Противомикробное вещество



Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество
Противомикробное вещество

 


Владельцы патента RU 2428182:

Тец Виктор Вениаминович (RU)
Тец Георгий Викторович (RU)

Изобретение относится к синтетическим биологически активным веществам гетероциклического ряда, обладающим противомикробной активностью, и представляет собой продукты модификации известного β-лактамного антибиотика - ампициллина, включая все пространственные изомеры заявляемого вещества, все их таутомерные и солевые формы. Противомикробное вещество с общей формулой:

где R выбран из группы: Н, метил, этил, н-алкил (С3-С9), фенил; X1 и Х3 выбраны из группы: СН2, О или N (NH или NR, где R - метил, этил, линейный или разветвленный алкил, алкенил или циклоалкил С3-С10, CH2CH2OEt, СН2СН2СН2ОМе, Ph, производное бензола, замещенное один или несколько раз линейным или разветвленным алкилом, алкенилом или циклоалкилом С1-С9, галогеном (F, Cl или Вr), СF3, метоксигруппой или другой алкоксигруппой, карбоксилом или карбоксиалкилом либо одновременно несколькими из перечисленных заместителей, CH2Ph, CH2CH2Ph, СН(СН3)Ph, СН2С6Н4(ОМе-р), СН2С6Н4(F-р), СН2СН2С6Н4(F-p), СН2СН2С6Н3(3,4-диОМе); 2-фурилметил, 2-(2-тиенил)этил; Х2 выбран из группы: С=0, C=S, СН2, СМе2, С(С5Н10-цикло). Изобретение обеспечивает биологически активное вещество с высокой антибактериальной активностью и широким спектром действия, эффективно действующим на бактерии, находящиеся в клетках человека и в составе биопленок. 11 табл.

 

Изобретение относится к синтетическим биологически активным веществам гетероциклического ряда, обладающим противомикробной активностью, и представляет собой продукты модификации известного β-лактамного антибиотика - ампициллина, включая все пространственные изомеры заявляемого вещества, все их таутомерные и солевые формы; изобретение может быть использовано при лечении заболеваний, вызванных инфекциями, а также для аналогичных целей в ветеринарии.

Антибиотики пенициллинового ряда имеют огромное значение в терапии бактериальных инфекций, продолжая оставаться одной из важнейших и широко применяемых групп противомикробных препаратов. Появление в 1940 г. в медицинской практике пенициллина было выдающимся достижением, позволившим эффективно лечить многие опасные инфекции. В дальнейшем было создано много других препаратов пенициллинового ряда, что значительно расширило возможности терапии инфекционных заболеваний [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп.- М.: Новая Волна, 2006. - 1206 с.]. Тем не менее, поиск новых, более эффективных антибиотиков продолжается и в настоящее время. Необходимость создания новых антибиотиков связана с появлением микробных штаммов, устойчивых к существующим препаратам, и открытием возможности жизни микробов в составе сообществ, получивших название «биопленки». Бактериальные биопленки представляют собой основную форму существования микробов в естественных условиях, в том числе в организме животных и человека. В биопленках бактерии и грибы защищены от факторов окружающей среды дополнительными оболочками, не дающими антибиотикам достигнуть микробных клеток (Davies D. Understanding biofilm resistance to antibacterial agents. Nat Rev Drug Discov 2003; 2:114-122; Campanac C., Pineau L., Payard A., Baziard-Mouysset G., Roques C. Interactions between Biocide Cationic Agents and Bacterial Biofilms. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46: 1469-1474; Tetz V.V., Korobov V.P., Artemenko N.K., Lemkina L.M., Panjkova N.V., Tetz G.V. Extracellular phospholipids of isolated bacterial communities Biofilms 2004; 1:149-155; B.B.Тец, А.Л.Бобров, Л.Ю.Орехова, Д.В.Левкович, Д.С.Щербакова, Г.В.Тец, А.А.Доморад.).

