Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения



Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения
Промежуточное соединение для синтеза каспофунгина и способ его получения

 

C07K1/06 - Пептиды (пептиды в пищевых составах A23, например получение белковых композиций для пищевых составов A23J, препараты для медицинских целей A61K; пептиды, содержащие бета-лактамовые кольца, C07D; циклические дипептиды, не содержащие в молекуле любого другого пептидного звена, кроме образующего их кольцо, например пиперазин-2,5-дионы, C07D; алкалоиды спорыньи циклического пептидного типа C07D519/02; высокомолекулярные соединения, содержащие статистически распределенные аминокислотные единицы в молекулах, т.е. при получении предусматривается не специфическая, а случайная последовательность аминокислотных единиц, гомополиамиды и блоксополиамиды, полученные из аминокислот, C08G 69/00; высокомолекулярные продукты, полученные из протеинов, C08H 1/00; получение

Владельцы патента RU 2592280:

ЮНИТРИС БИОФАРМА КО., ЛТД (CN)

Изобретение относится к промежуточному соединению формулы (I) для синтеза каспофунгина

в котором R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NR3R4; R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или фенил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную C1-6 алкильную группу, С3-8 циклоалкильную группу или фенил; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, линейными или разветвленными C1-6 алкильными группами, возможно замещенными амино группами, С3-8 циклоалкильными группами или фенилом; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает пять атомов. Изобретение также относится к способу получения промежуточного соединения формулы (I) и к способу получения каспофунгина. Технический результат: получено новое промежуточное соединение для синтеза каспофунгина, которое упрощает способ получения каспофунгина и повышает его выход. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 1 табл., 31 пр.

 

Область техники

Настоящее изобретение относится к промежуточному соединению для синтеза каспофунгина и к способу его получения.

Предшествующий уровень техники

Каспофунгин представляет собой новый противогрибковый препарат из группы эхинокандинов, который был разработан в начале 21 века и впервые поступил на рынок в Соединенных Штатах в феврале 2001 года. Этот препарат отличается оригинальным механизмом действия, который заключается в ингибировании фермента β-D-глюкансинтазы, что приводит к нарушению целостности клеточной стенки грибов и их гибели. Каспофунгин обладает рядом преимуществ, а именно широким спектром противогрибкового действия, отсутствием перекрестной резистентности и низкой токсичностью, что позволяет использовать его для лечения системных грибковых инфекций, в том числе различных инвазивных кандидозов и аспергиллезов. Этот препарат является более эффективным, чем амфотерицин В, особенно в отношении распространенных кандидозов, устойчивых к терапии.

Каспофунгин был получен полусинтетическим методом из промежуточного соединения пневмокандина В0 (РВ0), полученного способом биологической ферментации. Различные методы синтеза каспофунгина достаточно подробно описаны в таких патентах, как US 5552521, US 5936062, US 20100168415, WO 2002083713, WO 2007057141, CN 101648994, CN 101792486 и т.д. Во всех этих методах используется ключевое промежуточное соединение формулы I′, содержащее тиол-замещенные ароматические соединения (HS-Ar), например, содержащее тиофенол в качестве уходящей группы

Поскольку реакция замещения тиол-содержащих ароматических соединений является региоселективной, то в ходе получения каспофунгина необходимо использовать несколько ступеней хроматографической очистки, чтобы обеспечить получение чистых промежуточных соединений и чистого конечного продукта, что приводит к снижению выхода, высокой стоимости, сложному производственному процессу и т.п. Таким образом, по-прежнему существует необходимость в разработке новых способов получения каспофунгина.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к промежуточному соединению для синтеза каспофунгина и к способу его получения. Способ синтеза каспофунгина можно упростить, увеличив эффективность синтеза вышеуказанного промежуточного соединения.

Целью настоящего изобретения является создание промежуточного соединения формулы (I) для синтеза каспофунгина

где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN, или CH2NR3R4; R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или замещенный или незамещенный С6-10 арил или гетероарил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода или защитными группами для амино-группы, такими как BOC (tert-butoxycarbonyl - терт-бутоксикарбонил) или Cbz (carboxybenzyl - карбоксибензил); R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную C1-10 алкильную группу, линейную или разветвленную С3-10 алкенильную группу или С3-10 алкинильную группу, С3-8 циклоалкильную группу, или замещенную или незамещенную С6-10 арильную или гетероарильную группу; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, амино, метокси, линейными или разветвленными С1-10 алкильными группами, линейными или разветвленными С3-10 алкенильными группами или С3-10 алкинильными группами, С3-8 циклоалкильными группами, или замещенными или незамещенными С6-10 арилами или гетероарилами; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает от пяти до восьми атомов, предпочтительно пяти- или шестиатомное кольцо; R6 и R7 не могут быть амино- или метоксигруппами одновременно.

Предпочтительно, R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NH2; R2 представляет собой CN, CO2H, CO2Me, CO2Et, CO2Bu, CO2tBu, CO2Ph, C(=O)NH2, C(=O)NMe2, C(=O)NHEt, C(=O)NHBu, C(=O)NHCH2CH2NH2, C(=O)NHcPr, C(=O)NHiPr, C(=O)NHcPent, C(=O)NHBu, C(=O)NHPh или фенил, более предпочтительно R2 представляет собой СО2Н, CO2Me, или C(=O)NHCH2CH2NH2.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения в формуле (I) R1 представляет собой CH2NH2; R2 представляет собой CO2Me.

