Способ прогнозирования транслокации e.coli из кишечника при некультивируемом типе инфекционного процесса в эксперименте на кроликах

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии и может быть использовано для прогнозирования транслокации E. coli из кишечника, вызванной некультивируемыми бактериями. Способ включает заражение кроликов с использованием взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, который вводят подкожно. Затем на 1-2 и 4-5 сутки исследуют АЛТ и мочевину в сыворотке крови. При показателе АЛТ на 1-2 сутки, равном 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L, и показателе концентрации мочевины на 1-2 сутки, равном 4,6-5,6 u/L, а на 4-5 сутки - 1,3-1,9 u/L, прогнозируют развитие транслокации E. coli из кишечника во внутренние органы животного. Полученные результаты позволяют экстраполировать полученные данные для людей с целью совершенствования диагностики и лечения больных пациентов при инфекционных процессах, вызванных некультивируемыми бактериями. 2 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии и может быть использовано для выявления развития патогенетических механизмов транслокации, вызванных некультивируемыми бактериями, с целью экстраполяции полученных данных для разработки способов лечения и снижения летальности у людей, вызванных некультивируемыми бактериями.

В основе транслокации лежит способность бактерий проникать во внутренние органы из желудочно-кишечного тракта. [Berg R.D. Bacterial translocation from the intestines // Jikken Dobutsu, 1985, Jan., 34(1), 1-16] и вызывать сепсис [Несвижский Ю.В., Богданова Е.А., Зверев В.В. Колонизация Staphylococcus aureus биотопов желудочно-кишечного тракта крыс // Вестник РАМН, 2009, №4, с. 28-30; Бондаренко В.М., Рябиченко Е.В. Роль дисфункции кишечного барьера в поддержании хронического воспалительного процесса различной локализации // Ж. микробиол., 2010, 1, 92-100].

Причины возникновения транслокации изучены недостаточно. Транслокация возникает при снижении иммунитета организма, при кишечной непроходимости [Пашков С.А., Плечев В.В., Мурысева Е.М. Интраперитонеальная транслокация бактерий и антибиотикотерапия при острой спаечной кишечной непроходимости // Казанский медицинский журнал, 2004, т. 85, №5, с. 346-350; Салато О.В. Исследование транслокации бактерий при механической непроходимости тонкой кишки // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН, 2008, №4(62), с. 76-79], при стрессовых ситуациях, ожогах, радиационных поражениях [Павлович Е.Р., Дугин С.Ф. Патофизиологическое значение трансинтестинальной транслокации бактерий // Успехи современного естествознания, 2006, №6, с. 81-82].

Известна бактериальная транслокация при хирургических инфекциях [Апарцин К.А., Лишманов Ю.Б., Галеев Ю.М. и др. Бактериальная транслокация при релапаротомии в условиях распространенного перитонита // Бюллетень СО РАМН, 2009, №2(136), с. 95-100; Шестаков А.И., Хафизов А.Р. К вопросу о транслокации бактерий в хирургии аорты // Вестник Башкирского университета, 2006, №2, с. 70-73; Тарасенко B.C., Никитенко В.И., Кубышкин В.А. Острый панкреатит и транслокация бактерий. // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 2000, - Т. 159, №6. - С. 86-88].

На механизм транслокации оказывает влияние не только макроорганизм, но свойства микроорганизмов. Под влиянием эндотоксина бактерий происходит транслокация микрофлоры кишечника во внутренние органы [Домарадский И.В., Хохоев Т.Х., Кондракова О.А. и др. Противоречивая микроэкология // Рос. хим. журн. (Ж. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева), 2002, т. XLVI, №3, с. 80-89].

Однако влияние некультивируемых бактерий на механизм развития транслокации при инфекционных заболеваниях в периодической патентной и научно-технической литературе не описано. Хотя, известно широкое распространение некультивируемых бактерий в популяциях патогенных и условно-патогенных микроорганизмов [Соколенко А.В., Шаманская Е.П. Некультивируемые формы патогенных бактерий и здоровье человека // Валеология. - 2008. - №2. - С. 10-20; Козлов Л.Б., Диц Е.В. Роль микробных ассоциаций в инфекционной патологии человека // Фундаментальные исследования, 2013. - №9. - С. 366-370; Соколенко А.В. Некультивируемые формы бактерий: распространение в природе, индукторы некультивируемого состояния и реверсии // Современные наукоемкие технологии. - 2006. - №2 - С. 11-15; Heim S. Et al. The viable but nonculturable state and starvation are different stress responses of Enterococcus faecalis, as determined by proteome analysis // J. Bacteriol. - 2002. - Vol. 184. - №23. - P. 6739-6745].

