Способ биохимического определения активности протеолитических ферментов в крови

Авторы патента:

Вертипрахов Владимир Георгиевич (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2623875:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для биохимического определения активности протеолитических ферментов в крови. Способ включает использование препарата энтерокиназы, инкубирование с последующей фотометрией. В качестве препарата энтерокиназы используют надосадочную жидкость, полученную следующим образом: при убое животных или птиц берут соскоб слизистой оболочки 12-перстной кишки, предварительно промытый холодным физиологическим раствором, смешивают с раствором Рингера в соотношении 1:10 и гомогенизируют до однородной консистенции. После этого центрифугируют при 5000 об/мин в течение пяти минут и отбирают надосадочную жидкость, полученный препарат энтерокиназы добавляется к плазме крови в следующих соотношениях, мл: плазма крови 2,0-3,0, препарат энтерокиназы 0,1-0,2. Содержимое пробирки в количестве 0,1 мл инкубируют субстратом в течение 5 минут, результат учитывают при фотометрии с длиной волны 450 нм по количеству гидролизованного субстрата ферментативной реакции и расчету протеолитической активности. Использование данного способа позволяет определять активность протеолитических ферментов в плазме крови для изучения состояния поджелудочной железы. 2 табл., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к биохимии, и представляет собой биохимический способ, который позволяет определить количество протеолитических ферментов в жидкой части крови (сыворотке и плазме) за счет активирования протеаз с помощью препарата энтерокиназы. Изобретение обеспечивает переход неактивных протеолитических ферментов в активную форму, в которой возможно их определение биохимическим методом.

Предложенный способ может применяться для определения состояния здоровья поджелудочной железы человека и животных, поскольку протеазы вырабатываются исключительно в этом органе и резкое их увеличение в крови связано с патологией железы.

Панкреатические ферменты выделяются в составе секрета в 12-перстную кишку после приема корма. Протеазы взаимодействуют с белковыми субстратами, расщепляя их до аминокислот. Как известно (см. Формирование ферментного компонента секретов пищеварительных желез (обзор) / Г.Ф. Коротько // Физическая культура, спорт - наука и практика, №1, 2013. - С. 51-57), ферменты при взаимодействии с субстратом не изменяются, а после его расщепления отделяются от субстрата и вновь оказываются в свободном состоянии в кишечнике. После этого часть ферментов поступает в кровь. Поскольку протеазы обладают способностью гидролизовать белки, то в крови они связываются ингибиторами трипсина и в неактивном состоянии циркулируют в ней. Поэтому определение протеаз поджелудочной железы в жидкой части крови биохимическими методами практически невозможно.

Определение активности трипсина и его ингибитора до настоящего времени не нашло применения в неотложной диагностике поражений поджелудочной железы, несмотря на кажущуюся органоспецифичность этого исследования, главным образом, в связи с тем, что субстрат для его определения труднодоступен. Кроме того, при этом необходимо определять параллельно активность ингибитора трипсина, что занимает много времени и требует использования биохимических методик, а получаемые результаты довольно спорны. Норма содержания трипсина в крови колеблется от 0 до 5 миллиединиц, активность ингибитора трипсина - 30-600 миллиединиц (Баиров Г.А. Хирургия поджелудочной железы у детей. - Медицина, 1978. - 168 с.), по данным зарубежных исследователей содержание трипсина в сыворотке крови здорового человека 300 нг/мл (Isenman L., Liebow С, Rothman S.,The endocrine secretion of mammalian digestive enzymes byexocrine glands //Am. J. Physiol. -1999. - Vol. 276. - P. 223-232). В научной литературе есть положительные примеры использования эспресс-тестов «Актим-панкреатитис» (Финляндия), который основан на определении трипсиногена в моче путем иммунохроматографии (Каджаева С.З., Беслекоев А.С., Асатрян А.С. К вопросам диагностики острого панкреатита /Кубанский научный медицинский вестник, №3 (145), 2014. - С. 58-61).

Важную роль для диагностики панкреатита играет выявление прямыми или косвенными методами активности панкреатических протеаз: трипсина, химотрипсина, эластазы и карбоксипептидазы. Следует учесть, что поджелудочная железа является единственным источником трипсина, поэтому определение его содержания может быть более важным для суждения о поражении поджелудочной железы, чем других ферментов (Лабораторная диагностика панкреатита / www.eurolab).

