Способ моделирования химического гастрита


 


Владельцы патента RU 2442227:

Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова" (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине, ветеринарии и касается моделирования химического гастрита у животных. Для этого неинбредным белым крысам в течение 21 дня перорально вводят смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен из расчета 5 мг/кг за 1 час до кормления 1 раз в сутки. Способ обеспечивает создание модели, обладающей 100% воспроизводимостью и наиболее полно отражающей морфологическую картину поражения слизистой оболочки желудка при химическом гастрите у животных в ветеринарной практике, что может быть использовано для изучения патогенеза гастрита у животных и исследования эффективности новых методов лечения данной патологии.

 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, а именно к ветеринарной гастроэнтерологии, экспериментальной медицине, патологической физиологии, и может быть использовано для изучения патогенеза химического гастрита, вызванного приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) у животных и проведения доклинической апробации новых методов лечения этой патологии.

Известно несколько вариантов моделирования химического гастрита, вызванного приемом НПВП в эксперименте. Blandizzi et аl. моделировали химический гастрит у крыс мужского пола линии Спрейг-Доули, используя перорально следующие агенты: диклофенак (60 ммоль/кг), пироксикам 150 ммоль/кг (Blandizzi, С. Lansoprazole prevents experimental gastric injury induced by non-steroidal anti-inflammatory drugs through a reduction of mucosal oxidative damage /C.Blandizzi, M.Fornai, R.Colucci et al. //World J. Gastroenterol. - 2005. - Vol.11. - №26. - P.4052-4060). При этом авторы отмечают у экспериментальных животных появление воспалительной инфильтрации в слизистой оболочке желудка (полиморфноядерными лейкоцитами), в том числе собственной пластинки, эрозии и язвы слизистой оболочки желудка. Однако по современным данным эрозии и язвы слизистой оболочки желудка, возникающие в результате моделирования химического гастрита по данной методике при использовании различных НПВП, не являются типичными для химического гастрита.

Наиболее близким аналогом является способ моделирования данной патологии, предложенный Vaananen et al., 1992, при котором у крыс, получавших перорально однократно индометацин в дозе 20 мг/кг, отмечалось формирование макроскопически видимых повреждений слизистой оболочки желудка (СОЖ) (Vaananen, P.M. Pharmacological investigation of the role of leukotrienes in the pathogenesis of experimental NSAID gastropathy /P.M.Vaananen, C.M.Keenan, M.B.Grisham, J.L.Wallace //Inflammation. - 1992, Jun. - Vol.16. - №3. - P.227-240). Одновременно у другой экспериментальной группы использовали внутривенное введение индометацина в дозе 20 мг/кг. Наибольшие повреждения слизистой оболочки желудка были получены при пероральном введении препарата.

Недостатками данного способа являются использование индометацина - НПВП, как препарата, чрезвычайно редко применяемого в ветеринарии для воспроизведения в эксперименте химического гастрита, и отсутствие таких патогномоничных для химического гастрита, вызванного приемом НПВП, гистологических признаков, как изменения ямочного эпителия и гипертрофия гладких мышц в стенке желудка на фоне минимально выраженных воспалительных явлений в СОЖ (Sobala, G.M. Reflux gastritis in the intact stomach /Sobala G.M., King R.F., Axon A.T., Dixon M.F.//J.Clin. Pathol. - 1990, Apr. - Vol.43. - 34. - P.303-306. Комптон К.К. Гастрит: новое в патоморфологической классификации и диагностике. /К.К.Комптон. //Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 1998. - №3. - С.84-80). Поэтому разработка оптимального, приближенного к реальным условиям варианта моделирования химического гастрита, вызванного приемом НПВП, является на сегодняшний день актуальной научно-практической задачей ветеринарной науки.

Технический результат: создание модели, наиболее полно отражающей морфологическую картину поражения слизистой оболочки желудка при химическом гастрите, вызванном приемом НПВП, у животных с использованием НПВП, применяемых в повседневной ветеринарной практике.

Указанная задача достигается путем перорального введения неинбредным белым крысам в течение 21 дня за 1 ч до кормления 1 раз в сутки смеси 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен («МЕРИАЛ», Франция; международное непатентованное название - Кетопрофен) из расчета 5 мг/кг.

Способ осуществляют следующим образом. Неинбредным белым крысам (самцам и самкам) в течение 21 дня за 1 ч до кормления 1 раз в сутки вводят смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен («МЕРИАЛ», Франция; международное непатентованное название - Кетопрофен) из расчета 5 мг/кг. По окончании эксперимента животных забивают под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии, материал (стенку желудка) фиксируют в 10% забуференном по Лилли (рН 7,2) формалине. Используя общепринятые методики, готовят гистологические препараты, в которых выявляют типичные гистологические признаки химического гастрита: гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, увеличение количества обкладочных (париетальных) клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток, отек собственной пластинки слизистой оболочки.

