Способ дифференциальной диагностики гидроцефалий у новорожденных с экстремально низкой массой тела

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет на субклеточном уровне определять этиологический фактор гидроцефалии у погибших новорожденных с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ). Способ заключается в том, что у погибших новорожденных с ЭНМТ (от 500 до 1000 г) осуществляют иммуногистохимическое исследование вентрикулярной герминативной зоны, проекции цитоархитектонического поля N6 определяют индекс экспрессии (ИЭ) ММР-9 в глиобластах, дополнительно к этому рассчитывают индекс экспрессии рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса. При нулевых значениях обоих показателей диагностируют наследственную гидроцефалию, при значении ИЭ ММР-9, равном 0,25 усл. ед. или более, в сочетании с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную гидроцефалию, при значении ИЭ ММР-9, равном 0,17 усл. ед. или менее, в сочетании с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более - постгеморрагическую гидроцефалию. Предлагаемый способ высокоинформативен, выполняется при помощи иммуногистохимического метода и на субклеточном уровне позволяет дифференцировать наследственную (связанную с аномалиями развития Сильвиева водопровода), поствоспалительную и постгеморрагическую гидроцефалии у погибших новорожденных с ЭНМТ. Является морфологическим методом осуществления объективного контроля за качеством клинической диагностики, лечения гидроцефалии и оформления заключительного клинического диагноза. Позволяет оптимизировать морфологическую диагностику гидроцефалий в зависимости от этиологического фактора и существенно повышает качество оформления патологоанатомического диагноза и эпикриза. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет иммуногистохимическим методом на субклеточном уровне у погибших новорожденных с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ) дифференцировать гидроцефалии: наследственную (сопряженную с аномалиями развития Сильвиева водопровода), поствоспалительную и постгеморрагическую.

Актуальность

Гидроцефалия (ГЦ), формирующаяся в перинатальном периоде, как правило, в дальнейшем сопровождается нарушениями со стороны высших психических и двигательных функций различной степени выраженности, становится причиной инвалидности детей, а потому, диагностированная при скрининговом ультразвуковом исследовании беременных, является показанием к прерыванию беременности в допустимые сроки [1, 2]. По литературным данным [3], ГЦ в популяции встречается с частотой от 0,2 до 4 случаев на 1000 новорожденных детей.

Известно, что комплексная патогенетическая терапия пациента существенно повышает уровень адаптационных возможностей организма [4]. А для осуществления этиологически и патогенетически направленного лечения необходимо располагать сведениями об особенностях морфологического субстрата гидроцефалий различного генеза.

Как свидетельствуют результаты научных исследований, доминирующими этиологическими факторами ГЦ являются хромосомные и генетические аномалии, персистирующие в ЦНС вирусные инфекции и внутрижелудочковые кровоизлияния [5]. В 43% случаев этиологический фактор врожденной гидроцефалии остается неуточненным [3].

Основной задачей врача-патологоанатома, производящего аутопсию погибшего новорожденного с ГЦ, является не только подтверждение правомочности клинической диагностики и врачебной тактики, но и определение причины заболевания, для чего необходим набор морфологических критериев дифференциальной диагностики ГЦ в зависимости от этиологического фактора, которого в настоящее время не существует.

В патологоанатомической практике известен «Способ диагностики тяжелой степени врожденной гидроцефалии», осуществляемый с помощью морфометрии ядер нейронов 3-го слоя поля N40. Согласно методике, при объеме ядер не более 270 мкм3 диагностируют тяжелую степень гидроцефалии (Патент №2318446, Российская Федерация. Способ диагностики тяжелой степени врожденной гидроцефалии / Воробьев A.M., Старых B.C., Зинчук С.Ф., Воробьев М.А. - Изобретения. Полезные модели. - 2008. - №7).

Основным недостатком способа является невозможность выявить этиологию ГЦ и выполнить сличение заключительного клинического и патологоанатомического диагнозов по основному заболеванию с учетом этиологического принципа, когда ГЦ является непосредственной причиной смерти пациента.

Существует способ диагностики гидроцефалии методом компьютерно-томографической морфометрии головного мозга, согласно которому объему ликворных пространств от 3,8% до 10% краниальной полости соответствует легкая степень гидроцефалии, от 10,1% до 30% - средняя, более 30% - тяжелая (Патент №2301625, Российская Федерация. Способ диагностики гидроцефалии головного мозга / Ларькин В.И., Ларькин И.И., Ларькин Д.В., Атрошенко А.В. // Изобретения. Полезные модели. - 2007. - №18).

Недостатки способа:

1) дорогостоящий;

2) не применим в патоморфологии, поскольку диагностические КТ-критерии гидроцефалии не сопоставимы с морфологическими;

3) не позволяет определять этиологический фактор гидроцефалии.

