-метил-1,3-пропандиола. Смесь выдерживали при 120-130°С в течение 2 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток растирали в порошок в дихлорметане/метаноле. Суспензию фильтровали с получением свободного амина указанного в заглавии соединения, который затем суспендировали в метаноле. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую растворяли в метаноле. Раствор фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением гигроскопического твердого вещества, которое растирали в порошок в диэтиловом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 0,195 г 3-(2-хлорфенил)-7-(2-гидрокси-1-гидроксиметил-1-метилэтиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 45

Соединение 4-6

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-((R,R)-2-гидрокси-1-гидроксиметилпропиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

776 мг (1,9 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 238 мг (2,3 ммоля) (R,R)-3-амино-1,2-бутандиола и 5 мл 2-метоксиэтилового эфира. Смесь выдерживали при 120°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 97:3. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде масла вещества, которое повторно растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 159 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-((R,R)-2-гидрокси-1-гидроксиметилпропиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она.

Пример 46

Соединение 4-8

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(4-гидроксициклогексил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,500 г (1,21 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с рацемической смесью 0,70 г 4-аминоциклогексанолов [6,0 ммоля, получены лиофилизацией из 50%-ного водного раствора (ICN)] в 2 мл N-метилпирролидинона. Смесь выдерживали при 120°С в течение 1,5 ч, по прошествии этого времени ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 1-5% метанола/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде желтых гранул указанного в заглавии соединения, которое повторно растворяли в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 0,258 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(4-гидроксициклогексил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 47

Соединение 2-10

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(тетрагидропиран-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Получение 4-аминотетрагидропирана

4,19 г (59,9 ммоля) гидроксиламингидрохлорида при комнатной температуре диспергировали в 13 мл этанола и образовавшуюся суспензию промывали дополнительными 15 мл этанола в растворе 5 г (49,9 ммоля) тетрагидрофуран-4-она в 30 мл пиридина. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выпаривали под вакуумом до образования густого сиропа на пиридиновой основе, который выливали в насыщенный водный сульфат меди и экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили сульфатом натрия, выпаривали под вакуумом и элюировали этилацетатом. Фильтрат выпаривали под вакуумом с получением в виде зеленоватого твердого вещества 5,05 г (0,44 ммоля) тетрагидропиран-4-оноксима.

Часть тетрагидропиран-4-оноксима (2,8 г, 24,3 ммоля) растворяли в 50 мл тетрагидрофурана и охлаждали до 0°С с последующим медленным добавлением порциями 4,6 г (122 ммоля) алюмогидрида лития. Когда добавление завершали, реакционную смесь с ледяной бани удаляли, перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи, а затем реакцию гасили осторожным добавлением воды и 10%-ного водного гидроксида натрия. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего соли алюминия отфильтровывали и промывали дихлорметаном. Фильтрат выпаривали под вакуумом с получением в виде темно-коричневой жидкости 1,74 г (0,17 ммоля) 4-аминотетрагидропирана.

Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(тетрагидропиран-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

0,205 г (0,494 ммоля) сульфона 9.1 в 5 мл 1-метил-2-пирролидинона объединяли с 0,100 г (0,988 ммоля) 4-аминотетрагидропирана. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 24 ч и очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 3-7% метанола/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением в виде коричневой смолы указанного в заглавии соединения, которое повторно растворяли в метаноле. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали 0,026 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(тетрагидропиран-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 48

Соединение 4-14

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклопентил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

500 мг (1,2 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 550 мг (4,8 ммоля) 1-амино-1-циклопентилметанола и 1 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 120°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 3 мл метанола и суспензию перемешивали в течение 10 мин, фильтровали и остаток промывали метанолом, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с выделением 260 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклопентил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 49

Соединение 4-16

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклогексил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

500 мг (1,2 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 623 мг (4,8 ммоля) 1-амино-1-циклогексанметанола [полученного согласно изложенному в J.Med.Chem., 1966, 9(6) 911-920] и 1 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 120°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 3 мл метанола, суспензию перемешивали в течение 10 мин и фильтровали. Осадок тщательно промывали метанолом, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 328 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксиметилциклогексил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 50

Соединение 2-25

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-метилпиперидин-4-ил)метиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,512 г (1,2 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 2 мл 1-метил-4-(метиламино)пиперидина (фирма Aldrich Chemicals) в 0,3 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 100°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали рассолом. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Сырой продукт очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 2-10% метанола в дихлорметане и наконец 1% триэтиламина/10% метанола в дихлорметане. Полученные твердые частицы суспендировали в 5 мл метанола, через суспензию в течение 30 с барботировали хлорид водорода и выпаривали растворители. Далее твердые частицы перемешивали в этилацетате и отфильтровывали с получением 190 мг дихлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-метилпиперидин-4-ил)метиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 51

Соединение 4-18

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(цис-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,81 г (1,95 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 0,45 г (3,9 ммоля) цис-4-аминоциклогексанола (полученного согласно изложенному в Aust.J.Chem., 1961, 14, 610) в 2,0 мл 1-метил-2-пирролидинона. Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 24 ч, по прошествии которых реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат суспендировали в безводном метаноле, осадок собирали и сушили с получением в виде белого твердого вещества 0,400 г указанного в заглавии соединения (с t_пл 263,7-264,6°С). Это белое твердое вещество растворяли в хлороформе/метаноле в соотношении 10:1 и добавляли 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, концентрировали и сушили под вакуумом, а остаток кристаллизовали из метанола/диэтилового эфира с получением в виде белого твердого вещества 0,285 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(цис-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 52

Соединение 2-26

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-карбамоил-метилпиперидин-4-ил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

1,0 г (2,41 ммоля) сульфона 9.1 растворяли в 5 мл (29 ммолей) этил-4-амино-1-пиперидинкарбоксилата и перемешивали при 150°С. По прошествии 1 ч реакционную суспензию охлаждали до комнатной температуры, выливали в 50 мл метанола и фильтровали, собирая белое твердое вещество. Это твердое вещество промывали дополнительными 50 мл метанола и сушили под вакуумом с получением 0,569 г 3-(2-хлорфенил)-7-(1-этоксикарбонилпиперидин-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

3-(2-Хлорфенил)-7-(1-этоксикарбонилпиперидин-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 2 мл дихлорметана с 0,94 мл (6,60 ммоля) иодтриметилсилана и выдерживали при 60°С в течение 2 ч, реакцию гасили метанолом и смесь выпаривали под вакуумом. Сухой остаток вновь растворяли в минимальном количестве метанола, обрабатывали метоксидом натрия (0,5 экв., технический 0,5 М метанольный раствор) и повторно выпаривали. Сухой остаток очищали экспресс-хроматографией с использованием в качестве элюента 5-10% (гидроксида аммония/метанола в соотношении 1:9)/дихлорметана. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 0,280 г (7,80 ммоля) расщепленного пиперидинового промежуточного продукта, 3-(2-хлорфенил)-7-(пиперидин-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,050 г (0,139 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(пиперидин-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в 1 мл N,N-диметилформамида с 0,029 г (0,209 ммоля) бромацетамида и перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч, затем температуру повышали до 40°С и выдерживали в течение одного часа, после чего выдерживали в течение ночи при 80°С. Реакционную смесь очищали экспресс-хроматографией с использованием в качестве элюента 5-40% метанола/дихлорметана+1% гидроксида аммония. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом и конечный продукт повторно растворяли в минимальном объеме метанола. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 0,007 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-карбамоилметилпиперидин-4-ил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 53

Соединение 2-27

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Получение 1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламина

5 г (24,96 ммоля) трет-бутилового эфира пиперидин-4-илкарбаминовой кислоты (технически доступен на фирме ASTATECH), 7,03 г (1 экв.) 2,2,2-трифторэтилтрихлорметансульфоната и 4,1 г (1,2 экв.) карбоната калия растворяли в 80 мл ацетона и кипятили с обратным холодильником при перемешивании в течение 17 ч. Под пониженным давлением при 40°С удаляли растворитель и к остатку добавляли этилацетата и воды. Слои разделяли, а затем выделяли. Органический слой промывали водой и рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением окрашенного в темный цвет твердого вещества. В результате очистки хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 15% этилацетата в гексанах в виде не совсем белого порошка получали 4,45 г трет-бутилового эфира [1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-ил]карбаминовой кислоты с t_пл 99,2-99,8°С, (М+Н)⁺=283.

