Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб


 


Владельцы патента RU 2602662:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный университет" (RU)

Изобретение относится к ихтиологии и рыбоводству и представляет собой способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб, включающий исследование сыворотки крови рыб, отличающийся тем, что сыворотку крови исследуют методом краевой дегидратаци в аналитических ячейках и производят морфологический анализ образовавшихся структур в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях, при этом дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, а наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыб. Осуществление изобретения обеспечивает повышение эффективности оценки физиологического состояния осетровых рыб. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.

 

Изобретение относится к ихтиологии и рыбоводству, а именно к способам оценки физиологического состояния осетровых рыб.

Известен способ оценки общего физиологического состояния осетровых рыб, в котором используют наличие в крови исследуемых рыб естественного фактора ингибиции активности антител класса М, являющихся основными у осетровых рыб, с последующей регистрацией снижения титров. Реакцию непрямой гемагглютинации проводят с эритроцитарным сальмонелезным О диагностикумом, а исследуемую сыворотку крови разводят изотоническим раствором хлористого натрия в соотношении 1:20, смешивают с равным количеством тест-сыворотки в разведении 1:20 и инкубируют при 37°C в течение 4-х часов (RU №2253970, МПК A01K 61/00, опубл. 20.06.2005).

К недостаткам известного способа можно отнести, что при его реализации используют диагностикум, требующий определенные условия хранения (4-10°C), срок хранения которого не более 1 года. Необходимы специальное оборудование и условия стерильности для постановки реакции, что также усложняет его использование.

Известно, что морфология текстур, формирующихся при фазовых переходах биологических жидкостей, отражает состояние организма и изменяется при развитии патологических процессов. На современном этапе морфотесты достаточно широко используются в медицине для динамической оценки состояния организма.

Известны способы диагностики состояния организма (RU №2312606, МПК A61B 10/00, G01N 33/48, опубл. 20.12.2007; RU №2366949, МПК G01N 33/48, A61B 10/00, опубл. 10.09.2009). В качестве биологической жидкости исследуют кровь, и/или мочу, и/или слюну, и/или пот, и/или гнойные выделения и т.д.

В указанных способах для фазового перехода используются температуры ниже нуля, что повышает их энергозатратность.

Известно, что в процессе высушивания биологических жидкостей также формируются кристаллические текстуры, изучение которых является одним из активно развивающихся направлений в медико-биологических исследованиях.

Известен способ оценки токсического действия химических веществ на органы и ткани рыб, при котором методом клиновидной дегидратации исследуется гомогенат. Для этого его в форме капли наносят на поверхность предметного стекла, высушивают при комнатной температуре в течение суток, затем полученные образцы просматривают в поляризованном свете и при появлении цветных анизотропных образований проводят оценку о токсичности химических веществ (RU №2258926, МПК G01N 33/12, опубл. 20.08.2005).

Целью изобретения является упрощение оценки физиологического состояния осетровых рыб, повышение ее эффективности.

Поставленная цель достигается тем, что для оценки физиологического состояния осетровых рыб проводится морфологический анализ кристаллических структур сыворотки крови, сформированных при краевой дегидратации в аналитических ячейках исследуемой биологической жидкости.

Способ осуществляют следующим образом.

Сыворотку крови обследуемой рыбы объемом 0,02 мл помещают между предметным и покровным стеклами. Полученные аналитические ячейки высушивают в условиях рабочей комнаты лаборатории при минимальной подвижности воздуха в течение 24-48 часов. После чего в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях проводят морфологический анализ образовавшихся структур. Дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыбы.

Пример 1. Объектами изучения являлись двухлетки стерляди (Acipenser ruthenus) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в апреле, после продолжительного содержания рыбы при низких температурах в период зимовки.

В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток стерляди методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных, переходных и пластинчатых форм (в 30%, 60% и 100% сл. соответственно).