Поэтому прогнозирование транслокации микрофлоры из кишечника под влиянием некультивируемых бактерий, а также создание экспериментальной модели по изучению влияния некультивируемых бактерий на патогенетические механизмы развития транслокации является актуальным в плане создания эффективного лечения и снижения летальности при инфекционных процессах, вызванных некультивируемыми бактериями.

В патентной литературе описан способ выделения некультивируемых бактерий [патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Бюл. №35].

Описан способ предупреждения транслокации условно-патогенной микрофлоры кишечника животных (беспородные белые крысы) при стрессовом воздействии в эксперименте, при использовании биологически активной добавки «Ультрасорб» [патент RU №2410101 С1 от 27.01.2011]. Для подтверждения транслокации бактерий в организме животных авторы использовали сложные гистологические исследования.

Для профилактики транслокации предложен штамм Lactobacillus plantarum [патент RU №2521364 С2 от 27.06.2014]. Изобретение относится к области промышленной микробиологии и за счет увеличения бактериального разнообразия повышена эффективность профилактического действия препарата и снижена возможность транслокации бактерий из желудочно-кишечного тракта, но не устраняются основные причины и механизмы транслокации бактерий.

В предложенных выше двух технических решениях не предусмотрено устранение причин транслокации вызванных некультивируемыми бактериями, постоянно присутствующих в популяциях патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

В качестве прототипа нами выбран способ прогнозирования транслокации бактерий в кровь при генерализованном хроническом пародонтите [патент RU №2472858 С2 от 20.01.2013]. Транслокация бактерий прогнозирована по усилению гемолитической активности, антилизоцимной активности и росту в отношении других штаммов симбионтов. Штамм - симбионт, обладающий этими свойствами обладает способностью транслоцировать в кровь. Предложена сложная микробиологическая методика выявления транслокации бактерий, включающая выделение чистой культуры бактерий из крови и со слизистых оболочек пародонтальных карманов, идентификацию бактерий до вида и сравнение выделенных культур по типу антибиотикограмм. Предложенный способ не позволяет выявить транслокацию, вызванную некультивируемыми бактериями и представляется сложным проследить эффективность химиотерапевтического лечения при выявленной транслокации (необходимы дополнительные лабораторные исследования по изучению влияния предложенного химиотерапевтического препарата на культивируемый микроорганизм вызывающий транслокацию). Предложенный способ не позволяет выявить патогенетический механизм развития транс локации, вызванной некультивируемыми бактериями.

Задачей настоящего изобретения является установить достоверное прогнозирование транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями в экспериментальной модели, с целью изучения патогенетического механизма развития транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями.

Результаты проведенных экспериментальных исследований позволят экстраполировать полученные данные для разработки эффективного лечения и предупреждения летальности у людей вызванных некультивируемыми бактериями в процессе транслокации.

Технический результат заявленного нами способа заключается в использовании биохимических тестов для прогноза возникновения транслокации, вызванной наличием в микробных популяциях некультивируемых бактерий.

Для достижения данного технического результата необходима экспериментальная модель транслокации на лабораторных животных, вызванной некультивируемыми бактериями. Для этих целей использованы кролики породы «шиншилла», инфицированные некультивируемыми бактериями P. aeruginosa, S. aureus.

Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат и основан на исследовании сывороток крови кроликов в первые 5 дней болезни на наличие биохимических показателей: аланинаминотрансферазы (АЛТ) и концентрации мочевины.

