Способ моделирования токсического гепатита формалином и этиловым спиртом в токсикологическом эксперименте


 


Владельцы патента RU 2564758:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУ ПГНИИК ФМБА России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, токсикологии, и может быть использовано для изучения формирования и прогрессирования изменений печени, возникающих под действием токсико-химических повреждающих факторов. Для этого предложен способ моделирования подострого токсического поражения печени. Способ включает введение крысам-самцам перорально в течение 21 дня формалина. Введение осуществляют через день, из расчета 0,2 мл на 100 г массы животного. Одновременно воздействуют 10% раствором этанола, который используют вместо питьевой воды свободным поением животных. Способ обеспечивает развитие выраженных дегенеративных повреждений практически всех участков печени, что подтверждается повышением трансаминаз в сыворотке крови, креатининемией, снижением синтетической функции печени и развитием холестаза. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, токсикологии, и может быть использовано для изучения способов формирования и изучения прогрессирования изменений в печени, возникающих в эксперименте, под действием токсико-химических повреждающих факторов.

Основными инициаторами неинфекционных заболеваний печени у людей являются неправильное питание и злоупотребление алкоголем. Кроме того, разнообразные химические вещества, широко применяемые в промышленности, зачастую вызывают токсические поражения, сопровождающиеся различными нарушениями ферментативного равновесия в ней и изменением активности ферментов печеночного поражения. В связи с этим для изучения механизмов формирования неинфекционных заболеваний печени и возможности их профилактики и лечения природными факторами требуются экспериментальные модели, наиболее приближенные к реальным клиническим условиям.

Известны способы моделирования токсического гепатита у крыс путем помещения животного в клетку с открытым резервуаром, наполненным 70%-ным раствором формалина. В этих условиях лабораторные животные содержатся в течение 5-7 месяцев (пат. RU 94026117. Способ создания модели гепатита печени млекопитающих. Бояринов Г.А., Смирнов В.П., Кауров Я.В. и др., опубл. 27.08.1996), а также трехкратного подкожного введения масляного раствора четыреххлористого углерода (CCl4) с интервалом инъекций в 4 суток, из расчета 0,45 мл раствора на 100 г массы тела животного в течение 44 дней (Глушакова Е.С.Функциональное состояние печени в норме при экспериментальном токсическом гепатите и его физиотерапевтической коррекции в разные фазы окологодового цикла: автореферат дис. канд. биол. наук: 14.00.51, 14.00.16 / Глушакова Елена Сергеевна. - Томск, 2005. - 20 с).

Недостатками перечисленных выше способов моделирования токсической гепатопатии являются трудоемкий и длительный период моделирования от одного до семи месяцев, воздействие формалина на дыхательную и сердечно-сосудистую системы. Кроме того, при создании концентраций аэрозолей и удержании на заданном уровне в затравочных камерах отмечаются значительные трудности. Кроме того, количество вещества, попавшее в организм, зависит не только от его концентрации в воздухе, но и от степени его дисперсности в воздухе, а также от индивидуально выраженных защитных способностей верхних дыхательных путей лабораторных животных, что приводит к очень низкой степени воспроизводимости результатов исследования. Введение 50% масляного раствора четыреххлористого углерода в виде инъекций отличается от формирования большинства профессиональных заболеваний токсическими веществами путем поступления в организм ингаляционно или per os.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому изобретению является способ инициации токсического гепатита посредством поения животных 10% раствором этанола в сочетании с инъекциями 50% масляного раствора четыреххлористого углерода с интервалом инъекций в 4 суток из расчета 0,45 мл раствора на 100 г массы животного в течение 30 дней (Скакун Н.П. Эффективность антиоксидантов при комбинированном поражении печени четыреххлористым углеродом и этанолом / Н.П. Скакун, С.Ф.Ковальчук // Фармакология и токсикология. - 1987. - №3. - С. 104-107).

Недостатком данного способа является способ введения четыреххлористого углерода, а также длительность создания экспериментальной патологической модели. При этом следует отметить, что основным временным показателем для создания экспериментальных моделей подострого токсического гепатита токсическими веществами является 21 день, что четко соблюдается при нашем варианте моделирования.

Техническим результатом предлагаемого способа является решение задачи, заключающейся в создании модели токсического гепатита 10% этанолом в сочетании с формалином в более короткие сроки, и с соответствующей картиной поражения, более физиологичным способом, с высокой воспроизводимостью, что позволяет более полно изучить патофизиологические механизмы развития патологии. Преимущества предлагаемой модели в том, что она легко воспроизводима, результат достигается за более короткий промежуток времени по сравнению с прототипом. Повышение воспроизводимости формирования подострого патологического процесса в печени и сокращение сроков опыта достигаются за счет потенцирования гепатотоксического эффекта, вызванного воздействием 10% раствором этанола и формалина.