Известные антибиотики пенициллинового ряда, в том числе его полусинтетические производные, плохо проникают в человеческие клетки и бактериальные биопленки, в результате слабо действуют на находящиеся в них бактерии, что способствует ускорению изменчивости образующих их бактерий и, как было недавно показано, повышают риск формирования хронических инфекций (Anderl, J.N., Franklin M.J., Stewart P.S. Role of antibiotic penetration limitation in Klebsiella pneumoniae biofilm resistance to ampicillin and ciprofloxacin. Antimicrob. Agents Chemother. 2000. 44:1818-1824. Zahller J., Stewart P.S. Transmission Electron Microscopic Study of Antibiotic Action on Klebsiella pneumoniae Biofilm Antimicrob Agents Chemother. 2002; 46: 2679-2683).

Наиболее близким по химическому строению и назначению к заявленному противомикробному веществу является антибиотик ампициллин, который был выбран в качестве прототипа, см. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Медицина, часть 2.- М., 1985, стр.212-215.

Ампициллин обладает широким спектром антибактериальной активности, имеет низкую токсичность.

Фармакокинетика ампициллина позволяет использовать препарат для лечения инфекций различной локализации.

Однако ампициллин не действует на бактерии, находящиеся в клетках человека и животных, и слабо действует на бактерии, находящиеся в составе бактериальных биопленок.

Задача изобретения состоит в создании биологически активного вещества с высокой антибактериальной активностью и широким спектром действия, эффективно действующим на бактерии, находящиеся в клетках человека и в составе биопленок.

Поставленная задача решается путем синтеза противомикробных веществ общей формулы (I):

где R выбран из группы: H, метил, этил, н-алкил (C3-C9), фенил;

X1 и X3 выбраны из группы: CH2, О или N (NH или NR, где R - метил, этил, линейный или разветвленный алкил, алкенил или циклоалкил C3-C10, CH2CH2OEt, CH2CH2CH2OMe, Ph, производное бензола, замещенное один или несколько раз линейным или разветвленным алкилом, алкенилом или циклоалкилом C1-C9, галогеном (F, C1 или Br), CF3, метоксигруппой или другой алкоксигруппой, карбоксилом или карбоксиалкилом либо одновременно несколькими из перечисленных заместителей, CH2Ph, CH2CH2Ph, CH(CH3)Ph, CH2C6H4(OMe-p), CH2C6H4(F-p), CH2CH2C6H4(F-p), CH2CH2C6H3(3,4-диOMe); 2-фурилметил, 2-(2-тиенил)этил;

X2 выбран из группы: C=O, C=S, CH2, CMe2, C(C5H10-цикло).

Изобретение распространяется на все пространственные изомеры заявляемых веществ, все их таутомерные и солевые формы.

Заявляемые вещества общей формулы (I) могут применяться в виде нейтральных форм или в виде солей с катионами натрия, калия, лития, аммония, магния, кальция или другими фармакологически приемлемыми катионами.

Таблица 1
Структура наиболее активных заявляемых производных ампициллина общей формулы I
Субстанция № R X1 X2 X3
H NH C=O NH
H NH C=O NMe
H NMe C=O NMe
H N-н-Нех C=O NH
H NCH2Ph C=O NH
H NCH2C6H4OMe-p C=O NH
H NMe C=S NMe
H NCH2CH=CH2 C=S NH
H N-Циклопропил C=S NH
H NC6H5 C=S NH
H N-o-Толил C=S N-o-Толил
H О CMe2 O
H CH2 CH2 CH2
H N-CH2CH2OEt C=S NH
1п H N-Циклогексил C=S NH
H NC6H4OMe-p C=S NH
Me NMe C=O NMe

Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о технических решениях, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «Новизна».

Биологическая активность обнаруживается в той или иной степени у всех представителей данной группы при R, X1, X2, X3, перечисленных в общей формуле (I). Способ синтеза заявляемого вещества является также общим для всех членов группы. Таким образом, принципиальное значение имеет не конкретная структура радикалов и заместителей R, X1, X2, X3, которая влияет лишь на количественный уровень биологической активности, а принадлежность этих радикалов к химическим группам, перечисленным в общей формуле (I).

Заявителем не выявлены источники, в которых содержались бы сведения о влиянии отличительных признаков изобретения на достигаемый технический результат. Указанное новое свойство объекта обусловливает, по мнению заявителя, соответствие изобретения критерию «Изобретательский уровень».

Заявляемые вещества синтезируют в соответствии со Схемой 1. Расшифровка радикалов в структуре промежуточных реагентов 2, 3 и 4 приведена под Схемой 1, а в целевых веществах 1 - в Таблице 1.