Эксперимент выполнен на 50 животных - самцах и самках неинбредных белых крыс четырехмесячного возраста, содержащихся в стандартных условиях вивария. Все эксперименты проведены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

Животные были разделены на 2 экспериментальные группы, состав групп был следующий:

I группа - контрольная (интактные животные), n=25;

II группа - животные, получавшие в течение 21 дня за 1 ч до кормления 1 раз в сутки смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен («МЕРИАЛ», Франция; международное непатентованное название - Кетопрофен) из расчета 5 мг/кг, n=25.

На 22-й день от начала эксперимента животных выводили из эксперимента путем перерезки спинного мозга под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. При проведении аутопсии гистологические образцы, полученные из различных отделов желудка крысы (пищеводный, кардиальный, пилорический отделы), фиксировали в 10% забуференном по Лилли формалине (рН 7,2), обезвоживали в спиртах восходящей крепости, заливали в парафин, срезы (3-4 мкм) получали на ротационном микротоме, наносили на стекла с адгезивным покрытием (яичный альбумин), окрашивали гематоксилином, и эозином, и пикрофуксином по ван Гизону.

При проведении гистологического исследования у всех животных, получавших в течение 21 дня за 1 ч до кормления 1 раз в сутки смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен («МЕРИАЛ», Франция; международное непатентованное название - Кетопрофен) из расчета 5 мг/кг, отмечали появление гистологических признаков, патогномоничных для химического гастрита: уменьшение количества главных клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка на фоне увеличения количества эозинофильно окрашенных париетальных клеток, продуцирующих соляную кислоту, гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток и ее отек.

Примеры конкретного выполнения

Пример 1. Самке неинбредной белой крысы, массой 186 г, в течение 21 дня перорально в течение 21 дня за 1 ч до кормления 1 раз в сутки вводили смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен из расчета 5 мг/кг. На 22-е сутки животное было умерщвлено под эфирным наркозом путем перерезки спинного мозга, проведено гистологическое исследование стенки желудка.

При исследовании гистологических образцов в проходящем свете светового микроскопа выявлены выраженное полнокровие сосудов и отек собственной пластинки слизистой оболочки и подслизистой основы желудка в пищеводном, кардиальном, фундальном и пилорическом отделах. В железистой части слизистой оболочки желудка отмечались гиперплазия ямочного эпителия, локальное уменьшение количества слизистых клеток, увеличение количества париетальных клеток в дне желез слизистой оболочки желудка, гипертрофия мышечной пластинки слизистой оболочки, появление в собственной пластинке слизистой оболочки желудка большого количества гладких миоцитов. Выявленные изменения соответствуют гистологической картине химического гастрита, вызванного приемом НПВП.

Пример 2. Самцу неинбредной белой крысы, массой 178 г, в течение 21 дня перорально за 1 час до кормления 1 раз в сутки вводили смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен из расчета 5 мг/кг. На 22-е сутки животное было умерщвлено под эфирным наркозом путем перерезки спинного мозга с соблюдением правил эвтаназии, проведено гистологическое исследование стенки желудка.

При микроскопии гистологических образцов отмечались выраженное полнокровие сосудов и отек собственной пластинки слизистой оболочки и подслизистой основы желудка в пищеводном, кардиальном, фундальном и пилорическом отделах. В железистой части слизистой оболочки желудка выявлены гиперплазия ямочного эпителия, локальное уменьшение количества слизистых клеток, уменьшение количества главных клеток за счет преобладания обкладочных клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка, гипертрофия мышечной пластинки слизистой оболочки, появление в собственной пластинке слизистой оболочки желудка большого количества гладкомышечных клеток.

Таким образом, у данного животного ежедневное пероральное введение 5% раствора аскорбиновой кислоты в сочетании с нестероидным противовоспалительным препаратом (Кетофен) также привело к развитию химического гастрита, что было подтверждено результатами гистологического исследования.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа состоит в создании экспериментальной модели химического гастрита, обусловленного приемом НПВП, часто используемых в ветеринарной практике, обладающей 100%-ной воспроизводимостью и соответствующей по гистологической картине химического гастрита, наблюдаемого в ветеринарной практике.

