Средство для медикаментозной коррекции нарушений нитроксидергической системы


 


Владельцы патента RU 2505297:

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Фарматрон" (НПО "Фарматрон") (RU)

Предложено применение бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия в качестве активной основы лекарственных средств для коррекции нарушений функционирования нитроксидергической системы. Показано повышение активности эндотелиальной NO-синтазы и повышение продукции NO под действием заявленного средства, которое имеет более высокую эффективность по сравнению с уже известными средствами аналогичного действия и не оказывает побочного эффекта. 2 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к фармации и медицине, а именно к лекарственным средствам, положительно влияющим на состояние нитроксидергической системы.

Известно, что нарушение функционирования нитроксидергической системы, которое приводит к дефициту оксида азота (NO), резко повышает риск возникновения и развития заболеваний дыхательной, сердечно-сосудистой, гепато-билиарной систем, желудочно-кишечного тракта, а также развития эндокринных нарушений [1]. В патогенезе и клинике таких заболеваний, как атеросклероз, сахарный диабет, артериальная гипертензия и их осложнений, одним из важных аспектов считается нарушение структуры и функции сосудистого эндотелия [1, 3]. Эндотелиальная дисфункция (ЭД) развивается при дефиците оксида азота, нарушении экспрессии или транскрипции эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), снижении доступности запасов L-аргинина для eNOS, то есть при нарушении функционирования нитроксидергической системы.

Коррекция нарушений метаболизма оксида азота, т.е. коррекция нитроксидергической системы и восстановление выработки NO, приводит к снижению риска возникновения вышеперечисленных заболеваний, в основе которых лежит эндотелиальная дисфункция.

В конце XX столетия было установлено, что оксид азота (NO) является одним из универсальных и необходимых регуляторов клеточного метаболизма. Выяснилось, что эта молекула является короткоживущим и легко подвергающимся химическим трансформациям свободным радикалом, которая непрерывно ферментативно продуцируется в организме млекопитающих, оказывая воздействие на различные физиологические и патофизиологические процессы. Изучение роли NO позволило установить, что оксид азота - мессенджер, выступающий в роли универсального модулятора разнообразных функций организма, включая регуляцию дыхания, поддержания сердечно-сосудистого гомеостаза, иммунного статуса организма, активности макрофагов, экспрессии генов, пластичности нервной ткани, памяти, высвобождения нейротрансмиттеров. Оксид азота выполняет роль нейромодулятора в центральной нервной системе и в нервно-мышечных синапсах.

Открытие разнообразных физиологических ролей оксида азота в организме привело к созданию, изучению и применению лекарственных препаратов, способных корректировать нитроксидергическую систему.

Однако на сегодняшний день известных лекарственных средств, предназначенных для коррекции нарушений нитроксидергической системы, не так много, и к ним следует отнести лишь препараты, которые как активное действующее вещество содержат L-аргинин (глутаргин, вазотон, тивортин) [2, 3, 5]. Кроме того, их терапевтическое действие недостаточно эффективно, поэтому актуальной задачей является расширение арсенала препаратов для коррекции нарушений нитроксидергической системы, которые проявляли бы высокую эффективность и были безвредны для пациентов.

Известно биологически активное соединение бромид 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ), обладающее кардиопротективным, противоишемическим, антигипертензивным, антиоксидантным, протеинсинтетическим и энерготропным действием (патент Российской Федерации №2404974, C07D 249/08 (2006.01), A61P 9/04 (2006.01), A61P 9/10 (2006.01), A61P 9/12 (2006.01), опубл. 27.11.2010; патент Украины №92692, МПК (2009) A61K 31/41, опубл. в бюл. «Промислова власнiсть», 2010, №22).

Однако нигде в доступной нам литературе не описывается свойство указанного вещества корректировать нарушения нитроксидергической системы.

В основу изобретения поставлена задача получения средства, корректирующего нарушения нитроксидергической системы, которое имеет более высокую эффективность по сравнению с уже известными средствами аналогичного действия и не оказывает побочного эффекта.