Другая цель настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить способ получения промежуточного соединения формулы I, который включает реакцию между промежуточным соединением формулы (II) и тиольным соединением формулы (III) в присутствии органической борной кислоты и органической сульфокислоты с получением промежуточного соединения I формулы (I);

где R1 представляет собой С(=O)NH2, CN или CH2NR3R4, R2 представляет собой CN, CO2R5, С(=O)NR6R7 или замещенный или незамещенный С6-10 арил или гетероарил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода или защитными группами для амино-группы, такими как BOC или Cbz; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-10 алкильную группу, линейную или разветвленную С3-10 алкенильную группу, или С3-10 алкинильную группу, С3-8 циклоалкильную группу, или замещенную или незамещенную С6-10 арильную или гетероарильную группу; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, амино, метокси, линейными или разветвленными С1-10 алкильными группами, линейными или разветвленными С3-10 алкенильными группами или С3-10 алкинильными группами, С3-8 циклоалкильными группами, или замещенными или незамещенными С6-10 арилами или гетероарилами; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает от пяти до восьми атомов, предпочтительно пяти или шести атомное кольцо; R6 и R7 не могут быть амино- или метоксигруппами одновременно.

Согласно настоящему изобретению также предложен способ получения каспофунгина, включающий следующие стадии:

1) Реакция промежуточного соединения формулы (II) с тиольным соединением формулы (III) в присутствии органической борной кислоты и органической сульфокислоты с получением промежуточного соединения I формулы (I);

где R1 представляет собой С(=O)NH2CN или CH2NR3R4, R2 представляет собой CN, CO2R5, С(=O)NR6R7 или замещенный или незамещенный С6-10 арил или гетероарил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода или защитными группами для амино-группы, такими как BOC или Cbz; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-10 алкильную группу, линейную или разветвленную С3-10 алкенильную группу, или С3-10 алкинильную группу, С3-8 циклоалкильную группу, или замещенную или незамещенную С6-10 арильную или гетероарильную группу; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, амино, метокси, линейными или разветвленными С1-10 алкильными группами, линейными или разветвленными С3-10 алкенильными группами или С3-10 алкинильными группами, С3-8 циклоалкильными группами, или замещенными или незамещенными С6-10 арилами или гетероарилами; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает от пяти до восьми атомов, предпочтительно, пять и шесть атомов; R6 и R7 не могут быть амино- или метоксигруппами одновременно;

2) Реакция промежуточного соединения формулы (I) с этилендиамином с получением на последнем этапе каспофунгина, в котором R1 нужно восстановить до CH2NH2 или подвергнуть аминогруппу в составе R1 деблокированию до или после реакции с этилендиамином, если R1 не является CH2NH2

где R1 представляет собой С(=O)NH2, CN или CH2NR3R4; R2 представляет собой CN, CO2R5, С(=O)NR6R7 или замещенный или незамещенный С6-10 арил или гетероарил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода или защитными группами для амино-группы, такими как BOC или Cbz; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-10 алкильную группу, линейную или разветвленную С3-10 алкенильную группу, или С3-10 алкинильную группу, С3-8 циклоалкильную группу, или замещенную или незамещенную С6-10 арильную или гетероарильную группу; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, амино, метокси, линейными или разветвленными С1-10 алкильными группами, линейными или разветвленными С3-10 алкенильными группами или С3-10 алкинильными группами, С3-8 циклоалкильными группами, или замещенными или незамещенными С6-10 арилами или гетероарилами; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает от пяти до восьми атомов, предпочтительно пяти- или шестиатомное кольцо; R6 и R7 не могут быть амино- или метоксигруппами одновременно.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения вышеуказанный способ включает следующие стадии:

1) Реакция промежуточного соединения IIA формулы (IIA) с тиольным соединением III формулы (III) в присутствии органической бороновой кислоты и органической сульфокислоты с получением промежуточного соединения IA формулы (IA),

2) Реакция промежуточного соединения IA формулы (IA) с этилендиамином с получением каспофунгина

В другом предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения вышеуказанный способ включает следующие стадии:

1) Реакция промежуточного соединения IIB формулы (IIB) с тиольным соединением III формулы (III) в присутствии органической бороновой кислоты и органической сульфокислоты с получением промежуточного соединения IB формулы (IB),

2) Реакция промежуточного соединения IB формулы (IB) с этилендиамином с получением промежуточного соединения IVB формулы (IVB),

3) Промежуточное соединение формулы (IVB) восстанавливают до каспофунгина

В еще одном предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения вышеуказанный способ включает следующие стадии:

1) Реакция промежуточного соединения IIC формулы (IIC) с тиольным соединением III формулы (III) в присутствии органической борной кислоты и органической сульфокислоты с получением промежуточного соединения IC формулы (IC),

2) Реакция промежуточного соединения IC формулы (IC) с этилендиамином с получением промежуточного соединения IVC формулы (IVC),

3) Промежуточное соединение формулы (IVC) восстанавливают до каспофунгина

Группы, используемые для защиты аминогрупп в настоящем изобретении, представляют собой известные защитные группы, подходящие для защиты аминогрупп, о чем свидетельствуют способы защиты аминогрупп, описанные в литературе ("Protective Groups in Organic Synthesis", 5Th. Ed. Т.W. Greene & Р.G.М. Wuts), предпочтительно Boc или Cbz.

C6-10 ароматические группы, используемые в настоящем изобретении, могут быть одиночными, конденсированными или полициклическими, такими как фенил или нафтил. С6-10 ароматические группы могут быть незамещенными или замещенными, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, которые независимо друг от друга выбирают из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -С(O)OR8, -ОС(O)R8, -O(СН2)mC(O)OR8, -ОС(O)NR6R7, карбонила, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8, где m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2; R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом или йодом.