Существует способ диагностики прогрессирующей и непрогрессирующей гидроцефалии (Патент №2367351, Российская Федерация. Способ диагностики прогрессирующей и непрогрессирующей гидроцефалии у детей первого года жизни / Самсонова Т.В., Гоголев А.Ю. Изобретения. Полезные модели. - 2009. - №26), основанный на ультразвуковой допплерографии, позволяющий при значении индекса резистентности в передней мозговой артерии от 0,7 или более и средней скорости кровотока в вене Галена от 12 см/с или более диагностировать прогрессирующую гидроцефалию, при значениях ниже указанных - непрогрессирующую форму.

Недостатки способа:

1) не применим в патоморфологии, поскольку базируется на определении скорости кровотока;

2) не позволяет верифицировать этиологический фактор гидроцефалии.

Разработан способ дифференциальной диагностики вентрикуломегалии и гидроцефалии у новорожденных с экстремально низкой массой тела (Патент №2422805, Российская Федерация. Способ дифференциальной диагностики вентрикуломегалии и гидроцефалии у плодов и новорожденных 22-27 недель гестации / Проценко Е.В., Васильева М.Е., Перетятко Л.П., Кулида Л.В. - Изобретения. Полезные модели. - 2011. - №18, Ч. III. - С. 919), позволяющий у погибших новорожденных с экстремально низкой массой тела отличать гидроцефалию (по соотношению ширины герминативного матрикса к ширине неокортекса в области головки хвостатого ядра, равном 2:1) от вентрикуломегалии (при соотношении идентичных параметров, равном 1:2).

Основным недостатком способа является невозможность определить этиологический фактор гидроцефалии и, следовательно, оценивать качество проведенных при жизни профилактических и лечебных мероприятий.

Прототипом предлагаемого способа послужил способ дифференциальной диагностики вентрикуломегалии и гидроцефалии у погибших новорожденных с ЭНМТ (Патент №2432574, Российская Федерация. Способ дифференциальной диагностики вентрикуломегалии и гидроцефалии у плодов и новорожденных / Проценко Е.В., Васильева М.Е., Перетятко Л.П., Кулида Л.В. - Изобретения. Полезные модели. - 2011. - №18, Ч. II. - С. 580), позволяющий с помощью иммуногистохимического исследования по уровню экспрессии глиального белка S-100 отличать вентрикуломегалию (при окрашивании 30% или менее клеток вентрикулярной герминативной зоны в области задних рогов) от гидроцефалии (при окрашивании 50% или более идентичных клеток).

Основным недостатком способа является невозможность установить истинную причину гидроцефалии и, следовательно, качественно завершить патологоанатомическое исследование.

Способов морфологической дифференциальной диагностики различных этиологических вариантов гидроцефалий в доступных литературных источниках не выявлено. Указанные недостатки перечисленных способов предлагается устранить заявляемым способом.

Заявляемым техническим результатом является разработка способа морфологической дифференциальной диагностики гидроцефалии различной этиологии (наследственной, постгеморрагической и поствоспалительной) у погибших новорожденных детей, родившихся с ЭНМТ (от 500 до 1000 г), что позволит объективизировать морфологическую дифференциальную диагностику указанных вариантов внутренней водянки головного мозга и повысить качество патологоанатомического диагноза.

Технический результат достигается путем иммуногистохимического исследования паренхимы головного мозга в проекции цитоархитектонического поля N6. Определяют индекс экспрессии (ИЭ) ММР-9 в глиобластах вентрикулярной герминативной зоны и индекс экспрессии рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса. При нулевых значениях ИЭ ММП-9 и ИЭ рилина в соответствующих клетках паренхимы мозга диагностируют наследственную гидроцефалию; при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,25 усл. ед. или более, с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную ГЦ, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,17 усл. ед. или менее, с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более - постгеморрагическую ГЦ.

Отличительные признаки способа: в проекции цитоархитектонического поля N6 определяют индекс экспрессии (ИЭ) ММР-9 в глиобластах и индекс экспрессии рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса и при нулевых значениях обоих показателей диагностируют наследственную ГЦ, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,25 усл. ед. или более, с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную ГЦ, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,17 усл. ед. или менее, с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более, - постгеморрагическую ГЦ.

Новизна способа

Впервые предложен способ морфологической дифференциальной диагностики гидроцефалий различной этиологии (сопряженной с аномалиями развития Сильвиева водопровода, или наследственной, поствоспалительной и постгеморрагической) у погибших новорожденных с ЭНМТ, основанный на объективной оценке результатов иммуногистохимической реакции. В качестве антигенов используют матриксную металлопротеиназу-9 (ММР-9), экспрессию которой оценивают в глиобластах вентрикулярной герминативной зоны (ВГЗ), и рилин, экспрессирующийся в нейронах Кахаля-Ретциуса цитоархитектонического поля N6, расположенного в передней трети прецентральной извилины неокортекса.