Указанный технический результат достигается воздействием токсического средства, которое вводят крысам-самцам перорально шприцем в течение 21 дня, в качестве токсического средства используют формалин (CH2O), который вводят через день, из расчета 0,2 мл на 100 г массы животного с одновременным ежедневным использованием вместо питьевой воды 10% раствора этанола (С2Н5ОН) свободным поением.

Способ осуществлялся следующим образом. Для достижения адекватности предлагаемой модели изучено 50 крыс-самцов линии Вистар массой тела 180-200 г, разделенных на группы. Первую группу представляют 10 интактных животных. 20 крысам-самцам, представляющим вторую группу, вводят токсическое средство через день перорально, шприцем, в течение 21 дня, в качестве токсического средства используют формалин (СН2О) из расчета 0,2 мл на 100 г массы животного, с одновременным ежедневным использованием вместо питьевой воды 10% раствора этанола (С2Н5ОН) свободным поением.

20 крысам-самцам третьей группы инициируют токсическое поражение печени путем поения животных 10% раствором этанола ежедневно вместо питьевой воды в сочетании с инъекциями 50% масляного раствора четыреххлористого углерода (CCL4) с интервалом инъекций в 4 суток из расчета 0,45 мл на 100 г массы тела животного в течение 30 дней по способу прототипа.

На 21 день животных декапитируют с последующим проведением лабораторных тестов. Изучают содержание в сыворотке крови аспартатаминотрансферазы (ACT) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в (Ед/л), креатинина (КР) в (мкмоль/л), щелочной фосфатазы (ЩФ) в (МЕ/л), холестерина (X) в (ммоль/л), триглицеридов (ТГ) в (ммоль/л).

Приготовление формалина (CH2O) производили путем растворения формальдегида в воде до концентрации 40%, и разведения 96° спирта до 10%-ной концентрации.

Способ апробирован в условиях отдела изучения механизмов действия физических факторов (ОИМДФФ) ФГБУ ПГНИИК ФМБА России.

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

Пример №1. Интактная крыса-самец линии Вистар №5, масса тела 190 г. Дополнительных воздействий не получает. Исследование животного осуществляется одновременно с животными опытной группы. Содержание в крови КР - 78,2 мкмоль/л, ЩФ - 395,4 МЕ/л, ACT - 141,3 Ед/л, АЛТ - 83,4 Ед/л, X - 1,9 ммоль/л, ТГ - 2,3 ммоль/л.

Пример №2. Крыса-самец линии Вистар №13, масса тела - 200 г. Осуществляют поение животного 10% раствором этанола ежедневно вместо питьевой воды в сочетании с инъекциями 50% масляного раствора четыреххлористого углерода (CCl4) с интервалом инъекций в 4 суток в течение 30 дней из расчета 0,45 мл на 100 г массы тела животного. КР - 112,7 мкмоль/л, ЩФ - 477,2 МЕ/л, ACT - 200,0 Ед/л, АЛТ - 105,8 Ед/л, X - 1,8 ммоль/л, ТГ - 1,6 ммоль/л. Результат расценен как подострое отравление.

Пример №3. Крыса-самец №35 линии Вистар, масса тела 195 г. Вводят токсическое средство через день перорально шприцем в течение 21 дня, в качестве токсического средства используют формалин (CH2O) из расчета 0,2 мл на 100 г массы животного с одновременным ежедневным использованием вместо питьевой воды 10% раствора этанола (С2Н5ОН) свободным поением.

Содержание в крови КР - 86,7 мкмоль/л, ЩФ - 591,2 МЕ/л, ACT - 215,1 Ед/л, АЛТ - 138,4 Ед/л, X - 0,9 ммоль/л, ТГ - 1,2 ммоль/л. Результат расценен как подострое отравление.

Из представленной таблицы следует, что увеличение содержания ACT; АЛТ (Р<0,001), а также повышение КР (Р<0,001) в сыворотке крови указывают на усиление степени поражения печени и свидетельствуют о повреждении гепатоцитов, значительное снижение показателей X и ТГ (Р<0,05, Р<0,01) указывает на снижение синтетической функции печени, а повышение уровня ШФ (Р<0,001) - на развитие холестаза.

Таким образом, повышение воспроизводимости формирования подострого патологического процесса в печени и сокращение сроков опыта достигается за счет потенцирования гепатотоксического эффекта, вызванного воздействием 10% раствором этанола и формалина. Преимущества предлагаемой модели в том, что она легко воспроизводима, результат достигается за более короткий промежуток времени по сравнению с прототипом.