Схема 1

R1=H (1a-p, 3a-p), R1=Me (1c, 3c)

X1=X3=H, X2=CO (1а, 2а, 3а); X1=NMe, X2=CO, X3=NH (1б, 2б, 3б); X1=X3=NMe, X2=CO (1в,с, 2в,с, 3в,с); X1=N-н-Hex, X2=CO, X3=NH (1г, 2г, 3г); X1=NCH2Ph, X2=CO, X3=NH (1д, 2д, 3д); X1=NCH2C6H4OMe-p, X2=CO, X3=NH (1e, 2e, 3e); X1=X3=NMe, X2=CS (1ж, 2ж, 3ж); X1=NCH2CH=CH2, X2=CS, X3=NH (1з, 2з, 3з); X1=N-Циклопропил, X2=CS, X3=NH (1и, 2и, 3и); X1=NC6H5, X2=CS, X3=NH (1к, 2к, 3к); X1-X3=N-о-Толил, X2=CS (1л, 2л, 3л); X1=X3=O, X2=СМе2 (1 м, 2 м, 3м); X1=X2=X3=CH2 (1н, 2н, 3н); X1=N-CH2CH2OEt, Х2=CS, X3=NH (1o, 2o, 3o); X1=N-Циклогексил, X2=CS, X3=NH (1п, 2п, 3п); X1=NC6H4OMe-p, X2=CS, X3=NH (1p, 2p, 3p).

Синтез заявляемого вещества для всех членов группы состоит из двух основных этапов.

1) Получают β-трикарбонильный реагент (3) из соответствующего циклического β-дикарбонильного реагента (2) (производного барбитуровой, 2-тиобарбитуровой кислот, кислоты Мельдрума или циклогексан-1,3-диона) путем ацилирования (формилирования) соответствующим ацилирующим (формилирующим) агентом. Полученный реагент 3 очищают либо используют в сыром виде (без очистки).

2) Получают целевое соединение (1a-c) из синтезированного на первом этапе реагента 3 и ампициллина (4).

Синтез может проводиться в одну или две стадии. Процесс синтеза целевых соединений 1а-с считается одностадийным, если промежуточный реагент 3 используется без очистки, а если реагент 3 выделяется в чистом виде, то процесс считается двухстадийным.

Сущность изобретения поясняется приведенными ниже примерами синтеза промежуточных веществ, примерами синтеза заявленного вещества, таблицами выходов и характеристик целевых веществ и таблицами результатов экспериментов по определению биологических свойств заявляемых веществ, где:

примеры 1 - конкретный вариант выполнения 1-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение промежуточного реагента 3);

примеры 3 и 4 - конкретные варианты выполнения 2-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение целевых веществ 1a-c);

эксперимент 1 - определение антибактериальной активности;

эксперимент 2 - определение активности заявляемых веществ против резистентных бактериальных штаммов;

эксперимент 3 - определение острой токсичности;

таблица 1 - структура наиболее активных представителей заявляемых веществ 1a-c;

таблица 2 - исходные реагенты и выход целевых веществ 1a-c;

таблица 3 - данные спектров 1Н ЯМР целевых веществ 1a-c;

таблица 4 - данные элементного анализа целевых веществ 1a-c;

таблица 5 - результаты определения антибактериальной активности заявляемых веществ in vitro в сравнении со стандартами;

таблица 6 - результаты определения активности заявляемых веществ против резистентных бактериальных штаммов;

таблица 7 - результаты определения острой токсичности заявляемых веществ.

Пример 1. Вариант выполнения 1-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение промежуточного β-трикарбонильного реагента 5-формилбарбитуровой кислоты (3а)).

Схема 2

В плоскодонную колбу вместимостью 100 мл, снабженную обратным воздушным холодильником, загружают 6.4 г (0.05 моль) барбитуровой кислоты 2а, 20 мл диметилформамида и 7.4 г (0.05 моль) триэтилового эфира ортомуравьиной кислоты 5. Колбу нагревают до 120°C с постепенной отгонкой выделяющегося конденсата и выдерживают при этой температуре 15 мин. Затем охлаждают реакционную смесь до комнатной температуры, добавляют 50 мл эфира и перемешивают. Осадок отфильтровывают, промывают эфиром и сушат. Получают 6.1 г продукта 3а в виде светло-желтых кристаллов с Тпл>250°C (разл).