трет-Бутиловый эфир [1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-ил]карбаминовой кислоты растворяли в 80 мл диоксана и через раствор в течение 10 мин барботировали газообразный хлорид водорода. Реакционный сосуд герметично закрывали и содержимое перемешивали в течение 1,5 ч. Под пониженным давлением при 40°С удаляли растворитель. Остаток растворяли в 42 мл 0,5 М метоксида натрия в метаноле, перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали, растворяли в этилацетате, фильтровали и концентрировали с получением в виде окрашенного в темный цвет масла 1,0 г 1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламина, (М+Н)⁺=183.

Получение 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

200 мг (0,482 ммоля) сульфона 9.1 и 263 мг (3 экв.) 1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламина объединяли с 0,3 мл 1-метил-2-пирролидинона и реакционную смесь с перемешиванием выдерживали при 110°С в течение 2 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. В результате очистки с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с использованием в качестве элюента 60% этилацетата в гексанах в виде не совсем белого порошка получали 12 мг 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 54

Соединение 4-17

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(4-гидроксициклогексилметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

400 мг (0,96 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 470 мг (3,6 ммоля) 4-аминометилциклогексанола и 0,4 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 120°С в течение 3 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 3 мл метанола, суспензию перемешивали в течение 10 мин, фильтровали осадок промывали метанолом, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 198 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(4-гидроксициклогексилметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 55

Соединение 2-21

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Получение 4-аминометил-N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидина

Смесь 4 г (16,1 ммоля) (4-бензилоксикарбониламинометил)пиперидина, 5,58 г (20 ммолей) 2,2,2-трифторэтилтрихлорметансульфоната и 2,67 г (19 ммолей) карбоната калия в 40 мл ацетона кипятили с обратным холодильником в течение 17 ч. Смесь выпаривали и обрабатывали этилацетатом и рассолом. Органическую фазу отделяли, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Твердые частицы сырого продукта очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента 10-20% этилацетата в гексанах с получением 2,25 г 4-бензилоксиаминометил-1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидина, t_пл 93,8-95,1°С. 4-Бензилоксиаминометил-1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин растворяли в 50 мл этанола и гидрировали в течение 10 ч над 0,5 г 10%-ного палладия на угле. Смесь фильтровали через слой броунмиллерита и промывали метанолом. Фильтрат выпаривали с получением в виде полутвердого вещества 1,17 г 4-аминометил-1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидина.

Получение 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,389 г (1 ммоль) сульфона 9.1 объединяли с 0,50 г (2,5 ммоля) 4-аминометил-1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидина в 0,4 мл 1-метил-2-пирролидинона и выдерживали при 100°С в течение 4 ч. Далее смесь охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали метанолом, этилацетатом и диэтиловым эфиром. Образовавшиеся твердые частицы отфильтровывали и промывали этилацетатом. 0,22 г полученных твердых частиц растворяли в 5 мл метанола и в течение одной минуты через раствор барботировали хлорид водорода. Удаляли растворители и остаток растирали в порошок с 2 мл метанола и 40 мл диэтилового эфира с получением 210 мг дигидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[1-(2,2,2-трифторэтил)пиперидин-4-иламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 56

Соединение 2-22

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-цианометилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

2,24 г (5,4 ммоля) сульфона 9.1 объединяли с 5,6 г (16,2 ммоля) N-трет-бутоксикарбонил-4-аминометилпиперидина и 9 мл 1-метил-2-пирролидина. Смесь выдерживали при 100-110°С в течение 2 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры и добавляли этилацетат. Образовавшееся белое твердое вещество отфильтровывали и промывали этилацетатом с получением 2,3 г 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-трет-бутоксикарбонилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (MH⁺=473). Через 2,1 г защищенного амина, который суспендировали в 22 мл 1,4-диоксана, барботировали газообразный хлорид водорода и суспензию перемешивали в течение 1 ч, концентрировали под вакуумом и сушили с получением в виде белого твердого вещества промежуточного 3-(2-хлорфенил)-7-[(пиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,23 г (0,52 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[(пиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в 8 мл N,N-диметилформамида. Добавляли 0,175 г (1,6 ммоля) безводного карбоната натрия и 0,036 мл (0,57 ммоля) хлорацетонитрила. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч и разделяли между этилацетатом и водой. Слои выделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой, сушили и концентрировали под вакуумом, а остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 10% метанола/дихлорметана. Фракции, содержавшие продукт, концентрировали под вакуумом и растворяли в 40 мл 1,4-диоксана. Через раствор барботировали газообразный хлорид водорода и смесь концентрировали под вакуумом. Образовавшийся остаток растирали в порошок в диэтиловом эфире и сушили с получением 0,107 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-цианометилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 57

Соединение 2-19

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-диметиламинокарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,3 г (0,67 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[(пиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 56) растворяли в 7 мл N,N-диметилформамида. Добавляли 0,26 г (2,4 ммоля) безводного карбоната натрия и 0,098 г (0,81 ммоля) 2-хлор-N,N-диметилацетамида. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Слои выделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом и 10% изопропанола/хлороформом. Органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия, а затем сушили над безводным сульфатом натрия. Полученное после выпаривания под вакуумом белое твердое вещество растворяли в 50% метанола/1,2-дихлорэтане. Через раствор барботировали газообразный хлорид водорода и раствор выпаривали под вакуумом. Образовавшийся остаток растирали в порошок в диэтиловом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 0,182 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-диметиламинокарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 58

Соединение 2-23

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-аминокарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,3 г (0,67 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[(пиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 56) растворяли в 7 мл N,N-диметилформамида. Добавляли 0,26 г (2,4 ммоля) безводного карбоната натрия и 0,111 г (0,81 ммоля) 2-бромацетамида. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Слои выделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом и 10% изопропанола/хлороформом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия, а затем сушили над безводным сульфатом натрия. Полученное после выпаривания под вакуумом белое твердое вещество суспендировали в 1,4-диоксане. Через суспензию барботировали газообразный хлорид водорода и раствор выпаривали под вакуумом. Образовавшийся остаток растирали в порошок в диэтиловом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 0,185 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-аминокарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 59

Соединение 2-24

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксикарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

0,3 г (0,67 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[(пиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(lH)-она (полученного по изложенному в примере 56) растворяли в 7 мл N,N-диметилформамида. Добавляли 0,26 г (2,4 ммоля) безводного карбоната натрия и 0,12 мл (0,81 ммоля) трет-бутил-2-бромацетата. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Слои выделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом и 10% изопропанола/хлороформом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия, а затем сушили над безводным сульфатом натрия. Полученные после выпаривания под вакуумом объединенные белые твердые частицы суспендировали в 1,4-диоксане. Через суспензию барботировали газообразный хлорид водорода, раствор перемешивали в течение 10 ч при комнатной температуре и выпаривали под вакуумом. Образовавшийся остаток растирали в порошок в диэтиловом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 0,195 г гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[(1-гидроксикарбонилметилпиперидин-4-илметил)амино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 60

Соединение 3-29

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-метилтиоэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

500 мг (1,21 ммоля) сульфона 9.1 растворяли в 2 мл тетрагидрофурана с 0,16 мл (1,81 ммоля) 1-(2-метилтио)этанола, 474 мг (1,81 ммоля) трифенилфосфина и 0,28 мл (1,81 ммоля) ДЭАД и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Выпариванием под вакуумом получали сырой продукт, 3-(2-хлорфенил)-7-бензилсульфонил-1-(2-метилтиоэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он, который использовали без дополнительной очистки.

Сырой 3-(2-хлорфенил)-7-бензилсульфонил-1-(2-метилтиоэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 2 мл диглима со 139 мг (1,21 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и перемешивали при 120°С в течение 4 ч. Смесь очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 2,5-4,5% метанола/дихлорметана, получая 226 мг (0,511 ммоля) указанного в заглавии соединения. Очищенный продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O с осаждением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-метилтиоэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 61

Соединение 3-31

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(3-диметиламино-2,2-диметилпропил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

500 мг (1,21 ммоля) сульфона 9.1 растворяли в 2 мл тетрагидрофурана с 0,28 мл (1,81 ммоля) 3-диметиламино-2,2-диметил-1-пропанола, 474 мг (1,81 ммоля) трифенилфосфина и 0,28 мл (1,81 ммоля) ДЭАД и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь подвергали полуочистке хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 3-15% метанола/дихлорметана, получая >1 г смеси 3-(2-хлорфенил)-7-бензилсульфонил-1-(3-диметиламино-2,2-диметилпропил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и остатка трифенилфосфиноксида.