Способ моделирования подострого токсического поражения печени, включающий воздействие токсическим средством, которое вводят крысам-самцам перорально шприцем в течение 21 дня, отличающийся тем, что в качестве токсического средства используют формалин (CH2O), который вводят через день из расчета 0,2 мл на 100 г массы животного с одновременным ежедневным использованием вместо питьевой воды 10% раствора этанола (С2Н5ОН) свободным поением.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии и может быть использовано для лечения, коррекции и профилактики последствий ишемического воздействия на печень в условиях временного ее выключения из кровообращения.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано при ранней диагностике и лечении опухолей, индуцированных в эксперименте. Для раннего МРТ выявления опухолей, инвазий и метастазов животному вводят комбинации МРТ-негативных контрастных нанопрепаратов с позитивными МРТ контрастными препаратами.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной офтальмологии, и предназначено для получения модели пролиферативной витреоретинопатии. Для этого в полость стекловидного тела глаза крысы вводят 2 мкл изотонического раствора, содержащего 0,5 мкг - 0,5 мг конканавалина А.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для определения степени устойчивости мелких лабораторных животных к острой гипобарической гипоксии.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и может быть использовано в качестве модели опухоли толстой кишки. Для этого крысе в просвет общего желчного протока вводят пикрилсульфоновую кислоту в дозе 0,03-0.05 мл.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной токсикологии. И может быть использовано при исследовании механизмов токсического действия урана на функциональное состояние почек и других органов и систем при комбинированном воздействии.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано для оценки противоопухолевого действия наночастиц (НЧ) металлов.
Изобретение относится к медицине, к экспериментальной онкологии и может быть использовано в качестве модели фибромиомы матки. Моделирование проводят на самках кролика весом 3-4 кг введением серотонина.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гнойной хирургии, и может быть использовано для моделирования абсцесса печени. Для этого крысе линии Wistar под ультразвуковым контролем проводят чрескожную пункцию печени в определенной точке.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии и сосудистой хирургии, и может быть использовано при лечении критической ишемии конечности.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной токсикологии, и может быть использовано для моделирования хронического токсического поражения печени. Для этого самцам-крысам в течение 50 дней вводят через день, per os, шприцем 10%-ный раствор формалина (CH2O) из расчёта 0,2 мл на 100 г массы животного. Способ обеспечивает создание модели, по сроку моделирования и картине поражения в патогенезе приближенной к клиническому течению хронического процесса в печени за счёт развития структурных и функциональных изменений в гепатоцитах под действием вводимого химического вещества. 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано для обучения студентов и врачей-стоматологов. Модель корня зуба выполнена прозрачной и содержит разрушенную коронковую часть и заполненные по всей длине гуттаперчей корневые каналы корня зуба. Модель корня зуба содержит также съемную непрозрачную коронку или смываемое непрозрачное покрытие, закрывающие с боков модель корня зуба, и пазы для фиксации модели корня зуба в модель челюсти крепежным винтом. Модель корня зуба выполнена с возможностью разработки корня зуба при наличии коронки или непрозрачного покрытия, и контроля при их отсутствии. Изобретение позволяет повысить эффективность обучения разработке корня зуба за счет обеспечения возможности производить разработку корневых каналов как на прозрачной, так и на непрозрачной модели корня зуба, а контроль процесса разработки производится на прозрачной модели корня зуба. 3 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования кишечного иерсиниоза у мелких животных, для изучения влияния антигенов данного возбудителя на макроорганизм. Способ включает ряд стадий. Штамм Yersinia enterocolitica выращивают при температуре 24-26°C на агаре Хоттингера. Готовят взвесь полученной культуры в хлориде натрия, которую соединяют в соотношении 1:1 с 0,2% раствором агара Нобля. Взвесь содержит 3×108 микробных клеток Y. Enterocolitica. Эту взвесь вводят морским свинкам внутрибрюшинно в объеме 0,5 мл. Животных забивают через пять дней, вскрывают, делают мазки-отпечатки из брызжеечных лимфоузлов и выделяют из них пассированную культуру. Далее заражают опытных животных пассированной культурой. Перед заражением проводят снижение кислотности их желудочного сока путем перорального введения 7,5% раствора пищевой соды, белым мышам - 0,1 мл, морским свинкам - 0,5 мл. Заражение проводят перорально. Причем белым мышам вводят 3×109 микробных клеток, разведенных в 0,2 мл физиологического раствора, а морским свинкам - 3×109 микробных клеток, разведенных в 0,5 мл физиологического раствора. Подтверждают кишечный иерсиниоз методом ПНР после высева из внутренних органов животных на агар Хоттингера с pH 7,2. Способ обеспечивает полное воспроизведение патогенетических механизмов заболевания в эксперименте. 