Пример 2. Вариант выполнения 1-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение промежуточного β-трикарбонильного реагента - 1,3-диметил-5-формилбарбитуровой кислоты (3в)).

Схема 3

В плоскодонную колбу вместимостью 100 мл, снабженную обратным воздушным холодильником, загружают 6.24 г (0.04 моль) 1,3-диметилбарбитуровой кислоты 2в и 7.4 г (0.05 моль) триэтилового эфира ортомуравьиной кислоты 5. Колбу помещают на масляную баню при 70°C и в течение 10 мин доводят температуру бани до 120°C с постепенной отгонкой выделяющегося конденсата. Затем охлаждают реакционную смесь до 60°C и промывают горячим гексаном. Гексановый экстракт сливают с осадка, а осадок растворяют без нагревания в 40 мл водного раствора 1.6 г (0.04 моль) NaOH. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр, фильтрат охлаждают до 10°C и подкисляют концентрированной соляной кислотой до pH 1. Выделившийся осадок промывают холодной водой и сушат в вакуум-эксикаторе над P2O5. Получают 6.6 г продукта 3в в виде светло-желтых кристаллов с Тпл 111°C.

По аналогичной методике получают другие β-трикарбонильные реагенты 3б, г-с из соответствующих циклических β-дикарбонильных соединений 2.

Пример 3. Вариант выполнения 2-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение целевого вещества - 3,3-диметил-7-оксо-6-[(2-{[(2,4,6-триоксотетрагидропиримидин-5(2H)-илиден)фенил]амино}пропаноил)амино]-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновой кислоты (1a)).

Схема 4

В колбе вместимостью 150 мл растворяют при нагревании 0.01 моль (3.49 г) ампициллина 4 (или эквивалентное количество натриевой соли ампициллина) в 50 мл воды. К этому раствору приливают горячий раствор 0.01 моль (1.84 г) 5-формилбарбитуровой кислоты 3a и 0.02 моль (1.64 г) ацетата натрия в 30 мл воды. Полученную реакционную смесь нагревают 30 мин при 70°C, затем охлаждают до комнатной температуры и подкисляют соляной кислотой до pH 1-2. Выделившийся осадок фильтруют, промывают водой, затем водным спиртом и сушат в вакуум-эксикаторе над P2O5. Получают 4.12 г продукта 1а в виде кристаллического порошка светло-желтого цвета. Выход 80%.

Пример 4. Вариант выполнения 2-го этапа синтеза заявляемого вещества - получение целевого вещества - 3,3-диметил-7-оксо-6-[(2-{[(1,3-диметил-4,6-диоксо-2-тиоксотетрагидропиримидин-5(2H)-илиден)фенил]амино}пропаноил)амино]-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновой кислоты (1з).

Схема 5

В колбу вместимостью 100 мл, снабженную обратным воздушным холодильником, загружают 6.24 г (0.04 моль) 1,3-диметил-2-тиобарбитуровой кислоты 2ж и 7.4 г (0.05 моль) триэтилового эфира ортомуравьиной кислоты. Колбу помещают на масляную баню при 70°C и в течение 10 мин доводят температуру бани до 110°C с постепенной отгонкой выделяющегося конденсата. Затем охлаждают реакционную смесь до комнатной температуры, добавляют к ней 60 мл водного раствора 0.1 моль ацетата натрия и перемешивают при 30°C 10 мин. Нерастворенный остаток отфильтровывают, фильтрат переносят в колбу вместимостью 200 мл и добавляют 0.04 моль ампициллина 4. Реакционную смесь нагревают 30 мин при 70°C, затем фильтруют, фильтрат охлаждают до комнатной температуры и подкисляют соляной кислотой до pH 1-2. Выделившийся осадок фильтруют, промывают водой, затем водным спиртом и сушат в вакуум-эксикаторе над P2O5. Получают 13.43 г продукта 1ж в виде кристаллического порошка кремового цвета.

Пример 5. Вариант выполнения 2-го этапа синтеза заявляемого вещества 1 (Общий метод синтеза, см. Схему 1).