3-(2-Хлорфенил)-7-бензилсульфонил-1-(3-диметиламино-2,2-диметилпропил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в 3 мл диглима со 139 мг (1,21 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и перемешивали при 120°С в течение 4 ч. Смесь очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 4-25% метанола/дихлорметана, получая 52 мг (0,107 ммоля) указанного в заглавии соединения. Очищенный продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали 1 экв. HCl/Et₂O с осаждением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(3-диметиламино-2,2-диметилпропил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 62

Соединение 3-36

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(1-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 1,0 г (2,4 ммоля) сульфона 9.1, 1,9 г (7,23 ммоля) дифенил-2-пиридилфосфина и 0,555 г (4,8 ммоля) 4-гидрокси-1-метилпиперидина в азотной атмосфере растворяли в безводном тетрагидрофуране. В этот раствор добавляли 1,67 г (7,23 ммоля) ди-трет-бутилазодикарбоксилата и образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 9:1. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 354 мг 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(1-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

354 мг (0,69 ммоля) 7-бензилсульфонил-3-(2-хлорфенил)-1-(1-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она объединяли со 160 мг (1,38 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и 1 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 110°С в течение 1 ч, по прошествии которого ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола/диизопропиламина в соотношении 9:1:0,5. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли, концентрировали под вакуумом и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с выделением 135 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(1-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 63

Соединение 4-4

Данный пример иллюстрирует получение (R,R)-7-(2,3-дигидрокси-1-метилпропиламино)-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Получение (R,R)-3-аминобутан-1,2-диола

3-Аминобутан-1,2-диол получали аналогично изложенному в Tetrahedron: Asymmetry, 1995, 6(9), 2329-2342. Вкратце, раствор 10,0 г (42,2 ммоля) (2S,3S)-транс-3-метилоксиран-2-метил-4-нитробензоата (фирма Fluka) в 150 мл дихлорметана в аргоновой атмосфере объединяли с 25 мл (84,3 ммоля) изопропоксида титана и перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре. Добавляли 14,5 мл (84,4 ммоля) аминодифенилметана и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли раствор 10% гидроксида натрия в насыщенном рассоле и суспензию перемешивали в течение 2 ч. Смесь фильтровали и экстрагировали 0,2 М соляной кислотой. Кислотные слои экстрагировали дихлорметаном и экстракт выбрасывали. Кислотный слой подщелачивали гранулированным гидроксидом натрия до рН 9, а затем экстрагировали дихлорметаном. Слои разделяли и органический слой сушили над сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением в виде масла вещества, которое очищали в колонке для экспресс-хроматографии с использованием в качестве элюентов гексанов/этилацетата в соотношениях от 2:1 до 1:1 и этилацетата/гексана в соотношении 2:1, получая 2,6 г (R,R)-3-(бензгидриламино)бутан-1,2-диола.

В дегазированный раствор 2,6 г (9,59 ммоля) (R,R)-3-(бензгидриламино)бутан-1,2-диола в 20 мл метанола вводили 260 мг гидроксида палладия на угле. Над реакционной средой создавали разрежение и три раза вводили водород, после чего вводили водород под давлением 50 фунтов/кв.дюйм и гидрогенизатор встряхивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали с получением в виде масла 922 мг (R,R)-3-аминобутан-1,2-диола, который промывали гексаном и затем сушили под вакуумом.

Получение (R,R)-7-(2,3-дигидрокси-1-метилпропиламино)-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

622 мг (1,58 ммоля) сульфона 9.2 совмещали с 250 мг (1,9 ммоля) (R,R)-3-аминобутан-1,2-диола в 1 мл 1,2-диметоксиэтана и в аргоновой атмосфере выдерживали при 100°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли дихлорметаном/метанолом в соотношении 9:1 и вводили непосредственно в колонку с диоксидом кремния для экспресс-хроматографии с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 96:4 и дихлорметана/метанола в соотношении 9:1, получая в виде бесцветного масла 120 мг вещества, которое растворяли в 10 мл этилацетата и обрабатывали 1 экв. 1,0 М соляной кислоты в диэтиловом эфире. Осадок собирали фильтрованием под вакуумом, промывали этилацетатом и сушили под вакуумом с получением в виде белого твердого вещества 118 мг (R,R)-7-(2,3-дигидрокси-1-метилпропиламино)-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 64

3-(2-Хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он

64.1. Получение 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-метилтиопиримидина

Смесь 9,5 г (56,1 ммоля) 4-амино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида, 6,7 мл (63,7 ммоля) 2-хлоранилина и 0,85 г (4,5 ммоля) моногидрата 4-толуолсульфокислоты в 350 мл ксилола выдерживали при температуре кипения с азеотропным удалением воды в течение 6 ч. Смесь охлаждали до 25°С и осадок собирали фильтрацией под вакуумом, промывали гексанами и сушили на воздухе. Затем это твердое вещество растворяли в 300 мл тетрагидрофурана и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Небольшими порциями в течение 45 минут добавляли 2,3 г (60,6 ммоля) алюмогидрида лития. После того как добавление завершали, смесь перемешивали в течение еще 15 мин и осторожно последовательно обрабатывали 4,5 мл воды, 4,5 мл 15%-ного водного гидроксида натрия и затем 20 мл воды. Смесь перемешивали в течение 30 минут, фильтровали через броунмиллерит и фильтрат концентрировали под вакуумом. Твердое вещество очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием 25% ацетона/гексанов. Фракции колонки, содержавшие продукт, концентрировали под пониженным давлением до твердого вещества, которое перекристаллизовывали из этилацетата с получением в виде белого твердого вещества 7,0 г 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-метилтиопиримидина.

64.2. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В перемешанный раствор, охлажденный до 0°С, 7,0 г (24,9 ммоля) 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-амино-2-метилтиопиримидина в 200 мл тетрагидрофурана добавляли 10 мл (71,7 ммоля) триэтиламина. Затем этот раствор обрабатывали добавлением по каплям раствора 14,2 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле; 27,2 ммоля). После перемешивания в течение 2 ч добавляли дополнительно 5,0 мл (35,9 ммоля) триэтиламина, а затем 6,5 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле, 12,5 ммоля). После перемешивания в течение еще 2 ч добавляли дополнительно 2 мл (14,3 ммоля) триэтиламина, а затем 3 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле, 5,8 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение одного дополнительного часа, а затем нагревали до комнатной температуры, выливали в гетерогенный раствор 75 мл воды и 150 мл этилацетата. Далее смесь фильтровали и фазы разделяли. Водную фазу повторно дважды экстрагировали 150 мл этилацетата. Объединенные этилацетатные экстракты концентрировали под пониженным давлением. Остаток перемешивали с этилацетатом. Далее продукт собирали фильтрацией под вакуумом и сушили под вакуумом с получением в виде белого твердого вещества 3,2 г 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 65

Другой метод получения 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

65.1. Получение этил-4-амино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата

Раствор 1450 г (6,23 моля) этил-4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата (фирма Aldrich Chemical Co., Милуоки, шт.Висконсин, США) в 2987 мл тетрагидрофурана охлаждали до 5-10°С и обрабатывали медленным добавлением 2407 мл 37%-ного раствора гидроксида аммония в 2978 мл триэтиламина. После перемешивания в течение 16 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом до приблизительно 5 л и фильтровали. Фильтровальный пирог промывали гексанами и сушили в вакуумном сушильном шкафу при 60-65°С. Фильтрат выпаривали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 1314 г (выход 94%) этил-4-амино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата, t_пл 130,1-130,7°С.