В крупных исследовательских центрах США и Европы количество трипсина в сыворотке крови измеряют радиоиммунным методом (с использованием моноклональных антител к антигенным детерминантам молекулы фермента). Указанный метод является наиболее точным, однако дорог и требует специально оборудованных лабораторий.

Из биохимических методов исследования протеаз известен способ определения эстеразной активности протеолитических ферментов (см. патент РФ 2027764 С1, МПК G01N 33/50, опубл. 27.01.1995). Однако этот метод достаточно сложен в выполнении, поскольку направлен на регистрацию прироста концентрации летучего продукта в газовой фазе во времени, и вряд ли может быть использован для определения протеолитических ферментов в крови. Кроме того, наличие широкого спектра ингибиторов сериновых протеаз, к которым относятся ингибиторы Кунитца и Казеля панкреоцитов, антитрипсин и макроглобулин крови и тканевой жидкости, приводит к тому, что трипсин, вышедший из разрушенных клеток, находится исключительно в комплексе с каким-либо из тканевых или сывороточных ингибиторов (Логинов А.С., 1982).

Сравнительно недавно предложен Высокочувствительный способ определения иммуноглобулин-протеиназной активности с использованием полимерных матриц (см. патент РФ 2519071 C1 МПК G01N 33/573, G01N 33/543, опубл. 10.06.2014), который требует дорогостоящих и сложных реактивов и компонентов. Учет двухуровневой ферментативной реакции ведется на спектрофотометре. Поэтому использование данного метода в широкой клинической и лабораторной практике маловероятно.

Целью предлагаемого изобретения является расширение биохимических способов определения активности протеолитических ферментов в крови человека и животных для изучения состояния поджелудочной железы.

Поставленная цель достигается способом биохимического определения активности протеолитических ферментов в крови, включающий использование препарата энтерокиназы, инкубирование с последующей фотометрией, отличающийся тем, что препарат энтерокиназы добавляется к плазме крови в следующих соотношениях, мл:

Плазма крови	2,0-3,0
Препарат энтерокиназы	0,1-0,2

при этом процесс инкубирования препарата энтерокиназы с протеазами и субстратом проходит в течение 3-10 минут, результат учитывают при фотометрии с длиной волны 450 нм по количеству гидролизованного субстрата ферментативной реакции и расчету протеолитической активности.

Способ осуществляют следующим образом. Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, что для активирования протеаз плазмы крови используют фермент энтерокиназу, который выполняет в естественных условиях эту функцию в 12-перстной кишке. Для этого берут при убое животных или птиц соскоб слизистой оболочки 12-перстной кишки, предварительно промытый холодным физиологическим раствором. Смешивают с раствором Рингера в соотношении 1:10 и гомогенизируют до однородной консистенции. После этого центрифугируют при 5000 об/мин в течение пяти минут, в качестве препарата энтерокиназы используют надосадочную жидкость. С целью увеличения сроков хранения препарата с двух до 14 суток раствор Рингера заменяют 87% раствором глицерина, количество которого превышает массу слизистой оболочки кишки в два раза. Препарат хранят в холодильнике при температуре +2-4°С, а перед употреблением разбавляют раствором Рингера в 5 раз.

Протеолитическую активность плазмы крови определяют по уменьшению концентрации казеина при фотометрическом контроле (см. Фотометрическое определение активности протеолитических ферментов поджелудочного сока по уменьшению концентрации казеина [Текст] /Ц.Ж. Батоев // Сборник научных трудов Бурятского СХИ. - 1971. - №25. - С. 122-126).

Методика основана на определении уменьшения концентрации казеина при фотометрическом контроле на КФК-3.

Реактивы: 1) 0,1% раствор соды (NaHCO₃); 2) 0,1% раствор очищенного казеина, раствор казеина сохраняется 2-3 дня, рН 8,0; 3) 15% раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ).

После инкубирования смеси раствор ТХУ приливали по стенке пробирки и ставили в штатив. Преждевременное встряхивание и помешивание уменьшает экстинкции растворов. По истечении 30-40 минут, перед наливанием растворов в кювету, производили размешивание пробы 3-4 разовым перевертыванием пробирки вверх дном и быстро определяли показатели оптической плотности. При исследовании на КФК-3 применяли синий светофильтр (длина волны 450), используя кюветы по 3 мл.