Гетероарильная группа, используемая в настоящем изобретении, относится к пяти- - десятичленным гетероароматическим системам, содержащим от одного до четырех гетероатомов, которые могут быть кислородом, азотом или серой. Гетероарил представляет собой пяти- или шестичленный гетероарил. Например, фурил, тиенил, пиридил, пирролил, N-алкил пирролил, пиримидинил, пиразинил, имидазолил, тетразолил и т.д. Гетероароматические группы могут быть незамещенными или замещенными, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, независимо друг от друга выбранных из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -C(O)OR8, -OC(O)R8, -0(CH2)mC(O)OR8, -OC(O)NR6R7, карбонил, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8; m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2; R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом, йодом.

C1-10 алкильная группа, используемая в настоящем изобретении, относится к насыщенным алифатическим углеводородным группам, например метильной, этильной, пропильной, 2-пропильной, н-бутильной, изобутильной, трет-бутильной или пентильной, и т.д. Низшие алкильные группы, содержащие от одного до четырех атомов углерода, являются более предпочтительными, например метильная, этильная, пропильная, 2-пропильная, н-бутильная, изобутильная или трет-бутильная. Алкильная группа может быть незамещенной или замещенной, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, которые независимо друг от друга выбирают из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -C(O)OR8, -OC(O)R8, -O(CH2)mC(O)OR8, -OC(O)NR6R7, карбонила, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8; где m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2; R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным C1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом, или йодом.

С3-8 циклоалкильная группа, используемая в настоящем изобретении, относится к трех-восьмичленной углеродной моноциклической группе, которая может включать одну или несколько двойных связей, но не содержит полностью сопряженной π-электронной системы, например, циклопропильная, циклобутильная, циклопентильная, циклопентенильная, циклогексильная, циклогексадиенильная, циклогептильная, циклогептатриенильная и т.д. Циклоалкильная группа может быть незамещенной или замещенной, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, которые независимо друг от друга выбирают из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -C(O)OR8, -OC(O)R8, -O(CH2)mC(O)OR8, -OC(O)NR6R7, карбонила, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8; где m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2; R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом, или йодом.

С3-10 алкенильная группа, используемая в настоящем изобретении, может быть незамещенной или замещенной, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, которые независимо друг от друга выбирают из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -C(O)OR8, -OC(O)R8, -O(CH2)mC(O)OR8, -OC(O)NR6R7, карбонила, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8; где m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2; R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом, или йодом.

С3-10 алкинильная группа, используемая в настоящем изобретении, может быть незамещенной или замещенной, при этом заместители предпочтительно представляют собой одну или несколько групп, которые независимо друг от друга выбирают из алкила, алкоксила, галогена, гидроксила, нитрогруппы, цианогруппы, циклоалкила, гетероцикла, арила, гетероарила, -NR6R7, -C(O)OR8, -OC(O)R8, -O(CH2)mC(O)OR8, -OC(O)NR6R7, карбонила, -S(O)nR8, -OSO2R8, -SO2NR6R7, или -NHC(O)R8; где m может быть равно 0, 1 или 2; n может быть равно 0, 1 или 2. R6 и R7 определяются формулой (I); R8 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или замещенным или незамещенным С6-10 арилом или гетероарилом; галоген может быть фтором, хлором, бромом, или йодом.

Органическая бороновая кислота, используемая в настоящем изобретении, представляет собой R9B(OH)2, где R9 может быть линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или незамещенным или замещенным С6-10 арилом или гетероарилом, например метилом, этилом, пропилом, бутилом, фенилом, п-метилфенилом, п-метоксифенилом, п-хлорфенилом и т.д.

Органическая сульфокислота, используемая в настоящем изобретении, представляет собой R10SO3H, где R10 может быть замещенным или незамещенным, линейным или разветвленным С1-10 алкилом, линейным или разветвленным С3-10 алкенилом или С3-10 алкинилом, С3-8 циклоалкилом, или незамещенным или замещенным С6-10 арилом или гетероарилом, например метилом, трифторметилом, фенилом, п-метилфенилом, и т.д.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение станет понятным специалистам в данной области техники после ознакомления со следующими конкретными примерами. Эти примеры приведены для иллюстрации настоящего изобретения, и никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.

Обозначения промежуточных соединений формулы (I), описанных в примерах, представлены в следующей таблице:

Пример 1: Получение соединения IA1

В трехгорлой стеклянной колбе готовят суспензию, содержащую соединение IIA (3,0 г) (которое было получено в соответствии с аналогичным способом, описанным в патенте US 5378804), фенилборную кислоту (0,72 г) и ацетонитрил (120 мл), затем к полученной смеси при перемешивании добавляют метилтиогликолят (1,0 г) при -20°C. Полученную смесь перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, а затем к ней добавляют по каплям трифторметансульфокислоту (1,2 г). После этого реакционную смесь перемешивают при -20°C в течение 5-6 часов с последующим добавлением водного раствора ацетата натрия. Перемешивание продолжают еще 1-2 часа, после чего реакционную смесь фильтруют, осадок на фильтре промывают водным раствором ацетонитрила и сушат в вакууме с получением белого твердого продукта IA1 (2,8 г).

1Н ЯМР (ядерно-магнитный резонанс) (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.74 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н) 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2Н), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3Н), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.63 (s, 3Н), 3.04 (t, 2Н), 2.42 (dd, 1Н), 2.15-1.99 (m, 7Н), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1Н), 0.87 (d, 3Н), 0.85 (d, 6Н).