В колбе вместимостью 150 мл растворяют при нагревании 0.01 моль ампициллина 4 (или эквивалентное количество натриевой соли ампициллина) в 50 мл воды. К этому раствору приливают горячий раствор 0.01 моль β-трикарбонильного реагента 0.02 моль (1.64 г) ацетата натрия в 30 мл воды. Полученную реакционную смесь нагревают 30 мин при 70°C, затем охлаждают до комнатной температуры и подкисляют соляной кислотой до pH 1-2. Выделившийся осадок фильтруют, промывают водой, затем водным спиртом и сушат в вакуум-эксикаторе над P2O5. Выход целевого продукта 1а-с приведен в таблице 2, спектральные характеристики и данные элементного анализа - в таблицах 3 и 4.

Таблица 2
Исходные реагенты для синтеза и выход целевых веществ
Номер целевого вещества Исходный β-трикарбонильный реагент Метод синтеза (№ Примера) Выход целевого вещества, %
3 78
5 78
5 76
4 71
5 82
5 79
5 85
5 88
5 83
5 80
5 80
5 80
5 69
5 64
5 67
5 85
1п 3п 5 82
5 82
5 45
Таблица 3
Данные спектров 1H целевых веществ в ДМСО-d6
№ вещест-
ва
Химический сдвиг, в м.д.
CMe2, с+с CHCOO с∗ CH-CH, 2H, м CHP h д∗ ArH м =CH, д∗ NHCO с∗ NHC= д∗ Другие H
1.43+1.50 4.13 5.45 5.61 7.33 8.02 9.35 10.45 10.61+10.74 (2H, с+с, NH)
1.40+1.52 4.13 5.41 5.63 7.30 8.08 9.39 10.50 3.12 (3H, c, NMe), 10.72 (1H, с, NH)
1.33+1.45 4.10 5.34 5.49 7.22 8.15 8.74 10.55 3.08+3.19 (6H, с+с, NMe)
1.42+1.47 4.11 5.40 5.63 7.30 8.08 9.39 10.50 0.92 (3H, т, Me), 1.20-1.42 (8H, м, CH2), 3.62 (2H, кв, NCH2), 10.66 (1H, с, NH)
1.45+1.53 4.16 5.41 5.61 7.23 10H 8.15 9.27 10.85 4.93 (2H, д, аб-система, NCH2), 10.68 (1H, с, NH)
1.45+1.53 4.16 5.41 5.60
Продолжение таблицы 3
1.36+1.44 4.11 5.35 5.47 7.25 8.10 8.53 11.26 3.52+3.58 (6Н, с+с, NMe)
1.43+1.50 4.15 5.45 5.66 7.29 8.16 9.37 11.08 4.83 (2H, д, NCH2), 5.11 (2H, м, =CH2), 5.80 (1H, м, -CH=), 10.66 (1H, с, NH)
1.34+1.46 4.15 5.37 5.60 7.26 8.19 9.43 11.04 0.75+1.12 (4H, м+м, CH2CH2), 2.66 (1H, м, NCH), 11.70+11.91 (1H, с+с, NH)
1.44+1.50 4.13 5.42 5.67 7.35 10H 8.25 9.42 11.05 11.03 (1H, с, NH)
1.45+1.47 4.11 5.40 5.55 7.50 13H 8.12 9.51 11.26 2.17+2.19 (6H, с+с, NMe)
1.45+1.53 1.62+1.66 4.12 5.33 5.71 7.29 8.26 9.11 10.92
Продолжение таблицы 3
1.40+1.52 4.15 5.30 5.42 7.23 7.88 8.94 10.61 1.83 (2H, м, CH2), 2.41 (2H, м, 2CH2)
1.33+1.45 4.13 5.41 5.59 7.42 8.24 9.45 11.10 1.13 (3H, т, Me), 3.51 (4H, м, NCH2+O CH2), 4.44 (2H, т, OCH2)
1п 1.41+1.50 4.14 5.42 5.62 7.40 8.19 9.36 11.08 1.20-2.45 (10H, м, 5CH2), 4.37 (1H, NCH)
1.45+1.51 4.15 5.42 5.60 6.97 4Н
7.43 5Н
8.21 9.49 11.03 3.78 (3H, с, OMe)
1.36+1.41 4.10 5.34 5.49 7.32 - 8.79 10.94 2.56 (3H, с, =CMe), 3.14 (6H, с, NMe)
∗ Примечание. Для веществ 1б, г-е, з-к, о-р характерно удвоение данных сигналов из-за Z/E изомерии относительно енаминовой двойной связи
Таблица 4
Данные элементного анализа целевых веществ
№ вещества Найдено, % Брутто-формула Вычислено, %
С Н N C H N
51.74 4.34 14.37 C21H21N5O7S 51.74 4.34 14.37
52.51 4.60 13.88 C22H23N5O7S 52.69 4.62 13.96
53.65 4.91 13.52 C23H25N5O7S 53.58 4.89 13.58
56.99 5.87 12.13 C27H33N5O7S 56.73 5.82 12.25
58.04 4.78 12.00 C28H27N5O7S 58.22 4.71 12.12
57.44 4.89 11.41 C29H29N5O8S 57.32 4.81 11.53
51.75 4.86 13.01 C23H25N5O6S2 51.97 4.74 13.17
52.86 4.77 12.74 C24H25N5O6S2 53.03 4.64 12.88
52.91 4.73 12.80 C24H25N5O6S2 53.03 4.64 12.88
55.70 4.44 11.95 C27H25N5O6S2 55.95 4.35 12.08
61.35 4.99 10.12 C35H33N5O6S2 61.48 4.86 10.24
54.68 5.21 8.20 C23H25N3O8S 54.86 5.00 8.35
58.34 5.48 8.66 C23H25N3O6S 58.59 5.34 8.91
53.90 5.57 12.03 C25H29N5O7S2 52.16 5.08 12.17
1п 55.12 5.39 11.74 C27H31N5O6S2 55.37 5.33 11.96
55.09 4.55 11.42 C28H27N5O7S2 55.16 4.46 11.49
54.37 5.18 13.14 C24H27N5O7S 54.43 5.14 13.22