Калибровочная кривая выводится в соответствии с данными таблицы 1.

Для большей точности результаты отдельного опыта целесообразно сравнивать не с показателями калибровочной кривой, а с данными контрольных проб. Экстинкции контрольных проб закономерно могут отклоняться в ту или другую сторону от показателей калибровочной кривой в зависимости от условий, складывающихся в опыте.

Контрольные пробы выполняли по схеме опытов калибровочной кривой. Результаты контрольных проб сравнивали с данными калибровочной кривой. Рассчитывали среднюю разницу между показателями контрольных проб и калибровочной кривой. Эту разницу контрольных проб прибавляли к показателю первой пробирки калибровочной кривой (500), или вычитали, если она оказывалась со знаком минус. Таким путем находили максимальную экстинкцию для данного опыта.

Для всех проб опыта приготовленный раствор казеина, согласно прописи первой пробирки калибровочной кривой, разливали в пробирки для анализов. При этом учитывали изменение объема проб вследствие добавления ферментативного материала. При добавлениях на пробу больше 0,3 мл ферментативного субстрата увеличивали на столько же объем контрольных проб, или же производили уменьшение объема опытных проб за счет воды.

Для расчета единиц протеолитической активности панкреатического сока экстинкцию контроля принимали за 100%, а опыта за х%.

Так как в контрольной и опытной пробах содержится одинаковое количество субстрата, то 5 мл казеина принимаются за 100%, а разница между контролем и опытом в % равняется количеству мг казеина, расщепленного за опыт. По количеству сока, взятого для гидролиза субстрата и времени инкубации, рассчитывали количество казеина, расщепленного 1 мл сока в течение 1 минуты.

Результаты исследований показывают, что без добавления к плазме крови препарата энтерокиназы активность протеаз не выявляется. С учетом того, что в плазме крови протеазы связаны с ингибиторами фермента, то экстинкция раствора в опытной пробе оказывается выше, чем контроль. Это можно использовать для расчета ингибитора, но целью нашей работы было определить количество протеаз в плазме крови, поэтому мы добавляли к плазме крови препарат энтерокиназы из расчета 0,1 мл на 2,0-3,0 мл плазмы крови. В дальнейшем содержимое пробирки в количестве 0,1 мл добавляем к рабочему раствору, содержащему казеин, и помещаем в термостат на 3-5 минут. В контрольной пробирке используется плазма крови, поскольку там гидролиза субстрата не происходит, то экстинкция раствора контрольной пробы всегда выше, чем в опытной пробирке.

Экспериментально были изучены разные варианты инкубации (3, 5 и 10 минут) плазмы крови с рабочим раствором (субстратом). Результаты представлены в табл. 2.

Из данной таблицы видно, что наиболее оптимальным временем инкубации фермента и субстрата является 5 минут. Увеличение или уменьшение времени инкубации приводит к снижению показателя активности протеолитических ферментов в плазме крови.

Количество плазмы крови, которое добавляли к рабочему раствору, находилось в пределах 0,1-0,2 мл. При добавлении 0,1 мл плазмы крови экстинкция раствора соответствовала 600-700 единицам, а увеличение до 0,2 мл повышало экстинкцию раствора до 800-1000 единиц (рис. 1). Выполнение расчетов показывает, что наиболее оптимальным количеством плазмы крови является 0,1 мл, так как активность фермента в этом случае составляет 0,6 мг/мл/мин, а увеличение до 0,2 мл снижает активность протеаз до 0,2 мг/мл/мин.

Таким образом, предложенный метод позволяет активировать протеазы плазмы и сыворотки крови и определять их биохимическими методами для изучения состояния поджелудочной железы человека и животных.

