Средство, обладающее антибактериальной активностью



Средство, обладающее антибактериальной активностью
Средство, обладающее антибактериальной активностью

 


Владельцы патента RU 2532328:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к антибактериальным препаратам широкого спектра действия. Предложено средство, представляющее собой дигидроксоцистинодиа-минодиаргенат натрия, обладающее антибактериальной активностью. Средство представляет собой комплекс двух ионов серебра с динатриевой солью природной аминокислоты L-цистина, связанных координационной связью, отвечающий формуле C6H12Ag2N2Na2O6S2. Способ получения средства включает добавление расчетного количества окиси серебра к раствору динатриевой соли цистина, перемешивание реакционной смеси при комнатной температуре до полного растворения окиси серебра и осаждение целевого продукта спиртом. Технический результат: новое средство, дигид-роксоцистинодиаминодиаргенат натрия, обладает выраженным антибактериальным действием по отношению к патогенным штаммам стафилококка, протея, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, а также подавляет рост дрожжей, обладает низкой токсичностью и стабилен при хранении. 1 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к антибактериальным препаратам широкого спектра действия.

В последнее десятилетие внимание многих исследователей все чаще обращается к антибактериальным веществам, обладающим универсальным механизмом воздействия на бактериальную клетку, например к серебру и его соединениям, но их исследование и активное использование оттеснено широким и не всегда оправданным применением антибиотиков.

Однако, в связи с широким распространением штаммов возбудителей, устойчивых к используемым антибиотикам, а также в связи с выявлением ряда серьезных осложнений (рост аллергических осложнений, токсическое действие антибиотиков на внутренние органы и подавлением иммунитета, возникновением грибкового поражения дыхательных путей и дисбактериоза после длительной антибактериальной терапии), вновь наблюдается повышенный интерес к препаратам серебра.

Согласно литературным данным, производные серебра обладают антимикробной активностью в отношении 650-700 видов микроорганизмов (Савадян Э.Ш., Мельникова В.М., Беликов Г.П. Современные тенденции использования серебросодержащих антисептиков // Антибиотики и химиотерапия. 1989. - т.34. - №11. - С.874-878).

Известны препараты серебра в качестве антисептиков в виде водных растворов: серебряная вода, AgNO3 или протаргол (Лекарственные средства. Свойства. Применение. Противопоказания. Справочник (под редакцией М.А. Клюева). Красноярск: гротеск, 1993, с.362).

Известен препарат, представляющий собой порошок цеолита, модифицированный серебром, с размерами частиц 17-20 Ангстрем, для лечения инфицированных ран (Патент RU 2245151 C2, опубл. 27.01.2005). Известный препарат обладает антимикробной активностью, угнетает рост и размножение микроорганизмов.

Известен препарат Арговит, включающий 7% нитрата серебра и стабилизирующее вещество - поливинилпирролидон - остальное, обладающий антибактериальными свойствами (патент RU 2147237 C1, опубл. 10.04.2000). Препарат используется для лечения колибактериоза телят.

Недостатком вышеперечисленных препаратов является необходимость использования достаточно высоких концентраций коллоидных растворов серебра для достижения эффекта, например от 0,1 до 0,4 масс.% для препарата «Арговит» (патент RU 2342120 C2, опубл. 27.12.2008) в пересчете на содержание серебра в разведенном препарате, а также изменение свойств препаратов в процессе хранения, особенно под воздействием таких факторов, как свет, колебания температуры, замораживание, при которых происходит агрегация кластерных частиц с образованием коллоидных, малоактивных частиц серебра.

Наиболее ближайшим к заявляемому средству - прототипом - является средство, обладающее противовирусной активностью, представляющее монолитиевую соль комплекса цистина с серебром, отвечающее составу C6H19N4O6S2LiAg2 (патент RU 2277908 C1, опубл. 20.06.2006). Синтез заявленного средства осуществляют при комнатной температуре смешением следующих компонентов: цистин - гидроокись лития - нитрат серебра - аммиак в мольном соотношении 1:2:2:8. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 6 часов, после чего упаривают в вакууме до 1/4 первоначального объема при температуре 40-50°C. К полученной суспензии прибавляют эквивалентное количество этилового спирта, охлаждают до 4÷6°C и выдерживают 12 часов. Образовавшийся целевой продукт в виде желтого мелкодисперсного осадка отфильтровывают, промывают этиловым спиртом и сушат в вакууме при комнатной температуре.

Основным недостатком известного средства является то, что оно не обладает антибактериальной активностью.

