Способ прогнозирования риска развития эндометриоза



Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза
Способ прогнозирования риска развития эндометриоза

 


Владельцы патента RU 2558854:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и позволяет сформировать группу женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, с повышенным риском развития изолированного эндометриоза. Для этого проводят выделение ДНК из периферической венозной крови, типирование и анализ комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов интерлейкина 6 (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 А/Т MIP 1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/G I-TAC). Повышенный риск развития изолированного эндометриоза прогнозируют при выявлении комбинаций сочетания аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, А I-TAC, -511 СС IL-1B. Изобретение обеспечивает простой неинвазивный метод диагностики эндометриоза, что повышает риск рецидива заболевания после прекращения любого метода терапии как консервативного, так и хирургического. 5 ил., 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано в гинекологии для прогнозирования риска формирования изолированного эндометриоза.

Во всем мире эндометриозом страдают примерно 176 млн. женщин, число которых постоянно растет, поэтому это заболевание относят к разряду современных эпидемий. Эндометриоз поражает женщин независимо от расовой принадлежности, социально-экономического статуса и возраста - от подростков 10-11 лет до женщин в возрасте 60-70 лет. При хронических тазовых болях и бесплодии наблюдается у 40-70% и 30-50% соответственно. Эндометриоз - доброкачественное разрастание ткани, функционально и морфологически подобной нормальному эндометрию, которое характеризуется повышенным локальным образованием эстрогенов и чувствительностью к ним, а также резистентностью к прогестерону. Эндометриоз - гормонально-зависимое заболевание, сложный патогенез которого остается до конца не расрытым. Выявлена дисфункция иммунной системы, нарушения молекул адгезии, пролиферации клеток и апоптоза. Увеличение уровня цитокинов и воспалительных медиаторов также является важным звеном патогенеза обоих нарушений [Адамян Л.В., Андреева Е.Н. Роль современной гормонмодулирующей терапии в комплексном лечении генитального эндометриоза. Пробл. Репрод. 2011; 17:6:66-77].

Традиционные симптомы эндометриоза - дисменорея, хроническая тазовая боль, диспареуния, бесплодие, однако в последние годы обнаружены достаточно высокие показатели аллергических и аутоиммунных заболеваний, определенную обеспокоенность вызывает возможность злокачественной трансформации при определенных формах эндометриоза. Сопутствующий воспалительный процесс, иммунологическая дизрегуляция, ингибирование апоптоза, активация ангиогенеза - патогенетичекие факторы, способствующие выживанию и росту эндометриоидных имплантов [Vigano Р., Infantino М., Lattuada D. et al. Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) gene polymorphisms in endometriosis. Mol Hum Reprod 2003; 9:47-52].

Эндометриоз - трудно поддающееся диагностике заболевание, особенно на ранних этапах, чаще диагноз устанавливается, когда пациентка обращается к врачу по поводу бесплодия. Эндометриоз называют «упущенным» заболеванием, поскольку проходит 7-8 лет в среднем от момента появления первых симптомов заболевания до правильной постановки диагноза. К сожалению, до сих пор не разработано простого неинвазивного метода диагностики эндометриоза, что повышает риск рецидива заболевания после прекращения любого метода терапии как консервативного, так и хирургического.

За аналог выбран патент РФ №2360605 (опубл. 10.07.2009) по заявке: 2008102542/14 от 22.01.2008 «Способ диагностики ретроцервикального эндометриоза и эндометриоза крестцово-маточных связок» (Колпинский Г.И, Лобанова О.Г.), где предложен способ выявления минимальных очагов эндометриоза при ультразвуковом исследовании трансвагинальным датчиком в первые три дня после овуляции. Датчик устанавливают в заднем своде влагалища. При наличии в позадишеечной области округлых очагов средней и повышенной эхогенности неоднородной структуры с неровными контурами или при наличии подобных образований в одной из параметральных областей на уровне перешейка диагностируют соответственно ретроцервикальный эндометриоз или эндометриоз крестцово-маточных связок. Способ позволяет выявить минимальные очаги эндометриоза за счет использования овуляторной жидкости в качестве контраста.