Способ биохимического определения активности протеолитических ферментов в крови, включающий использование препарата энтерокиназы, инкубирование с последующей фотометрией, отличающийся тем, что в качестве препарата энтерокиназы используют надосадочную жидкость, полученную следующим образом: при убое животных или птиц берут соскоб слизистой оболочки 12-перстной кишки, предварительно промытый холодным физиологическим раствором, смешивают с раствором Рингера в соотношении 1:10 и гомогенизируют до однородной консистенции, после этого центрифугируют при 5000 об/мин в течение пяти минут и отбирают надосадочную жидкость, полученный препарат энтерокиназы добавляется к плазме крови в следующих соотношениях, мл:

Плазма крови	2,0-3,0
Препарат энтерокиназы	0,1-0,2

содержимое пробирки в количестве 0,1 мл инкубируют субстратом в течение 5 минут, результат учитывают при фотометрии с длиной волны 450 нм по количеству гидролизованного субстрата ферментативной реакции и расчету протеолитической активности.

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу диагностики крови на наличие паразитарных заболеваний по изменению лейкограммы после ультразвукового воздействия, включающему: воздействие на образцы крови, помещенные в термостатируемую кювету, бегущей модулированной ультразвуковой волной; обработку образцов крови в абсолютно одинаковых условиях; поддержание постоянной температуры образцов в кюветах с проточным охлаждением и анализ морфологического состояния клеток методами световой микроскопии; при начале гемолиза эритроцитов через 18-30 с, уменьшении количества лимфоцитов в 1,7-3,5 раза, а сегментоядерных нейтрофилов в 1,5-4,0 раза, деформации и разрушении ядер и изменении структуры цитоплазмы, ее вакуолизации, а также при ядерном сдвиге влево диагностируют наличие паразитарного заболевания.

Способ прогнозирования динамики фиброза печени у пациентов с хроническим гепатитом с, генотипом 1, не ответивших на лечение пегилированными интерферонами и рибавирином // 2623151

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования достоверности динамики фиброза печени у пациентов с ХГС, генотипом 1, не ответивших на двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином.

Способ прогнозирования гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у пациенток с плохим ответом на неоадъювантную химиотерапию // 2623150

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у пациенток с плохим ответом на неоадъювантную химиотерапию, согласно которому осуществляют исследование инфильтративного компонента новообразования на светооптическом уровне, отличающийся тем, что проводят морфологическое исследование строения ткани опухоли и в ходе гистологической оценки инфильтративного компонента новообразования определяют альвеолярные, тубулярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток, и при наличии альвеолярных структур прогнозируют высокий риск гематогенного метастазирования.

Способ оценки тяжести состояния больного и риска летального исхода по уровню фенилмолочной кислоты в крови // 2623148

Изобретение относится к области медицины и касается способа оценки тяжести состояния больного и риска летального исхода по уровню фенилмолочной кислоты в крови. Сущность способа заключается в том, что в крови больных количественно определяют концентрацию фенилмолочной кислоты (ФМК).

Способ комплексной оценки эффективности полихимиотерапии у больных с рецидивной лимфомой ходжкина // 2623143

Изобретение относится к медицине и касается способа комплексной оценки эффективности полихимиотерапии у больных с рецидивной лимфомой Ходжкина, заключающегося в том, что до начала лечения и после проведения трех противорецидивных курсов полихимиотерапии исследуют развернутую протеинограмму в комплексе с оценкой морфоструктуры сыворотки крови методами клиновидной и краевой дегидратации и при появлении дефектных форм сферолитов, нарушении агрегации макро- и микросферолитов, трансформации анизоморфонов злокачественного роста вплоть до скелетирования остаточных структур крупных сферолитов, формировании нормотипов фаций с радиальной и частично радиальной симметрией трещин, восстановлении системы концентрационных волн в краевой зоне фаций, при нормализации показателей белкового обмена режим полихимиотерапии признают эффективным и полихимиотерапию продолжают по той же схеме, в обратном случае выполняют смену схемы лечения с заменой применяемых цитостатиков.

Способ диагностики врожденного иммунитета слизистых оболочек носа для обоснования выбора лечения детей с гипертрофией аденоидных вегетаций // 2623121

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки мукозального иммунитета слизистой оболочки носа и носоглотки. В эпителиальных клетках слизистой оболочки полости носа определяют экспрессию генов рецептора врожденного иммунитета (TLR2) и противомикробного пептида (HBD2), и при соотношении показателя HBD2 к TLR2 меньше 0,1 диагностируют нарушение мукозального иммунитета, что является обоснованием хирургического метода лечения.