МС (масс-спекторметрия): 1139,61 (М+Н+).

Пример 2: Получение соединения IA2

В трехгорлой стеклянной колбе готовят суспензию, содержащую соединение IIA (3,0 г), фенилборную кислоту (0,72 г) и ацетонитрил (120 мл), затем к полученной смеси при перемешивании добавляют N-(2-аминоэтил)меркаптоацетамид (1,26 г) при -20°C. Полученную смесь перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, а затем к ней добавляют по каплям трифторметансульфокислоту (1,2 г). После этого реакционную смесь перемешивают при -20°C в течение 5-6 часов с последующим добавлением водного раствора ацетата натрия. Перемешивание продолжают еще 1-2 часа, после чего реакционную смесь фильтруют, осадок на фильтре промывают водным раствором ацетонитрила и сушат в вакууме с получением белого твердого продукта IA2 (3,1 г).

МС: 1167,39 (М+Н+).

Пример 3: Получение соединения IA3

В трехгорлой стеклянной колбе готовят суспензию, содержащую соединение IIA (3,0 г), фенилборную кислоту (0,72 г) и ацетонитрил (120 мл), затем к полученной смеси при перемешивании добавляют Ν,Ν-диметил-меркаптоацетамид (1,1 г) при -20°C. Полученную смесь перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, а затем к ней добавляют по каплям трифторметансульфокислоту (1,2 г). После этого реакционную смесь перемешивают при -20°C в течение 5-6 часов с последующим добавлением водного раствора ацетата натрия. Перемешивание продолжают еще 1-2 часа, после чего реакционную смесь фильтруют, осадок на фильтре промывают водным раствором ацетонитрила и сушат в вакууме с получением белого твердого продукта IA3 (3,1 г).

МС: 1152,81 (М+Н+).

Пример 4: Получение соединения IA4

В трехгорлой стеклянной колбе готовят суспензию, содержащую соединение IIA (3,0 г), фенилборную кислоту (0,72 г) и ацетонитрил (120 мл), затем к полученной смеси при перемешивании добавляют меркаптоацетонитрил (1,5 г) при -20°C. Полученную смесь перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, а затем к ней добавляют по каплям трифторметансульфокислоту (1,2 г). После этого реакционную смесь перемешивают при -20°C в течение 5-6 часов с последующим добавлением водного раствора ацетата натрия. Перемешивание продолжают еще 1-2 часа, после чего реакционную смесь фильтруют, осадок на фильтре промывают водным раствором ацетонитрила и сушат в вакууме с получением белого твердого продукта IA4 (3,0 г).

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.15 (d, 2Н), 6.79 (d, 2Н), 5.34 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.64 (m, 3Н), 4.53-4.42 (m, 4Н), 4.43-4.32 (m, ЗН), 4.31-4.25 (m, 5Н), 4.23-4.18 (m, 1Н), 3.99-3.95 (m, 1Н), 3.90-3.8 (m, 3Н), 3.73-3.65 (m, 2Н), 3.58-3.65 (m, 2Н), 3.05-3.18 (m, 2Н), 2.40-2.50 (m, 1Н), 2.35-2.23 (m, 4Н), 2.21-1.98 (m, 6Н), 1.97-1.80 (m, 3Н), 1.78-1.60 (m, 2Н), 1.58-1.41 (m, 2Н), 1.40-1.26 (m, 14Н), 1.21 (d, 3H), 1.20-1.13 (m, 3Н), 0.95-0.85 (m, 10Н), 0.68-0.76 (dd, 2H).

MC: 1106,54 (M+Н+).

Пример 5: Получение соединения IB1

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг, полученного в соответствии с аналогичным способом, описанным в патенте US 5378804), фенилборной кислоты (35 мг) и N-этил-2-меркаптоацетамида (68 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Реакционную смесь фильтруют, осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB1.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.08 (d, 2Н), 6.70 (d, 2H), 5.21 (d, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.95 (d, 1H), 4.56-4.47 (m, 3Н), 4.39-4.21 (m, 6H), 3.99-3.95 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.80-3.75 (m, 2H), 2.95-2.90 (q, 2H), 2.80-2.64 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 2.42 (m, 3Н), 2.26-2.12 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (m), 0.81 (m).

MC: 1148.48 (M+H+).

Пример 6: Получение соединения IB2

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и N,N-диметил-2-меркаптоацетамида (68 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB2.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.08 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.27 (d, 1Н), 4.99 (d, 1Н), 4.95 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m, 3Н), 4.39-4.21 (m, 6Н), 3.99-3.95 (m, 1Н), 3.87-3.83 (m, 1Н), 3.80-3.75 (m, 2Н), 3.04 (s, 3Н), 2.89 (s, 3Н), 2.80-2.64 (m, 2Н), 2.46 (m, 1Н), 2.42 (m, 3Н), 2.26-2.12 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (m), 0.81 (m).

MC: 1148. 48 (M+H+).

Пример 7: Получение соединения IB3

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и метил-2-меркаптоацетата (61 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB3.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2H), 6.69 (d, 2H), 5.28 (d, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.90 (d, 1H), 4.56-4.47 (m, 3Н), 4.39-4.21 (m, 6H), 3.99-3.95 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.80-3.75 (m, 2H), 3.66 (m, ЗН), 3.56-3.52 (dd, 1H), 3.49-3.39 (dd, 1H), 2.80-2.64 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 2.42 (m, 3H), 2.26-2.12 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (m), 0.81 (m).