Из литературных источников известно, что ММР-9 является ферментом, непосредственно участвующим в ремоделировании тканей. Локальная активность ММР-9 в основном изучена в опухолях различной локализации (желудок, мочевой пузырь, яичники, матка и др.) с целью диагностики злокачественности новообразований [6]. Рилин рассматривается как фактор нейрональной миграции, определяющий окончательное расположение нейронов в неокортексе [7].

На основании собственных исследований установлено, что морфологический субстрат гидроцефалий у детей с ЭНМТ проявляется не только общеизвестными признаками, такими как дилятация вентрикулярной системы и атрофия вещества головного мозга от сдавления избыточным количеством ликвора [8], но и определенными структурными особенностями ВГЗ и неокортекса, взаимосвязанными с этиологическим фактором заболевания [9, 10, 11, 12]; доказана взаимосвязь особенностей экспрессии рилина с этиологией ГЦ [13].

На основании вышеизложенного возникло предположение о том, что гестационные структурные преобразования вентрикулярной герминативной зоны, возможно, осуществляются при участии матриксной металлопротеиназы-9, причем каждому из рассматриваемых этиологических факторов ГЦ соответствует определенный характер экспрессии ММР-9.

Следует учитывать, что в дифференциальной диагностике ГЦ различной этиологии использование только патоморфологических параметров (без учета иммуногистохимических) недостаточно корректно в связи с похожими, хоть и неидентичными, изменениями в ВГЗ при поствоспалительной и постгеморрагической гидроцефалиях (замедление редукции), а также в неокортексе при поствоспалительной ГЦ и вентрикуломегалии (замедление дифференцировки коры поля N6), что может смутить неопытного нейроморфолога. Точно так же не корректен расчет только одного иммуногистохимического показателя, например, ИЭ ММР-9 либо ИЭ рилина, поскольку компенсаторное увеличение экспрессии ММР-9 в глиобластах при поствоспалительной ГЦ или отсутствие уменьшения экспрессии рилина в кортикальных нейронах при постгеморрагической ГЦ без дополнительных критериев могут быть расценены как отсутствие ГЦ.

В связи с вышеизложенным для объективизации морфологической дифференциальной диагностики гидроцефалий разной этиологии у погибших новорожденных с ЭНМТ предлагаем использовать расчет одновременно двух иммуногистохимических параметров - ИЭ ММР-9 в глиобластах ВГЗ и ИЭ рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса.

Способ осуществляется следующим образом

Головной мозг целиком фиксируют в 10% нейтральном формалине в течение 2-3 недель. Взятие материала для гистологического исследования осуществляют на горизонтальном срезе больших полушарий на уровне спайки свода в проекции поля N6 (передняя треть прецентральной извилины). Кусочки ткани мозга размерами 0,5×0,5 см, включающие ВГЗ и неокортекс, после обычной проводки заливают в парафин. Для проведения иммуногистохимического исследования используют парафиновые срезы толщиной 5 мкм, в качестве первичных антител - мышиные моноклональные антитела к ММР-9 в рабочем разведении 1:50 («Dako», Дания) и мышиные моноклональные антитела к рилину (рабочее разведение 1:250, «Dako», Дания). Для исключения возможности получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов каждое иммуногистохимическое исследование сопровождают постановкой положительного и отрицательного контролей в соответствии с инструкцией.

Экспрессию ММР-9 и рилина в структурах мозга оценивают при помощи светового микроскопа «Micros MS-300» (Австрия) полуколичественным способом, оценивая результат в баллах: 0 - отсутствие экспрессии, 1 - слабовыраженное окрашивание, 2 - умеренное окрашивание, 3 - максимальное окрашивание. Иммуногистохимическую реакцию оценивают в 10 полях зрения микроскопа при увеличении ×400 в 100 клетках каждого препарата, а индекс экспрессии изучаемых фермента (ММР-9) и белка (рилин) вычисляют по формуле [14]:

где ИЭ - это индекс экспрессии;

i - показатель интенсивности окрашивания клеток в баллах;

P(i) - процент позитивных клеток, окрашенных с разной степенью интенсивности;

результат обозначается условными единицами (усл. ед.).

При нулевых значениях обоих показателей диагностируют наследственную ГЦ, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,25 усл. ед. или более, с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную ГЦ, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,17 усл. ед. или менее, с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более, - постгеморрагическую ГЦ.

Сущность способа поясним следующими примерами.

Пример 1.

Беременность (V) женщины И., 37 лет, завершилась самопроизвольными преждевременными родами на акушерском сроке 22-23 нед. в результате декомпенсированной хронической плацентарной недостаточности. Новорожденный ребенок мужского пола (масса тела при рождении 567 г, длина 27,5 см) прожил 21 сутки 18 часов.