Способ оценки повреждающего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание общего холестерола в периферической крови беременных, перенесших в третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции // 2623120

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования плацентарной недостаточности при повреждающем действии цитомегаловирусной инфекции на содержание общего холестерола в третьем триместре гестации.

Способ определения степени риска развития отдаленных метастазов у больных раком ободочной кишки // 2623119

Изобретение относится к медицине и предназначено для определения степени риска развития отдаленных метастазов у больных раком ободочной кишки. Проводят исследование молекулярных характеристик в опухоли ободочной кишки и в неизмененной ткани: X1 - химотрипсинподобная активность протеасом в опухоли, ⋅103 Ед/мг белка; Х2 - химотрипсинподобная активность протеасом в неизмененной ткани, ⋅10 Ед/мг белка; Х3 - общая кальпаиновая активность в опухоли, ⋅10 Ед/мг белка; Х4 - общая кальпаиновая активность в неизмененной ткани, ⋅10 Ед/мг белка; учитывают Х5 - возраст пациентов, после чего рассчитывают значения Y1 и Y2 по дискриминантным уравнениям:Y1=0,039*X1+0,126*X2+0,775*X3-0,083*X4-0,040*X5-23,51; и Y2=0,015*X1+0,115*X2+0,509*X3-0,026*X4-0,026*X5-13,84, и при Y1>Y2, пациента относят к группе с низким риском развития отдаленных метастазов; при Y1<Y2 - к группе с высоким риском развития отдаленных метастазов рака ободочной кишки.

Способ прогнозирования вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с трижды негативным молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы // 2623118

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с трижды негативным молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы.

Способ отбора тромбоцитов человека, пригодных для криоконсервирования // 2623073

Изобретение относится к области медицины, а именно производственной и клинической трансфузиологии, и раскрывает способ морфофункционального анализа тромбоцитов, пригодных для криоконсервирования.

Твердофазный носитель для иммобилизации и/или хранения биологических образцов, содержащих нуклеиновые кислоты // 2624241

Изобретение относится к области хранения образцов биологического материала, а именно к твердофазным носителям иммобилизации и хранения биологических образцов. Твердофазный носитель для иммобилизации и хранения образцов, содержащих нуклеиновые кислоты, представляет собой пористую целлюлозную основу, обработанную композицией, содержащей детергент, слабое основание, хелатообразующий агент и дисахарид. Изобретение обеспечивает увеличение срока хранения образцов при комнатной температуре без разрушения нуклеиновых кислот, а также позволяет осуществить стерилизационную обработку носителя от «примесной» ДНК или РНК без потери свойств носителя. 13 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр.

Способ определения оптимального моноэндоцеллюлярного криоконсерванта для хранения клеток при -80o с // 2624243

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному исследованию биологической жидкости (супернатанта, плазмы или сыворотки крови), и может быть использовано для определения оптимального для конкретного больного моноэндоцеллюлярного криоконсерванта для хранения клеток при -80°С. Способ характеризуется проведением сравнительного исследования зональных структур высушенных капель супернатантов с различными криоконсервантами, замороженными до температуры минус 80°С, а также до и спустя определенные интервалы времени после испытания на модели трансфузии in vitro. При аналогичности структуропостроения центральных, срединных и краевых зон контрольного и опытного микробиопрепаратов примененный криоконсервант оценивают как оптимальный для конкретного больного. Способ позволяет проводить индивидуальный скрининг криоконсерванта на раннем доклиническом этапе проявления критического расстройства гомеостаза субъекта криопротекторного генеза. 1 табл.

Способ оценки фибринолитической активности слезной жидкости // 2624256

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу оценки фибринолитической активности слезной жидкости. Способ оценки фибринолитической активности слезной жидкости включает отбор слезы из нижнего конъюнктивального свода глаз, титрование анализируемой слезной жидкости путем проведения серии из двукратных разведений с помощью буферного раствора, добавление к полученным образцам латексного реагента, содержащего мышиные моноклональные антитела к Д-димеру фибрина, далее смесь перемешивают, регистрируют реакцию агглютинации в пробе при наибольшей величине разведения и рассчитывают концентрацию Д-димера по формуле:С(Д-димер)=200×d, нг/мл,где С - концентрация Д-димера (нг/мл), d - наибольшая величина разведения, 200 - чувствительность реагента, при этом концентрацию Д-димера 3200 нг/мл считают пороговой для подтверждения повышения активности системы фибринолиза слезной жидкости для оценки фибринолитической активности слезной жидкости с использованием в качестве маркера концентрацию Д-димера в слезной жидкости в слезной жидкости. Вышеописанный способ позволяет эффективно проводить оценку фибринолитической активности слезной жидкости. 2 пр.