MC: 1135,38 (M+H+).

Пример 8: Получение соединения IB4

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и бутил-2-меркаптоацетата (85 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB4.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.08 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.29 (d, 1Н), 4.99 (d, 1Н), 4.95 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m, 3Н), 4.39-4.21 (m, 6Н), 3.99-3.95 (m, 1Н), 3.87-3.83 (m, 1Н), 3.80-3.75 (m, 2Н), 3.58-3.56 (t, 2Н), 3.56-3.52 (dd, 1Н), 3.49-3.39 (dd, 1Н), 2.80-2.64 (m, 2Н), 2.46 (m, 1Н), 2.42 (m, 3Н), 2.26-2.12 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (m), 0.81 (m).

MC: 1178,49 (M+H+).

Пример 9: Получение соединения IB5

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг), меркаптоуксусной кислоты (60 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB5.

МС: 1121,16 (М+Н+).

Пример 10: Получение соединения IB6

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и меркаптоацетамида (62 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB6.

МС: 1120,44 (М+Н+).

Пример 11: Получение соединения IB7

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и N-бутил-2-меркаптоацетамида (86 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IB7.

МС: 1176,51 (М+Н+).

Пример 12: Получение соединения IB8

К суспензии, состоящей из соединения IIB (100 мг), фенилборной кислоты (35 мг) и N-пирролил-2-меркаптоацетамида (86 мг) в безводном ацетонитриле (8 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (57,3 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и высушивают в вакууме с получением продукта IB8.

МС: 1174,58 (М+Н+).

Пример 13: Получение соединения IC1

К суспензии, состоящей из соединения IIC (РВ0, полученного с помощью микробной ферментации) (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и метилмеркаптоацетата (299 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC1.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2H), 5.29 (d, 1H), 5.1 (d, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.63 (s, 3H), 3.55-3.51 (dd, 1H), 3.36-3.40 (dd, 1H), 2.88 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1153,26 (M+H+).

Пример 14: Получение соединения IC2

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг), меркаптоуксусной кислоты (259 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC2.

1H ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2H), 6.70 (d, 2H), 5.24 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.90 (d, 1H), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m,2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 2.88 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1139,18 (M+H+)

Пример 15: Получение соединения IC3

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и бутилмеркаптоацетата (417 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC3.

МС: 1195,48 (М+Н+).

Пример 16: Получение соединения IC4

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и трет-бутилмеркаптоацетата (417 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и высушивают в вакууме с получением продукта IC4.

МС: 1195,48 (М+Н+).

Пример 17: Получение соединения IC5

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и циклопентил меркаптоацетата (431 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC5.

МС: 1207,49 (М+Н+).

Пример 18: Получение соединения IC6

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и фенилмеркаптоацетата (431 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC6.

МС: 1215,48 (М+Н+).

Пример 19: Получение соединения IC7

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и меркаптоацетамида (259 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC7.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2H), 6.70 (d, 2H), 5.24 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.90 (d, 1H), 4.56-4.47 (m), 4.39- 4.35 (m,2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 2.88 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1138,45 (M+H+).

Пример 20: Получение соединения IC8

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и N,N-диметилмеркаптоацетамида (336 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC8.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3Н), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.01 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1166,52 (M+H+).

Пример 21: Получение соединения IC9

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и N,N-диметилмеркаптоацетамида (259 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC9.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2H), 6.70 (d, 2H), 5.24 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.90 (d, 1H), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m,2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 2.88 (dd, 2H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1166,52 (M+H+).

Пример 22: Получение соединения IC10

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг), N,N-диметилмеркаптоацетамида (414 мг) и безводного ацетонитрила (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC10.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 2.94-2.91 (t, 2H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 2H), 0.87 (d, 6H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1194,53 (M+H+).

Пример 23: Получение соединения IC11

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг), N-пирролилмеркаптоацетамида (410 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC11.

1Н-ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3Н), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.18-3.14 (m, 4H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.94-1.90(m, 4H), 1.87-1.85 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 2H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H);

MC: 1192,56 (M+H+).

Пример 24: Получение соединения IC12

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и N-циклопропилмеркаптоацетамида (370 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC12.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3Н), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.21-3.09 (dd, 1H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.87-1.85 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 2H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H) 0.68~0.50(m,4H);

MC: 1178,46 (M+H+).

Пример 25: Получение соединения IC13

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и N-циклопентилмеркаптоацетамида (450 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC13.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3H), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.21-3.09 (dd, 1H), 2.68 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.94-1.90 (m, 4H), 1.87-1.85 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 2H), 0.89-0.85 (m, 15H);

MC: 1206,50 (M+H+).

Пример 26: Получение соединения IC14

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и N-изопропилмеркаптоацетамида (370 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC14.

МС: 1180,50 (М+Н+).

Пример 27: Получение соединения IC15

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг), N-фенилмеркаптоацетамида (370 мг) и безводного ацетонитрила (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC15.

МС: 1214,65 (М+Н+).

Пример 28: Получение соединения IC16

К суспензии, состоящей из соединения IIC (500 мг), фенилборной кислоты (172 мг) и бензилмеркаптана (350 мг) в безводном ацетонитриле (30 мл), по каплям добавляют раствор трифторметансульфокислоты (282 мг) в ацетонитриле при -15°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при данной температуре в течение 4-6 часов до завершения реакции. После добавления водного раствора ацетата натрия и перемешивания в течение 1-2 часов к реакционной смеси добавляют воду (90 мл) и продолжают перемешивание в течение еще одного часа. Затем реакционную смесь фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью ацетонитрил/вода, затем его собирают и сушат в вакууме с получением продукта IC16.