Заключительный клинический диагноз

Гидроцефалия, постгеморрагическая, на фоне двустороннего внутрижелудочкового кровоизлияния III степени в постнатальном периоде (по данным нейросонографии).

Результат морфологической диагностики

Иммуногистохимически в глиобластах ВГЗ и нейронах Кахаля-Ретциуса, соответственно месту экспрессии, идентифицированы ММР-9 и рилин, рассчитаны их индексы экспрессии (ИЭ ММР-9=0,15 усл. ед., ИЭ рилина = 2,13 усл. ед.). Полученные параметры характерны для постгеморрагической гидроцефалии.

На аутопсии в головном мозге обнаружены следующие изменения: внутрижелудочковые кровоизлияния (ВЖК) III степени в области передних рогов и тел боковых желудочков (БЖ), дилятация всех отделов боковых желудочков (передние, задние, нижние рога и тела) до 2-2,5 см, истончение мозговой паренхимы до 0,5 см. Герминативный матрикс широкий, представлен гипер- и эухромными клетками. Сосуды типа капилляров расположены в толще герминативного матрикса. В неокортексе дифференцируются I (с разделением на подслои), II и III слои.

Таким образом, расчет ИЭ ММР-9 в глиобластах ВГЗ и рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса позволил диагностировать постгеморрагическую гидроцефалию. Результаты иммуногистохимической диагностики подтверждены морфологическими критериями постгеморрагической ГЦ-дилятацией полостей БЖ до 2,5 см на фоне ВЖК III степени, отсутствием признаков редукции герминативного матрикса, соответствием гирификации и дифференцировки неокортекса гестационному возрасту погибшего ребенка.

При сличении клинического диагноза, оформленного с учетом результатов нейросонографии (постгеморрагическая гидроцефалия), и патологоанатомического диагноза (постгеморрагическая гидроцефалия) констатировано совпадение.

Пример 2.

Беременность (IV) женщины С., 30 лет, завершилась самопроизвольными преждевременными родами в 26 недель гестации вследствие острой плацентарной недостаточности, обусловленной преждевременной отслойкой нормально расположенной плаценты. Новорожденный ребенок мужского пола (масса тела при рождении - 800 г, длина - 29 см) погиб на 4 сутки жизни.

Заключительный клинический диагноз.

Гидроцефалия, постгеморрагическая, на фоне двустороннего внутрижелудочкового кровоизлияния III степени (по данным нейросонографии).

При посмертном иммуногистохимическом исследовании вещества головного мозга в глиобластах ВГЗ идентифицирован фермент - ММР-9, в нейронах Кахаля-Ретциуса - рилин. С учетом вышеобозначенной формулы рассчитаны индексы экспрессии ММР-9 (0 усл. ед.) и рилина (0 усл. ед.) в соответствующих клетках, что соответствует Х-сцепленной гидроцефалии, сопряженной с аномалией развития Сильвиева водопровода.

На аутопсии обнаружена микрополигирия, дилятация всех отделов боковых желудочков (передние, задние, нижние рога и центральные отделы) до 2,5-3 см, истончение вещества головного мозга до 0,5 см, двусторонние мелко- и среднеочаговые субэпендимальные кровоизлияния в области передних рогов и центральных отделов боковых желудочков, при наполнении вентрикулярной системы раствором желатина, маркированным черной тушью, - расщепление Сильвиева водопровода на два узкие канала, один из которых заканчивается слепо. ВГЗ представлена гипер- и эухромными клетками, капилляры локализуются преимущественно в субэпендимальной зоне. В неокортексе отсутствует дифференцировка цитоархитектонических слоев.

Таким образом, по значениям ИЭ ММР-9 в глиобластах ВГЗ и ИЭ рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса диагностирована наследственная гидроцефалия, сопряженная с аномалией развития Сильвиева водопровода. Результаты иммуногистохимической диагностики подтверждены морфологическими признаками указанной патологии - выраженной дилятацией полостей БЖ головного мозга на фоне аномалии развития водопровода мозга, отсутствием редукции ВГЗ и дифференцировки цитоархитектонических слоев в неокортексе.

При сличении заключительного клинического диагноза, оформленного на основании результатов ультразвукового исследования новорожденного (основное заболевание - постгеморрагическая гидроцефалия), и патологоанатомического диагноза (основное заболевание - гидроцефалия, сопряженная с аномалией развития Сильвиева водопровода) констатировано расхождение по этиологическому принципу.

Пример 3.

Новорожденная девочка женщины М. (23 года) от первой беременности, осложнившейся внутриутробной инфекцией и многоводием, первых преждевременных родов в 27 недель гестации. Масса тела при рождении 980 г. Продолжительность жизни: 1 месяц и 2 дня.

Заключительный клинический диагноз

Гидроцефалия постгеморрагическая на фоне двустороннего внутрижелудочкового кровоизлияния III степени в постнатальном периоде (по данным нейросонографии).