Способ выбора тактики лечения острых кишечных инфекций у детей раннего возраста // 2624262

Способ относится к медицине и предназначен для выбора тактики лечения острых кишечных инфекций у детей раннего возраста. При выявлении в остром периоде заболевания интоксикационного синдрома и уровня сывороточной мочевины 2 ммоль/л и ниже определяют дисбиоз кишечника, протекающий с метаболической эндотоксемией на фоне избыточного размножения протеолитических кишечных бактерий, и назначают проведение дезинтоксикационной терапии. При выявлении воспалительного синдрома и уровня мочевины более 2 ммоль/л определяют дисбиоз кишечника, протекающий с дефицитом функциональной активности микрофлоры, и назначают антибактериальное лечение. Способ позволяет повысить точность и обоснованность выбора предлагаемого лечения. 1 пр., 1 табл., 1 ил.

Способ лечения люминального подтипа рака молочной железы n1 в постменопаузальном периоде // 2624370

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения люминального подтипа рака молочной железы N1 в постменопаузальном периоде. Для этого определяют рецепторы эстрогена, суммарный диаметр метастазов D в аксиллярных лимфоузлах и среднее количество метастатических клеток К, ядра которых экспрессируют рецепторы эстрогена, в них. При выявлении 2≤D<10 мм и значении К, превышающем 1%, проводят лучевую терапию по выбранной схеме лечения, а после ее завершения осуществляют сочетанное введение тамоксифена и неселективного бета-адреноблокатора ежедневно в терапевтических дозах в течение 1-5 лет. При выявлении D≥10 мм и при значении К≥33% осуществляют последовательное проведение адьювантной химиотерапии с одновременным подкожным введением фрагмина в суточной дозе 2500 ME ежедневно, затем проводят лучевую терапию по выбранным схеме лечения, а после этого проводят гормонотерапию ингибитором ароматазы в течение 5-7 лет. При выявлении D≥10 мм и при значении К<33% осуществляют одновременное проведение химиолучевой и гормонотерапии, при этом одновременно с химиотерапией вводят подкожно фрагмин в дозе 5000 ME ежедневно, а в качестве гормонотерапии используют ингибитор ароматазы в течение 7-10 лет. Способ обеспечивает возможность в более короткие сроки провести лечение, в ряде случаев сохранить трудоспособность во время его проведения, избавить пациента от возможных осложнений при обеспечении высокой эффективности терапии. 3 пр.

Способ интраоперационной дифференциальной диагностики объемных образований щитовидной железы // 2624377

Изобретение относится к медицине, хирургии, интраоперационной дифференциальной диагностике объемных образований щитовидной железы (ЩЖ). В режиме реального времени проводят конфокальную лазерную микроскопию ткани ЩЖ. При получении изображения в виде сетки с ячейками округлой или полигональной формы диаметром 20-200 мкм с перегородкой толщиной 0,2 мкм диагностируют отсутствие объемных образований ЩЖ. При регистрации сетчатого изображения с диаметром ячеек более 200 мкм диагностируют узловой коллоидный зоб. При получении изображения с ячейками диаметром 20-200 мкм с толщиной перегородки 10-30мкм и участками фиброза диагностируют аденому ЩЖ. При регистрации изображения с бесструктурными массами с неровными изъеденными краями по всему полю зрения с просветлениями, расположенными в хаотичном порядке, диагностируют рак ЩЖ. Способ обеспечивает быструю и точную диагностику образований ЩЖ в режиме реального времени, интраоперационно. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.