Задачей изобретения является получение нового стабильного, низкотоксичного средства, обладающего антибактериальной активностью в отношении широкого спектра патогенных микроорганизмов.

Поставленная задача достигается предлагаемым соединением, представляющим собой дигидроксоцистинодиаминодиаргенат натрия со следующей структурной формулой (1):

Общая схема синтеза дигидроксоцистинодиаминодиаргената натрия, представляющего собой комплекс двух ионов серебра с динатриевой солью природной аминокислоты L-цистина, отвечающий формуле C6H12Ag2N2Na2O6S2, представлена ниже.

C6H12N2O4S2+2NaOH+Ag2O→C6H12Ag2N2Na2O6S2+H2O

Используемая для синтеза аминокислота цистин (цистеин) относится к серосодержащим аминокислотам и играет важную роль в процессах формирования тканей кожи, а также для дезинтоксикационных процессов. Цистин и цистеин тесно связаны между собой, каждая молекула цистина состоит из двух молекул цистеина, соединенных друг с другом. Цистеин очень нестабилен и легко переходит в L-цистин, и одна аминокислота легко переходит в другую при необходимости.

Синтез заявленного средства осуществляют при комнатной температуре смешением следующих компонентов: цистин - гидроокись натрия - окись серебра в мольном соотношении 1:2,2:2, реакционную смесь перемешивают до полного растворения окиси серебра, фильтруют и продукт осаждают спиртом. В результате получают комплекс серебра с цистином, обладающий антибактериальной активностью в отношении широкого спектра патогенных микроорганизмов.

В результате проведения экспериментов в лабораторных условиях были изучены токсичность, антибактериальная активность и стабильность при хранении заявляемого средства.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение комплекса серебра с цистином.

Цистин (12 г, 0.05 моль) и гидроокись натрия (4,4 г, 0.11 моль) растворяют в 200 мл H2O. К полученному раствору, при перемешивании, добавляют 23.1 г (0.1 моль) окиси серебра. Мольное соотношение исходных компонентов 1:2,2:2, соответственно. Реакционную смесь перемешивают до полного растворения осадка (около 6 ч). Реакционную смесь фильтруют и выливают при интенсивном перемешивании в 1 л метилового спирта. Выпавший осадок отфильтровывают и последовательно промывают 200 мл метилового спирта и 200 мл ацетона. Осадок высушивают в вакууме. Выход целевого соединения дигидроксоцистинодиаминодиаргената натрия (АС-01) в виде мелкодисперсного порошка желтого цвета составил 22.1 г (83.1%). Элементный анализ: Найдено: C, 13,24; H, 2,41; Ag, 40,26; N, 5,17; Na, 8,21; S, 11,68. C6H12Ag2N2Na2O6S2 Вычислено: С, 13,49; Н, 2,26; Ag, 40,40; N, 5,25; Na, 8,61; S, 12,01.

Пример 2. Определение влияния условий и сроков хранения АС-01 на стабильность его химического состава.

АС-01 хранили в защищенном от света месте при комнатной температуре 20±2°C и в условиях бытового холодильника при - 4±2°C в течение 2 лет (срок наблюдения). Проводили сопоставление ИК-спектров образцов с периодичностью один раз месяц. В результате проведенных исследований не было отмечено отклонений в его составе.

При нагревании до 45°C соединение темнеет в течение 6 часов. Отклонение в ИК-спектрах наблюдается через 18 ч нагревания до 45°C. Таким образом, полученное соединение стабильно (срок наблюдения 2 года), допускает хранение при комнатной температуре в защищенном от света месте.

Пример 3.

Оценка антибактериальной активности соединения АС-01 на патогенные тест-штаммы: Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa.

Растворы АС-01 вносили в питательную среду одновременно с посевной концентрацией тест-штамма, инкубировали стационарно в пробирках (по 1 мл) при 37°C в течение 24 часов.

Результаты учитывали методом биологического титрования, определяя количество микроорганизмов (титр) до и после инкубации (в колонии образующие единицы на 1 мл, КОЕ/мл). В качестве контроля использовали среду с тест-штаммом без внесения препарата.

Бактерицидную активность (БА) оценивали условно:

+ наличие бактерицидной активности (резкое уменьшение количества микроорганизмов);

+/- наличие бактериостатической активности (отсутствие увеличения или незначительное увеличение количества микроорганизмов);

- отсутствие активности (увеличение количества микроорганизмов, сравнимое с контролем).