Поставленная задача решается тем, что в качестве активной основы лекарственных средств для коррекции нарушений нитроксидергической системы используют бромид 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия.

Суть изобретения поясняется нижеприведенными примерами результатов доклинических исследований.

Пример 1. Для проведения исследований моделировали эндотелиальную дисфункцию (ЭД) (с выраженным дефицитом NO, т.е. нарушением функционирования нитроксидергической системы) путем ежедневного введения N-нитpo-L-аргинин метилового эфира (L-NAME) белым беспородным крысам-самцам массой 180-190 г один раз в сутки, внутрибрюшинно, в дозе 25 мг/кг в течение 8 дней. Проводили оценку эффективности коррекции нарушений нитроксидергической системы при использовании бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ). В эксперименте сравнивали действие бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ) и референс-препарата L-аргинина (EUROBIOPHARM GmgH, Hamburg). Исследуемые препараты вводили внутрибрюшинно через 30 минут после введения L-NAME: L-аргинин в дозе 200 мг/кг/сутки, бромид 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия - в дозе 5 мг/кг/сутки. Крыс выводили из эксперимента на 8 день от его начала под тиопенталовым наркозом (40 мг/кг), и у них для исследований забирали сердце, которое затем гомогенизировали в жидком азоте и методом дифференцированного центрифугирования выделяли цитозольную фракцию, в которой содержится только эндотелиальная NO-синтаза (eNOS).

В цитозольной фракции гомогената сердца определялись биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции - стабильные метаболиты NO и активность общей NO-синтазы [4]. Уровень экспрессии эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) определяли в цитозольной фракции гомогената сердца методом иммуноблотинга [4].

Полученные результаты представлены в таблице №1.

Таблица 1
Влияние бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ) и референс-препарата L-аргинина на показатели системы NO в цитозольной фракции гомогената сердца крыс с эндотелиальной дисфункцией при введении в течение 8 суток
Группа животных NOS, мкмоль НАДФ/мин/г белка Нитриты, мкмоль/ г ткани Концентрация eNOS, у.е./г белка
интактные (n=10) 12,4±0,63 18,5±0,77 15,7±0,65
ЭД (контроль) (n=10) 4,22±0,45 5,81±0,53 3,2±0,17
ЭД+МТ(5 мг/кг) (n=10) 8,7±0,55*1 (+106,2%) 12,2±0,85*1 (+110%) 10,2±0,45*1 (+218,7%)
ЭД+L-аргинин (200 мг/кг) (n=10) 5,00±0,47 (+18,4%) 7,12±0,32* (+22,5%) 3,5±0,27 (+9,3%)
Примечание:
* - изменения достоверны по отношению к животным контрольной группы (p<0,05);
1 - изменения достоверны по отношению к группе животных, получавших L-аргипин (p<0,05)

Как видно из таблицы 1, при моделировании эндотелиальной дисфункции (ЭД) у животных наблюдается дефицит NO, о чем свидетельствует достоверное снижение его стабильного метаболита - нитрит-аниона на 68,6% на фоне угнетения активности общей NOS на 66% и снижение экспрессии eNOS на 79,6% в цитозоле миокарда по сравнению с интактными животными.

Курсовое назначение животным с эндотелиальной дисфункцией препарата МТ в дозе 5 мг/кг/сутки приводило к повышению продукции NO в цитозоле миокарда на 110%. МТ усиливал физиологический путь синтеза NO, повышая активность эндотелиальной NO-синтазы. Так, в группе животных с ЭД, получавших МТ, активность общей NO-синтазы в цитозоле возросла на 106,2%, а также отмечалось увеличение экспрессии эндотелиальной NO-синтазы на 218,7% по сравнению с нелеченными животными. L-Аргинин влиял только на образование NO, достоверно повышая уровень нитритов на 22,5%, однако он не оказывал достоверного влияния на активность и экспрессию NO-синтазы в миокарде.