Способ оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний // 2624511

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, медицинской токсикологии, микробиологии, биологии, и касается способа оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний. Способ включает забор исследуемого биологического материала, введение раствора коммерческого бактериофага в исследуемый биологический материал и определение эффективности взаимодействия коммерческого бактериофага с патогенными микроорганизмами в исследуемом биологическом материале. Перед проведением хирургического вмешательства осуществляют идентификацию патогенных микроорганизмов в области планируемого хирургического вмешательства. Определяют концентрацию (титр) бактериофага к патогенным микроорганизмам в исследуемом биологическом материале. Вводят первую дозу раствора коммерческого бактериофага сразу после выполнения хирургического вмешательства. Через 18-24 часов после введения первой дозы раствора коммерческого бактериофага производят забор исследуемого биологического материала и определяют концентрацию (титр) бактериофага в исследуемом биологическом материале. При установлении титра не менее 106 БОЕ/мл делают вывод об эффективном воздействии раствора коммерческого бактериофага на целевой патогенный микроорганизм. Через 18-24 часов после введения первой дозы раствора коммерческого бактериофага вводят вторую дозу раствора коммерческого бактериофага, через 18-24 часов после введения второй дозы раствора коммерческого бактериофага вводят третью дозу раствора коммерческого бактериофага. На 4-5 сутки после хирургического вмешательства выполняют забор исследуемого биологического материала и производят оценку эффективности путем сравнения бактериофага, содержащегося в исследуемом биологическом материале с раствором коммерческого бактериофага. При установлении тождественности литической активности не менее первых двух десятикратных разведений раствора коммерческого бактериофага, используемого для лечения пациента с бактериофагом, находящимся в исследуемом биологическом материале от пациента, делают вывод об эффективности фаготерапии и продолжают вводить раствор коммерческого бактериофага до полной элиминации патогенных микроорганизмов. Способ позволяет осуществлять качественный и количественный контроль присутствия бактериофагов, что приводит к более точной трактовке полученных результатов; позволяет отслеживать концентрацию бактериофагов в условиях in vitro и в условиях in vivo. Предусматривает идентификацию этиологически значимого возбудителя инфекционного процесса до проведения хирургического вмешательства, что позволяет сразу произвести подбор этиотропного штамма бактериофага. Позволяет оценить эффективность фаготерапии в процессе ее проведения, это позволяет установить активность бактериофага в ране и тем самым повысить оценку эффективности фаготерапии. Как следствие, повышается качество процесса лечения, уменьшается риск возникновения рецидива инфекции. 2 табл.

Способ определения имплантации зародыша человека в слизистую оболочку матки в зависимости от содержания в хорионе активных рецепторов к эстрогенам при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации // 2624519

Изобретение касается определения угрозы нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации. Сущность способа: определяют титр антител IgG к ЦМВ на 7-8 неделях беременности и определяют содержание активных рецепторов к эстрогенам (ERα) в гомогенате хориона, и при определении титра антител IgG к цитомегаловирусу до 1:1600, снижении содержания ERα в гомогенате хориона до 3,62±0,51 нмоль/л определяют угрозу нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки, что может привести к его гибели в виде самопроизвольного выкидыша. 1 пр.

Способ предупреждения появления и дальнейшего развития клиновидных дефектов зубов // 2624529

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для предупреждения появления и дальнейшего развития клиновидных дефектов зубов. Для этого проводят двукратно забор десневой жидкости в 8.00 и в 20.00, причем в десневой жидкости исследуют концентрации билирубина общего, билирубина прямого, билирубина непрямого, щелочной фосфатазы; если концентрация хотя бы одного из показателей в процессе исследования будет выше референтного значения, которое составляет для билирубина общего 8,35±1,04 ммоль/л, билирубина прямого 0,24±0,06 ммоль/л, билирубина непрямого 8,12±0,84 ммоль/л, щелочной фосфатазы 36,9±3,0 Ед/л, то подтверждают агрессивное воздействие на зубы желудочного содержимого и рекомендуют пациенту провести лечение патологии желудочно-кишечного тракта, сопровождающейся гастроэзофагеальнооральным рефлюксом. 3 пр.

Способ диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите // 2624855

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки. При выявлении Lactobacillus spp., Enterococcus faecali, Streptococcus viridans, Streptococcus agalactiae диагностируют микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. Использование способа позволяет с высокой точностью диагностировать микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. 3 пр.