Примеры изучения биологической активности

Пример 6.

Определение эффективности вещества в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий.

В экспериментах использованы стандартные коллекционные штаммы и бактерии, выделенные от больных. Оценку проводили методом серийных разведений с использованием питательных сред, пригодных для культивирования соответствующих видов микроорганизмов.

Соединения растворяли в стерильной воде и титровали в концентрациях от 500 до 0,025 мг/л. Концентрация препарата в среде соседних пробирок отличалась в два раза. Результат учитывали после 72-часового культивирования бактерий при 37°C (таблица 5).

Таблица 5
Минимальная подавляющая концентрация полученных соединений
Соединение МИК, мг/л
S. aureus E. coli M. smegmatis
Ампициллин
Контроль
0.05 1.5 12.5
0.03 12.5 12.0
1.5 5.0 12.0
1.0 5.0 12.0
0.25 3.5 6.2
0.012 1.0 12.0
0.05 3.0 6.2
0.05 5.0 6.2
0.05 5.0 6.2

Полученные результаты свидетельствуют, что заявляемые соединения сопоставимы с ампициллином по уровню и спектру антимикробной активности, а некоторые превосходят по определенным параметрам прототип - ампициллин.

Пример 7.

Действие на S. aureus, находящиеся в составе биопленок

Таблица 6
Выживание S. aureus в биопленках при действии заявляемых соединений (24-часовое действие)
Антибиотик Число КОЕ (Log10)
Контроль 9.9±0.76
Ампициллин 9.78±0.64
8.27±0.34
8.35±0.82
8.32±0.45
8.02±0.16
8.27±0.62
7.47±0.72
8.18±0.24
8.12±0.72

Представленные данные указывают, что заявляемые соединения, в отличие от прототипа - ампициллина, активны против стафилококков, находящихся в составе биопленок.

Пример 8.

Действие на S. pyogenes, находящиеся в составе биопленок

Таблица 7
Выживание S. pyogenes в биопленках при действии заявляемых соединений (24-часовое действие)
Антибиотик Число КОЕ (Log10)
Контроль 8.41±0.76
Ампициллин 8.15±0.66
7,46±0.40
6.44±0.87
7.05±0.15
7.50±0.70
6.24±0.54
7,20±0.34
8.00±0.65
7.75±0.23

Представленные данные указывают, что заявляемые соединения, в отличие от прототипа - ампициллина, активны против стрептококков, находящихся в составе биопленок.