Пример 2. Для оценки эффективности коррекции нарушений нитроксидергической системы при использовании бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ) были использованы 30 крыс обоего пола массой 180-200 г со спонтанной артериальной гипертензией линии НИСАГ (наследственно индукцированная стрессом артериальная гипертензия на фоне дефицита NO) и 8 нормотензивных контрольных животных линии WKR (normotensive Wistar-Kyoto rats), массой 180-220 г. МТ вводили внутрибрюшинно ежедневно в дозе 5 мг/кг в течение 15 суток. L-аргинин (EUROBIOPHARM GmgH, Hamburg) вводили в дозе 200 мг/кг по той же схеме. На 15 день эксперимента животных выводили из эксперимента под тиопенталовым наркозом (40 мг/кг), и у них забиралось сердце, которое затем гомогенизировали в жидком азоте и методом дифференцированного центрифугирования выделяли цитозольную фракцию, в которой содержится только эндотелиальная NO-синтаза (eNOS). В цитозольной фракции гомогената сердца определялись биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции - стабильные метаболиты NO и активность общей NO-синтазы [4]. Уровень экспрессии эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) определяли в цитозольной фракции гомогената сердца методом иммуноблотинга [4]. Результаты исследований представлены в таблице №2.

Таблица 2
Влияние МТ иреференс-препарата L-аргинина на показатели системы NO в цитозольной фракции гомогената сердца крыс со спонтанной артериальной гипертензией при введении в течение 15 суток
Группа животных NOS, мкмоль НАДФ/мин/г белка Нитриты, мкмоль/ г ткани Концентрация eNOS, у.е./г белка
Нормотензивные (интакт) (n=8) 11,75±0,75 17,23±0,84 15,2±0,73
SHR (контроль) (n=10) 5,15±0,64 7,76±0,67 4,1±0,21
SHR+MT (5 мг/кг) (n=10) 9,71±0,65*1 (+88,5%) 15,15±0,77*1 (+95,2%) 12,3±0,65*1 (+200%)
SHR+L-аргинин (200 мг/кг) (п=10) 6,20±0,55 (+20,4%) 9,87±0,44* (+27,2%) 4,77±0,53 (+16,3%)
Примечание:
* - изменения достоверны по отношению к животным контрольной группы (p<0,05);
1 - изменения достоверны по отношению к группе животных, получавших L-аргинин (p<0.05)

Как видно из таблицы 2, у крыс линии НИСАГ наблюдается уменьшение образования NO, о чем свидетельствовало достоверное снижение его стабильного метаболита - нитрит-аниона на 55,0% на фоне угнетения активности общей NOS на 56,2% и снижение экспрессии eNOS на 73,0% в цитозоле миокарда по сравнению с нормотензивными крысами.

Курсовое назначение НИСАГ крысам препарата МТ в дозе 5 мг/кг/сутки приводило к повышению продукции NO в цитозоле миокарда на 95%. МТ усиливал физиологический путь синтеза NO, повышая активность эндотелиальной NO-синтазы. Так, в группе НИСАГ крыс, получавших МТ, активность общей NO-синтазы в цитозоле повысилась на 88% на фоне повышения экспрессии эндотелиальной NO-синтазы на 200% по сравнению с нелеченными животными. L-Аргинин не оказывал достоверного влияния на активность и экспрессию NO-синтазы в миокарде, а влиял только на образование NO, достоверно повышая уровень нитритов на 27,2%.

В результате проведенных исследований установлено, что МТ в дозе 5 мг/кг достоверно превосходит референс-препарат L-аргинин в дозе 200 мг/кг по таким показателям нитроксидергической системы, как активность общей NOS, экспрессия eNOS, продукция оксида азота. Терапевтическая эффективность МТ значительно превышала эффективность референс-препарата L-аргинина.

Таким образом, у известного средства - бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ) - нами выявлено новое свойство - проявлять коррегирующий эффект по отношению к нитроксидергической системе. По активности МТ достоверно превышает препарат сравнения - L-аргинин. По токсичности препарат МТ относится к IV классу (малотоксичен). Таким образом, использование предлагаемого изобретения позволит в дальнейшем создавать высокоэффективные безвредные лекарственные средства, содержащие как активное действующее вещество бромид 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия (МТ), для коррекции нарушений нитроксидергической системы.