Результат морфологической диагностики

Иммуногистохимически в глиобластах ВГЗ и нейронах Кахаля-Ретциуса, соответственно месту экспрессии, идентифицированы ММР-9 и рилин, рассчитаны их индексы экспрессии (ИЭ ММР-9=0,25 усл. ед., ИЭ рилина = 1,8 усл. ед.), что соответствует поствоспалительной гидроцефалии.

На аутопсии в головном мозге обнаружена выраженная дилятация всех камер БЖ, III и IV желудочков. Эпендима, выстилающая полости боковых желудочков (БЖ), тусклая, утолщенная, с симметричными мелкоочаговыми кровоизлияниями. В просвете БЖ - мутный ликвор. ВГЗ представлена эу- и гиперхромными клетками в равном соотношении. Сосуды типа капилляров в основном расположены субэпендимально. В неокортексе дифференцированы молекулярный, или I (без деления на подслои), и наружный зернистый (II) слои.

Таким образом, по уровню экспрессии ММР-9 в глиобластах ВГЗ (ИЭ=0,25 усл. ед.) и рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса (ИЭ=1,8 усл. ед.) диагностирована поствоспалительная гидроцефалия. Результаты иммуногистохимической диагностики подтверждены морфологическими признаками указанной патологии - выраженной дилятацией полостей БЖ головного мозга при отсутствии ВЖК III степени, морфологическими признаками замедления редукции ВГЗ и дифференцировки слоев неокортекса (III и двух подслоев молекулярного слоя) на фоне атрофии мозговой паренхимы, включая кору.

При сличении заключительного клинического диагноза, оформленного с учетом результатов ультразвукового исследования (постгеморрагическая гидроцефалия), и патологоанатомического (врожденная гидроцефалия, поствоспалительная) констатировано расхождение основного заболевания по нозологическому принципу. Преимущества способа

1. Является объективным методом морфологической дифференциальной диагностики гидроцефалий, обусловленных различными этиологическими факторами.

2. Повышает качество оформления патологоанатомического диагноза и эпикриза.

3. Заявленный способ высокоинформативен.

ЛИТЕРАТУРА

1. Воробьёв А.М. Клинико-морфологическая оценка прогноза врожденной гидроцефалии // Вестник РГМУ. - 2007. - №4 (57). - С. 23-26.

2. Барашнев Ю.И. Перинатальная неврология. - М., 2005. - 672 с.

3. Congenital hydrocephalus-prevalence, prenatal diagnosis and outcome of pregnancy in four European regions / E. Garne [et al.] // Eur J Paediatr Neurol. - 2010. - Vol. 14. - P. 150.

4. Gretiz D., Gretiz T. A new view on the CSF circulation with the potential for pharmacological tretment of childhood hydrocephalus // Acta Paediatr. - 2004. - P.86

5. Богадельников И.В., Здырко Ε.В., Крюгер Е.А. Гидроцефалия у детей // Здоровье ребенка. - 2011. - №5. - С. 86-87.

6. Loskwood C.G., Oner С., Uz Y.H. Matrix metalloproteinase 9 (MMP 9) expression in preeclamptic decidua and MMP 9 induction by tumor necrosis factor alpha and interleukin 1 beta in human first trimester desidual cells // Biol. Reprod. - 2008. - Vol. 78 (6). - P. 1064-1072.

7. Regional and cellular patterns of reelin mRNA expression in the forebrain of the developing and adult mouse / S. Alcantara [et al.] // J. Neurosci. -1998. - Vol. 18, N 19. - P. 7779-7799.

8. The genesis of low pressure hydrocephalus / P.T. Akins [et al.] // Neurocrit Care. - 2011. - Vol. 15. - P. 461.

9. Проценко Ε.В., Губанова А.Н., Перетятко Л.П. Структурные особенности больших полушарий головного мозга плодов и новорожденных в зависимости от генеза гидроцефалии // Современные проблемы материнства и детства сб. науч. тр., посвящ. 25-летию со дня основания НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова. - Иваново: ОАО «Изд-во «Иваново», 2005. - С. 406-410.

10. Проценко Е.В., Губанова А.Н., Перетятко Л.П. Морфология неокортекса плодов и новорожденных с ЭНМТ при дилятации тел и задних рогов боковых желудочков головного мозга // Архив патологии. - 2009. - Т. 71, №3. - С. 12-15.

11. Проценко Е.В., Васильева М.Е., Кулида Л.В. Патоморфология гидроцефалии у плодов и новорожденных с экстремально низкой массой тела при задержке развития тимуса // Российский иммунологический журнал. - 2012. - Т. 6 (14), №2 (1). - С. 142-143.