1Н ЯМР (CD3OD, 400 MHz) δ 7.30-7.27 (d, 2Н), 7.24-7.2 (t, 3Н), 7.17-7.15 (d, 1Н), 7.09 (d, 2Н), 6.70 (d, 2Н), 5.24 (d, 1Н), 5.04 (d, 1Н), 4.90 (d, 1Н), 4.56-4.47 (m), 4.39-4.35 (m, 2H), 4.31-4.25 (m), 4.23-4.21 (m, 3Н), 3.99-3.95 (m), 3.80-3.75 (m), 3.63 (s, 3H), 3.55-3.51 (dd, 1H), 3.36-3.40 (dd, 1H), 2.88 (dd, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.42 (dd, 1H), 2.26-2.18 (m), 2.10-2.03 (m), 1.97-1.90 (m), 1.63-1.52 (m), 1.51-1.46 (m), 1.45-1.39 (m), 1.38-1.20 (m), 1.14 (d), 1.12-1.03 (m), 0.91 (dt, 1H), 0.87 (d, 3H), 0.85 (d, 6H).

MC: 1171,10 (M+H+).

Пример 29: Получение каспофунгина

Соединение IA1 (70 мг) растворяют в метаноле (0,5 мл) при 15°C. Этилендиамин (0,7 мл) добавляют к раствору при 5°C и полученную смесь перемешивают при 40°C в течение 20 часов. После выпаривания метанола к остаткам смеси добавляют ацетонитрил, полученную смесь перемешивают и фильтруют в атмосфере азота с получением сырого продукта в виде твердого вещества, которое сушат в вакууме. Очистка на колонке с силикагелем С-18 позволяет получить конечный продукт - каспофунгин.

MS: 1093,21 (M+Н+).

Пример 30: Получение каспофунгина

Стадия 1):

К раствору соединения IB1 (800 мг) в метаноле (20 мл) в трехгорлой стеклянной колбе при перемешивании добавляют этилендиамин (20 мл) при 30°C и полученную реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов при данной температуре. После концентрирования реакционного раствора к остаткам смеси добавляют ацетонитрил (40 мл), полученную смесь перемешивают в течение 20-30 минут и фильтруют. Осадок на фильтре собирают и сушат с получением продукта IVB.

MC: 1089,22 (М+Н+).

Стадия 2):

К раствору соединения IVB (100 мг) в этаноле (9 мл) и воде (1 мл) добавляют уксусную кислоту (1 мл) и Pd/C (palladium on carbon - палладиевая чернь) (10%, 50 мг). Полученную реакционную смесь перемешивают в течение 10 часов при 3 атм и 20°C в атмосфере водорода. После фильтрации для удаления катализатора и упаривания для удаления растворителя остатки смеси растворяют в воде (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл × 2). Водную фазу собирают и лиофилизируют с получением сырого каспофунгина, который затем очищают на колонке с силикагелем С-18 с получением готового продукта - каспофунгина.

MC: 1093,21 (М+Н+).

Пример 31: Получение каспофунгина

Стадия 1):

К раствору соединения IC1 (800 мг) в метаноле (20 мл) в трехгорлой стеклянной колбе добавляют этилендиамин (20 мл) при 30°C, полученную реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов при данной температуре. После концентрирования реакционного раствора к остаткам смеси добавляют ацетонитрил (40 мл), полученную смесь перемешивают в течение 20-30 минут и фильтруют. Осадок собирают и сушат с получением продукта IVC.

MC: 1107,29 (М+Н+).

Стадия 2):

К раствору соединения IVC (100 мг) в безводном THF (tetrahydrofuran - тетрагидрофуран) (20 мл) в трехгорлой стеклянной колбе добавляют фенилборную кислоту (33 мг) в атмосфере азота и полученную реакционную смесь перемешивают в течение ночи, а затем охлаждают до 10°C. В реакционную смесь добавляют бис(триметилсилил)трифторацетамид (140 мг) и перемешивают в течение 3 часов. Затем реакционную смесь помещают на -15°C и добавляют к ней боргидрид в растворе THF (1,0 M, 1,35 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 6 часов при -15°C. Реакцию останавливают путем добавления 2 N соляной кислоты (2 мл), а затем добавляют воду (20 мл). Водную фазу отделяют и экстрагируют этилацетатом (10 мл × 2). Водную фазу собирают и лиофилизируют с получением сырого продукта каспофунгина, который затем очищают на колонке с силикагелем С-18 с получением готового продукта - каспофунгина.

МС: 1093,21 (М+Н+).

Основываясь на подробном описании конкретных вариантов реализации настоящего изобретения, специалист в данной области техники может вносить некоторые изменения, которые будут включены в объем настоящего изобретения.

1. Промежуточное соединение формулы (I) для синтеза каспофунгина

где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NR3R4; R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или фенил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную C1-6 алкильную группу, С3-8 циклоалкильную группу или фенил; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, линейными или разветвленными C1-6 алкильными группами, возможно замещенными амино группами, С3-8 циклоалкильными группами или фенилом; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает пять атомов.

2. Промежуточное соединение по п 1, где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NH2; R2 представляет собой CN, CO2H, CO2Me, CO2Et, CO2Bu, CO2tBu, CO2Ph, C(=O)NH2, C(=O)NMe2, C(=O)NHEt, C(=O)NHBu, C(=O)NHCH2CH2NH2, C(=O)NHcPr, C(=O)NHiPr, C(=O)NHcPent, C(=O)NHBu, C(=O)NHPh или фенил, R2 предпочтительно представляет собой СО2Н, СО2Ме, C(=O)NHCH2CH2NH2, более предпочтительно CO2Me.