Литература

1. Новый взгляд на коррекцию эндотелиальной дисфункции / Корокин М.В., Покровский М.В., Кочкаров В.И. и др. // Russian journal of immunology. - 2006. - Vol.9, supp.3. - P.59-63.

2. Корокин M.B., Артюшкова Е.Б. Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции // Кубанский научный медицинский вестник. - 2007. - №1-2. - С.146-150.

3. Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (третий пересмотр). - М., 2008.

4. Доклиническое изучение специфической активности потенциальных препаратов: метод, рекомендации ГФЦ МЗ Украины / И.С. Чекман, Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев. - К., 2010. - 81 с.

5. Компендиум. Лекарственные препараты. - К.: Морион, 2010. - С. Л-418, Л-1505.

Применение бромида 1-(β-фенилэтил)-4-амино-1,2,4-триазолия в качестве активной основы лекарственных средств для коррекции нарушений функционирования нитроксидергической системы.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для лечения и профилактики артериальной гипертонии с метаболическим синдромом.
(57) Изобретение относится к области биотехнологии и предназначено для пермебиализации мембран первичных гепатоцитов. Способ включает обработку клеток печени пороформирующим гемолизином Hlyll Bacillus cereus, увеличивающим эффективность проникновения внутрь клеток низкомолекулярных веществ, при котором воздействуют на гепатоциты Hlyll из В.cereus в диапазоне концентраций 0,1-1 мкг/мл.

Группа изобретений относится к медицине и касается средства для стимулирования работы в экстремальных условиях в виде смеси пептидов с молекулярной массой 2000-5000 Да и пептидов с молекулярной массой 500-900 Да, полученных из головного мозга крупного рогатого скота и/или свиней возрастом до одного года, в соотношении компонентов 2/1-3/1, с концентрацией смеси пептидов в средстве 5,0-10,0 мг/мл водного раствора или 5,0-10,0 мг/г в суппозитории на основе витепсола; способа получения указанного средства для стимулирования работы в экстремальных условиях; применения указанного средства для парентерального введения или для ректального введения.

Изобретение относится к области медицины, а именно к средству для стимуляции работы в экстремальных условиях. Средство представляет собой смесь пептидов с молекулярной массой 2000-5000 Да, полученных из головного мозга крупного рогатого скота и/или свиней возрастом до одного года, а именно из вентрального и дорзального гиппокампа (hippocampus) поясной борозды (sulcus cinguli) миндалевидного комплекса (nucleus amygdalae) лимбической системы мозга, а также из хвостатого ядра (nucleus caudatus) и гипоталамуса (hypothalamus) с концентрацией смеси пептидов в средстве 5,0-10,0 мг/мл водного раствора или 5,0-10,0 мг/г в суппозитории на основе витепсола.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложена композиция, применяемая для клеточной терапии.
Изобретение относится к медицине, а именно к физиотерапии, оториноларингологии, аудиологии, восстановительной медицине, и может быть использовано для физиотерапевтического воздействия на организм при заболеваниях, развившихся в тканях и органах головы и шеи человека, таких как нейросенсорная тугоухость, верхнечелюстной синусит, евстахеит, темпоромандибулярный болевой дисфункциональный синдром, одонтогенная или риногенная невралгия тройничного нерва, неврит лицевого нерва и т.п.
Изобретение относится к медицине, а именно к геронтологии, и может быть использовано для профилактики преждевременного старения организма человека. Для этого на фоне диетотерапии в рацион питания дополнительно вводят функциональный продукт питания «Самарский здоровяк» не менее 50 г на один прием - на завтрак, или обед, или ужин.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для лечения спастичности, сопровождающегося улучшением сознания у больных в вегетативном состоянии.