12. Структурные изменения герминативного матрикса у плодов и новорожденных с вентрикуломегалией и врожденной гидроцефалией / Е.В. Проценко [и др.] // Архив патологии. - 2014. - Т. 76, №3. - С. 9-12.

13. Проценко Е.В., Васильева М.Е., Перетятко Л.П. Особенности экспрессии рилина в головном мозге плодов и новорожденных с внутренней гидроцефалией // Архив патологии. - 2016. - Т. 78 (№1). - С. 3-7.

14. Tavassoli F.A., Schnitt S.J. Pathologi of the Breast // New York: Prentice Hall. - 1992. - 669 p.

Способ дифференциальной диагностики гидроцефалий у погибших новорожденных с экстремально низкой массой тела путем иммуногистохимического исследования вентрикулярной герминативной зоны головного мозга, отличающийся тем, что в проекции цитоархитектонического поля N6 определяют индекс экспрессии (ИЭ) металлопротеиназы-9 (ММР-9) в глиобластах и индекс экспрессии рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса, и при нулевых значениях обоих показателей диагностируют наследственную гидроцефалию, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,25 усл. ед. или более, с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную гидроцефалию, при сочетании ИЭ ММР-9, равного 0,17 усл. ед. или менее, с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более, - постгеморрагическую гидроцефалию.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к гигиене труда и медицине и раскрывает способ оценки профессионального риска здоровью, связанного с развитием артериальной гипертензии (АГ) у работников, занятых на выполнении подземных горных работ в условиях труда с производственным шумом при уровне выше допустимого.

Изобретение относится к области медицины, в частности к пульмонологии и аллергологии, и предназначено для прогнозирования дыхательной недостаточности у больных бронхиальной астмой.

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии и касается способа определения кофеина в биологическом материале. Способ заключается в том, что биологический материал обрабатывают ацетоном, жидкое извлечение отделяют фильтрованием, упаривают в токе воздуха при комнатной температуре, водный остаток разбавляют водой, насыщают сульфатом аммония, доводят pH среды до 4,2-4,5, однократно экстрагируют смесью органических растворителей этилацетата и хлороформа, взятых в объемном отношении 2:8, органический экстракт отделяют, хроматографируют и проводят определение физико-химическим методом, вычисляя количественное содержание анализируемого вещества, и отличается тем, что обработку биологического объекта ацетоном осуществляют неоднократно дважды по 30 минут, экстрагируют в условиях, когда объем водной фазы равен объему смеси органических растворителей, перед хроматографированием растворители испаряют из экстракта до получения сухого остатка, остаток растворяют в смеси растворителей пропанол-2 - хлороформ, взятых в соотношении 5:5 по объему, хроматографируют в макроколонке силикагеля L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы пропанол-2 - хлороформ в соотношении 5:5 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°С, затем в токе азота до полного удаления растворителей, остаток растворяют в дихлорметане, в качестве физико-химического метода используют хромато-масс-спектрометрию, определение проводят в капиллярной колонке длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой 5% фенил - метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,7 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 80°С, данная температура выдерживается в течение 1 минуты, в дальнейшем температура программируется вначале от 80°С до 200°С со скоростью 40°С в минуту, затем от 200°С до 300°С со скоростью 12,5°С в минуту, температура инжектора составляет 200°С, температура интерфейса детектора - 300°С, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току, по результатам измерений на хромато-масс-спектрометре строят график зависимости площади пика от концентрации определяемого вещества, методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение градуировочного графика, которое в данном случае имеет вид: S=5238700⋅С+43091, где S - площадь хроматографического пика, а С - концентрация определяемого вещества в хроматографируемой пробе, мкг, и вычисляют количество кофеина по площади хроматографического пика.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно стоматологии. Предлагаемый способ получения искусственного зачатка зуба in vitro включает этапы: a) получения выделенных мезенхимальных клеток пульпы зуба; b) культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в монослое на поверхностях для адгезивных клеток; и c) культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в неадгезивных условиях в культуральных сосудах с культуральной поверхностью, обладающей ультранизким прикреплением клеток, для формирования клеточного агрегата, представляющего собой искусственный зачаток зуба.

Изобретение относится к медицине и раскрывает способ оценки риска развития онкозаболеваний в поколениях жителей регионов радиационного загрязнения. Способ характеризуется тем, что отбирают периферическую кровь пациентов, выделяют РНК, в образцах которых проводят одновременное количественное определение уровня экспрессии генов ST13, IER3, BRCA1, LRDD, MRAS генной сети белка р53, далее сопоставляют выявленные маркеры у матерей и их потомства и при наличии по отношению к группе пациентов, не подвергавшихся воздействию радиационного фактора, понижения или повышения уровня экспрессии указанных генов у матерей с клиническими проявлениями злокачественных новообразований, и однонаправленном изменении у их потомства уровня экспрессии указанных генов оценивают у детей высокий риск развития онкозаболеваний.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается диагностики гипоксии плода в модели общей пренатальной гипоксической гипоксии. Моделируют общую пренатальную гипоксическую гипоксию у беременных крольчих породы Шиншилла на сроке 27-28 суток.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для лечения вагинальной атрофии у женщин в постменопаузе с учетом состояние биоценоза влагалища.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, и предназначено для определения доли плодовой ДНК в плазме крови беременной женщины с помощью методов высокопроизводительного секвенирования.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для ех vivo определения чувствительности клеток пациента к лекарственным препаратам.