3. Способ получения промежуточного соединения формулы (I), отличающийся тем, что промежуточное соединение формулы (II) приводят во взаимодействие с тиолом формулы (III) с получением промежуточного соединения формулы (I):

где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NR3R4, R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или фенил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-6 алкильную группу, С3-8 циклоалкильную группу или фенил; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, линейными или разветвленными С1-6 алкильными группами, возможно замещенными амино группами, С3-8 циклоалкильными группами или фенилом; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют 5-членный гетероцикл.

4. Способ получения по п. 3, отличающийся тем, что данный способ осуществляют в присутствии органической бороновой кислоты и органической сульфокислоты.

5. Способ получения по п. 4, отличающийся тем, что органическая борная кислота представляет собой фенилборную кислоту, а органическая сульфокислота представляет собой трифторметансульфокислоту.

6. Способ получения каспофунгина, отличающийся тем, что данный способ включает стадию взаимодействия промежуточного соединения формулы (I) по п. 1 с этилендиамином, где R1, входящий в состав интермедиата формулы (I), нужно восстанавливать до CH2NH2 или снимать защиту с амино группы перед или после реакции с этилендиамином, если R1 не является CH2NH2

где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NR3R4, R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или фенил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-6 алкильную группу, С3-8 циклоалкильную группу или фенил; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, линейными или разветвленными C1-6 алкильными группами, возможно замещенными амино группами, С3-8 циклоалкильными группами или фенилом; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает пять атомов.

7. Способ получения по п. 6, отличающийся тем, что вышеуказанное восстановление амино группы или снятие с нее защитных групп проводят после реакции промежуточного соединения формулы (I) с этилендиамином.

8. Способ получения по п. 6 или 7, отличающийся тем, что данный способ включает стадию, на которой промежуточное соединение формулы (II) приводят во взаимодействие с тиолом формулы (III) с получением промежуточного вещества формулы (I):

где R1 представляет собой C(=O)NH2, CN или CH2NR3R4; R2 представляет собой CN, CO2R5, C(=O)NR6R7 или фенил; R3 и R4 независимо друг от друга являются атомами водорода; R5 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную С1-6 алкильную группу, С3-8 циклоалкильную группу или фенил; R6 и R7 независимо друг от друга являются атомами водорода, линейными или разветвленными С1-6 алкильными группами, возможно замещенными амино группами, С3-8 циклоалкильными группами или фенилом; или R6 и R7 вместе с атомом азота формируют гетероцикл, кольцо которого включает пять атомов.

9. Способ получения по п. 8, отличающийся тем, что реакцию между промежуточным соединением формулы (II) и тиолом формулы (III) проводят в присутствии органической борной кислоты и органической сульфокислоты.

10. Способ получения по п. 9, отличающийся тем, что органическая бороновая кислота представляет собой фенилборную кислоту, а органическая сульфокислота представляет собой трифторметансульфокислоту.

11. Способ получения по п. 6 или 7, в котором R1 представляет собой CN.

12. Способ получения по п. 6 или 7, в котором R1 представляет собой C(=O)NH2.

13. Способ получения по п. 6 или 7, в котором R1 представляет собой CH2NR3R4, R3 и R4 представляют собой независимо друг от друга атом водорода.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к способу очистки микафунгина. Способ включает нанесение исходного сырья микафунгина на подложку гидрофобной адсорбирующей смолы, воздействие на связанный микафунгин водного раствора растворенной фармацевтически приемлемой соли, элюирование растворенной фармацевтически приемлемой соли микафунгина раствором, содержащим органический растворитель, смешивающийся с водой, при этом исходное сырьё или водный раствор содержат органический растворитель, смешивающийся с водой.

Изобретение относится к новым пептидомиметическим макроциклам и способам применения таких макроциклов для модуляции активности p53 и/или HDM2, HDMX. 4 н.

Изобретение относится к однореакторному способу приготовления Микафунгина. Способ включает в себя ацилирование пептидного ядра Микафунгина без изолирования активированной боковой цепи Микафунгина из ее реакционной смеси.

Изобретение относится к циклическому соединению, содержащему аминокислотную последовательность GQRETPEGAEAKPWY в дополнение к одной или двум дополнительным аминокислотам, и не имеющему C-концевую карбоксильную группу и/или N-концевую аминогруппу, где одна из аминокислот является неприродной аминокислотой и где замыкание цикла происходит между боковой цепью одной аминокислоты и C-концом другой аминокислоты или замыкание цикла происходит посредством неприродной аминокислоты; способу его получения и его применению для регуляции векторных ионных каналов, для лечения заболеваний, связанных с функцией легких, и для лечения отеков.

Изобретение относится к способу очистки циклического липопептида формулы I или его соли. Способ включает стадии: (1) экстракции ферментативного бульона, содержащего соединение формулы I или его соль, с получением экстракта 1 после фильтрации или центрифугирования; (2) разбавления или концентрирования экстракта 1 в вакууме со снижением содержания органического растворителя, с получением экстракта 2; (3) загрузки экстракта 2 в макропористую адсорбционную смолу; (4) промывки макропористой адсорбционной смолы водой или смесью воды и органического растворителя в качестве промывного раствора и (5) элюирования соединения формулы 1 из макропористой адсорбционной смолы смесью воды и органического растворителя в качестве элюента.