Технический результат предложенного способа достигается тем, что способ прогнозирования транслокации E. coli из кишечника, вызванной некультивируемыми бактериями, в эксперименте, заключается в том, что проводят заражение кроликов с использованием взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, который вводят подкожно, затем на 1-2 и 4-5 сутки исследуют АЛТ и мочевину в сыворотке крови и при показателе АЛТ на 1-2 сутки, равном 53,0-63,0 u/L, а 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L и показателе концентрации мочевины на 1-2 сутки, равном 4,6-5,6 u/L, а на 4-5 сутки - 1,3-1,9 u/L прогнозируют развитие транслокации E. coli из кишечника во внутренние органы животного.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образам.

Здоровых кроликов породы «шиншилла» массой 2500-3500 грамм содержат в клетках в соответствии с требованиями санитарных правил (утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживают температуру воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации.

Для заражения кроликов использовали взвесь некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, а затем вводили кроликам подкожно в объеме 1,0 мл смеси. Некультивируемые бактерии получали по методике предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Бюл. №35].

На 1-2 и 4-5 сутки после заражения кроликов некультивируемыми бактериями проводили биохимическое исследование сывороток крови на наличие АЛТ и мочевины. Биохимические исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе BS 200 (Mindray) с использованием коммерческих наборов реактивов. При показателе АЛТ в сыворотке крови животных на 1-2 сутки болезни кроликов 53,0-63,0 u/L, а 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L и показателе концентрации мочевины на 1-2 сутки 4,6-5,6 u/L, а на 4-5 сутки - 1,3-1,9 u/L прогнозировали развитие транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями.

Наличие транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями, определяют бактериологическим методом. Животных вскрывают на 7-9 сутки после инфицирования некультивируемыми бактериями и определяют наличие, а также концентрацию E. coli в легких, печени и почках, используя общепринятые микробиологические методики [Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - М.: Медицина, 1982, 462 с.].

Для изучения микробной обсемененности внутренних органов экспериментальных животных использован метод определения "бактерийного индекса" селезенки. После извлечения органа в асептических условиях, его взвешивали на торсионных весах. На каждые 100 мг веса органа прибавляют 1 мл стерильного изотонического раствора NaCL и в стерильной ступке путем растирания получают основную взвесь исследуемой ткани органа. Затем из основной взвеси делают ряд последовательных десятикратных разведений и 0,1 мл каждого разведения высевают на элективную питательную среду для выделения E. coli. Через 24 часа инкубации в термостате при 37°С подсчитывают количество колоний.

Примеры практического использования предлагаемого способа:

Пример 1.

Здорового кролика породы «шиншилла» массой 2800 грамм содержали в клетке в соответствии с требованиями санитарных правил (утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации.

Для заражения кролика использовали смесь взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105 микробных клеток в количестве 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, а затем вводили кролику подкожно в объеме 1,0 мл. Некультивируемые бактерии получали по методике предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Бюл. №35].

Через сутки и четверо суток после заражения кролика некультивируемыми бактериями проводили биохимические исследования сывороток крови на наличие АЛТ и мочевины. Показатель АЛТ в сыворотке крови животных через сутки болезни составил 53 u/L, а на 4-е сутки - 57 u/L и показатель концентрации мочевины через сутки составил 4,7 u/L, а на 4-е сутки - 1,4 u/L. На основании полученных результатов биохимических исследований сывороток крови животного прогнозировано развитие транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями.

Биохимические исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе BS 200 (Mindray) с использованием коммерческих наборов реактивов.

Для подтверждения возникновения транслокации E. coli во внутренние органы использовали клинические наблюдения за кроликом, результаты микробиологических исследований внутренних органов и проводили анализ изменений в тканях органов на основании гистологических срезов, полученных после вскрытия животного. Животного вскрыли на 9-е сутки после инфицирования некультивируемыми бактериями и определяли концентрацию E. coli в легких, печени и почках, используя общепринятые микробиологические методики [Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - М.: Медицина, 1982, 462 с.].

Для изучения микробной обсемененности внутренних органов экспериментального животного использовали метод определения "бактерийного индекса" селезенки. После извлечения органа в асептических условиях, его взвешивали на торсионных весах. На каждые 100 мг веса органа добавляли 1 мл стерильного изотонического раствора NaCL и в стерильной ступке путем растирания получали основную взвесь исследуемой ткани органа. Затем из основной взвеси делали ряд последовательных десятикратных разведений и 0,1 мл каждого разведения высевали на плотную элективную питательную среду для выделения E. coli и учета изолированных колоний E. coli. Через 24 часа инкубации в термостате при 37°С подсчитывали количество выросших колоний.

