Способ моделирования ахалазии кардии



Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии
Способ моделирования ахалазии кардии

 


Владельцы патента RU 2524193:

Алексеев Владимир Александрович (RU)
Кошель Андрей Петрович (RU)
Клоков Сергей Сергеевич (RU)
Завьялова Марина Викторовна (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования ахалазии кардии. Способ включает верхнесрединную лапаротомию, обеспечение доступа к нижней трети пищевода и последующее введение раствора бензалкония хлорида в область гастроэзофагеального перехода. При этом указанный реагент вводят посредством инъекций в концентрации 0,02% в 4 точки, расположенные на 3, 6, 9 и 12 часах в проекции кардиального сфинктера, объемом 0,2-0,3 мл на каждую точку введения. 8 ил.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования ахалазии кардии.

В связи с трудностями создания «искусственной» ахалазии кардии описано мало способов моделирования данного заболевания.

Известен способ моделирования ахалазии [A. Etzel (1942)], заключающийся в лигировании пищевода собаки у места перехода в желудок, суживая его просвет на 2/3. Через 4 месяца наблюдалось резкое супрастенотическое расширение пищевода. Известен способ моделирования [Шалимов С.А. с соавт., 1989], при котором накладывали пластмассовое кольцо, которое плотно охватывало, но не сдавливало пищевод, на кардиоэзофагеальный переход у 6-8 месячных щенков. По мере роста животного стеноз нарастал, что приводило к развитию супрастенотического расширения, достигающего к году значительных размеров. При этом следует отметить, что в обоих случаях интрамуральный нервный аппарат пищевода оставался интактным.

Известен способ моделирования ахалазии кардии [K. Alnor, 1956], включающий обнажение торакоабдоминальным доступом кардиального отдела желудка у собак, затем охлаждение его струей углекислоты из баллона или обкладывание на 2-3 мин сухим льдом. В результате ткани пищевода и кардиального отдела желудка промерзали, в зоне воздействия нарушалось кровообращение, возникала циркуляторная и тканевая гипоксия и появлялись очаги некробиоза, эти нарушения приводили к дегенеративным изменениям во внутристеночных нервных сплетениях, и через 3-9 месяцев после операции у подопытных животных развивалась типичная картина ахалазии кардии.

Известен способ моделирования ахалазии кардии у лабораторных животных [H. Corelli, 1957] после механического сдавления эзофагокардиальной области и длительной ишемии участка пищевода. Известен способ моделирования [F. Kobler и соавт. 1958], путем заражения собак культурой трипаносомы Круса, токсин трипаносомы вызывал в интрамуральном нервном сплетении дегенеративные изменения, аналогичные наблюдавшимся при ахалазии кардии, и таким образом добивались возникновения у них кардиоспазма [1].

Однако вышеуказанные способы моделирования ахалазии кардии имеют следующие недостатки:

- необходимость длительно содержать собак, что требует специально оборудованных клеток и вивария, а соответственно и высокой стоимости эксперимента;

- при механическом воздействии на кардиоэзофагеальный переход нет морфологического субстрата ахалазии, а именно повреждения нервных ганглиев области кардии;

- относительная сложность оперативных вмешательств увеличивающая операционный риск и соответственно послеоперационную летальность экспериментальных животных.

Наиболее близким к предлагаемому является способ моделирования ахалазии кардии у крыс, предложенный в 2009 году Л.Г. Сабировым и соавт [2]. Выполнялась верхнесрединная лапаротомия, после обеспечения доступа к нижней трети пищевода, под мобилизованный сегмент подкладывался протектор из плотного полиэтилена, предотвращающий растекание бензалкония хлорида по брюшной полости. После чего, на пищевод апплицировалась марлевая турунда, которую в течение 30 минут смачивали 0,2% раствором бензалкония хлорида.

Моделирование ахалазии кардии на крысах наиболее удобный способ создания экспериментальной модели, т.к. они имеют пищеварительный тракт, схожий с человеческим, питаются продуктами органического происхождения, их содержание не требует особых условий и больших затрат на экспериментальную работу.

Недостатками вышеуказанного способа являются длительность выполнения оперативного вмешательства, сохранение опасности попадания нейротоксина на окружающие ткани, что может вызвать повреждение их нервных сплетений, а также интоксикацию животного и летальный исход, которые обусловлены высокой абсорбирующей способностью брюшины.