Группа изобретений относится к области косметологии и раскрывает систему получения индивидуализированной композиции для обработки волос, а также способ приготовления окрашивающей композиции с использованием вышеуказанной системы.
Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине. Для установления непосредственных причин смерти. Для определения непосредственных причин терминального исхода при отравлениях этанолом на фоне алкогольной болезни печени (АБП) оценивают комплекс патоморфологических, судебно-химических и гистохимических эквивалентов и их компонентов в баллах. Полученные баллы суммируют, и при сумме баллов, равной 4-6, определяют мозговой тип умирания с развитием паралича сердечно-сосудистого и дыхательного центров; при сумме баллов, равной 7-9, - печеночный тип, обуславливающий острую печеночную недостаточность, отек головного мозга; при сумме баллов, равной 10-12, - сердечный, при котором причиной смерти является прогрессирование цирротической кардиомиопатии (ЦКМП) с нарастанием сердечной недостаточности по левожелудочковому типу; при сумме баллов, равной не менее 13, - сердечный, в основе которого лежит алкогольная кардиомиопатия (АКМП), влекущая за собой внезапную сердечную смерть или острую недостаточность кровообращения. Способ повышает точность определения истинной причины смерти и достоверность информации, отражаемой в статистических документах. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии, и предназначено для оценки прогноза кариеса. Из венозной крови выделяют ДНК. Для определения точечных мутаций гена KLK4 используют метод ПЦР. В случае присутствия аллеля А в мутационных точках G2664153A и G2142A гена KLK4 прогнозируют развитие кариеса. Изобретение позволяет прогнозировать кариозный процесс при отсутствии клинических признаков заболевания. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики выраженного фиброза печени у больных хроническим гепатитом C (ХГС) естественного течения с 1 генотипом, отличающийся тем, что в нейтрофилах и моноцитах периферической крови определяют активность цитохимических ферментов - лактатдегидрогеназы (ЛДГ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) и никотинамидадениндинуклеотид-диафоразы (НАД-диафоразы) и при снижении их активности в нейтрофилах и моноцитах более чем в три раза по сравнению с нормой диагностируют выраженный фиброз печени. Способ позволяет выявлять фиброз печени при ХГС у пациентов, не получавших ранее лечение, с возможностью своевременного начала противовирусной терапии. 6 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики выраженного фиброза печени у больных хроническим гепатитом C (ХГС) естественного течения с 1 генотипом, отличающийся тем, что в нейтрофилах и моноцитах периферической крови определяют активность цитохимических ферментов - лактатдегидрогеназы (ЛДГ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) и никотинамидадениндинуклеотид-диафоразы (НАД-диафоразы) и при снижении их активности в нейтрофилах и моноцитах более чем в три раза по сравнению с нормой диагностируют выраженный фиброз печени. Способ позволяет выявлять фиброз печени при ХГС у пациентов, не получавших ранее лечение, с возможностью своевременного начала противовирусной терапии. 6 табл., 2 пр.