На 9 день инфекционного процесса концентрация E. coli в легких животного составила 1,0×103 микробных клеток в 1 грамме исследуемой ткани, в печени - 9,0×102 и в почках - 1,0×103 микробных клеток (даны средние данные по результатам трех исследований органа).

Результаты клинического наблюдения за животным.

На 5-е сутки болезни кролик отказался от еды, а затем на 6-е сутки отмечено вздутие живота и отсутствие перистальтики кишечника.

Результаты гистологических исследований органов.

В динамике развивалась очаговая инфильтрация печени. Диагноз: Очаговый септический гепатит.

В легких отмечалось расширение альвеолл с разрывами межальвеолярных перегородок, утолщение единичных межальвеолярных перегородок за счет воспалительной инфильтрации. Диагноз: Острая инфекционная эмфизема легких.

В почках выявлено полнокровие, в просветах сосудов эритростазы, умеренно выраженная белковая дистрофия эпителия извитых канальцев нефрона с десквамацией эпителия. Капсулы клубочков тонкие, несколько отечные. Сосуды единичных клубочков содержат фибриновые тромбы. Диагноз: Морфологические признаки шока.

Пример 2.

Здорового кролика породы «шиншилла» массой 3200 грамм содержали в клетке в соответствии с требованиями санитарных правил (утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации.

Для заражения кролика использовали смесь взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, а затем вводили кролику подкожно в объеме 1,0 мл. Некультивируемые бактерии получали по методике предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Бюл. №35].

На 2-е и 5-е сутки после заражения кролика некультивируемыми бактериями проводили биохимические исследования сывороток крови на наличие АЛТ и мочевины. Показатель АЛТ в сыворотке крови животного на 2-е сутки болезни составил 60 u/L, а на 5-е сутки - 68 u/L и показатель концентрации мочевины на 2-е сутки 5,3 u/L, а на 5-е сутки - 1,8 u/L. На основании полученных результатов биохимических исследований сывороток крови животного прогнозировано развитие транслокации, вызванной некультивируемыми бактериями.

Биохимические исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе BS 200 (Mindray) с использованием коммерческих наборов реактивов.

Для подтверждения возникновения транслокации E. coli во внутренние органы использовали клинические наблюдения за кроликом, результаты микробиологических исследований внутренних органов и проводили анализ изменений в тканях органов на основании гистологических срезов, полученных после вскрытия животного. Животного вскрыли на 9-е сутки после инфицирования некультивируемыми бактериями и определяли концентрацию E. coli в легких, печени и почках, используя общепринятые микробиологические методики [Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - М.: Медицина, 1982, 462 с.].

Для изучения микробной обсемененности внутренних органов экспериментального животного использовали метод определения "бактерийного индекса" селезенки. После извлечения органа в асептических условиях, его взвешивали на торсионных весах. На каждые 100 мг веса органа добавляли 1 мл стерильного изотонического раствора NaCL и в стерильной ступке путем растирания получали основную взвесь исследуемой ткани органа. Затем из основной взвеси делали ряд последовательных десятикратных разведений и 0,1 мл каждого разведения высевали на плотную элективную питательную среду для выделения E. coli и учета изолированных колоний E. coli. Через 24 часа инкубации в термостате при 37°С подсчитывали количество колоний E. coli.

На 9 день инфекционного процесса концентрация E. coli в легких животного составила 1,0×103 микробных клеток в 1 грамме исследуемой ткани, в печени - 9,0×102 и в почках - 5,0×102 микробных клеток (даны средние данные по результатам трех исследований органа).

Результаты клинического наблюдения за животным.

На 5-е сутки болезни кролик отказался от еды, а затем на 7-е сутки отмечено вздутие живота и отсутствие перистальтики кишечника. На 8-е сутки животное погибло.

Результаты гистологических исследований органов.

В тканях печени наблюдался мостовидный некроз, распространяющийся между соседними портальными трактами, а также ступенчатый некроз, с распространением к центру дольки. Диагноз: Острый серозно-гнойный септический гепатит.