Новый технический результат - упрощение способа, снижение числа осложнений, вызванных попаданием реагента на окружающие ткани, уменьшение количества и дозы нейротоксина и анестетиков, а соответственно, снижение летальности на фоне передозировки вышеназванных препаратов, сокращение времени операции в среднем с 40 мин при аппликационном способе введения нейротоксина до 15 мин и длительности эксперимента с 40 суток до 30 суток.

Для решения поставленной задачи в способе моделирования, включающем верхнесрединную лапаротомию, с обеспечением доступа к нижней трети пищевода с последующим введением раствора бензалкония хлорида в область гастроэзофагеального перехода, указанный реагент вводят посредством инъекций в концентрации 0,02% в 4 точки, расположенные на 3, 6, 9 и 12 часах в проекции кардиального сфинктера объемом 0,2-0,3 мл на каждую точку введения.

Способ осуществляют следующим образом.

Используют белых крыс линии Вистар массой тела 150-200 г. Анестезиологическое пособие обеспечивают посредством использования анестетика золетил 100 и миорелаксанта рометар в дозировке по от 0,2 до 0,3 мл в зависимости от размеров и массы животного. Шерсть на животе выстригают. После наркотизации выполняют фиксацию животного на операционном столе, лапаротомию, осуществляют доступ к кардиальному отделу желудка. Затем в операционную рану выводят гастроэзофагеальный комплекс, отграничивают область интереса салфетками с целью предупреждения попадания нейротоксина на окружающие ткани и инсулиновым шприцом вводят раствор бензалкония хлорида 0,02% объемом 0,2-0,3 мл внутримышечно в 4 точки: на 3, 6, 9 и 12 часах в проекции кардиального сфинктера. Затем удаляют салфетки из брюшной полости и послойно ушивают рану.

Доза, кратность и место введения были подобраны эмпирически, что позволило снизить гибель животных и сократить время формирования модели. Доза ниже указанной была не эффективной для формирования модели.

Животные выводились из эксперимента на 1, 3, 15, 30, 60-е сутки после первичного вмешательства для забора гистологического материала путем внутримышечного ведения анестетика золетил 100 в количестве 1 мл. После введения анестетиков выполнялась релапаротомия, визуально оценивалось и фиксировалось с помощью фотоаппаратуры состояние верхнего этажа брюшной полости, после чего извлекался органокомплекс, включающий в себя желудок с кардиоэзофагеальным переходом и н/3 пищевода.

Полученные в ходе эксперимента макро- и микроскопические данные сравнивались с гистологической картиной пищеводно-кардиального перехода у 2-х интактных крыс, которые составили контрольную группу.

Результаты эксперимента изучались на основании гистологического исследования на препаратах, изготовленных по стандартной методике и окрашенных гематоксилином и эозином. При этом оценивался ряд признаков:

- состояние выстилающего эпителия, наличие и выраженность лимфоплазмоцитарной инфильтрации стромы слизистой оболочки (нет, слабо, умеренно, резко выраженная);

- наличие и выраженность межэпителиальной лимфоидной инфильтрации (нет, слабо, умеренно, резко выраженная);

- количество подслизистых и межмышечных нервных ганглиев (при увеличении ×400 в 10 полях зрения);

- наличие и выраженность дистрофических изменений в клетках нервных ганглиев (Фиг.1-8).

Получены следующие результаты.

В группе контроля видимых изменений со стороны серозной оболочки желудка и адвентиции пищевода в зоне гастроэзофагеального перехода нет. При изучении гистологической картины имелась слабовыраженная лимфоплазмоцитарная инфильтрация стромы. В подслизистых и межмышечных нервных ганглиях дистрофических изменений не выявлено (Фиг.1, Фиг. 2).

У оперированных крыс макроскопически при заборе материала обращал на себя внимание спаечный процесс в области кардиоэзофагеального перехода с вовлечением окружающих тканей, у одной из крыс в месте инъекции бензалкония хлорида обнаружена гранулема до 0,5 см диаметром. Начиная с 30-х суток, пищевод был несколько расширен выше места инъекций: 3±0,47 мм в сравнении с диаметром до операции 2,66±0,38 мм, p=0,05.