Изобретение относится к способу очистки циклических липопептидов или их солей. Предложенный способ включает стадии: (1) загрузки неочищенного соединения Формулы I в макропористую адсорбционную смолу; (2) промывки макропористой адсорбционной смолы водой, органическим растворителем или смешанным раствором органического растворителя и воды в качестве промывной жидкости; и (3) элюирование соединения Формулы I из макропористой адсорбционной смолы с помощью воды, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды в качестве элюента, где на стадии (1) раствор, содержащий неочищенное соединение Формулы I, содержит способные к ионизации соли; и макропористая адсорбционная смола выбрана из неполярной ароматической адсорбционной смолы, полимеризованной из стирола и дивинилбензола, или метакриловой адсорбционной смолы средней полярности с остатками метакрилата в структуре.

Предложен способ очистки соединения формулы 1, включающий следующие этапы: (1) загрузку неочищенного соединения 1 в макропористую адсорбционную смолу, (2) промывку макропористой адсорбционной смолы при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды, (3) элюирование при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды.

Изобретение относится к способу очистки даптомицина, включающий стадии а) загрузки частично очищенного даптомицина в анионообменную хроматографическую колонку и последующие стадии очистки б) и в) в обращено-фазовых хроматографических колонках, где элюирующий буфер на стадии а) представляет собой раствор одновалентной соли и элюирующий буфер на стадии б) и в) представляет собой водный спирт.

Изобретение относится к новому полипептидному соединению, обладающему противогрибковой активностью. .

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному тамавидину, и может быть использовано для детекции связанной с биотином субстанции. Получают модифицированный биотин-связывающий белок на основе тамавидина с последовательностью SEQ ID NO: 2, который содержит до 7 мутаций и при этом остаток аспарагина в 115 положении заменен на цистеин.

Изобретение относится к области биохимии. Описано изобретение, включающее способ получения антитела против IGF-1R при помощи катионной хроматографии.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ очистки коагуляционного фактора IX (FIX).

Группа изобретений относится к способам синтеза гликопептида, имеющего сиалированную сахарную цепь. Путем реакции этерификации осуществляют связывание смолы, имеющей гидроксильную группу с аминокислотой, у которой азот аминогруппы защищен Вос-группой.

Изобретения относятся к области биохимии. Описана группа изобретений, включающая способ получения обогащенного изоформами препарата антител (варианты).

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и медицины. Способ очистки трипторелина, заключающийся в том, что растворяют трипторелин в 0,6% водном растворе уксусной кислоты, фильтруют методом ультрафильтрации, к раствору добавляют изопропиловый спирт до концентрации 2% по объему и перемешивают, проводят жидкостную хроматографию низкого давления на колонке с сферическим полистиролом, сшитым дивинилбензолом типа LPS-500, используя градиентное элюирование водным раствором изопропилового спирта (ИПС) и уксусной кислоты (УК), затем полученный раствор полупродукта подвергают ионообменной хроматографии на колонне с сульфоэтильными группами на сшитом полиакрилате марки типа СПС-Био SP Сульфопропил (SPS-bio) с размером частиц 75 мкм, используя градиентное элюирование, проводят высокоэффективную жидкостную хроматографию на колонке с обращенно-фазным сорбентом на основе силикагеля с частицами сферической формы и размером 5 мкм типа Kromasil С18, используя в качестве элюента водный раствор, содержащий 5% ИПС и 0,25% УК, полученные фракции очищенного продукта с содержанием трипторелина более 98% подвергают концентрированию на гидрофобном сорбенте с последующим элюированием раствором, содержащим смесь изопропилового спирта и уксусной кислоты, упариванием элюата и его лиофильным высушиванием.

Изобретение относится к биотехнологии и медицинской промышленности. Предложен способ получения террилитина.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения очищенного концентрата тромбина. Способ получения концентрата тромбин, свободного от вирусов, заключающийся в криофракционировании свежезамороженной плазмы донорской крови человека, выделении протромбинового комплекса на анионообменном сорбенте DEAE Sepharose Fast Flow, активации протромбина раствором СаСl2 в составе протромбинового комплекса с получением тромбина, вирусной инактивации сольвент-детергентным методом и очистке полученного тромбина на катионообменном сорбенте Fractogel EMD-SO3 с последующей стерильной фильтрацией и лиофилизацией.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению антител, и может быть использовано для снижения гетерогенности антител во время культивирования.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены способ производства лактоферрина, фракция, содержащая лактоферрин, и ее применения.

Изобретение относится к твердофазному способу получения нонапептидов формулы I-III: R - A r g 1 - L y s 2 - L y s 3 - T y r 4 - L y s 5 - T y r 6 - A r g 7 - X a a 8 - L y s 9 - N H 2 , где R = Н, Хаа = L-Arg (I);R = Me, Хаа = L-Arg (II); R = H, Хаа = D-Axg (III). Синтез нонапептидов формулы I-III осуществляют путем последовательного наращивания пептидной цепи, начиная с С-концевой аминокислоты, ковалентно связанной с полимерной матрицей, с использованием Nα-защищенных производных аргинина, для блокирования гуанидиновой функции которых применяется протонирование. Для протонирования гуанидиновой функции используют 1-гидроксибензотриазол, гексафторфосфат или тетрафторборат. Полученный нонапептидилполимер обрабатывают деблокирующим агентом для отщепления защитных групп и полимерной матрицы и в 1 стадию выделяют конечный продукт с помощью ВЭЖХ. Способ позволяет повысить выход целевых продуктов, упростить и удешевить процесс их получения. 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл., 3 пр.
Наверх