Способ моделирования химического гастрита путем перорального введения крысам нестероидного противовоспалительного препарата, отличающийся тем, что неинбредным белым крысам в течение 21 дня перорально вводят смесь 200 мкл 5%-ного раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кетофен из расчета 5 мг/кг за 1 ч до кормления 1 раз в сутки.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, в частности к экспериментальной патофизиологии и гепатологии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано в создании модели рубцового стеноза трахеи, максимально приближенной к данной патологии у человека, для изучения способов лечения.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к моделированию флегмоны околочелюстной области. .
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для повышения физической выносливости. .

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, экологии и токсикологии, и может быть использовано при исследовании механизмов токсического действия тяжелого металла, в частности кобальта, на функции печени.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования неоваскуляризации роговицы. .

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной гинекологии, и может быть использовано для моделирования аутоиммунного оофорита. .

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейробиологии. .
Изобретение относится к медицине, экспериментальной, сердечно-сосудистой хирургии. .
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к моделированию флегмоны околочелюстной области. .
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для повышения физических возможностей у лиц женского пола 17-18 лет. .
Изобретение относится к медицине, к физиотерапии и может быть использовано для профилактического и лечебного воздействия как на кожный покров человека, так и на его внутренние органы при лечении сопутствующих заболеваний.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для повышения физической выносливости. .

Изобретение относится к оксадиазолидиндионовым соединениям, представленным следующей формулой (I), или к их фармацевтически приемлемым солям, (символы в представленной формуле представляют следующие значения, R1: -Н, R0 : низший алкил, Rz: одинаковые или отличные друг от друга, и каждый представляет собой -Н или низший алкил, L: *-СН 2-O- или *-CH2-NH-, где знак * в L означает связывание с кольцом А и положение замещения группы L в кольце В представляет собой 4-положение, кольцо А: бензол, кольцо В: бензол или пиридин, R2: соответственно одинаковые или отличные друг от друга, и каждый представляет собой -галоген или -R0, n: 0 или 1, R3: фенил, который может быть замещен группой, выбранной из группы G3 , группа G3: галоген, -R0, галогено-низший алкил, -ORz, -CON(Rz)2, -CON(R z)-гетерокольцевая группа, -O-S(O)2-R0 , -О-низший алкилен-ORz, -О-низший алкилен-O-COR z, -О-низший алкилен-N(Rz)2, -О-низший алкилен-N(Rz)CO-Rz, -О-низший алкилен-CO 2Rz, -О-низший алкилен-CON(Rz) z, -О-низший алкилен-CON(Rz)-(низший алкил замещен группой -ORz), -О-низший алкилен-SR0, -О-низший алкилен-циклоалкил, -О-низший алкилен-CON(Rz)-циклоалкил, -О-низший алкилен-гетерокольцевая группа и -О-низший алкилен-CON(R z)-гетерокольцевая группа, где низший алкилен в группе G3 может быть замещен галогеном или -ORz , и циклоалкил и гетерокольцевая группа в группе G3 могут быть замещены группой, выбранной из группы G1 , группа G1: галоген, циано, -R0, -OR z, -N(Rz)2, -S-R0, -SO 2-R0, -SO2N(Rz)2 , -CO-Rz, -CON(Rz)2, -CON(R z)-низший алкилен-ORz, -N(Rz)CO-R z, оксо, -(низший алкилен, который может быть замещен группой -ORz)-арил, гетерокольцевая группа и низший алкилен-гетерокольцевая группа, где арил и гетерокольцевая группа в группе G1 могут быть замещены группой, выбранной из следующей группы G 2, группа G2: галоген, циано, где "гетерокольцевая группа" означает группу, содержащую кольцо, выбранное из i) моноциклического 5-7-членного насыщенного или ненасыщенного гетерокольца, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из О, S и N, ii) бициклического гетерокольца, в котором гетерокольца, указанные в представленном выше i), являются конденсированными по кольцу, где конденсированные кольца могут быть одинаковые или отличные друг от друга, и iii) бициклического гетерокольца, в котором гетерокольцо, указанное в представленном выше i), является конденсированным с бензольным кольцом или 5-7-членным циклоалканом, R4: -Н.

Изобретение относится к созданию нового биоматериала, используемого в качестве тканевого трансплантата для регенеративной хирургии. .
Изобретение относится к медицине и может быть использовано при защите организма от мутагенного воздействия тяжелых металлов в эксперименте. .

Изобретение относится к области медицины, в частности фармакологии, и может быть использовано для повышения антигипоксической активности бемитила основания (БО) при гипоксии с гиперкапнией.
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано при лечении гипотонусных дисфоний (ГД). .
Наверх