На 10 сутки в пищеводно-желудочном переходе гиперплазия эпителия, акантоз, дисплазия 2 степени. Лимфоплазмоцитарная инфильтрация выражена слабо, признаков межэпителиальной лимфоидной инфильтрации не выявлено. Нервные ганглии в подслизистом слое отсутствуют. В мышечном слое один нервный ганглий с резко выраженными дистрофическими изменениями клеток (Фиг.3, Фиг.4).

На 30-е сутки в области пищеводно-желудочного перехода эпителиальный слой без особенностей, слабо выраженная лимфоплазмоцитарная инфильтрация стромы, лимфоидной межэпителиальной инфильтрации нет. Визуализируется один нервный подслизистый ганглий с резко выраженными дистрофическими изменениями. Межмышечных нервных ганглиев нет (Фиг.5).

На 60-е сутки эпителий без особенностей, слабо выраженная лимфоплазмоцитарная инфильтрация стромы, межэпителиальной лимфоидной инфильтрации нет. Нервных подслизистых ганглиев нет. Имеется два межмышечных нервных ганглия с резко выраженными дистрофическими изменениями (Фиг.6, Фиг. 7, Фиг.8).

Таким образом, предлагаемый способ обладает следующими преимуществами:

- выполнение хирургического вмешательства не требует от хирурга специальных оперативных навыков;

- нет необходимости в сложном оборудовании и специальном хирургическом инструментарии;

- вероятность осложнений, вызванных попаданием реагента на окружающие ткани, сведена к минимуму;

- количество бензалкония хлорида, необходимого для одной операции, не превышает 1,2 мл;

- время операции не превышает 15 минут. Малая длительность оперативного вмешательства позволяет снизить количество анестетика и миорелаксанта, а уменьшение дозы нейротоксина, анестетика и миорелаксанта, соответственно, уменьшают летальность на фоне передозировки;

- длительность создания экспериментальной модели равна 30 суткам, что значительно меньше по сравнению с ранее описанными способами.

Источники информации, принятые во внимание при составлении описания

1. Шалимов С.Л., Радзиховский А.П., Кейсевич Л.B. Руководство по экспериментальной хирургии. - М.: Медицина, 1989.

2. Сабиров Л.Г., Бурмистров М.В., Мухамедьяров М.А. и др. Модификация метода экспериментальной ахалазии у крыс и анализ его эффективности // Казанский медицинский журнал, 2009 г., том 90, №2., стр. 282-284.

Способ моделирования ахалазии кардии, включающий верхнесрединную лапаротомию с обеспечением доступа к нижней трети пищевода и последующее введение раствора бензалкония хлорида в область гастроэзофагеального перехода, отличающийся тем, что указанный реагент вводят посредством инъекций в концентрации 0,02% в 4 точки, расположенные на 3, 6, 9 и 12 часах в проекции кардиального сфинктера объемом 0,2-0,3 мл на каждую точку введения.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и патофизиологии и касается моделирования остеорезорбции в условиях репаративного остеогенеза. Для этого экспериментальному животному внутрибрюшинно однократно вводят раствор селенометионина в концентрации 2 мкг/мл в дозе 10 мкг/кг веса тела.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования атеросклероза. Для этого крысам самцам, возраст которых превышает 1 год, скармливают сбалансированный рацион, который поэтапно частично заменяют на холестерин и свиной жир.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам контроля качества оказания экстренной медицинской помощи, и направлено на повышение выживаемости детей с остановкой сердца.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, травматологии и ортопедии. На голень кролика накладывают аппарат внешней фиксации (АВФ), затем между II-м и IV-м его уровнями проводят остеоперфорацию и остеоклазию.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и предназначено для моделирования укушенной раны на млекопитающих в эксперименте. Для этого предлагается устройство, которое включает две ручки с браншами, на рабочих поверхностях которых выполнен ряд зубцов с заостренной вершиной и расширенным основанием.