65.2. Получение этил-4-{[(2-хлорфенил)амино]карбониламино}-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата

В суспензию 1215 г (5,7 моля) этил-4-амино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата в 2600 мл ксилолов, нагретую до 100-105°С, 965,5 г (6,23 моля) 2-хлорфенилизоцианата вводили таким образом, чтобы поддерживать температуру ˜100°С. Температуру реакционной смеси повышали до 120°С и ее перемешивали в течение 14 ч. Нагрев прекращали и начиналось медленное охлаждение до 110°С. Когда начиналась кристаллизация, медленным добавлением 5256 мл этилацетата кристаллизацию завершали. Смесь охлаждали до 20°С и фильтровали. Фильтровальный пирог промывали этилацетатом, помещали в вакуумный сушильный шкаф и сушили в течение 10-12 ч при температуре от 60 до 80°С с получением 1895 г (выход 90,7%) этил-4-{[(2-хлорфенил)амино]карбониламино}-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата, t_пл 172,3-172,6°С.

65.3. Получение [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(гидроксиметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида

В перемешиваемую суспензию 1000 г (2,73 моля) этил-4-{[(2-хлорфенил)амино]карбониламино}-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата в 4,7 л безводного тетрагидрофурана при -25°С в азотной атмосфере в течение 3-часового периода вводили 2730 мл (3,19 моля) 1 М раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране. Образовавшийся желтый гомогенный раствор выдерживали при -25°С в течение еще 45 мин, затем ему давали нагреться в течение последующих 90 мин до 0°С. Данные ВЭЖХ анализа указывали на отсутствие исходного сложного эфира. Далее раствор резко охлаждали в 8,0 л перемешиваемого 1,0 М раствора сегнетовой соли и экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты, содержавшие суспендированный нерастворимый желтый продукт, концентрировали и фильтровали. Желтое твердое вещество промывали гексанами, а затем сушили под вакуумом при 60°С с получением в виде желтых кристаллов 617 г (выход 69,3%) [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(гидроксиметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида, t_пл 182,5-182,9°С. Этот эксперимент повторяли с использованием 1168 г исходного вещества, получив 717,8 г указанного в заглавии соединения.

65.4. Получение [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(бромметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида

1363 г [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(гидроксиметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида смешивали с 8 л тетрагидрофурана и в азотной атмосфере начинали механическое перемешивание. Затем в смесь в течение 15 мин добавляли 135 мл трибромида фосфора в 800 мл тетрагидрофурана. Перемешивание продолжали в течение 4 ч, по прошествии которых реакцию останавливали и смесь фильтровали. Фильтровальный пирог промывали один раз тетрагидрофураном и сушили в течение ночи в вакуумном сушильном шкафу при 55°С с получением 1360 г (выход 71%) [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(бромметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида (М+1377).

65.5. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В суспензию 1360 г (3,62 моля) [(2-хлорфенил)амино]-N-[5-(бромметил)-2-метилтиопиримидин-4-ил]карбоксамида в 10 л 1-метил-2-пирролидинона вводили 136 мл гексаметилдисилазана. Смесь выдерживали при температуре в массе 105-115°С в течение 1,5 ч. Далее смесь охлаждали до 30°С и обрабатывали 20 л воды. Затем смесь перемешивали при 5-8°С в течение 2 ч и фильтровали. Продукт фильтрования собирали и промывали последовательно водой и гексанами. Продукт помещали в сушильный шкаф и под вакуумом выдерживали при повышенной температуре в течение 16 ч с получением в виде не совсем белого твердого вещества 780 г (выход 70,1%) 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (М+1308).

С использованием на вышеописанной стадии 65,2 орто-толилизоцианата вместо 2-хлорфенилизоцианата получали родственное соединение, 7-метилтио-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он.

Пример 66

3-(2-Хлорфенил)-7-метилсульфонил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он

Суспензию 4,1 г (12,8 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 50 мл хлороформа охлаждали льдом и обрабатывали 70%-ной 3-хлорпербензойной кислотой (9,8 г, 39,8 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем дважды обрабатывали 100 мл 10%-ного водного тиосульфата натрия и оставляли перемешиваться на 30 мин. Реакционную смесь разбавляли 400 мл дихлорметана и фазы разделяли. Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем сушили над сульфатом магния и фильтровали. В результате концентрирования фильтрата под пониженным давлением получали твердое вещество, которое перемешивали с этилацетатом, а затем фильтровали, выделяя в виде белого твердого вещества 2,6 г 3-(2-хлорфенил)-7-метилсульфонил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (сульфон 11.1) (MH⁺=364).

Пример 67

Соединение 4-19

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(4-гидроксиметилциклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

350 мг (1,04 ммоля) сульфона 11.1 объединяли с 400 мг (3,3 ммоля) 4-аминоциклогексилметанола (цис-/транс- в соотношении 1:1) (полученного согласно изложенному в Chem.Ber.; GE; 96; 1963; 2377-2386) с 0,3 мл 1-метил-2-пирролидинона. Смесь выдерживали при 100° в течение 2 ч, по прошествии которых ее охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь вводили в воду и экстрагировали этилацетатом, промывали водой, сушили и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента метанола/дихлорметана в соотношении 10:90. Фракции колонки, содержавшие продукт, концентрировали до вещества в виде пены, которое суспендировали в метаноле. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали с получением гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(4-гидроксиметилциклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 68

Соединение 2-28

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(1-этоксикарбонилпеперидин-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

1,3 г (3,75 ммоля) сульфона 11.1 растворяли в 3,7 мл (21 ммоль) этил-4-амино-1-пиперидинкарбоксилата и нагревали до температуры 120°С, при которой исходная суспензия полностью растворялась, а спустя 10 мин вновь выпадал осадок с образованием суспензии. Эту вторичную суспензию выдерживали при 150°С в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду с получением смолистой массы. Когда эту смолистую массу перемешивали с 50 мл диэтилового эфира, образовывалось небольшое количество белого твердого вещества, которое убирали в сторону. Оставшуюся часть смолистой массы обрабатывали в течение 10-15 мин метанолом с получением белого твердого вещества. Общая масса объединенного белого твердого вещества составляла 0,685 г (1,59 ммоля), из которых 30 мг приходилось, как полагали, на долю свободного основания.

Пример 69

Соединение 4-25

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

196 мг (0,579 ммоля) сульфона 11.1 и 0,36 г (3,2 ммоля) транс-1,4-диаминоциклогексана растворяли в 5 мл 1-метил-2-пирролидинона. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч, охлаждали, затем добавляли 30 мл этилацетата и 30 мл воды. Органический слой отделяли, а водный слой повторно экстрагировали 30 мл дихлорметана. Объединенные органические слои концентрировали под вакуумом, из сырой жидкости при стоянии выпадал белый осадок. Эти твердые частицы отфильтровывали и промывали этилацетатом с получением в виде белого порошка 28 мг (выход 13%) указанного в заглавии соединения с t_пл >300°С. Продукт растворяли в этилацетате и обрабатывали HCl/Et₂O с получением в виде белого порошка гидрохлоридной соли 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 70

Соединение 4-26

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоиламидо)циклогексиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

В раствор 318 мг (0,632 ммоля) 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного аналогично изложенному в примере 87) в 20 мл дихлорметана добавляли 0,10 мл (0,72 ммоля) триметиламина и раствор 0,12 г (0,84 ммоля) диметилсульфамоилхлорида в 5 мл дихлорметана. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч, охлаждали, затем концентрировали под вакуумом. В результате очистки хроматографией с использованием в качестве элюента 5% метанола/дихлорметана в виде белой пены получали 271 мг (выход 70%) 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоиламидо)циклогексиламино]-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. (МН⁺=610, t_пл 106,5-110,0°С).