Однако эхография не устраняет всех акустических помех со стороны прямой кишки, затрудняющих верификацию мелких очагов ретроцервикального эндометриоза, позволяет диагностировать эндометриоз матки только в активной форме, частота встречаемости которой составляет 66%, что исключает возможность диагностики неактивной формы заболевания, нет данных о точности использования данного метода и не дает возможность спрогнозировать формирование эндометриоидных очагов.

В патенте РФ №2161311 (опубл. 27.12.2000) по заявке №99107082/14, 07.04.1999 «Способ прогнозирования развития эндометриоза, приводящего к нарушению репродуктивной функции у девочек с альгоменореей» (Филонова Л.В. (RU), Брусницина В.Ю. (RU), Александрова Н.Н. (RU)), выбранном за прототип, где предложен способ прогнозирования течения эндометриоза с развитием клинической симптоматики, включающий забор периферической крови и исследование ряда показателей иммунной системы, ответственных за формирование патогенеза эндометриоза, в частности иммуноглобулинов класса М, циркулирующих иммунных комплексов, уровня Т-лимфоцитов (-CD3). Определяют величину диагностического коэффициента F по формуле F=-K10,00793+K20,013-K30,043+3,09, где K1 - показатель IgM, K2 - показатель ЦИК, K3 - показатель Т-клеток (-CD3). Если F>0, то у пациента прогнозируют риск развития эндометриоза, при F<0 - возникновение эндометриоза маловероятно. Для прогнозирования изолированного развития эндометриоза чувствительность и специфичность этого способа недостаточна.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования риска формирования изолированного эндометриоза по комбинациям сочетаний генетических полиморфизмов: аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES,+1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10; аллелей -801 А SDF1, AI-TAC, -511 СС IL-1B.

Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки риска прогнозирования изолированного эндометриоза у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования формирования изолированного эндометриоза, включающий:

- забор периферической крови;

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- типирование генетических полиморфизмов генов интерлейкина 6 (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительноо протеина -1β (+1931 А/Т MIP1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/GI-TAC);

- анализ комбинаций сочетаний полиморфизмов гена интерлейкина 6 (-174 С IL-6), интерлейкина 1B (-511 С IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 A SDF1), макрофагального воспалительноо протеина -1β (+1931 A MIP1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A I-TAC) - прогнозирование повышенного риска развития изолированного эндометриоза у больных в случае выявления комбинаций сочетаний аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10; аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10; аллелей -801 A SDF1, AI-TAC, -511 СС IL-1B.

Новизна и изобретательский уровень заключается в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза развития изолированного эндометриоза у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, по наличию комбинаций сочетаний аллелей -174 С гена интерлейкина 6 (полиморфизм -174 С IL-6), аллеля -511 С интерлейкина 1 В (полиморфизм -511 С IL-1B), аллелей -592 С интерлейкина 10 (полиморфизм -592 С IL-10), аллелей -801 А фактора стромальных клеток (полиморфизм -801 A SDF1), аллелей+1931 А макрофагального воспалительноо протеина -1β (полиморфизм+1931 A MIP1β), аллелей -403 G регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (полиморфизм -403 G RANTES), аллелей А интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (полиморфизм A I-TAC).

Изобретения характеризуют следующие графические изображения:

Фиг. 1. Дискриминация аллелей по локусу+1931 А/Т MIP-lp, где ● - гомозиготы +1931АА, ■ - гомозиготы +1931ТТ, ▲ - гетерозиготы +1931 AT, ♦ - отрицательный контроль.

Фиг. 2. Дискриминация аллелей по локусу -801 G/A SDF1, где ● - гомозиготы -801GG, ■ - гомозиготы -801АА, ▲ - гетерозиготы -801GA, ♦ - отрицательный контроль.

Фиг. 3. Дискриминация аллелей по локусу -403 G/A RANTES, где ● - гомозиготы -403GG, ■ - гомозиготы -403АА, ▲ - гетерозиготы -403GA, ♦ - отрицательный контроль.