Изобретение относится к медицинской вычислительной технике. Технический результат - повышение эффективности оценки действий обучаемого трансфеморальной аортографии.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к моделированию воспаления в околоносовых пазухах при хроническом табакокурении. Для этого помещают крыс в ингаляционную камеру, в которую подают табачный дым, содержащий 98 мг/м угарного газа.
Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии и гепатологии, и касается терапии гепатитов, изучаемой в эксперименте. Для этого у лабораторных животных (крыс) моделируют вирусный гепатит с помощью D-галактозамина.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной травматологии, хирургии и касается лечения различных травм кости, в частности переломов и трещин. Для этого фиксируют фрагменты поврежденной кости гипсовой повязкой или бинтом из полимерного материала.

Изобретение относится к биомедицине, в частности к исследованию выносливости и поведения подопытных животных, и может быть использовано при разработке и исследовании новых медицинских средств.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для профилактики и лечения алкогольного и токсического гепатита. Способ включает моделирование гепатита путем 7-дневной алкоголизации крыс-самок. В качестве гепатопротекторного средства используют апи-фитокомпозицию в виде водной суспензии меда, лецитина и экстракта корня солодки в соотношении 10:2:1. Введение осуществляют 2 раза в сутки внутрижелудочно до кормления животного в дозе 200 мг/кг массы тела за 5 дней до введения этанола и затем в течение 7 дней за час до введения этанола. Способ обеспечивает эффективное лечение гепатита, в т.ч. за счет ингибирования процессов перекисного окисления липидов в гепатоцитах, при отсутствии побочных явлений. 1 пр., 1 табл., 1 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции и профилактики эндотелиальной дисфункции. Способ включает воспроизведение эндотелиальной дисфункции у крыс-самцов линии Wistar ежедневным, в течение 7 дней, внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг/сутки. Коррекцию эндотелиальной дисфункции проводят внутрижелудочным введением апи-фитокомпозиции в виде водной суспензии меда, маточного молочка, перги, резвератрола в соотношении 10:1:2:1. Введение осуществляют в дозе 200 мг/кг массы тела животного однократно в сутки в течение 7 суток. Способ обеспечивает синергизм эндотелиопротекторных эффектов при отсутствии побочных явлений, которые отмечаются при лечении синтетическими препаратами. 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к разработке способа повышения регенераторной активности эпителия кишечника после лучевой нагрузки. Для этого крысам после лучевой нагрузки в дозе 3,0 Гр осуществляют внутривенное введение аллогенных мультипотентных мезенхиальных стромальных клеток в количестве 6 млн клеток/кг. Дополнительно вводят гемопоэтические стволовые клетки, выделенные из пуповинной крови, в количестве 300 тыс. клеток/кг. Причем такую трансплантацию клеток осуществляют через 60 мин после лучевой нагрузки. Способ обеспечивает увеличение числа митозов, что приводит к существенному увеличению содержания криптального эпителия. 3 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для разработки медикаментозного лечения острого панкреонекроза с последующим наблюдением за его эффективностью с помощью гистологического исследования. Для этого проводят моделирование панкреонекроза у животных. Затем выполняют внутривенное введение соединения «2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадиазин, гидробромид» из класса 1,3,4-тиадиазинов в дозировке 40 мг/кг. Способ обеспечивает эффективное лечение панкреонекроза, в т.ч. за счет купирования острой фазы системной воспалительной реакции, увеличивая вероятность излечения от этого заболевания, и уменьшение летальности.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и касается прогнозирования исхода множественной скелетной травмы у животных. Для этого регистрируют показатель ректальной температуры у кроликов породы Шиншилла в условиях основного обмена после нанесения травмы на фоне лечения препаратами анальгин, линкомицин и инфузии раствора глюкозы. При снижении ректальной температуры ниже 38°С в первые сутки после травмы прогнозируют неблагоприятный исход. Изобретение обеспечивает простой способ прогноза в ранние сроки после травмы. 