Состав морфологических типов наблюдаемых структур рассматривают как тест, который свидетельствует о негативных изменениях, происходящих в организме обследованных рыб.

Возможность такого использования подтверждают результаты биохимического исследования сыворотки крови.

Результаты биохимического исследования сыворотки крови

Концентрация холестерина в сыворотке крови стерляди изменялась в пределах 3,45-8,35 ммоль/л при среднем значении 5,157±0,6483 ммоль/л, коэффициент вариации составил 37,7%.

Содержание глюкозы находилось в пределах 1,51-4,12 ммоль/л при среднем значении 3,144±0,2753 ммоль/л. Коэффициент вариации соответствовал 26,3%.

Полученные результаты биохимического исследования, а именно коэффициенты вариации свыше 25%, исследуемых параметров, свидетельствуют о пониженной устойчивости рыб данной группы к длительному периоду пониженных температур и дальнейшей затрудненной адаптации обменных процессов к изменяющимся условиям и адекватны выводам по результатам анализа кристаллических структур сыворотки крови.

Пример 2. Объектами изучения являлись двухлетки русского осетра (Acipenser gueldenstaedty) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в июне, в период полной их адаптации после зимовки.

В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток русского осетра методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных и переходных форм в 100% случаев, пластинчатых в 20% случаев.

Существенное снижение числа особей, аналитические ячейки сыворотки крови которых содержат структуры пластинчатой формы, свидетельствует об удовлетворительном физиологическом состоянии организма у большинства обследованных рыб.

Возможность такого утверждения подтверждают результаты биохимического исследования сыворотки крови.

Результаты биохимического исследования сыворотки крови

Уровень холестерина варьировал в пределах 1,23-2,10 ммоль/л при среднем значении 1,586±0,0947 ммоль/л (коэффициент вариации 18,91%).

Показатели глюкозы сыворотки крови варьировали в пределах 0,6-2,9 ммоль/л при среднем значении 1,857±0,2152 ммоль/л (коэффициент вариации 18,89%).

Следовательно, невысокая вариабельность содержания холестерина и глюкозы, а именно 18,9%, свидетельствует об удовлетворительном физиологическом состоянии обследованных особей русского осетра, что соответствует выводам морфологического анализа кристаллических структур сыворотки крови исследуемых рыб.

Пример 3. Объектами изучения являлись годовики русского осетра (Acipenser gueldenstaedty) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в июне.

В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток русского осетра методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных и переходных форм в 90 и 100% случаев соответственно пластинчатых в 90% случаев.

Полученная морфологическая картина сыворотки крови следующим образом соотносится с результатами ее биохимического анализа.

Результаты биохимического исследования сыворотки крови

Содержание холестерина в плазме крови годовиков русского осетра составлял от 1,42 до 2,26 ммоль/л (среднее значение 1,967±0,0978 ммоль/л). Коэффициент вариации был невысоким и составлял 14,9%.

Содержание глюкозы в плазме крови годовиков русского осетра составлял от 0,69 до 4,05 ммоль/л (среднее значение 2,101±0,3456 ммоль/л). Коэффициент вариации был высоким и составлял 46,5%.

Высокая вариативность содержания глюкозы в сыворотке крови годовиков русского осетра указывает на их низкую устойчивость к воздействию стресс-факторов, возникающих при осуществлении рыбоводных манипуляций во время выращивания.

Следовательно, существенное увеличение количества особей (до 90% случаев), аналитические ячейки сыворотки крови которых содержат структуры пластинчатой формы, служит сигналом об изменении адаптационных возможностей у данной группы рыб.

Таким образом, предлагаемый способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб по составу морфологических типов наблюдаемых структур является информативным, репрезентативным. Осуществление способа несложно в выполнении, способ реализуется с использованием незначительного количества биологического материала, что актуально для экспериментальных исследований, не требует наличия специализированной лаборатории, дорогостоящей аппаратуры, реактивов, красителей.

1. Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб, включающий исследование сыворотки крови рыб, отличающийся тем, что сыворотку крови исследуют методом краевой дегидратаци в аналитических ячейках и производят морфологический анализ образовавшихся структур в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях, при этом дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, а наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыб.

2. Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб по п. 1, отличающийся тем, что сыворотку крови объемом 0,02 мл помещают между предметным и покровным стеклами, а полученные аналитические ячейки высушивают в условиях рабочей комнаты при минимальной подвижности воздуха в течение 24-48 часов.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике. Через 3-4 недели после трансплантации печени в плазме крови у детей измеряют концентрацию трансформирующего фактора роста бета 1 (TGF-β1) в нг/мл.

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики степени тяжести атаки у пациентов с болезнью Крона. Сущность способа заключается в том, что определяют скорость оседания эритроцитов (СОЭ), концентрацию С-реактивного белка (СРБ), уровень васкулоэндотелиального фактора (ВЭФ) в сыворотке, рассчитывают количество десквамированных эндотелиоцитов (ДЭЦ) в плазме крови, оценивают концентрацию микроальбумина (МАУ) в моче.

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и касается способа оценки атерогенности аполипопротеин В-содержащих липопротеинов. Сущность способа заключается в том, что у пациентов анализируют субфракционное распределение липопротеинов низких плотностей.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике и касается способа определения мозговой изоформы креатинфосфокиназы в крови человека.

Группа изобретений относится к устройствам для разделения фракций с более низкой и более высокой плотностями пробы текучей среды, в частности для взятия и транспортировки проб текучей среды.

Изобретение касается способа определения содержания глюкозы в крови, включающего установку в согласующее устройство резонансного элемента; размещение согласующего устройства на поверхности кожи; облучение поверхности кожи электромагнитной волной; измерение зависимости от частоты коэффициента отражения электромагнитной волны от поверхности кожи, определение минимальной величины коэффициента отражения Rмин и соответствующей этой величине частоты fмин; сопоставление значений Rмин и fмин с индивидуальной «электросахарной кривой» пациента и определение на основе этого сопоставления содержания глюкозы в крови пациента.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска неблагоприятного исхода послеоперационного течения перитонита, осложненного абдоминальным сепсисом, заключающийся в определении и оценке активности фактора Виллебранда, отличающийся тем, что дополнительно определяют и оценивают активность факторов свертывания крови VIII и V, уровень фактора Виллебранда, время Хагеман - зависимого лизиса, активность естественных антикоагулянтов - протеина С и антитромбина на 1-е, 3-и и 7-е сутки после хирургического вмешательства и при увеличении значений 5-ти и более из перечисленных факторов системы гемостаза, по сравнению с предыдущими результатами, прогнозируют высокий риск неблагоприятного исхода послеоперационного течения перитонита, осложненного абдоминальным сепсисом, 4-х факторов - умеренный риск, от 1-го до 3-х - низкий риск.

Группа изобретений относится к устройствам для разделения фракций с более низкой и более высокой плотностями пробы текучей среды, в частности для взятия и транспортировки проб текучей среды.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской диагностике наличия ацетона в выдыхаемом воздухе пациента. Способ измерения концентрации ацетона в выдыхаемом воздухе основан на измерении уровня содержания ацетона по эмиссионным линиям разряда при пониженном давлении пробы выдыхаемого воздуха пациента с нормировкой на концентрацию паров воды, определенную по параметрам тлеющего разряда.