Фиг. 4. Электрофоретическое разделение продуктов рестрикции гена IL-1B -511, где 1, 9 - гомозиготы -511ТТ; 2, 3, 5, 7, 8- гетерозиготы -511СТ, 4, 6,- гомозиготы -511СС.

Фиг. 5. Электрофоретическое разделение продуктов рестрикции гена -592С/А IL-10, где 1, 8-10 - гомозиготы - 592СС, 4-7, 11-12 - гетерозиготы - 592СА, 2 - гомозигота - 592АА.

Способ осуществляют следующим образом:

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови больных с изолированными гиперпластическими процессами эндометрия методом фенольно-хлороформной экстракции в 2 этапа.

На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (pH 7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°C, 4000 об/мин в течение 20 мин. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (pH 8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы K (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37°C в течение 16 ч.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 мин. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -200°С.

Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров (табл. 1).

Структура праймеров и зондов, используемых для генотипирования исследуемых ДНК-маркеров

Молекулярно-генетический анализ проводят методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК. ПЦР осуществляют на амплификаторах IQ5 (BioRad) и ТП4-ПЦР-01-«ТЕРЦИК».

На амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) проводят анализ полиморфизмов генов +1931 А/Т MIP1β, -801 G/A SDF-1, -403 G/A RANTES, A/G I-TAC, -174 G/C IL-6 полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и специфических зондов с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей. Реакционная смесь объемом 25 мкл включает: 6,7 мМ трис-HCl (pH 8,8), 2,5 мМ MgCl2, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пМ каждого праймера, по 5 пкмоль каждого зонда, по 200 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации выполняют 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров и денатурация.

На амплификаторе ТП4-ПЦР-01-«ТЕРЦИК» проводят анализ полиморфизма гена -511 С/Т IL-1B, -592 С/А IL-10 методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров по методике указанной в работе (10). Реакцию проводят в 12,5 мкл общего объема смеси, содержащей 33,5 мМ трис-HCl (pH 8,8), 1,25 мМ MgCl2, 0,5 мкг геномной ДНК, по 5 пМ каждого праймера, по 100 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации выполняют 32 цикла амплификации по схеме: денатурация, отжиг праймеров и элонгация. Затем пробы выдерживают 5 мин при 72С и охлаждают. Продукты амплификации анализируют в 2%-ном агарозном геле, окрашенным бромистым этидием, в течение 30 мин при 160V. В качестве электрофорезного буфера используют 1xTAE (трис-ацетатный буфер). Затем пробы идентифицируют в проходящем УФ-свете.

Генотипирование осуществляют методом дискриминации аллелей с использованием Tag Man зондов. При проведении ПЦР в амплификаторе с флюоресцентной детекцией (амплификатор IQ5) генотипирование осуществляют методом Tag Man зондов по данным величин RFU каждого зонда, где RFU - уровень относительной флуоресценции.

Две полосы, вертикальная и горизонтальная, делят график на четыре секции: одна для каждого гомозиготного состояния, одна для гетерозиготного состояния и секция без реакции. Присвоение генотипов неизвестным образцам определяется вычерчиванием RFU для одного флуорофора на оси x относительно RFU для другого флуорофора на оси y на диаграмме дискриминации аллелей.

Если значения RFU неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и правее вертикальной полосы, генотип гетерозиготен (GA).

Если значения RFU неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и левее вертикальной полосы, генотип гомозиготен по аллелю 2 (RFU по аллелю 2 отложены по оси y).

Если значения RFU неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и правее вертикальной, генотип гомозиготен по аллелю 1 (RFU аллеля 1 отложены по оси x).

Если значения RFU неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и левее вертикальной, определение генотипа невозможно (в данном случае неопределенный образец - отрицательный контроль).

Генотипирование ДНК-маркеров (локус -511 С/Т IL-1B, -592 С/А IL-10) производят методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) продуктов ПЦР-амплификации специфических участков генома с использованием соответствующих ферментов рестрикции производства фирмы «Сибэнзим» (Новосибирск).