250 мг (0,410 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоил-амидо)циклогексиламино]-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в 10 мл метанола и обрабатывали 10 мл 10%-ной водной соляной кислоты. Реакционную смесь перемешивали при 50°С и за ходом процесса следили по данный ТСХ (5% метанола/дихлорметан). Реакционную температуру в течение 3 ч повышали до 85°С и реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Образовавшуюся суспензию фильтровали с получением белого твердого вещества, которое промывали этилацетатом с получением 125 мг (выход 59%) гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(N,N-диметилсульфамоиламидо)циклогексиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-4]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 71

Соединение 4-24

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

4,6 г (13 ммолей) сульфона 11.1 объединяли с 4,2 г (27 ммолей) 1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламина (полученного по изложенному в примере 8) в 40 мл 1-метил-2-пирролидинона. Реакционную смесь выдерживали при 100°С в течение ночи, по прошествии этого времени ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и водой и фильтровали с получением не совсем белого твердого вещества. В суспензию 0,12 г (0,29 ммоля) этого продукта в метаноле добавляли 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире и образовавшийся раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в метаноле/дихлорметане и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 2% метанола/дихлорметана, получая в форме свободного основания чистое указанное в заглавии соединение. В суспензию этого продукта в метаноле добавляли 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире. Образовавшийся раствор концентрировали в токе азота, затем перекачивали под пониженным давлением с получением в виде желтого твердого вещества 80 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 72

Соединение 4-23

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-3,4-дигидропиримицо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Смесь 0,17 г (0,41 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(1,4-диоксаспиро[4.5]дец-8-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 71) с тетрагидрофураном/3 н. водной соляной кислотой в соотношении 1:1 перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Далее реакционную смесь разбавляли этилацетатом и обрабатывали насыщенным водным бикарбонатом натрия. Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали рассолом, сушили сульфатом натрия и концентрировали под пониженным давлением. Остаток растворяли в метаноле и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента 2% гидроксида аммония в 35% ацетона/гексане. Фракции, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением до белого твердого вещества, которое суспендировали в метаноле. В результате добавления 1 М соляной кислоты в диэтиловом эфире получали соль, которую концентрировали и перекачивали под пониженным давлением с получением в виде желтой пены 80 мг чистой гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 73

Соединение 4-2

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

73.1. Получение

0,400 г (1,18 ммоля) сульфона 11.1 объединяли с 0,272 г (2,36 ммоля) транс-4-аминоциклогексанола и 0,4 мл 2-метоксиэтилового эфира. Реакционную смесь выдерживали при 100-105°С в течение 1 ч, по прошествии которого ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 9:1. Фракции, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом до вещества в виде масла, которое повторно растворяли в этилацетате и метаноле. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.) получали соль, которую растворяли в растворителях. Раствор концентрировали под вакуумом до твердого вещества, которое растирали в порошок в диэтиловом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 0,220 г 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

73.2. Другой вариант получения

Раствор 700 г сульфида 10.1 в 3000 мл 1-метил-2-пирролидинона объединяли с 350 г N-хлорсукцинимида в 500 мл 1-метил-2-пирролидинона и 40 г воды и смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 25°С. В этот раствор добавляли 865 г транс-4-аминоциклогексанола. Смесь выдерживали при 60°С в течение от 12 до 26 ч, охлаждали до 20-25°С и обрабатывали 10500 мл воды. Эту смесь охлаждали до 5-8°С и перемешивали в течение 2 ч. Твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой, гексанами и сушили при 65°С в вакуумном сушильном шкафу с получением 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. Гидрохлоридную соль получали воздействием на это свободное основание этанольного раствора соляной кислоты/воды.

Пример 74

Соединение 4-5

Данный пример иллюстрирует другой вариант получения 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Раствор 2 г сульфида 10,2 в 4 мл 1-метил-2-пирролидинона объединяли с 1,03 г N-хлорсукцинимида в 4 мл 1-метил-2-пирролидинона и 0,125 г воды и смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 25°С. В этот раствор добавляли 2,65 г транс-4-аминоциклогексанола. Смесь выдерживали при 60°С в течение 48 ч, охлаждали до 20-25°С и обрабатывали 10 мл воды. Эту смесь охлаждали до 5°С и перемешивали в течение 2 ч. Твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой, гексанами и сушили под вакуумом. Это твердое вещество очищали экспресс-хроматографией в колонке с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношениях от 95/5 до 90/10, получая 614 мг 7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. Полученное твердое вещество превращали в гидрохлоридную соль воздействием на это свободное основание эфирного раствора соляной кислоты/воды.

Пример 75

Соединение 4-15

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-формилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

300 мг (0,8 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73) и 2 мл 96%-ной муравьиной кислоты перемешивали при 60°С в течение 3 ч, затем концентрировали под пониженным давлением. Остаток растирали в порошок в диэтиловом эфире, фильтровали и сушили с получением 250 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-формилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 76

Соединение 4-13

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-ацетилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

400 мг (1,07 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73), 0,3 мл (3,2 ммоля) уксусного ангидрида и 0,34 мл (4,3 ммоля) пиридина в 5 мл дихлорметана перемешивали при 25°С в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали и осадок промывали дихлорметаном, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с выделением 200 мг гидрохлоридной соли 7-(транс-4-ацетилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 77

Соединение 4-20

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метоксикарбонилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Суспензию 200 мг (0,5 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73) и 6,5 мг (0,05 ммоля) 4-диметиламинопиридина в тетрагидрофуране охлаждали на ледяной бане. Добавляли 0,6 мл (5,35 ммоля) диметилпирокарбоната и смесь перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали и осадок очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 98:2, получая 30 мг указанного в заглавии соединения. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с выделением 34 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метоксикарбонилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 78

Соединение 4-21

Данный пример иллюстрирует получение 7-(транс-4-карбамоилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Суспензию 285 мг (0,77 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73) в 3 мл дихлорметана охлаждали на ледяной бане и добавляли 0,09 мл (1,01 ммоля) хлорсульфонилизоцианата. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч, затем обрабатывали 0,5 мл воды. Двухфазную смесь перемешивали в течение 8 ч, фильтровали и осадок очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 97:3, получая 110 мг указанного в заглавии соединения. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 94 мг гидрохлоридной соли 7-(транс-4-карбамоилоксициклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 79

Соединение 4-22

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метиламинокарбонилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Суспензию 350 мг (0,94 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73) в 3 мл дихлорметана обрабатывали 1 мл (избыток) метилизоцианата и 1 мл триэтиламина. Смесь перемешивали в азотной атмосфере в течение одной недели. Реакционную смесь фильтровали и осадок промывали дихлорметаном, сушили и суспендировали в этилацетате. В результате добавления 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (2,0 экв.) получали соль, которую отфильтровывали и сушили с получением 250 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-метиламинокарбонилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 80

Соединение 4-3

Данный пример иллюстрирует получение 7-(3-карбоксиизопропиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

1,0 г (2,97 ммоля) сульфона 11.1 объединяли с 0,87 мл (5,94 ммоля) этил-3-аминобутирата. Смесь выдерживали при 110-115°С в течение 1 ч, по прошествии которого ее охлаждали до комнатной температуры. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 10:1. Фракции колонки, содержавшие полученный сложный эфир, 7-(3-карбоксиизопропиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением 1,10 г твердого вещества. 0,500 г (1,24 ммоля) этого сложного эфира растворяли в метаноле. В результате добавления 0,05 г (1,24 ммоля) гидроксида натрия и 1 мл воды получали натриевую соль. Раствор концентрировали под вакуумом до твердого вещества, которое растирали в порошок в этилацетате в течение 1 ч, отфильтровывали и сушили с получением 0,41 г 7-(3-карбоксиизопропиламино)-3-(2-хлорфенил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. (МН⁺=376, t_пл 170,0-185,5°С).

Пример 81

Соединение 3-48

Данный пример иллюстрирует получение 1-бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

81.1. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Суспензию 1,86 мг (5 ммолей) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 73) объединяли с 1,05 г (7 ммолей) трет-бутилдиметилсилилхлорида и 0,75 г (11 ммолей) имидазола в 35 мл диметилформамида. Реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 24 ч, охлаждали до комнатной температуры и вводили в воду, перемешивали в течение 30 мин, фильтровали и сушили с получением 1,88 г 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, t_пл 289-294°С.