В таблице 1 представлены показатели активности различных концентраций соединения АС-01 на патогенные штаммы бактерий и штамм дрожжей Candida albicans. Значение <102 показывает, что на чашках Петри не выросло ни одной колонии патогенных микроорганизмов.

Из таблицы 1 видно, что соединение АС-01 обладает выраженным антибактериальным действием по отношению к патогенным штаммам микроорганизмов. При концентрации препарата 100 мкг/мл происходит полная инактивация всех исследуемых микроорганизмов. При снижении концентрации до 10 мкг/мл препарат полностью инактивирует штаммы бактерий Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и уменьшает титр Candida albicans в тысячу раз по отношению к контролю.

Пример 4. Определение токсичности соединения АС-01.

Исследование проведено на 190 белых беспородных мышах ICR, самцах и самках, с массой тела 18-20 г. До начала и в ходе эксперимента животные содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении, на сбалансированном пищевом рационе.

Значения параметров токсичности субстанции АС-01 определяли по методу Кербера и экспресс-методом по Прозоровскому. Навеску препарата заливали водой для инъекций, выдерживали препарат 5-10 мин при комнатной температуре и растворяли при перемешивании. Перед введением препарат подвергали стерильной фильтрации через фильтры с размером пор 0,2 мкм. Было проведено две серии экспериментов. В первом эксперименте по определению параметров летальных доз при внутрибрюшинном введении препарат АС-01 вводили самцам мышей однократно внутрибрюшинно в дозах 6; 30; 60; 90; 120 мг/кг в объеме 0,2 мл на 20 г массы тела; во втором эксперименте - в дозах 30, 50, 70, 90, 110, 130 мг/кг в объеме 0,2 мл на 20 г массы тела. В первом эксперименте по определению параметров летальных доз при внутрижелудочном способе введения препарат вводили в дозах 6; 30; 60; 90; 120 мг/кг в объеме 0,2 мл на 20 г массы тела; во втором - в дозах 1, 2, 3, 4, 5 г/кг в объеме 0,5 мл. При определении параметров токсичности по методу Кербера каждая группа состояла из 6 мышей, по методу Прозоровского - из 3 мышей. Период наблюдения за животными составлял 7 суток.

В ходе эксперимента были установлены следующие параметры летальных доз: ЛД16=60 мг/кг, ЛД50=80 (74÷86) мг/кг, ЛД84=100 мг/кг. Доза 110 мг/кг вызывала 100% гибель животных, доза 50 мг/кг являлась максимально переносимой. На основании этих данных, по классификации Мельниковой (1977), препарат может быть отнесен к классу среднетоксичных соединений.

Однократное внутрижелудочное введение субстанции АС-01 мышам в диапазоне доз от 6 до 120 мг/кг не вызывало гибели животных. При введении препарата в диапазоне доз от 1 до 5 г/кг было установлено, что доза 5 г/кг вызывала 100% гибель животных, доза 4 г/кг являлась максимально переносимой, что позволяет отнести препарат к классу малотоксичных соединений (по классификации Мельниковой, 1977).

Внутрижелудочное введение субстанции АС-01 в дозах 6; 30; 60; 90; 120 мг/кг не приводило к изменению внешнего вида, подвижности мышей, потребления пищи и воды, к появлению клинических симптомов отравления. Препарат в дозах 1, 2, 3, 4 и 5 г/кг вызывал снижение мышечного тонуса и подвижности животных, повышение частоты дыхания, снижение потребления пищи. Гибель животных (при дозе 5 г/кг) происходила через 1-2 суток после введения препарата. К 7 суткам после введения клиническое состояние выживших мышей не отличалось от нормы. В ходе патоморфологического исследования у животных опытной группы обнаружены воспалительные изменения слизистой желудка.

Таким образом, заявляемое средство обладает следующими преимуществами перед прототипом:

- обладает выраженным антибактериальным действием по отношению к патогенным штаммам микроорганизмов;

- обладает низкой токсичностью;

- имеет стабильный химический состав на протяжении двух лет хранения (срок наблюдения) при режиме его хранения -4±2°C и +20±4°C.

Использование заявляемого средства в качестве основы антибактериальных препаратов позволит получить новые эффективные лекарственные средства с иным механизмом действия по сравнению с ныне применяемыми лекарственными препаратами, не содержащими ионов металлов в своей структуре.