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к нейрохимии, патофизиологии, неврологии и психиатрии, и касается выявления противосудорожного действия цитиколина. Выявление проводят на модели пентилентетразолового киндлинга у мышей самцов линии C57B1/6. Действие цитиколина оценивают после его введения в дозе 500 мг/кг за час до введения пентилентетразола. Введение проводят в разном режиме в разных группах животных, а именно: ежедневно в течение 24 дней, однократно на 14 день кидлинга или в течение 14 дней кидлинга. Способ обеспечивает возможность выявления спектра и степени выраженности противосудорожного действия препарата. 2 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования отграниченного перитонита для изучения патогенеза и тестирования новых средств профилактики и лечения этого заболевания. Для этого нелинейным лабораторным мышам массой 20-22 г производят однократное внутрибрюшинное введение 10% каловой взвеси из свежих крысиных фекалий через одну точку вкола по средней линии в пупочной области живота на глубину 2 мм. Взвесь готовят на изотоническом растворе хлорида натрия и однократно фильтруют через двойной слой марли. Для использования модели более 13 дней взвесь вводят в дозе 0,3-0,4 мл, а для использования модели не более 13 дней - в дозе 0,5 мл. Результатом является образование отграниченных абсцессов в нескольких анатомических областях брюшной полости. Способ позволяет воспроизвести у мышей длительно текущее заболевание, близкое по патогенезу к клиническим формам, обеспечивая предупреждение гибели животных в ранние сроки эксперимента от инфекционно-токсического шока. 4 табл., 8 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции при гипоэстрогенемии. Способ включает моделирование дисфункции путем проведения билатеральной овариэктомии крысам-самкам линии Wistar. На 43 день после операции проводят ежедневное в течение 7 суток внутрибрюшинное введение L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг. Коррекцию индуцированной дисфункции проводят путем ежедневного внутрижелудочного введения розувастатина в дозе 0,85 мг/кг и тиоктовой кислоты в дозе 50 мг/кг на протяжении 7 дней, совпадающих с введением крысам L-NAME. Способ обеспечивает активизацию коррекции эндотелиальной дисфункции при гипоэстрогенемии. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, результаты которого могут быть использованы в области восстановительной медицины, геронтологии и гериатрии. В эксперименте используют белых беспородных крыс-самок предстарческого возраста, весом 290,7±31,6 г, содержащихся в стандартных условиях вивария. Крысам дают легкую воду со сниженным содержанием дейтерия (46±2 ppm) в качестве питьевой воды в объеме 25-30 мл/сутки ежедневно в течение 5 недель. Способ обеспечивает профилактику нарушений нейроэндокринной регуляции при старении, повышение адаптивного статуса, нормализацию репродуктивных функций у крыс предстарческого возраста. 2 табл., 2 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и предназначено для моделирования пролиферативной витреоретинопатии (ПВР). Для этого в оба глаза кролика осуществляют однократное интравитреальное введение 2000 Ε Интерлейкина 1-b в объеме 0.1 мл. Затем последовательно интравитреально однократно вводят тромбоцитарный фактор роста PDGF АА остеосаркомы в объеме 0.1 мл с концентрацией 2000 пкг/мл. Способ обеспечивает получение клинически и цитопатогенетически адекватной модели ПВР с возможностью ее использования для изучения эффективности медикаментозного лечения и профилактики ПВР в эксперименте. 2 пр., 6 ил.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, в частности к способу моделирования тромбообразования у мышей для изучения эффективности препаратов антикоагулянта. Способ характеризуется тем, что открывают сонную артерию и яремную вену у наркотизированного животного. Под сонную артерию подкладывают изолирующий ее от окружающих тканей материал. Затем вводят препарат антикоагулянта или контрольного раствора в яремную вену. После этого приводят сонную артерию в соприкосновение с тонкой стальной иглой, соединенной с источником постоянного тока с напряжением 3 В. При этом второй электрод вводят подкожно в область бедра животного и пропускают через него ток силой 200-250 микроампер в течение одной минуты. Затем осуществляют под микроскопом видеосъемку, в результате которой отснятый видеоматериал анализируют посредством компьютерной программы для определения размера образовавшегося тромба. Способ обеспечивает приемлемую скорость образования тромба, повышая тем самым эффективность определения тромбообразования у модельных животных с электрически индуцированным тромбозом. 10 з.п. ф-лы

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Цирроз печени у кроликов воспроизводят путем подкожного введения тетрахлоруглерода. Измеряют сатурацию в левом, нижнем и правом краях большого сальника. При сатурации 87-97% рассекают большой сальник на 3-6 лоскутов. В каждом лоскуте две сальниковые артерии, анастомозирующие друг с другом. На диафрагмальной поверхности печени, на глубине от 0,5 см до 1,0 см формируют каналы длиной от 7,0 см до 10,0 см на расстоянии 2,0-3,0 см друг от друга. Проводят рассеченные участки большого сальника через печеночную ткань. Способ позволяет осуществить разгрузку портального кровотока при циррозе печени с компенсированным и декомпенсированным синдромом портальной гипертензии за счет образования коллатералей между сосудами печени и большого сальника. 5 ил.
Наверх