81.2. Получение 1-бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

В суспензию 486 мг (1 ммоль) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 1-метил-2-пирролидиноне вводили 44 мг (1,1 ммоля) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле) и перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин. В полученный раствор добавляли 0,12 мл (1 ммоль) бензилбромида и при комнатной температуре перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь вводили в воду и экстрагировали этилацетатом. Слои разделяли и органический слой промывали водой, сушили сульфатом магния и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке с использованием в качестве элюента ацетона/гексана в соотношении 25:75, получая в виде масла 1-бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

81.3. Получение 1-бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

1-Бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в тетрагидрофуране и добавляли тетрабутиламмонийфторида (1,0 М/тетрагидрофуран, 1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, вводили в воду, экстрагировали этилацетатом, сушили сульфатом магния и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 90:10. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заглавии соединения. Этот продукт суспендировали в метаноле и добавляли 1,0 М соляной кислоты в Et₂O (1,0 экв.), перемешивали в течение 30 мин, а затем выпаривали с получением вещества в виде пены. Эту пену перемешивали с метанолом/диэтиловым эфиром, фильтровали и сушили, получая 130 мг гидрохлоридной соли 1-бензил-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 82

Соединение 3-55

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-цианометил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

486 мг (1,0 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 81) суспендировали в 7 мл 1-метил-2-пирролидинона и 44 мг (1,1 ммоля) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин. В полученный раствор добавляли 0,167 мг (1,0 ммоля) иодацетонитрила и при комнатной температуре перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь вводили в воду и экстрагировали этилацетатом, промывали водой, сушили над сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением с получением вещества в виде масла. Это вещество в виде масла очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента ацетона/гексана в соотношении 25:75. Фракции колонки, содержавшие продукт, объединяли и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 510 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-1-цианометил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. (М+Н)⁺ 527, t_пл 100,2-148,7°С.

510 мг (0,97 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилил-оксициклогексиламино)-1-цианометил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в тетрагидрофуране и добавляли 1,0 М тетрабутиламмонийфторида в ТГФ (1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч, добавляли воды, экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде масла указанного в заглавии соединения. Этот остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 90:10. Фракции колонки, содержавшие продукт, выпаривали под вакуумом с получением в виде пены 249 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-цианометил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 33

Соединение 3-49

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метоксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

972 мг (2 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилило-ксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (полученного по изложенному в примере 81) суспендировали в 15 мл 1-метил-2-пирролидинона и в суспензию вводили 88 мг (2,2 ммоля) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и добавляли 0,190 мл (2 ммоля) метилбромацетата. Смесь перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь вводили в воду и экстрагировали этилацетатом, промывали водой, сушили над сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента гексана/ацетона в соотношении 70:30. Фракции, содержавшие продукт, объединяли и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде белого твердого вещества 425 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-1-метоксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. (М+H)⁺ 560, t_пл 165,7-167,4°C.

3-(2-Хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-1-метоксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он растворяли в тетрагидрофуране, добавляли 1,0 М тетрабутиламмопийфторида (1,0 экв.) и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь вводили в воду, экстрагировали этилацетатом, сушили сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента дихлорметана/метанола в соотношении 90:10. Фракции, содержавшие продукт, объединяли и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде пены указанного в заглавии соединения. Этот продукт растворяли в метаноле и добавляли 1,0 М соляной кислоты (1,0 экв.), перемешивали в течение 30 мин и выпаривали под пониженным давлением. Остаток перемешивали с метанолом/диэтиловым эфиром в течение 4 ч, фильтровали и сушили с получением в виде белого твердого вещества 294 мг 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метоксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 84

Соединение 3-53

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-гидроксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

395 мг (0,88 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-метоксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она (полученного по изложенному в примере 83) суспендировали в 5 мл этанола и в суспензию добавляли 0,85 мл 1,037 н. (0,88 ммоля) водного гидроксида натрия. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч, затем выпаривали под пониженным давлением с получением в виде пены указанного в заглавии соединения. Этот остаток перемешивали в смеси метанола/диэтилового эфира в течение 2 ч, фильтровали и сушили с получением в виде белого твердого вещества 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-гидроксикарбонилметил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 85

Соединение 3-56

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-(2-гидроксиэтил)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

85.1. Получение 1-(2-триизопропилсилилоксиэтил)-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В суспензию 486 мг (1,0 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она (полученного по изложенному в примере 81) в 7 мл 1-метил-2-пирролидинона вводили 44 мг (1,1 ммоля) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле) и перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин. Добавляли 328 мг (1,0 ммоля) триизопропилсилана и реакционную смесь при комнатной температуре перемешивали в течение 4 ч. Полученный раствор вводили в воду и экстрагировали этилацетатом, промывали водой, сушили над сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде масла промежуточного продукта, защищенного силилом. Остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием в качестве элюента ацетона/гексана в соотношении 25:75 и фракции, содержавшие продукт, объединяли и выпаривали под пониженным давлением, получая в виде масла 604 мг 1-(2-триизопропилсилилоксиэтил)-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, (М+Н)⁺ 688.

85.2. Получение 1-(2-гидроксиэтил)-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

604 мг (0,88 ммоля) 1-(2-триизопропилсилилоксиэтил)-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-трет-бутилдиметилсилилоксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она растворяли в тетрагидрофуране. В реакционную смесь добавляли 1,0 М тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране и ее перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Полученный раствор вводили в воду и экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом магния и выпаривали под пониженным давлением с получением в виде масла указанного в заглавии соединения. Этот остаток очищали хроматографией в колонке на силикагеле с использованием дихлорметана/метанола в соотношении 90:10 и фракции, содержавшие продукт, концентрировали под вакуумом, получая в виде пены 145 мг 1-(2-гидроксиэтил)-3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 86

Соединение 3-52

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

86.1. Получение дин-5-карбоксилата этил-4-фениламино-2-метилтиопирими

Смесь 15 г (64,5 ммоля) этил-4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата и 12 мл (132 ммоля) анилина в 200 мл ацетонитрила при комнатной температуре перемешивали в течение 24 ч. Далее смесь выпаривали и к остатку добавляли этилацетата и 2 М водной соляной кислоты. Фазы разделяли и органическую фазу промывали водной соляной кислотой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Полученное твердое вещество очищали растиранием в порошок с диэтиловым эфиром/гексанами в соотношении 1:3, выделяя в виде белого твердого вещества 14,2 г (выход 64%) этил-4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата, t_пл 88,2-88,7°C.

86.2. Получение 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола

Раствор 14,2 г (49 ммолей) этил-4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксилата в 100 мл тетрагидрофурана при 0°С по каплям добавляли к 1,9 г алюмогидрида лития в 50 мл тетрагидрофурана, после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 9 ч. Далее смесь охлаждали на льду и осторожно обрабатывали добавлением по каплям 3,3 мл воды, 3,3 мл 2 М водного гидроксида натрия, 4,4 мл воды и 500 мл этилацетата. Образовавшуюся суспензию фильтровали через вспомогательное фильтровальное вещество и фильтрат концентрировали. Продукт отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром с получением в виде слабо окрашенного твердого вещества 7 г 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола, t_пл 142,2-143,2°C.

86.3. Получение 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида

7 г (28,3 ммоля) 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола перемешивали в 130 мл дихлорметана и обрабатывали 25 г (289 ммолей) диоксида марганца. Суспензию перемешивали в течение 7 ч, а затем фильтровали и фильтрат выпаривали. Остаток растирали в порошок с диэтиловым эфиром/гексанами в соотношении 1:3 с выделением в виде белого твердого вещества 6,4 г 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида, t_пл 105,6-106,2°С.

86.4. Получение 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-фениламино-2-метилтиопиримидина

Смесь 6,4 г (26,5 ммоля) 4-фениламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида, 3 мл 2-хлоранилина и 300 мг 4-толуолсульфокислоты в 150 мл толуола в течение 2,5 ч выдерживали при температуре кипения с азеотропным удалением воды. Смесь охлаждали и фильтровали с выделением 6,6 г твердых частиц. К этому твердому веществу в 50 мл тетрагидрофурана добавляли 20 мл 1 М раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране. После перемешивания в течение 1,5 ч в смесь добавляли 1,2 мл воды, 1,2 мл 15%-ного гидроксида натрия и 3,8 мл воды. Смесь перемешивали в течение 15 мин, фильтровали и промывали этилацетатом. Фильтрат растирали в порошок с диэтиловым эфиром/гексанами в соотношении 1:1 с выделением в виде белого твердого вещества 6 г 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-фениламино-2-метилтиопиримидина, t_пл 131,1-131,5°С.