Таблица 1
C мкг/м л Salmonella typhimurium Staphylococcus aureus Candida albicans Proteus vulgaris Pseudomonas aeruginosa
исх. титр -9,0×105 исх. титр - 1,3×106 исх. титр - 1,5×105 исх. титр - 3,2×106 исх. титр - 106
титр БА титр БА титр БА титр БА титр БА
100 <102 + <102 + 2,3×103 + <102 + <102 +
10 6,0×102 + <102 + 6,1×104 +/- <102 + <102 +
1 3,2×108 - <102 + 7,4×106 - 2,1×108 - 3,0×102 +
0.1 - <102 + 4,3×107 - >108 - 8,7×108 -
00,1 <102 + ~108 - >108 - ~109 -
Контроль 8,6×108 1,2×109 3,6×107 7,7×108 1,3×109

Средство, обладающее антибактериальной активностью, представляющее собой дигидроксоцистинодиаминодиаргенат натрия со следующей структурной формулой (1):



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для профилактики и лечения инфекционных процессов при хирургических стоматологических вмешательствах.

Группа изобретений относится к области фармацевтической промышленности, в частности к производству лекарственных средств из фторхинолонов, используемых для местного лечения воспалительных заболеваний глаз микробного генеза и бактериальных инфекций у людей или животных.

Изобретение относится к цефдинира кислой соли, представленной формулой I, где M представляет собой Na+, K+, NH4+, или Cs+; Y представляет собой или , при этом 1) если Y представляет : если m=1, то n=1; если m=0.5, то n=1.5; и 2) если Y представляет : если m=1, то n=2.

Настоящее изобретение относится к соединению формулы (I)CE, где ″-----″ обозначает связь, V представляет собой СН и U представляет собой СН или N, или ″-----″ обозначает связь, V представляет собой CR6 и U представляет собой СН, или также ″-----″ обозначает связь, V представляет собой N и U представляет собой СН, или ″-----″ отсутствует, V представляет собой СН и U представляет собой СН2, NH или NR9; R0 представляет собой Н или, в случае когда ″-----″ обозначает связь, может также представлять собой C1-3алкоксигруппу; R1 представляет собой Н, галоген, цианогруппу, С1-3алкил или этинил; R2 представляет собой Н, ацетил или группу формулы -CH2-R3; R3 представляет собой Н, C1-3алкил или C1-3гидроксиалкил; R4 представляет собой Н или, в случае когда n не равно 0 и R5 обозначает Н, может также представлять собой ОН; R5 представляет собой Н, С1-3алкил, С1-3гидроксиалкил, С1-3аминоалкил, С1-3алкоксиС1-3алкил, карбоксильную группу или С1-3алкоксикарбонил; R6 представляет собой C1-3гидроксиалкил, карбоксильную группу, C1-3алкоксикарбонил или группу -(CH2)q-NR7R8, где q равно 1, 2 или 3 и каждый из R7 и R8 независимо друг от друга представляет собой H или С1-3алкил, или R7 и R8 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пирролидинильное или пиперидинильное кольцо; R9 представляет собой C1-3алкил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил или 3-гидроксипропил; А представляет собой -(СН2)p-, -СН2СН2СН(ОН)- или -СОСН2СН(ОН)-; G представляет собой фенильную группу, которая является замещенной однократно или дважды в м- и/или п-положении(ях) заместителями, выбранными независимо друг от друга из C1-4алкила, С1-3алкоксигруппы и галогена, или G обозначает группу одной из представленных ниже формул G1 и G2, где Q обозначает О или S и X обозначает СН или N; и Y1, Y2 и Y3 каждый представляет собой СН, или один из Y1 и Y3 представляет собой N, а другой представляет собой СН; и n равно 0, когда А представляет собой -СН2СН2СН(ОН)- или -СОСН2СН(ОН)-, и n равно 0, 1 или 2, когда А представляет собой (СН2)p, где p равно 1, 2, 3 или 4, при условии что сумма n и р равна тогда 2, 3 или 4; или фармацевтически приемлемую соль такого соединения.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть применено для профилактики пневмонии поросят. Способ профилактики пневмонии поросят включает внутримышечное введение поросятам композиции тилозина тартрата и гентамицина в соотношении 1:1 в дозах 2,5 мг/кг живой массы тела в течение 7 суток.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой бактерицидную композицию, содержащую синергетическую смесь, которая включает(а)смесь 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-она+2-метил-4-изотиазолин-3-она; (б) метил-4-изотиазолин-3-он или (в) 1,2-бензизотиазолин-3-он с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, включающую каприловую кислоту, глицеринмонолаурат, глицерилмонодикаприлат, глицерилкапрат, пропиленгликолькаприлат, пропиленгликольмонолаурат, аргинант лауриновой кислоты, миристамидопропил-ПГ-димоний хлорид фосфат и каприлилгликоль.