В легких на основании гистологических срезов ткани легкого поставлен диагноз: Острая инфекционная эмфизема легких.

В почках выявлены аутоиммунные поражения (по типу системных заболеваний соединительной ткани. Наблюдается острое течение патологического процесса.

Проведенные результаты исследований подтверждают, что на основании биохимических исследований сывороток крови животного (показатели АЛТ и мочевина) можно прогнозировать развитие транслокации E. coli во внутренние органы животных.

Были проведены следующие исследования: Здоровых кроликов породы «шиншилла» массой 2500-3500 грамм инфицировали культивируемыми и некультивируемыми бактериями P. aeruginosa и S. aureus. С 1 по 9 сутки у животных брали кровь и проводили биохимические исследования сывороток крови. Определяли наличие щелочной фосфатазы (ЩФ), АЛТ, мочевины, креатинина и общего биллирубина. Наличие транслокации E. coli у животных было подтверждено клиническими наблюдениями за животными, микробиологическими и гистологическими исследованиями. Результаты исследований представлены в таблице.

Предложенный способ прогнозирования транслокации E. coli из кишечника при некультивируемом типе инфекционного процесса в эксперименте на кроликах позволяет также осуществлять контроль за эффективностью лечения заболеваний вызванных культивируемыми и некультивируемыми бактериями. У больных кроликов при некультивируемом типе инфекционного процесса показатели щелочной фосфатазы в 3 раза выше, чем при инфекционном процессе, вызванным культивируемыми бактериями, а показатели АЛТ в 2 раза ниже. Эти показатели можно использовать при контроле эффективности проводимого лечения.

Предложенный способ легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат, в ранние сроки позволяет прогнозировать транслокацию E. coli во внутренние органы. Результаты выявления патогенетических механизмов транслокации кишечной палочки в организме кроликов могут быть использованы для экстраполяции полученных данных с целью совершенствования диагностики и лечения больных людей с инфекционными процессами, вызванные культивируемыми и некультивируемыми бактериями.

Способ прогнозирования транслокации E. coli из кишечника, вызванной некультивируемыми бактериями, в эксперименте, заключается в том, что проводят заражение кроликов с использованием взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, который вводят подкожно, затем на 1-2 и 4-5 сутки исследуют АЛТ и мочевину в сыворотке крови и при показателе АЛТ на 1-2 сутки, равном 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L, и показателе концентрации мочевины на 1-2 сутки, равном 4,6-5,6 u/L, а на 4-5 сутки - 1,3-1,9 u/L, прогнозируют развитие транслокации E. coli из кишечника во внутренние органы животного.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования гипертензии малого круга кровообращения. Для этого используют крыс-самцов линии Wistar в возрасте 10-12 месяцев, которым проводят трахеотомию по срединной линии ниже перешейка щитовидной железы.

Изобретение относится к медицине и предназначено для моделирования подострого токсического поражения печени формалином. Используют формалин (CH2O), который вводят крысам-самцам перорально, ежедневно, из расчета 0,1 мл на 100 г массы животного, в течение 14 дней.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для моделирования сенсоневральной тугоухости, вызванной акустическим воздействием широкополосного шума.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования отдаленных последствий воздействия вибрации на лабораторных животных. Для этого самцов белых беспородных крыс подвергают воздействию вибрации с уровнем вибрации на основной частоте 40 Гц по виброускорению 7,9 м/с2 непрерывно по 4 часа ежедневно по 5 дней в неделю в течение 60 дней.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для изучения механизмов метастазирования рака желудка и разработки новых методов лечения этой патологии.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к модели асептического некроза головки бедренной кости (АНГБК), которая может быть использована для испытания различных способов лечения и средств профилактики остеонекроза.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для изучения этиологии и патогенеза пародонтита, а также для определения эффективности новых методов лечения заболевания.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования повышенной устойчивости сердца крыс к ишемическим-реперфузионным повреждениям.

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и касается определения защитной активности коклюшных вакцин. Для этого осуществляют интраназальное введение коклюшных вакцин с последующим интраназальным заражением вирулентными бактериями В.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования травматического остеомиелита трубчатых костей. Для этого в асептических условиях создают полость в метаэпифизарной зоне кости лабораторного животного, находящегося под наркозом.