86.5. Получение 3-(2-хлорфенил)-1-метил-7-фенилтио-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В охлажденный раствор 6 г 5-(2-хлорфенил)аминометил-4-фениламино-2-метилтиопиримидина и 5,2 мл триэтиламина в 75 мл тетрагидрофурана по каплям добавляли 8,5 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле) в 35 мл тетрагидрофурана. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В эту смесь дополнительно добавляли 3 мл фосгена (20%-ный раствор в толуоле). После перемешивания в течение 15 мин смесь обрабатывали водой и этилацетатом. Фазы разделяли и органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Сырой продукт очищали хроматографией в колонке с использованием в качестве элюента этилацетата/гексанов в соотношении 10:45, получая в виде белого твердого вещества 2,1 г 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, t_пл 79,5-82,4°С.

86.6. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-метансульфонил-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

К 2 г 3-(2-хлорфенил)-7-метилтио-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она в 20 мл тетрагидрофурана при 0°С добавляли раствор 8,1 г продукта Oxone^® в 24 мл воды. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, разбавляли этилацетатом, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали с получением 2 г 3-(2-хлорфенил)-7-метансульфонил-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она, t_пл 185.8-186,3°С.

86.7. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

Суспензию 0,212 г 3-(2-хлорфенил)-7-метансульфонил-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и 0,19 г 1-амино-4-циклогексанола в 0,3 мл 1-метил-2-пирролидинона выдерживали при 100°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали, обрабатывали диэтиловым эфиром/гексанами в соотношении 1:2 и фильтровали. Остаток очищали с использованием 10% метанола в дихлорметане, получая 149 мг указанного в заглавии соединения, которое растворяли в 10 мл этанола. Через раствор в течение 5 мин барботировали газообразный хлорид водорода, раствор концентрировали и обрабатывали метанолом и диэтиловым эфиром. Полученные твердые частицы отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром с выделением 100 мг гидрохлоридной соли 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-1-фенил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

Пример 87

Соединение 4-28

Данный пример иллюстрирует получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)циклогексиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она.

87.1. Получение 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В раствор 3,0 г (8,87 ммоля) сульфона 11.1 в 10 мл 1-метил-2-пирролидинона добавляли 60%-ного гидрида натрия (390 мг, 9,76 ммоля, в минеральном масле). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре, а затем добавляли 1,57 мл (8,87 ммоля) 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорида. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем в полученный раствор добавляли 5,06 г транс-1,4-диаминоциклогексана, предварительно растворенного в 15 мл 1-метил-2-пирролидинона. Далее реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение 24 ч. Реакционную смесь выливали в рассол и продукт экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным бикарбонатом натрия и водой, сушили над сульфатом магния и концентрировали под вакуумом с получением вещества в виде светло-коричневого масла. В результате очистки хроматографией с использованием в качестве элюента от 2% метанола/дихлорметана до 5% метанола/дихлорметана в виде бледно-желтой пены получали 2,8 г 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она. (MH⁺=502).

87.2. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)циклогексиламино]-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она

В раствор 500 мг (1,04 ммоля) 7-(транс-4-аминоциклогексиламино)-3-(2-хлорфенил)-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1H)-она в 5 мл дихлорметана вводили 0,29 мл (0,207 ммоля) триэтиламина и раствор 0,2 г (1,14 ммоля) метансульфонового ангидрида в 5 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, разбавляли этилацетатом и промывали водным 10%-ным бикарбонатом натрия. Органические экстракты концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией с использованием в качестве элюента от 2% метанола/дихлорэтана до 3% метанола/дихлорметана, получая в виде белой пены 292 мг 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)ииклогексиламино]-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она (MH⁺=581).

87.3. Получение 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)циклогексиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она

В раствор 290 мг (0,5 ммоля) 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)циклогексиламино]-1-[2-(триметилсилил)этоксиметил]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она в 5 мл метанола вводили 4,0 мл 10%-ной водной соляной кислоты. Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 24 ч и концентрировали под вакуумом. В результате повторных растираний вещества в виде бесцветного масла с этилацетатом в форме белого твердого вещества получали 3-(2-хлорфенил)-7-[транс-4-(метансульфониламино)циклогексиламино]-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он, который собирали фильтрованием под вакуумом.

Значения ИК₅₀ соединений с 1-1 по 1-23 в тестах с р38 in vitro составляли меньше 10 мкМ.

Значения ИК₅₀ соединений с 2-1 по 2-11, с 2-13 по 2-24 и 2-28 в тестах с р38 in vitro составляли меньше 10 мкМ.

Значения ИК₅₀ соединений 3-1, 3-3, с 3-5 по 3-10, 3-12, с 3-14 по 3-23, с 3-27 по 3-36, 3-38, 3-39 с 3-41 по 3-58 и 3-60 в тестах с р38 in vitro составляли меньше 10 мкМ.

Значения ИК₅₀ соединений с 4-1 по 4-8 и с 4-10 по 4-28 в тестах с р38 in vitro составляли меньше 10 мкМ.

Пример 88

Тест на ингибирование р38 MAP киназы in vitro

В этом примере проиллюстрирован метод определения in vitro активности р38 MAP киназы, применяемый для оценки соединений по настоящему изобретению.

С целью оценить ингибирующую активность соединений по настоящему изобретению в отношении MAP киназы р38 определяли in vitro перенос γ-фосфата от γ-³³Р-АТР к основному белку миелина (ОБМ), катализируемый киназой р38, используя с некоторыми модификациями метод, описанный в работе Ahn и др., J.Biol.Chem. 266:4220-4227 (1991).

Фосфорилированную форму рекомбинантной MAP киназы р38 соэкспрессировали с SEK-1 и МЕКК в E.Coli (см. Khokhlatchev и др., J.Biol.Chem. 272:11057-11062 (1997)) и затем очищали афинной хроматографией, используя никель-колонки.

Фосфорилированную MAP киназу р38 разбавляли киназным буфером [20 мМ 3-(N-морфолино)пропансульфоновая кислота, рН 7,2, 25 мМ β-глицеринфосфат, 5 мМ этиленгликоль-бис-бета-аминоэтиловый эфир N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты, 1 мМ ортованадат натрия, 1 мМ дитиотреит, 40 мМ хлорид магния]. Тестируемое соединение, растворенное в ДМСО, или только ДМСО (эталон), добавляли и образцы инкубировали в течение 10 мин при 30°С. Киназную реакцию инициировали добавлением субстратного коктейля, содержавшего ОБМ и γ≠³³ Р-АТР. После инкубирования в течение еще 20 мин при 30°С реакцию останавливали добавлением 0,75%-ной фосфорной кислоты. Затем фосфорилированный ОБМ отделяли от остаточного γ-³³Р-АТР, используя фосфоцеллюлозную мембрану (фирма Millipore, Бедфорд, шт.Миннесота), и с помощью сцинтилляционного счетчика (фирма Packard, Меридиэн, шт.Коннектикут) проводили количественные определения.

Пример 89

Тест на ингибирование TNF in vitro

В этом примере проиллюстрирован in vitro метод оценки ингибирования продуцирования TNF-α, индуцированного LPS в клетках ТНР1.

Способность соединений по настоящему изобретению ингибировать высвобождение TNF-α определяли, применяя с незначительной модификацией методы, описанные в работе Blifeld и др. Transplantation, 51:498-503 (1991).

а) Индукция биосинтеза TNF

Клетки ТНР1 суспендировали в культуральной среде [RPMI (фирма Gibco-BRL, Гейтерсбург, шт.Мэриленд), содержавшей 15%-ную фетальную бычью сыворотку, 0,02 мМ 2-меркаптоэтанол] при концентрации 2,5×10⁶ клеток/мл и затем помещали в 96-луночный планшет (по 0,2-миллилитровой аликвоты в каждую лунку). Тестируемые соединения растворяли в ДМСО и затем разбавляли культуральной средой таким образом, чтобы конечная концентрация ДМСО достигла 5%. В каждую лунку добавляли аликвоты по двадцать пять микролитров тестируемого раствора или только среды с ДМСО (эталон). Клетки инкубировали при 37°С в течение 30 мин. В лунки добавляли LPS (фирма Sigma, Сент-Луис, шт.Миссури) до конечной концентрации 0,5 мкг/мл и клетки инкубировали еще 2 ч. К концу инкубационного периода культуральную надосадочную жидкость собирали и количество присутствующего TNF-α определяли, используя описанный ниже метод ELISA.

б) ELISA метод

Количество присутствующего TNF-α человека определяли по специфическому связыванию согласно методу ELISA, используя два антитела к TNF-α (2TNF-H12 и 2TNF-H34), описанных в работе Reimund, J.M. и др., GUT, том 39(5), 684-689 (1996).