После инкубации рестрикционной смеси в течение 16 ч при температуре 37°C проводят разделение фрагментов ДНК с помощью горизонтального электрофореза на электрофоретических ячейках производства фирмы «Хеликон» (Россия). В зависимости от размера разделяемых фрагментов ДНК используют агарозный гель 2-3% концентрации, приготовленный на основе ТВЕ-буфера, окрашенный раствором бромистого этидия (0,01%). Визуализацию фореграмм осуществлют в темном боксе с трансиллюминатором фирмы UVP (Швеция).

Проводят контроль качества генотипирования с использованием положительных контрольных образцов ДНК с разными генотипами и отрицательного контрольного образца, где вместо ДНК к реакционной смеси добавляют воду.

Формирование базы данных и статистические расчеты осуществляют с использованием программы «STATISTICA 6.0» [Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета программ Ststistica / О.Ю. Реброва // М.: МедиаСфера. - 2006. - 312 с.].

Изучение роли комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов интерлейкинов в формировании изолированной миомы матки проводят с помощью программного обеспечения APSampler [http:sources.redhat.com/cygwin/], использующего метод Монте-Карло марковских цепей и байесовсовскую непараметрическую статистику [Favorov А.V. A Gibbs sampler for identification of symmetrically structured, spaced DNA motifs with improved estimation of the signal length / A.V. Favorov, M.S. Gelfand, A.V. Gerasimova [et al.] // Bioinformatics. - 2005. - Vol. 21, №10. - P. 2240-2245].

Оценку уровня статистической значимости полученных результатов проводят с использованием поправки Бонферрони (pcor), т.е. поправки, минимизирующей вероятность получения ложноположительньгх результатов [Боровиков, В. Statistica: искусство анализа данных на компьютере / В. Боровиков. - 2-е изд. - СПб.: Питер, 2003. - 688 с.: ил. - (Для профессионалов)].

Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития изолированного эндометриоза подтверждает анализ результатов наблюдений 713 больных с различными пролиферативными процессами репродуктивной системы (миомой матки, эндометриозом, гиперпластическими процессами эндометрия) и группы популяционного контроля из 500 человек. Среди 713 обследуемых больных у 104 женщин наблюдался эндометриоз. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических, лабораторно-инструментальных методов обследования и подтвержденного результата гистологического исследования. В исследуемые группы включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России и не имеющие родства между собой.

Установлено, что у пациенток с изолированной формой эндометриоза сочетания генетических вариантов аллелей:

-174 CIL-6, -801 A SDF1,+1931 A MIP1β, -592 CIL-10 встречается у 40,00%, что в 3,4 раза чаще, чем в контрольной группе (11,72%, р=0,0000008, pcor=0,006, OR=5,02 95% CI 2,52-10,01),

-801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10 встречается у 49,18%, что в 2,5 раза чаще, чем в контрольной группе (19,44%, р=0,000001, pcor=0,009, OR=4,00),

-801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10, встречается у 41,77%, что в 2,4 раза чаще, чем в контрольной группе (16,77%, р=0,000004, pcor=0,03, OR=3,55),

-174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 CIL-10 встречается у 37,31%, что в 2,7 раза чаще по сравнению с контрольной группой (;13,84%, р=0,000006, pcor=0,05, OR=3,70).

-801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10 встречается у 48,38%, что в 2,2 раза чаще по сравнению с контрольной группой (22,00%, р=0,000005, pcor=0,04, OR=3,32).

и -801 A SDF1, A I-TAC, -511 СС IL-1B встречается у 24,73%, что в 3 раза чаще по сравнению с контрольной группой (8,03%, р=0,000008, pcor=0,05, OR=3,76).

Конкретный пример использования предложенного способа.

Пациентке X., русской национальности, являющейся уроженкой Центрального Черноземья России, был проведен забор периферической венозной крови, выделение ДНК из периферической венозной крови; типирование генетических полиморфизмов генов интерлейкинов (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 А/Т MIP1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/G I-TAC) и анализ сочетаний полиморфизмов гена интерлейкина 6 (-174 С IL-6), интерлейкина 1 В (-511 С IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 А SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A MIP1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A I-TAC).