Пример 9.

Действие на E. coli, находящиеся в составе биопленок

Таблица 8
Выживание в биопленках при действии заявляемых соединений (24-часовое действие)
Испытуемое вещество Число КОЕ (Log10)
Контроль (добавлен растворитель) 8.97±0.48
Ампициллин 8.64±0.62
7.50±0.15
7.15±0.32
7.27±0.55
7,54±0.34
7.11±0.65
7.72±0.52

Представленные данные указывают, что заявляемые соединения, в отличие от прототипа - ампициллина, активны против грамотрицательных эшерихий, находящихся в составе биопленок.

Пример 10.

Действие на K. pneumoniae, находящиеся в составе биопленок

Таблица 9
Выживание K. pneumoniae в биопленках при действии заявляемых соединений (24-часовое действие)
Испытуемое вещество Число КОЕ (Log10)
Контроль (добавлен растворитель) 8.79±0.72
Ампициллин 8.57±0.74
7.49±0.54
7.37±0.14
8.00±0.27
7.78±0.76
7.02±0.44
7.78±0.76

Представленные данные указывают, что заявляемые соединения, в отличие от прототипа - ампициллина, активны против грамотрицательных клебсиелл, находящихся в составе биопленок.

Пример 11.

Действие на A. baumannii, находящиеся в составе биопленок

Таблица 10
Выживание A. baumannii в биопленках при действии заявляемых соединений (24-часовое действие)
Испытуемое вещество Число КОЕ (Log10)
Контроль (добавлен растворитель) 8.54±0.87
Ампициллин 8.48±0.43
8.11±0.46
7.71±0.15
7.51±0.38
7.79±0.85
7.51±0.75
6.61±0.55
7.67±0.45
7.41±0.55

Представленные данные указывают, что заявляемые соединения, в отличие от прототипа - ампициллина, активны против A. baumannii, находящихся в составе биопленок.

Пример 12.

Проникновение заявляемых соединений на S.sonnei, находящиеся внутри клеток

Для выполнения исследования клетки HeLa инфицировали 24-часовой культурой S.sonnei, предварительно отмытой двукратным центрифугированием от питательной среды и ресуспендированной в фосфатном буфере. После 4-часовой экспозиции все бактерии, не проникшие в клетки, были убиты гентамицином, обладающим бактерицидным действием и не проникающим в клетки эукариот. После экспозиции с гентамицином среду вместе с антибиотиком (гентамицином) удаляли и добавляли свежую среду с испытуемыми препаратами или без них.

Таблица 11
Действие заявляемых соединений на S.sonnei, находящиеся внутри клеток
N Вещество Число неповрежденных клеток
1. Интактные клетки 8000 (100%)
2. ДМСО 8000 (100%)
3. Инфицированные клетки 6000 (75%)
4. Ампициллин 6200 (77,5%)
5. 7200 (90%)
6. 7800 (97,5%)
7. 7500 (93,75%)

Полученные результаты свидетельствуют, что заявляемые соединения в отличие от прототипа проникают в клетки человека и действуют на находящиеся в них бактерии.

Приведенные выше примеры подтверждают высокую антибактериальную активность веществ общей формулы (I), широкий спектр действия и, что весьма важно, эффективное воздействие на бактерии, находящиеся в клетках человека и в составе биопленок.

Противомикробное вещество с общей формулой

где R выбран из группы: Н, метил, этил, н-алкил (С3-С9), фенил;
X1 и Х3 выбраны из группы: СН2, О или N (NH или NR, где R - метил, этил, линейный или разветвленный алкил, алкенил или циклоалкил С3-С10, CH2CH2OEt, CH2CH2CH2OMe, Ph, производное бензола, замещенное один или несколько раз линейным или разветвленным алкилом, алкенилом или циклоалкилом С1-С9, галогеном (F, Сl или Вr), СF3, метоксигруппой или другой алкоксигруппой, карбоксилом или карбоксиалкилом, либо одновременно несколькими из перечисленных заместителей, CH2Ph, CH2CH2Ph, СН(СН3)Рh, СН2С6Н4(ОМе-р), СН2С6H4(F-p), СН2СН2С6Н4(F-p), СН2СН2С6Н3(3,4-диОМе); 2-фурилметил, 2-(2-тиенил)этил;
Х2 - выбран из группы: C=O, C=S, CH2, СМе2, С(С5Н10-цикло).