Изобретение относится к соединениям общей формулы (I), где представляет собой замещенное 5-членное гетероарильное кольцо, выбранное из тиенила, тиазолила, оксазолила, пирролила, имидизолила или пиразолила, W выбирают из группы, включающей N и -С=; M выбирают из группы, включающей -C(O)N(R1)OR2, -C(O)NR1R2 и -C(O)OR1, или M представляет собой -C1-C3алкил-C(O)N(R1)OR2, при этом представляет собой , ; R1 и R2 независимо выбирают из группы, включающей -H, C1-C3-алкил, C6-арил и C1-C3-алкил-C6-арил; R выбирают из группы, включающей H, C1-C3алкил, галоген, NR1R2, -OR1 и C6арил; n представляет собой целое число от 0 до 1; L и Y являются такими, как указано в формуле изобретения; и к соединениям формулы (II), где L2 выбирают из группы, включающей H, -C0-C3алкил-C6арил, -C0-C3алкил-гетероарил, где гетероарил представляет собой пиридил; -C1-C6алкил, Y и M являются такими, как для соединений формулы (I).
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой питательную композицию для младенца или ребенка, содержащую липид или жир; источник белка; источник полиненасыщенных жирных кислот с длинной цепью, который содержит докозагексаеновую кислоту; до 2,5 вес.% источника дополнительного кальция, причем по меньшей мере 20% источника дополнительного кальция представляет собой глюконат кальция, и от 0,015 до 0,1 миллионных долей (пг/мкг) ТРФ-β.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использована для предотвращения и лечения кариеса. Для этого используют композицию для орального применения, содержащую соединение полигуанидина, выраженную формулой (I), и приемлимый для орального применения носитель.

Описывается инъецируемый формирующийся in situ депо-состав, включающий рассасывающийся полимер, полиэтиленгликоль с молекулярной массой 450<Mw<650 Да и с концевыми группами, выбранными из метокси и этокси, который характеризуется температурой затвердевания между 8° и 20°С, фармацевтически активное вещество и, необязательно, вспомогательное вещество.

Изобретение относится к области медицины, фармацевтики и нанотехнологий, конкретно к фармацевтической композиции на основе флуконазола - противогрибкового средства из группы производных триазола, получаемого химическим синтезом, и к способу ее получения.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтическим композициям и фармацевтическим наборам для лечения бактериальных инфекций и нового способа лечения заболеваний, связанных с бактериальными инфекциями, в том числе туберкулеза.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой комбинацию для лечения и/или профилактики проявлений психических, когнитивных, поведенческих и неврологических нарушений при органических заболеваниях ЦНС различного генеза, характеризующуюся тем, что она включает Мелатонин в количестве от 0,01 мг до 50 мг и Мемантин в количестве от 0,01 до 100 мг.
Изобретением предоставлена композиция эсмолола в форме концентрированного раствора, включающего: а) от 40 до 60 мг/мл гидрохлорида эсмолола; b) от 0,01 до 2 м буферного агента; где значение рН раствора находится в интервале от 4,0 до 6,0.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для лечения различных заболеваний глаз. Глазные капли содержат метиленовый синий, дифенгидрамина гидрохлорид, нафазолина гидрохлорид, гидроксипропилметилцеллюлозу, борную кислоту, поливинилпирролидон и дистиллированную воду при определенном соотношении компонентов.

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ профилактики и лечения воспаления в ротовой полости после стоматологической хирургической операции, заключающийся в том, что пациенту после имплантации ежедневно на область послеоперационной раны наносят лекарственный препарат методом аппликации, отличающийся тем, что в качестве лекарственного препарата используют препарат на основе штамма Lactobacillus plantarum 8P-A3 и/или B.bifidum в дозе не менее 10 млн живых лактобактерий и/или бифидобактерий.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой применение этиламида 5-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-4-(4-морфолин-4-илметилфенил)изоксазол-3-карбоновой кислоты, или его фармацевтически приемлемой соли, или гидрата, или сольвата для получения фармацевтической композиции, предназначенной для лечения рака мочевого пузыря, ободочной кишки, печени, легкого, молочной железы, яичников, поджелудочной железы, желудка, желудочно-кишечного тракта, предстательной железы, головы и шеи и/или крови.

Изобретение относится к соединению формулы и к его фармацевтически приемлемой соли. Изобретение также касается фармацевтической композиции, предназначенной для лечения β-амилоидных заболеваний и синуклеинопатий, на основе указанного соединения.
Наверх