Результаты представлены на фиг. 1-5.

Полученные данные свидетельствуют о наличии сочетаний аллелей:

-174 С IL-6, -801 A SDF1,+1931 A MIP1β, -592 С IL-10 (OR=5,02),

-801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10 (OR=4,00),

-801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 CIL-1B, -592 С IL-10 (OR=3,55),

-801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10 (OR=3,32),

-174 CIL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10 (OR=3,70),

-801 A SDF1, A I-TAC, -511 CC IL-1B (OR=3,76), что подтверждает необходимость отнесения пациентки в группу риска развития изолированного эндометриоза.

Применение данного способа позволит сформировать группу женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России с повышенным риском развития изолированного эндометриоза. В данной группе женщин рекомендовано проводить исследование концентрации опухолевых маркеров СА125, С А 19-9, РЭА методом иммуноферментного анализа, динамический осмотр УЗИ органов малого таза, простая и расширенная кольпоскопия, бактериоскопическое исследование мазков, МРТ исследование, приоритет выполнения репродуктивных целей осуществлять в молодом репродуктивном возрасте.

Способ прогнозирования риска развития изолированного эндометриоза, включающий забор периферической венозной крови, отличающийся тем, что из периферической венозной крови выделяют ДНК, после чего проводят типирование и анализ комбинаций сочетаний генетических полиморфизмов генов интерлейкина 6 (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 А/Т MIP 1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/G I-TAC), прогнозируют повышенный риск развития изолированного эндометриоза у пациенток русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России при выявлении комбинаций сочетания аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES,+1931 A MIPip, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, A I-TAC, -511 СС IL-1B.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике пневмонии. Способ лабораторной диагностики пневмонии заключается в том, что исследуют уровень сурфактантного белка А и/или сурфактантного белка D в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА), и при значении уровня сурфактантного белка А более 49,56 ng/ml или уровня сурфактантного белка D более 234,39 ng/ml диагностируют пневмонию.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования плацентарной недостаточности у женщин I триместра с угрозой невынашивания беременности инфекционного генеза.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может использоваться для прогнозирования устойчивого вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии у больных с гепатитом C на фоне ВИЧ-инфекции.
Изобретение относится к медицине, а именно к гемотрансфузиологии, и может быть использовано при отборе доноров, для получения плазмы крови. Для этого получают плазму крови, выявляют в ней антимикробные пептиды дефензины.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска снижения уровня здоровья ребенка в возрасте 12-16 лет. Для этого через час после еды полость рта за 15 минут до забора ротовой жидкости промывается раствором натрия хлорида 0,9%.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и касается способа прогнозирования развития гиперплазии эндометрия у пациенток с миомой матки после проведения эмболизации маточных артерий (ЭМА).

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для обнаружения контаминантов полимеров глюкозы. Для этого проводят анализ воспалительного ответа in vitro с применением клеточной линии, которая представляет собой клеточную линию либо макрофагов, либо дифференцируемую в макрофаги, либо клетку, экспрессирующую один или несколько толл-подобных рецепторов (TLR) или NOD-подобных рецепторов, выбранных из TLR2, TLR4 и NOD2.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения иммуно-функционального резерва организма. Для этого определяют лейкоцитарные показатели периферической крови до и после нагрузочной пробы, используя ступенчатую субмаксимальную физическую нагрузку.

Изобретение относится к области медицины, а именно гинекологии, и может быть использовано для выявления риска развития гиперпластических процессов эндометрия у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения целесообразности проведения иммунологического обследования у работников животноводства.
Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики болезней органов дыхания у телят. Способ включает отбор проб крови у телят.
Изобретение относится к медицине, а именно к детской гастроэнтерологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона у детей.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики биполярного аффективного расстройства. Сущность способа состоит в том, что выявляют достоверные различия в спектре распределения белков сыворотки крови без белков альбумина, иммуноглобулина G, иммуноглобулина А, антитрипсина, трансферина и гаплоглобина у больных эндогенным психозом.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике бесплодия женщин. Для этого проводят определение цитотоксичности сыворотки женщин к мужским лимфоцитам, включая их совместное культивирование с контрольной мужской и исследуемой женской сывороткой в лунках 96-луночного планшета в присутствии питательной среды RPMI 1640 в СО2-инкубаторе.