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для подавления роста полирезистентных штаммов Mycobacterium tuberculosis в эксперименте. Для этого осуществляют фотодинамическое воздействие. В качестве фотосенсибилизатора используют фотодитазин в концентрации 4*10-5 моль/л. Облучение проводят низкоинтенсивным лазером «Азор-2К-02» с длиной волны 660 нм, выходной мощностью 25 мВт, излучающим в постоянном режиме в течение 40 минут при плотности мощности 0,32 мВт/см2 и энергетической плотности 0,76 Дж/см2. Способ обеспечивает простое, надёжное и эффективное угнетение роста культуры микобактерий туберкулёза за счёт дополнительного ингибиторного эффекта и усиления бактериостатического эффекта лазерного облучения клеточной культуры, обработанной фотосенсибилизатором. 1 табл.

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к патологической физиологии, радиобиологии, хирургии, реаниматологии. Для моделирования комбинированного радиационно-механического поражения животных подвергают общему равномерному облучению в дозе, вызывающей развитие острой лучевой болезни средней степени тяжести. Затем наносят механическую травму - повреждение печени IV степени по международной классификации AAST с продолжающимся внутрибрюшным кровотечением и кровопотерей в объеме 40% от объема циркулирующей крови с развитием клинической картины травматического шока III степени, отягощенного симптомами первичной реакции на облучение. Остановку кровотечения осуществляют путем тампонады раны марлевыми салфетками. Завершают операцию внутривенным введением физиологического раствора в объеме, равном кровопотере. Спустя сутки выполняют повторную операцию, при которой тампоны удаляют, контролируют гемостаз, послойно зашивают рану. Способ обеспечивает возможность оценки синдрома взаимного отягощения комбинированных радиационных поражений и эффективности хирургического лечения с использованием тактики многоэтапного хирургического лечения.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для создания модели для изучения эффектов введения объем-образующих веществ у лабораторных животных. Производят нижнесрединный разрез, не вскрывая брюшины, оттягивают мочевой пузырь, выполняют укол прямой иглой 17-19 G на глубину 0,3-0,5 см латеральнее боковых стенок мочевого пузыря и вводят 2-3 мл объем-образующего вещества. Способ позволяет создать модель для изучения влияния на ткани объём-образующих веществ при их малоинвазивном введении. 2 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к экспериментальной хирургии и может быть применимо для экспериментального анатомо-хирургического обоснования оперативного доступа к тазобедренному суставу при чрезвертлужных переломах костей таза. Отмечают маркером три основные ориентира разреза, первым из которых является точка, которая находится на уровне передней верхней ости подвздошной кости и на 2 см кнутри от нее, второй ориентир находится в точке пересечения вертикальной линии, проходящей кзади от верхушки большого вертела в проекции межвертельного гребня, и горизонтальной линии, проходящей на три - пять см выше верхушки большого вертела, и третий ориентир находится на три см ниже основания большого вертела и в проекции переднего края бедренной кости. Маркером восстанавливают линию будущего разреза по указанным точкам. Выполняют по намеченной линии разрез кожи и подкожно-жировой клетчатки. Рану расширяют, осуществляют доступ. Способ позволяет экспериментально обосновать доступ, уменьшающий риск невропатии седалищного нерва, пареза малоберцовых мышц, гетеротопической оссификации. 37 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования спаечного процесса в брюшной полости. Для этого лабораторной крысе производят срединную лапаротомию. Затем проводят разминание в руке стенок тонкой кишки на протяжении 5 см на нескольких участках до появления темно-красного цвета серозной оболочки. Далее проводят десерозирование этих участков тупфером до появления небольшого кровотечения. Десерозируют также париетальную брюшину на участке размером 1,5×1,5 см. Способ позволяет получить модель спайкообразования в брюшной полости, по своим характеристикам максимально приближенную к клиническому течению спаечного процесса. 1 пр.
Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для моделирования миопатии у животных. Для этого крысе в течение двух месяцев ежедневно один раз в день перорально вводят водную суспензию препарата Симвастатин из расчета 12 мг/кг массы. Предлагаемый способ моделирования миопатии прост в исполнении, не инвазивен и обеспечивает адекватное воспроизведение лекарственной миопатии. 2 пр.