Изобретение относится к судебной медицине, в частности к судебно-медицинской экспертизе, и может быть использовано для определения давности образования капель крови, с применением цифровой фотографии.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и нейрохирургии. Перед началом проведения лечебных мероприятий осуществляют клинический осмотр с оценкой неврологического статуса, клинико-интраскопическую диагностику с оценкой выраженности структурных изменений вещества головного мозга и положения его срединных структур, взятие венозной крови с определением методом иммуноферментного анализа концентрации молекул адгезии нервных клеток С.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и иммунологии, и может использоваться для дифференциальной диагностики острого и хронического течения инфекционного мононуклеоза у детей.
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для доклинического определения противоаллергического действия пищевых продуктов, содержащих лактобациллы.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для определения угрозы формирования в организме беременной анемии при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицинской иммунологии и микробиологии, а именно к лабораторной диагностике и предназначено для определения совокупной активности антимикробных пептидов (АМП) в клинических образцах слюны, мочи, вагинального и кожного секретов.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для определения концентрации глюкозы. Способ определения концентрации глюкозы содержит этапы, на которых прикладывают первое тестовое напряжение между контрольным электродом и вторым рабочим электродом и прикладывают второе тестовое напряжение между контрольным электродом и первым рабочим электродом; измеряют первый тестовый ток, второй тестовый ток, третий тестовый ток и четвертый тестовый ток на втором рабочем электроде после нанесения пробы крови, содержащей аналит, на тест-полоску; измеряют пятый тестовый ток на первом рабочем электроде; отображают концентрацию глюкозы, рассчитанную на основании первого, второго, третьего, четвертого и пятого тестовых токов.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и касается способа прогнозирования эффективности профилактики альбендазолом послеоперационного рецидива цистного эхинококкоза.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики развития эректильной дисфункции, включающий определение уровня тестостерона и эхокардиографическое исследование с анализом структурно-геометрических показателей левых камер сердца, отличающийся тем, что для мужчин в возрасте до 44 лет включительно, страдающих контролируемой гипертонической болезнью II стадии, дополнительно определяют в сыворотке крови уровень общего холестерина и триглицеридов и используют решающее правило: Z=0,04а+0,93b+0,84с-0,34d-8,38, где: а - индекс массы миокарда левого желудочка по данным ЭхоКГ (г/м2), b - общий холестерин в сыворотке крови (ммоль/л), с - триглицериды в сыворотке крови (ммоль/л), d - уровень тестостерона в сыворотке крови (нмоль/л), при Z>0 заключают, что пациент имеет эректильную дисфункцию, при Z<0 заключают, что пациент не имеет эректильную дисфункцию.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики гибели эмбрионов у коров. На 28-40 дни гестации осуществляют забор венозной крови, в сыворотке которой определяют показатель активности гамма-глутамилтрансферазы (ГГТ).

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогоноза развития гемморагических форм рожи у больных рожей нижних конечностей. Способ прогноза развития геморрагических форм рожи у больных рожей нижних конечностей (РНК), включающий биохимическое исследование крови, при этом у больных РНК в первые трое суток от появления клинических симптомов заболевания определяют в сыворотке крови уровень лептина, резистина и показателей коагулограммы: АЧТВ и фибриногена; критическим значениям уровней вышеуказанных показателей присваивают баллы: увеличение уровня лептина 51,7 до 57,9 нг/мл соответствует 1 баллу; от 58,0 нг/мл и выше - 2 баллам; повышение уровня резистина до 17,0 нг/мл соответствует 1 баллу, а 17,1-20,0 нг/мл соответствует 2 баллам; повышение параметров коагулограммы: АЧТВ 36 сек и более соответствует 0,5 баллам уровня фибриногена 7 г/л и более соответствует 0, 5 баллам; затем рассчитывают величину суммарного адипокинового коэффициента (Кс), равного сумме баллов для каждого показателя; и при величине Кс, равном 2-2,4 баллов, прогнозируют умеренный риск развития геморрагических форм (ГФ) рожи; при величине Кс, равном 2,5-2,9 баллам, прогнозируют высокий риск развития ГФ рожи; при величине Кс, равном 3,0 и более баллов, прогнозируют очень высокий риск развития ГФ рожи.

Садок (10) для рыбы включает по меньшей мере одну стенку (30), определяющую канал (40), по которому могут перемещаться рыбы. Канал закручивается внутрь и имеет форму направленной внутрь спирали.
Наверх