Изобретения касаются пептида, синтезированного химическим способом или способом генной инженерии, композиции, включающей такой пептид, ДНК, кодирующей полипептид, вектора, включающего такую ДНК, клетки-хозяина для экспрессии представленного пептида, набора для скрининга пептида, способного подавлять инфекцию респираторного вируса, и способа скрининга пептида, способного подавлять инфекцию респираторного вируса. Представленный пептид содержит 5 или более основных аминокислот, из которых 2 или более основных аминокислот расположены в N-терминальной области или в С-терминальной области, причем N-терминальная область содержит последовательность не более 10 аминокислот, считая от N-терминальной аминокислоты пептида, а С-терминальная область содержит последовательность не более 10 аминокислот, считая от С-терминальной аминокислоты пептида, при этом пептид состоит из последовательности аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичной SEQ ID NO: 10. Изобретения могут применяться для блокирования в клетках-мишенях инфекций таких респираторных вирусов, как вирусы гриппа или коронавирусы, а также для профилактики и лечения указанных инфекций.10 н. и 13 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, к области лабораторной диагностики и непосредственно к диагностике эндогенной интоксикации при реперфузионном синдроме после восстановления артериального кровообращения. Сущность способа: при проведении диагностики эндогенной интоксикации при реперфузионном синдроме до и после восстановления артериального кровообращения рассчитывают коэффициент КАСС/ОА, отражающий удельный вес азотсодержащих соединений (АСС) в составе остаточного азота (OA), по формуле ,где OA - остаточный азот, М - мочевина, Кр - креатинин, МК - мочевая кислота. При увеличении удельного веса азотсодержащих соединений по отношению к остаточному азоту после восстановления артериального кровотока по сравнению с показателями до восстановления диагностируют развитие эндогенной интоксикации. Способ позволяет провести диагностику эндогенной интоксикации при реперфузионном синдроме после восстановления артериального кровообращения. 1 табл.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки безопасности биомедицинского клеточного продукта (БМКП). Устанавливаются контрольные количественные величины, характеризующие уровень теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом. Сопоставляются уровни теломеразной активности в контролях. Проводится оценка безопасности испытуемых клеток, используемых для получения БМКП или клеток в составе БМКП. Изобретение обеспечивает повышение точности за счет использования экспериментально установленных контрольных количественных параметров - уровня теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки безопасности биомедицинского клеточного продукта (БМКП). Устанавливаются контрольные количественные величины, характеризующие уровень теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом. Сопоставляются уровни теломеразной активности в контролях. Проводится оценка безопасности испытуемых клеток, используемых для получения БМКП или клеток в составе БМКП. Изобретение обеспечивает повышение точности за счет использования экспериментально установленных контрольных количественных параметров - уровня теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Для оценки риска рака желудочно-кишечного тракта создают в базе данных множество классификаторов в соответствии с множеством соответствующих результатов проведенных ранее анализов крови у множества подвергнутых анализу индивидуумов. Проводят оценку с использованием аппаратного процессора риска рака желудочно-кишечного тракта у указанного целевого индивидуума с помощью указанной комбинации, по меньшей мере, 10 различных характеристик анализа крови с использованием указанного, по меньшей мере, одного классификатора. Проведенные ранее и текущие анализы крови включают результаты, по меньшей мере, одного из следующих анализов крови: анализ на эритроциты (RBC), гемоглобин (HGB) и гематокрит (НСТ), и, по меньшей мере, один результат из следующих анализов крови: анализ на среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) и среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците (МСНС). Количественный показатель риска рака желудочно-кишечного тракта выводят на клиентский терминал. Группа изобретений позволяет с высокой точностью автоматически рассчитать количественный показатель риска рака желудочно-кишечного тракта на основании набора результатов анализов крови. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 13 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и сердечно-сосудистой хирургии. Предложен способ прогнозирования риска развития синдрома полиорганной недостаточности у пациентов после коронарного шунтирования. Проводят анализ клинико-анамнестических показателей и молекулярно-генетическое тестирование с определением полиморфизмов генов TLR6 и TREM-1. Каждому прогностическому критерию присваивают оценочный балл. Минимальный риск прогнозируют при сумме баллов от 0 до 2,5. Средний риск - при сумме от 3,0 до 4,0 баллов. Высокий риск - от 4,5 до 5,5 баллов. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование риска развития синдрома полиорганной недостаточности после коронарного шунтирования путем определения полиморфизмов генов-кандидатов и расчета суммарного риска по оценочной шкале на основании баллового эквивалента. 7 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет на субклеточном уровне определять этиологический фактор гидроцефалии у погибших новорожденных с экстремально низкой массой тела. Способ заключается в том, что у погибших новорожденных с ЭНМТ осуществляют иммуногистохимическое исследование вентрикулярной герминативной зоны, проекции цитоархитектонического поля N6 определяют индекс экспрессии ММР-9 в глиобластах, дополнительно к этому рассчитывают индекс экспрессии рилина в нейронах Кахаля-Ретциуса. При нулевых значениях обоих показателей диагностируют наследственную гидроцефалию, при значении ИЭ ММР-9, равном 0,25 усл. ед. или более, в сочетании с ИЭ рилина менее 2 усл. ед. - поствоспалительную гидроцефалию, при значении ИЭ ММР-9, равном 0,17 усл. ед. или менее, в сочетании с ИЭ рилина, равным 2 усл. ед. или более - постгеморрагическую гидроцефалию. Предлагаемый способ высокоинформативен, выполняется при помощи иммуногистохимического метода и на субклеточном уровне позволяет дифференцировать наследственную, поствоспалительную и постгеморрагическую гидроцефалии у погибших новорожденных с ЭНМТ. Является морфологическим методом осуществления объективного контроля за качеством клинической диагностики, лечения гидроцефалии и оформления заключительного клинического диагноза. Позволяет оптимизировать морфологическую диагностику гидроцефалий в зависимости от этиологического фактора и существенно повышает качество оформления патологоанатомического диагноза и эпикриза. 3 пр.

Наверх