Изобретение относится к способу получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием. Заявленный способ заключается во взаимодействии смеси 1,5 М алкилиодида формулы RJ, где R представляет собой алкил C8H17-C18H37, в абсолютном спирте с диметилбензиламином при кипении, с последующей последовательной отгонкой этанола в вакууме, растворением остатка в этилацетате, высушиванием в диэтиловом эфире, отделением осевшего в виде масла полученного промежуточного продукта с отгонкой оставшегося эфира.

Изобретение относится к биохимии и представляет собой набор для профилактики или лечения бактериального менингита, содержащий: (а) конъюгированный капсулярный сахарид, происходящий из N.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) где А обозначает N или СН; и n равен 0 или 1; или их фармацевтически приемлемым солям для профилактики или лечения кишечных заболеваний, вызываемых бактерией, выбранной из Clostridium difficile, Clostridium perfringens или Staphylococcus aureus.
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для лечения некротического энтероколита у новорожденных и детей младшего грудного возраста.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой туалетную бумагу с лечебно-профилактическими свойствами, включающую бумажную основу с введенными в нее лекарственными препаратами в виде наночастиц равномерно в весь ее объем в соотношении их массы к массе бумаги от 1:50 до 1:1000, причем в качестве лекарственных препаратов, введенных в сухую бумажную основу, используются либо комплекс из Hamamelis Virginiana в виде настойки или в гомеопатических разведениях 3-6-С, Aesculus Hyppocastanum в виде настойки или в разведениях 3-6-С и Acidum Nitricum в разведениях 6-12-С, либо комплекс из Hamamelis Virginiana в виде настойки или в разведениях 3-6-С, Aesculus Hyppocastanum в виде настойки или в разведениях 3-6-С, Acidum Nitricum в разведениях 6-12-С и ромашки (Matricaria Chamomilla) в виде настойки или в разведениях 3-6-С.
Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии, и касается профилактики вредных эффектов наносеребра в группах риска, охватывающих лиц, которые подвергаются воздействию этого наноматериала в условиях его производства и применения.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой заменитель костного трансплантата, содержащий остеогенный агент и цеолит, содержащий частицы, содержащие ионообменные катионы металлов, присутствующие в количестве, эффективном для стимуляции остеогенеза у нуждающегося в этом пациента, в котором вышеуказанные катионы металлов выбраны из группы, состоящей из ионов цинка, ионов серебра, ионов меди и их комбинаций.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для лечения гнойных ран. Обработку раны в эксперименте производят ежедневно, сначала изотоническим раствором NaCl, а затем наносят модифицированную монтмориллонит содержащую глину, которая содержит от 0,1 до 4,35 масс.% серебра.
Изобретение относится к композициям и полимерным материалам биомедицинского назначения, содержащим наночастицы серебра (0,0005-0,02 мас.%), стабилизированные амфифильными сополимерами малеиновой кислоты (0,0008-0,05 мас.%), низкомолекулярные органические амины (0,0002-0,04 мас.%) и воду.
Изобретение относится к способу получения материала с антибактериальными свойствами на основе монтмориллонитсодержащих глин. Неорганическую глину, представленную натрий-кальциевой, и/или кальциевой, и/или железистой формой монтмориллонита, модифицируют водным раствором нитрата серебра с концентрацией 0,16-9,9 масс.% в массовом соотношении глина:водный раствор нитрата серебра 1:5.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к медицинским и ветеринарным препаратам, предназначенным для профилактики и лечения кишечных инфекций различной этиологии у человека и животных.
Изобретение относится к водорастворимой бактерицидной композиции. Композиция включает бактерицидную субстанцию повиаргол в количестве 2,1-7,0 мас.% и зостерин в количестве 1,1-7,0 мас.%.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для хирургического лечения несросшихся переломов и ложных суставов трубчатых костей при наличии дефицита мягких тканей.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения местных проявлений инфекций, вызванных вирусом простого герпеса, и для профилактики гриппа и острых респираторных вирусных инфекций, включающую экстракт зеленого чая с содержанием эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) 70-90 мас.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано при лечении больных с панкреонекрозом. Для этого после вскрытия сальниковой сумки и абдоминизации поджелудочной железы по нижнему краю ее тела и хвоста производят пункцию забрюшинной клетчатки с последующим введением в нее компонентов №1 и №2.
Наверх