Изобретение относится к области экспериментальной хирургии и касается способа формирования экспериментальной модели костного дефекта. Сущность способа заключается в том, что на уровне диафиза трубчатой кости формируют ряд каналов поперечно оси кости на глубину одной из стенок кости, костномозгового канала. Далее выполняют цилиндрическую развертку в костном веществе боковых отделов противоположной стенки. После этого костные заменители в виде цилиндров заклинивают в сформированных каналах с их стабилизацией на глубину выполненной развертки боковых отделов противоположной остеоперфорации стенки. Использование способа позволяет уменьшить травматичность при проведении экспериментальных исследований. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования тяжелой хронической печеночной недостаточности. Способ включает подкожное введение крысе 60% масляного раствора CCl4. На первом этапе моделирования раствор вводят по следующей схеме: сначала по 0,5 мл на 100 г веса животного 2 раза в неделю в течение 2 –х недель с интервалом 3-4 дня, а затем по 0,3 мл на 100 г веса животного 2 раза в неделю с интервалом 3-4 дня также в течение 2-х недель. На втором этапе в течение последующих трех недель продолжают введение 60% масляного раствора CCl4 в дозе 0,5 мл на 100 г веса 1 раз в неделю. При этом на втором этапе за сутки до введения раствора внутрибрюшинно вводят 1 мл неполного адъюванта Фрейнда. Способ обеспечивает создание модели тяжелой печеночной недостаточности без спонтанной реверсии биохимических и гистологических признаков повреждения печени за счет стабильного уменьшения массы жизнеспособных клеток, образования печеночного аутоантигена и торможения на этом фоне процессов восстановительной регенерации в печени при индукции аутоиммунного воспаления. 13 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для моделирования кровообращения, а при тестировании взаимодействия фармацевтических препаратов с потоком крови. Устройство содержит имитатор сосудов в виде прозрачных трубок с установленными насосом и системой регистрации давления. Замкнутая сеть имитаторов сосудов обеспечивает возможность моделирования артериального и венозного кровотока и выполнена в виде прозрачных силиконовых трубок с изменением их диаметров по длине, соответствующих диаметрам кровеносных сосудов. В трубки с помощью тройников вмонтированы датчики давления и перистальтический насос, имеющий возможность регулирования мощности, компенсации потерь давления и обеспечения пульсаций моделирующей кровь жидкости. В качестве имитатора крови используется раствор сывороточного альбумина человека с концентрацией 100÷300 мкМ в фосфатном буфере. Технический результат состоит в приближении модели к реальным условиям за счет учета основной сети сосудов и физико-химических показателей крови. 3 ил.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для моделирования аваскулярного некроза головки бедренной кости. Для этого лабораторному животному выполняют разрез кожных покровов в проекции заднего края большого вертела и разводят мышцы до тазобедренного сустава. После рассечения капсулы и круглой связки вывихивают головку бедренной кости кзади. Со стороны шейки на границе надкостницы головки бедренной кости вводят спирт с последующим закрытием воском места введения спирта. Вправляют тазобедренный сустав и послойно ушивают рану. Способ сокращает время оперативного вмешательства, исключает возможность кровоснабжения оперированного сегмента при сохранении мышечно-связочного аппарата.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии и может быть использовано для прогнозирования транслокации E. coli из кишечника, вызванной некультивируемыми бактериями. Способ включает заражение кроликов с использованием взвеси некультивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрациях 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия, который вводят подкожно. Затем на 1-2 и 4-5 сутки исследуют АЛТ и мочевину в сыворотке крови. При показателе АЛТ на 1-2 сутки, равном 53,0-63,0 uL, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 uL, и показателе концентрации мочевины на 1-2 сутки, равном 4,6-5,6 uL, а на 4-5 сутки - 1,3-1,9 uL, прогнозируют развитие транслокации E. coli из кишечника во внутренние органы животного. Полученные результаты позволяют экстраполировать полученные данные для людей с целью совершенствования диагностики и лечения больных пациентов при инфекционных процессах, вызванных некультивируемыми бактериями. 2 пр., 1 табл.

Наверх