Изобретение относится к высокочувствительному способу определения количества глицирризина, глицирретиновой кислоты и их фармакологически приемлемых солей, присутствующих в плазме крови человека.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата.

Изобретение относится к медицине, а именно акушерству и может быть использовано для прогнозирования веса новорожденного у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и может быть использовано для дооперационного определения объема операции у больных диффузным токсическим зобом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска раннего развития микрососудистых осложнений у детей с сахарным диабетом 1 типа.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для мониторинга состояния пациента. Способ предоставления сигнала предупреждения о меняющемся во времени физиологическом параметре включает мониторинг контролируемого параметра пациента, сравнение контролируемого параметра с начальным пороговым критерием, временное изменение начального порогового критерия на пороговый критерий ухудшенного состояния после проведения терапии, а затем, после определенного периода времени, на пороговый критерий после введения.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска формирования приобретенной устойчивости микобактерий туберкулеза к препаратам группы фторхинолонов в ходе лечения больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя. Для этого выявляют у пациента признаки-предикторы формирования устойчивости микобактерий туберкулёза к фторхинолонам и при наличии их у него присваивают выявленным признакам-предикторам соответствующие значения баллов. Наличие инфильтративно-деструктивных изменений в легких в сочетании с диссеминацией оценивают как +15 баллов. Рост более 100 колоний M. tuberculosis при посеве на плотные питательные среды либо положительный результат прямой микроскопии мазка диагностического материала с окраской по Цилю-Нельсену соответствует +17 баллам. Наличие начальной устойчивости микобактерий туберкулеза (МБТ) к аминогликозидам или/и капреомицину расценивают как +7 баллов. Наличие у пациента сопутствующего нарушения функции почек соответствует +3 баллам, сопутствующей алкогольной или/и наркотической зависимости соответствует +6 баллам. В случае прерывания курса полихимиотерапии МЛУ-ТБ на 2 недели и более присваивают +38 баллов. Назначение фторхинолона в суточной дозе ниже рекомендуемой оценивают как +5 баллов. В случае назначения индивидуализированных режимов полихимиотерапии МЛУ-ТБ с включением менее 5 противотуберкулезных препаратов с сохраненной чувствительностью МБТ присваивают +8 баллов. Применение резекционных методов хирургического лечения оценивают как -3 балла. После этого осуществляют подсчёт суммарного балла риска. Далее определяют вероятность или степень риска формирования устойчивости микобактерий туберкулёза к фторхинолонам. При этом степень риска прогнозируют либо по интервальной шкале, либо путём вычисления точного значения вероятности по формуле: p=1/1+e-0,055x-2,964, где е - основание натурального логарифма, константа, равная 2,718….., х - абсолютное значение суммарного балла. В случае использования интервальной шкалы при суммарном балле < 30 степень риска оценивают как низкую с вероятностью (р), равной 0,0-0,2. При суммарном балле, соответствующем 30-50 баллам, степень риска оценивают как среднюю с р>0,2-0,5. При суммарном балле, соответствующем 50-70 баллам, степень риска расценивают как высокую с р>0,5-0,7. При суммарном балле >70 баллов степень риска расценивают как очень высокую с р>0,7-0,9. Простой в применении способ, не требующий использования вычислительных устройств, обеспечивает возможность прогнозирования риска формирования приобретенной устойчивости микобактерий туберкулеза ко всем препаратам группы фторхинолонов и может быть использован при выборе режима химиотерапии, определении ее продолжительности и может влиять на принятие своевременного решения о проведении хирургического лечения. 1 ил., 4 табл., 2 пр.
Наверх