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области химии, точнее касается способа получения моногидрохлоридов и натриевых солей таутомерных 5(6)-алкоксикарбонилпроизводных бензимидазол-3-гидроксида, проявляющих высокую противогрибковую активность, имеющих формулы I, II: Поиск малотоксичных соединений с противогрибковой активностью является актуальной проблемой.

Изобретение относится к ветеринарной медицине. .
Изобретение относится к микробиологии, биотехнологии и фтизиатрии, в частности к производству антибиотиков. .
Изобретение относится к микробиологии, биотехнологии и фтизиатрии, в частности к производству антибиотиков. .

Изобретение относится к области фармакологии и медицины, конкретно к жидким водным фармацевтическим композициям амброксола, жидким лекарственным средствам на ее основе (например, сироп, раствор или элексир).
Изобретение относится к медицине и найдет применение при лечении вирусных респираторных инфекций. .
Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения детей с кишечными коликами. .

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается способа получения парентерального фармацевтического раствора противоопухолевого действия на основе производных таксанов, включающего растворение производного таксана в этаноле, введение поверхностно-активного вещества и последующее удаление этанола, отличающегося тем, что удаление этанола осуществляют путем барботирования инертного газа через полученный этанольный раствор при комнатной температуре.

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается комбинации, предназначенной для ингибирования роста клеток опухоли, включающей цитотоксичное соединение, выбранное из соединений камптотецина; антиметаболитов; алкалоидов барвинка; таксанов; соединений платины; ингибиторов топоизомеразы 2; и комбинации двух или более из указанных классов, или ингибитор передачи сигнала, выбранного из антител, мишенью которых является рецептор EGPR; ингибиторов тирозинкиназы EGFR; антител, мишенью которых является рецепторная система VEGF/VEGF; ингибиторов PDGFR; ингибиторов Raf и ингибиторов передачи РКВ, в эффективном количестве и соединение формулы (IV).

Изобретение относится к новым соединениям, - ариламидразоновым производным формулы (I), где R1 представляет собой С2-С8алкильную группу или С2 -С8алкокси группу, которые могут быть замещены галогеном или С1-С8алкокси группой; 5-7-членный ароматический гетероцикл, содержащий 1 или 2 атома кислорода, азота или серы, или фенил, которые могут быть замещены галогеном, С1 -С8алкильной группой, галоС1-С8 алкильной группой или C1-C8алкокси группой; или -NR4R5; R2 и R3 одинаковые или отличные друг от друга, и каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, галогенС1-С 8алкильную группу, С1-С8алкильную группу, С2-С6алкинильную группу, C 1-C8алкокси группу, цианогруппу, С2 -С6алканоильную группу или C1-С8 алкилсульфонильную группу; А представляет собой бензольное, пиридиновое, хинолиновое или изохинолиновое кольцо; D представляет собой простую связь или метилен; m имеет значение от 1 до 3, и n представляет от 1 до 5, обладающим антагонистическим действием в отношении S1P3 рецепторов, а так же к лекарственным средствам и фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения в качестве активного ингредиента.

Изобретение относится к продукту - оксиморфона гидрохлориду, обладающему анальгетической активностью и содержащему менее 10 ч./млн. .

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается противораковой композиции, содержащей: а) терапевтически эффективное количество 13-дезоксиантрациклина указанной ниже формулы, где каждый из R1, R2, R3 , R4, R5 и R6 имеет указанные в формуле значения, и б) терапевтически эффективное количество таксана.

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности, а именно к комбинации, содержащей ацетоциклопропил-таксотер и трастузумаб, предназначенной для лечения рака молочной железы, для лечения разновидностей рака, резистентных к таксоидам.

Изобретение относится к способу получения 10-деацетилбаккатина III, чистотой более 99%, не содержащего 10-деацетил-2-дебензоил-2-пентеноилбаккатин III. .
Наверх