1 пр., 1 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для разработки мероприятий, направленных на предупреждение летального исхода инфекционного процесса на фоне ожоговой травмы. Моделирование процесса проводят на кроликах массой 2000-2500 грамм, которых после срока карантина содержат в течение 8 часов при температуре окружающего воздуха 34-36°C. Затем температуру воздуха снижают до 24-26°C и через 24 часа наносят под наркозом термический ожог площадью 10-20% поверхности тела. В течение часа после ожога кроликам создают дополнительные условия для дыхания, используя газовую смесь, содержащую 80% кислорода и 20% азота. Через 24 часа животным вводят подкожно по 1 мл некультурабельных бактерий Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus в концентрациях 104-105 микробных клеток в 1 мл. Через 12 часов снова повышают температуру окружающего воздуха до 34-36°C в течение 8 часов. Затем в течение 5 суток определяют признаки поражения головного мозга и летальность животных. Способ позволяет создать условия максимального приближения моделируемого процесса к естественным условиям развития и течения ожоговой болезни. 1 табл., 3 прим.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения стимуляции эндогенных механизмов васкуляризации сердечной мышцы. В качестве средства, обеспечивающего такую стимуляцию, в эксперименте на крысах предлагается использовать стрептозотоцин. Препарат вводят однократно внутрибрюшинно в дозе 60 мг/кг через две недели после проведения животным коронароокклюзии. Изобретение обеспечивает эффективное стимулирование эндогенных механизмов развития капилляров в сердечной мышце при постинфарктном ремоделировании.1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования осложненной стенозом дуоденальной язвы. Способ включает введение крысам в подслизистый слой двенадцатиперстной кишки через прокол боковой стенки живота 3% раствора соляной кислоты. При этом предварительно при проведении лапаротомии к боковой стенке животе фиксируют кишку узловыми швами, наложенными через серозный, мышечный и подслизистый слои дуоденальной стенки. Фиксацию проводят таким образом, чтобы фиксированной оказалась ¼ окружности кишки. Через семь-десять дней после лапаротомии раствор соляной кислоты вводят по 50 мкл в трех точках, устанавливая вначале конец иглы на противоположную от прокола стенку кишки, после чего перемещая по окружности двенадцатиперстной кишки на 45° путем наклона иглы. Введение осуществляют пятикратно с интервалом в 7 суток. Способ позволяет во всех случаях проводимого эксперимента индуцировать локальный рубцово-язвенный стеноз двенадцатиперстной кишки. 1 ил.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа перед обучением проводят интерактивное компьютерное тестирование. Оценку осуществляют по балльно-рейтинговой шкале исходных профессиональных знаний, скорости переработки информации, продуктивности и выносливости. Распределяют по трем уровням обучения и выбирают для каждого обучаемого очное или очное и дистанционное обучение. Процесс обучения проводят в соответствии с результатами предварительного тестирования с использованием дополнительных интерактивных компьютерных обучающих материалов с аудио- и видеоизображением диагностических, лечебных алгоритмов и процедур. В конце очного этапа проводят итоговое интерактивное компьютерное тестирование с предъявлением графических изображений с активными областями, аудио- и видеозаписей, моделирующих симптомы или клинические случаи, и выявляют неусвоенный врачом-педиатром объем знаний. Предъявляют обучающемуся врачу-педиатру таблицы Анфимова и определяют скорость восприятия зрительной информации. После чего составляют для обучающегося необходимый объем тематического материала. Далее осуществляют дистанционное обучение и распределение по трем уровням дистанционного обучения для каждого обучаемого в зависимости от его балльно-рейтинговой оценки. Изобретение позволяет повысить эффективность обучения врача-педиатра профессиональным знаниям и навыкам за счет индивидуализированной системы обучения. 2 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к радиобиологии и комбустиологии, и может быть использовано для изучения механизмов патогенеза сочетанных радиационных поражений (СРП), включая феномен взаимного отягощения, а также для испытания новых способов и средств профилактики и лечения. Моделирование осуществляют путем последовательного радиационного воздействия на крыс. Сначала проводят общее Y-облучение. Затем после освобождения кожи от волосяного покрова 10% раствором сернистого натрия проводят местное локальное облучение кожи жестким рентгеновским излучением. Для защиты тела животного от рентгеновского излучения свинцовую пластину хирургическим путем имплантируют под кожу животного. Используют пластину, имеющую линейную прорезь, позволяющую производить локальное облучение кожи спины, соответствующее площади поражения 10% поверхности тела у крыс. Способ позволяет воспроизводить одинаковые по степени тяжести лучевую болезнь и глубокие лучевые ожоги и изучать влияние площади и степени поражения кожи на течение и исходы СРП в зависимости от выбранных доз общего облучения. 3 табл., 1 ил.
Наверх