В лунки полистирольного 96-луночного планшета сорбировали по 50 мкл антитела 2TNF-H12 в РФБ (раствор, содержавший фосфатный буфер) (10 мкг/мл) и инкубировали при 4°С в течение ночи в увлажненной камере. Планшет промывали РФБ и затем в течение 1 ч при комнатной температуре блокировали 5%-ным обезжиренным сухим молоком в РФБ и промывали 0,1%-ным БСА (бычий сывороточный альбумин) в РФБ.

Стандарты TNF готовили из запасного раствора рекомбинантного TNF-α человека (фирма R&D Systems, Миннеаполис, шт.Миннесота). Начальная концентрация стандартов в тестах составляла 10 нг/мл, а затем следовали 6 полулогарифмических серийных разбавлений.

Аликвоты объемом по двадцать мкл вышеуказанных культуральных надосадочных жидкостей или TNF стандартов или только среды (эталон) смешивали с 25-микролитровыми аликвотами биотинилированного моноклонального антитела 2TNH-H34 (2 мкг/мл в РФБ, содержавшем 0,1%-ный БСА) и затем добавляли в каждую лунку. Образцы инкубировали с осторожным встряхиванием при комнатной температуре в течение 2 ч и затем промывали 3 раза 0,1%-ным БСА в РФБ. В каждую лунку вводили по 50 мкл раствора стрептовидинпероксидазы (фирма Zymed, S. Сан-Франциско, шт.Калифорния), содержавшего 0,416 мкг/мл стрептовидинпероксидазы и 0,1%-ный БСА в РФБ. Образцы дополнительно инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре и затем промывали 4 раза 0,1%-ным БСА в РФБ. В каждую вводили по пятьдесят микролитров раствора о-фенилендиамина (1 мкг/мл о-фенилендиамина и 0,03% перекиси водорода в 0,2 М цитратном буфере, рН 4,5) и образцы инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре в темноте. Оптическую плотность образца и сравнительной кюветы определяли при соответственно 450 и 650 нм. Уровни TNF-α определяли по кривой зависимости оптической плотности при 450 нм от используемой концентрации.

Значение ИК₅₀ определяли как концентрацию тестируемого соединения, соответствующую снижению наполовину максимальной адсорбции при 450 нм.

Пример 90

В этом примере проиллюстрирован in vivo метод, применяемый для оценки ингибирования индуцированного LPS процесса продуцирования у мышей (или крыс) TNF-α.

Способность соединений по настоящему изобретению ингибировать высвобождение TNF-α in vivo определяли, применяя с незначительной модификацией методы, описанные в работах Zanetti и др., J.Immunol., 148:1890 (1992), и Sekut и др., J. Lab.Clin.Med., 124:813 (1994).

Самок мышей линии BALB/c массой по 18-21 г (фирма Charles River, Холлистер, шт.Калифорния) акклиматизировали в течение одной недели. Каждому животному групп, включавшим по 8 мышей, орально вводили либо тестируемое соединение в виде суспензии или растворенное в водном носителе, содержавшем 0,9%-ный хлорид натрия, 0,5%-ную натрийкарбоксиметилцеллюлозу, 0,4%-ный полисорб 80, 0,9%-ный бензиловый спирт (носитель для КМЦ) или только носитель (контрольная группа). Через 30 мин животным внутрибрюшинными инъекциями вводили по 20 мкг LPS (фирма Sigma, Сент-Луис, шт.Миссури). По прошествии 1,5 ч животных умерщвляли ингаляцией СО₂ и собирали кровь, производя пункцию сердца. Кровь осветляли центрифугированием при 15600g в течение 5 мин, сыворотку крови переносили в чистые пробирки, замораживали при -20°С и хранили до тех пор, пока не проводили анализ на TNF-α по методу ELISA (фирма Biosource International, Камарилло, шт.Калифорния) в соответствии с инструкцией производителя.

Необходимо иметь в виду, что приведенные в настоящем описании примеры и варианты выполнения изобретения служат только иллюстративным целям, поэтому, принимая их во внимание, по предложениям специалистов в данной области техники в них можно вносить самые разнообразные модификации или изменения, которые не выходят за пределы сущности и рамок данной заявки и объема прилагаемой формулы изобретения.

1. Гетероалкиламинозамещенное производное дигидропиримидо[4,5-d] пиримидинона, выбранное из ряда соединений, отвечающих формуле I

в которой подстрочный символ n обозначает целое число 1;

R¹ обозначает C_1-6алкил (замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, C_1-6алкокси, амино, ди(С_1-4алкил)амино, С_1-4алканоиламино и фенил), пиперидинил-С_0-4алкил [где пиперидинильный фрагмент необязательно монозамещен бензилом, карбамоилом, С_1-4алкансульфонилом, C_1-6алкилом (который необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси, циано, карбамоил, фенил, карбокси, ди(С_1-4алкил)аминокарбонил, С_1-4алкоксикарбонил, трифторметил) или С_1-4алкоксикарбонилом], морфолинил-С_0-4алкил, тетрагидропиранил-С_0-4алкил, 2-оксоимидазолидинил-С_0-4алкил, 2-оксо-пирролидинил-С_0-4алкил или 1,1-диоксо-тетрагидротиенил-С_0-4алкил, С_3-6циклоалкил (монозамещенный гидрокси, С_1-6алкокси (необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей гидрокси и С_1-4алкокси), формилокси, С_2-6алкенилокси, С_1-4алканоилокси, карбамоилокси, С_1-4алкоксикарбонилокси, С_1-4алкиламинокарбонилокси, гидрокси-С_1-4алкил, =O, =N-OH, амино, С_1-4алкилсульфониламино или ди(С_1-4алкил)аминосульфониламино), 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил, 2,4-дион-1,3-диаза-спиро[4.5]декан-8-ил или (3-гидроксиметил-3-метил)-1,5-диоксаспиро [5.5]ундекан-9-ил,

R² обозначает С_1-4алкил, гало;

R³ обозначает водород, C_1-6алкил (необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей С_1-4алкокси, пирролидинил, ди(С_1-4алкил)амино, С_1-4алкилтио, ди(С_1-4алкил)аминокарбонил, карбамоил, С_1-4алкоксикарбонил, карбокси, циано, гидрокси и трифторметил), фенил, бензил или пиперидинил (необязательно N-замещенный С_1-4алкилом);

R⁴ обозначает водород;

а также его индивидуальные изомеры, рацемические и нерацемические смеси изомеров, пролекарства и его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение по п.1, в котором -(R²)_n обозначает 2-гало.

3. Соединение по п.1, в котором -(R²)_n обозначает 2-метил.

4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором R³ обозначает водород или метил.

5. Соединение по любому из пп.1-3, в котором R³ обозначает 2,2,2-трифторэтил.

6. Соединение по п.1, в котором R¹ обозначает С_1-6гидроксиалкил.

7. Соединение по п.6, в котором R² обозначает гало или метил, а R³ обозначает метил.

8. Соединение по п.1, в котором R² обозначает гало или метил, a R³ обозначает метил.

9. Соединение по п.8, в котором R¹ обозначает С_3-6гидроксициклоалкил.

10. Соединение по п.1, в котором R² обозначает гало или метил, а R³ обозначает метил или водород.

11. Соединение по п.1, которое представляет собой 3-(2-хлорфенил)-7-(транс-4-гидроксициклогексиламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-он и его фармацевтически приемлемые соли.

12. Соединение по п.1, выбранное из

3-(2-хлорфенил)-7-(тетрагидропиран-4-иламино)-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она,

7-[1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-иламино]-1-метил-3-орто-толил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она,

3-(2-хлорфенил)-7-[(транс-4-метоксициклогексил)метиламино]-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она,

3-(2-хлорфенил)-7-(4-оксоциклогексиламино)-1-метил-3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1Н)-она и их фармацевтически приемлемых солей.

13. Соединение по любому из пп.1-12, обладающее ингибирующей активностью в отношении р38 MAP киназы.

14. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении р38 MAP киназы, включающая гетероалкиламинозамещенное производное дигидропиримидо[4,5-d]пиримидинона формулы (I), изомер, рацемическую или нерацемическую смесь изомеров или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем.