Способ получения вещества из гонад мидий m. galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью




Владельцы патента RU 2674033:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН" (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества из гонад мидий Mytilus galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью. Способ получения вещества из гонад мидий М. galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью, заключающийся в том, что из мидий M. galloprovincialis 4-5 стадии половозрелости по пятибалльной шкале выделяют сырые гонады, сырые гонады гомогенизируют в смеси хлороформ:этанол, центрифугируют, остаток отмывают водой от нелипидных примесей, хлороформную фракцию упаривают в вакууме, к полученному липидному остатку добавляют гексан и водный спирт, смесь встряхивают в делительной воронке, гексановую фракцию отделяют, а водно-спиртовую фракцию экстрагируют гексаном, гексановые фракции объединяют и упаривают в вакууме до постоянной массы, при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет увеличить выход конечного вещества. 2 пр.

 

Изобретение относится к биотехнологии и предназначено для получения лекарственных веществ из гидробионтов и может быть использовано в медицине для создания препаратов, которые обладают противоопухолевой активностью.

Известно, что мясо мидий обладает широким спектром положительных медико-биологических свойств. Ранее было разработано несколько типов лечебно-профилактичнских продуктов, полученных путем глубокой переработки мягких тканей мидий или из целых моллюсков: МИГИ-К [1], "Биоплан" [2]. В гонадах мидий, культивируемых в Крыму, обнаружены вещества разной природы: биологически активные вещества с высоким содержанием тестостерона [3] биоантиоксиданты, иммуномодуляторы [4]. Проведенные клинические испытания показали, что экстракты из гонад мидий оказывают иммуномодулирующее действие [4] и могут быть использованы в ликвидации последствий воздействия ионизирующего излучения. На основании имеющихся данных о химическом составе гонад моллюсков, а также опыта их использования, нами предлагается способ получения продукта на основе гонад М. galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью.

Известен способ получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью, из гонад коллекторных мидий Mytilus galloprovincialis Lam путем экстракции смесью хлороформ:спирт (Пат. №4106, Украина, 2004, A61K 35/56). В известном способе из черноморских мидий Mytilus galloprovincialis выделяют сырые гонады. Для получения гонад используют мидии 3-4-ой стадии половозрелости по пятибалльной шкале. Сырые гонады гомогенизируют в смеси хлороформ:этанол (1:1), центрифугируют, и остаток повторно гомогенизируют в смеси хлороформ:этанол (2:1). Экстракт трижды отмывают водой от нелипидных примесей. Хлороформную фракцию упаривают в вакууме при температуре ниже 30°C. К полученному липидному остатку добавляют гексан и 85% водный спирт в соотношении 2:1 и смесь встряхивают в делительной воронке. Гексановую фракцию отделяют, а водно-спиртовую фракцию экстрагируют гексаном дважды. Гексановые фракции объединяют и упаривают в вакууме до постоянной массы. Недостатком известного способа является длительность процесса и сравнительно низкий выход.

Задачей изобретения Способ получения вещества из гонад мидий M. galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью является увеличение конечного выхода вещества, обладающего противоопухолевой активностью и упрощение способа экстракции вещества из гонад мидий.

Техническим результатом изобретения является получение вещества, обладающего противоопухолевой активностью в количестве, достаточном для использования в медицине качестве сырья для изготовления новых лекарственных препаратов.

Технический результат достигается путем гомогенизации гонад, находящихся исключительно на 4-5 стадиях половозрелости, при температуре (37±1)°C в хлороформно:спиртовой смеси в соотношении (1:1), что в значительной мере увеличивает экстракцию целевого вещества, отмывании при температуре (25-30)C° полученного экстракта водой от нелипидных примесей и добавлении к полученному липидному остатку гексана и 85% водного спирта в соотношении 1:1. Такая методика приводит к увеличению выхода конечного продукта на (12-13) % и уменьшает время экстракции (1,5-2) раза. Значения количественных параметров заявляемого способа, режимы и условия экстрагирования экспериментально установлены авторами в оптимальных границах достижения технического результата.

В предлагаемый способ, включающий экстракцию активного вещества из гонад мидий М. Galloprovincialis спирто-хлороформной смесью (1:1) в с последующим отделением органической фазы, выпариванием ее в вакууме при температуре (25-30)°C, растворением в гексане с добавлением 85% водного спирта, отделением гексановой фракции от водно-спиртовой, которую экстрагируют гексаном, объединением полученных гексановых фракций и выпариванием в вакууме при температуре (25-30)°C до постоянной массы, вводятся новые условия. Во-первых, используют мидии, находящиеся на 4-5 стадиях половозрелости по пятибалльной шкале. Во-вторых, экстракцию активного вещества из гонад мидий спирто-хлороформной смесью проводят при температуре (37±1)°C в течение 30 минут. В-третьих, экстракцию водно-спиртовой фракции гексаном выполняют один раз.

Признаками, совпадающими с прототипом, являются: выделение сырых гонад из черноморских мидий М. galloprovincialis и их гомогенизация в смеси хлорофом:этанол (1:1), а затем центрифугирование; отмывание экстракта водой от нелипидных примесей; упаривание хлороформнной фракции в вакууме при температуре ниже 30°C; добавление к полученному липидному остатку гексана и 85% водного спирта в соотношении 1:1, отделение гексановой фракции и экстрагирование водно-спиртовой фракции гексаном: объединение гексановых фракций и упаривание в вакууме до постоянной массы.

Способ реализуется следующим образом.

Из черноморских мидий М. galloprovincialis выделяют сырые гонады, преимущественно находящиеся на 4-5 стадиях половозрелости по пятибалльной шкале. Сырые гонады гомогенизируют в смеси хлороформ:этанол (1:1) при температуре (37±1)°C в течение 30 минут, центрифугируют. Повторной экстракции не требуется. Экстракт дважды отмывают водой от нелипидных примесей при температуре (25-30) C°. Хлороформную фракцию упаривают в вакууме при температуре (25-30)°C. К полученному липидному остатку добавляют гексан и 85% водный спирт в соотношении 1:1, смесь встряхивают в делительной воронке. Гексановую фракцию отделяют, а водно-спиртовую фракцию экстрагируют гексаном еще однин раз. Гексановые фракции объединяют и упаривают при температуре (25-30)°C в вакууме до постоянной массы. Примеры реализации способа.

Пример 1. Из 4 кг мидий Mytilus galloprovincialis, выращенных в Крымских хозяйствах марикультуры, выделяли 120 г сырых гонад. Сырые гонады гомогенизировали в смеси хлороформ:этанол (1:1) при температуре 37°C в течение 30 минут, центрифугировали. Экстракт дважды отмывали водой от нелипидных примесей. Хлороформную фракцию упаривали в вакууме при температуре 30°С.К полученному липидному остатку добавляли гексан и 85% водный спирт в соотношении 1:1. Смесь встряхивали в делительной воронке. Гексановую фракцию отделяли, а водно-спиртовую фракцию экстрагировали гексаном еще одни раз. Гексановые фракции объединяли и упаривали при температуре (25-30)°C в вакууме до постоянной массы. Выход конечного продукта составил 0,6 г на 100 г сырой массы гонад. Получали липидную фракцию с содержанием α-токоферола 48 мг на 1 г (на жидкостном хроматографе).

Пример 2. Из 20 г гонад черноморских мидий, используя приемы, описанные в примере 1, получали липидную фракцию с выходом 0,17 г. Содержание α-токоферола, определенное методом жидкостной хроматографии, - 57 мг на 1 г липидной фракции.

Противоопухолевая активность полученного препарата согласовывается с активностью препарата, полученного по известному способу. Вещество, полученное предложенным способом, обладает низкой токсичностью и не вызывает гибели мышей, а также других токсических явлений при изученной схеме лечения. В предложенном авторами способе не используются дорогостоящие методы экстракции и очистки, а выход конечного продукта выше на (12-13) % при сохранении показателей противоопухолевой активности. Преимущество способа получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью, заключается в доступности сырьевой базы и в высоком выходе целевого продукта. Способ не требует сложных и дорогих методик выделения. Полученное вещество отличается низкой токсичностью и может быть использовано для создания нового препарата для лечения онкологических больных.

Заявленный способ позволяет увеличить выход конечного продукта на (12-13) %, уменьшает в (1,5-2) раза время экстракции, и, не угнетая природных качеств препарата, сохраняет показатели противоопухолевой активности.

Источники информации, принятые во внимание:

Рехина, Н.И.; Новикова, М.В.; Беседина, Т.В.; Королев, А.Н.; Терентьев, В.А. Пищевой продукт из мидий для лечебно-профилактического применения. // Рыбное хозяйство - 1995 - №4. - С. 53-56.

2. Симонова Л.И, Григорьева М.П. Битютская О.Е. Изучение адаптогенного действия биодобавки Биоплан. // Рыбное хозяйство Украины - 2001 - №3-4. - С. 17-18.

3. Пат. 2599834 Российская Федерация. МПК A23L 33/10, A23L 17/50. Способ получения биологически активного вещества из черноморской мидии Mytilus galloprovincialis Lam / Никонова Л.Л. (RU), Нехорошев М.В. (RU); патентообладатель Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт морских биологических исследований им. А.О. Ковалевского РАН» (RU). - №2014138314/13; заявл. 22.09.2014; опубл. 20.10.2016, Бюл. №29

4. Г.Н. Апрышко, М.В. Нехорошее. Противоопухолевые препараты из морских организмов. "Аквавита", Севастополь, 2000, стр. 106

5. Пат. 4106 UA, МПК A01K 35/56. Спосiб одержання речовини, яка протипухлинну активнiсть / Нехорошев М.В. (UA), Фiлiппов О.В. (UA), Усс Ю.А. (UA), Апрiшко Г.Н. (RU), . (RU), Судакова Л.А. (RU), Фiрсова Г.А. (RU); заявник Iнститут пiвденних морiв iм. О.О. Ковалевського HAH (UA). - №2004010067; Заявл. 08.01.2004; Опубл. 17.01.05. Бюл. №1.

Способ получения вещества из гонад мидий М. galloprovincialis, обладающего противоопухолевой активностью, включающий экстракцию активного вещества из гонад мидий М. Galloprovincialis спирто-хлороформной смесью (1:1) с последующим отделением органической фазы, путем выпаривания в вакууме при температуре ниже 30°C, растворением в гексане с добавлением 85% водного спирта в соотношении 1:1, отделением гексановой фазы и экстракцией водно-спиртовой фракции гексаном с последующим объединением гексановых фракций и выпариванием в вакууме при температуре (25-30)°C до постоянной массы, отличающийся тем, что экстракцию активного вещества из гонад мидий, находящихся на 4-5 стадиях половозрелости по пятибалльной шкале, проводят спирто-хлороформной смесью при температуре (37±1)°C в течение 30 минут, а экстракцию водно-спиртовой фракции гексаном выполняют один раз.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой лекарственное средство для лечения рака кожи методом фотодинамической терапии, характеризующееся тем, что оно представляет собой композицию в форме мази, содержащей в качестве фотосенсибилизатора тетраметиловый эфир копропорфирина, а в качестве вспомогательных компонентов диметилсульфоксид, моноглицериды, касторовое масло, полиэтиленоксид, ланолин и эмульгатор.

Изобретение относится к соединению формулы 1, или его фармацевтически приемлемой соли, где значения X представляет собой -N(R7)2, -N(R7)(R2) или -N(H)-R3-R6; R’ представляет собой H или метил; R2 представляет собой H, -CH2OP(=O)(OH)2 или -(C=O)OCHR8O(C=O)CH3; R3 представляет собой -C(=NR)- или -(C(R)2)n-; R5 выбран из группы, состоящей из 1,4-циклогександиила и 1,4-фенилена; R6 выбран из группы, состоящей из арила, выбранного из группы состоящей из фенила и нафталенила, и гетероарила, выбранного из группы состоящей из пиримидина, пиридина, хинолина, бензофурана, пиразина и фурана, любой из которых является возможно моно- или дизамещенным и заместители, если присутствуют, независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, фенила, гетероарила, выбранного из группы состоящей из тиофена, фурана, пиридина, бензофурана, пиразола и пиррола, алкокси, гидрокси, перфторалкила, трифторметокси, диалкиламино, перфторэтокси и галогенида, при этом возможный фенильный или гетероарильный заместитель может содержать в качестве заместителей алкил, галогенид, алкокси, перфторалкил или диоксоланил; R7 выбран из группы, состоящей из H и –CН2-пиридина, любой из которых является возможно монозамещенным, и заместитель, если присутствует, представляет собой тиофен; или два R7 и азот, с которым они связаны, вместе представляют собой морфолин; R8 представляет собой H; R представляет собой H или (C1-C4)алкил; и n равно 1, 2 или 3.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к полипептидному биомаркеру эффективности применения ингибитора FGFR при лечении рака мочевого пузыря и рака легких, что может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к применению полиацилированного производного 20(R)-гинзенозида Rg3, имеющего формулу (I), для получения противоопухолевого или противоракового лекарственного средства, в которой R=CH3(CH2)nCO, n=1-5.

Изобретение относится к соединению, имеющему структуру формулы (II), или его фармацевтически приемлемой соли, которые обладают свойством ингибирования ферментов гистондеацетилаз (HDAC).
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения кастрационно- устойчивого рака простаты. Для этого назначают комбинацию препаратов доцетаксель 75 мг/м2 поверхности тела 1 раз в 3 недели, абиратерон 1000 мг в сутки, преднизолон 10 мг в сутки.

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения рака. Используют композицию, содержащую паклитаксел и альбумин, и антитело против VEGF, где эффективное количество паклитаксела в содержащей наночастицы композиции составляет от приблизительно 45 мг/м2 до приблизительно 350 мг/м2 и эффективное количество антитела против VEGF составляет от более 1 мг/кг до менее 10 мг/кг.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложен иммуноконъюгат, включающий рекомбинантное антитело IgG1 к эпидермальному фактору роста человека (hEGFR), ковалентно присоединенное к цитотоксическому средству.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к полипептиду, специфически связывающемуся с CD3, а также нуклеиновой кислоте, его кодирующей. Причем указанный полипептид содержит домен связывания с CD3 со сниженной изоэлектрической точкой.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы I или к его фармацевтически приемлемой соли, где W представляет C-R3; X и Z представляют CH или N; R1 выбран из хлора, фенила, гетероарила (выбранного из фурана, пиридина, пиримидина, изоксазола, имидазола и пиразола), гетероциклила (выбранного из пирролидина, пиперидина, морфолина, пиперазина, азетидина, 6-азаспиро[3.4]октана, 2-окса-6-азаспиро[3.4]октана, 2-окса-6-азаспиро[3.3]гептана, тиоморфолин-1,1-диоксида, 7-окса-2-азаспиро[3.5]нонана, 6-окса-2-азаспиро[3.4]октана, 2-окса-7-азапспиро[4.4]нонана, 2-окса-6-азаспиро[3.5]нонана и дигидропирана), (3-6C)циклоалкила, NR7R8, OR9, S(O)pR9 (где p = 0), N(R10)SO2R9 или N(R10)SOR9; и где R1 необязательно замещен 1-2 заместителями, выбранными из фтора, циано, гидрокси, (1-4C)алкила, (1-4C)алкокси, S(O)qCH3 (где q = 2) и пиперидина, и где любая (1-4C)алкильная, (1-4C)алкокси или гетероциклильная часть, присутствующая в заместительной группе в R1, необязательно дополнительно замещена 1-2 заместителями, выбранными из фтора, гидрокси, (1-4C)алкила, NRaRb, ORa и C(O)ORa, где каждый из Ra и Rb независимо выбран из H или (1-4C)алкила; R3 представляет водород, (1-4C)алкил или (3-6C)циклоалкил; R4 представляет водород или (1-3C)алкил; Ar имеет формулу ,где (i) все из A1, A2 и A3 представляют CH или (ii) один из A1 и A2 представляет N и другие представляют CH; R5 выбран из водорода, циано, (1-3C)алкила, (1-3C)алкокси, (1-3C)фторалкокси и галогена и где любые алкильные или алкокси части, присутствующие в заместительной группе R5, необязательно дополнительно замещены гидрокси или метокси; R6 выбран из галогена или циано или R6 представляет группу формулы -L1-L2-R17, где L1 отсутствует, L2 отсутствует или выбран из O, SO2, C(O) или C(O)N(R20), где каждый из R20 и R21 независимо выбран из водорода или (1-2C)алкила, и R17 представляет (1-6C)алкил, гетероарил (выбранный из имидазола, пиразола, изоксазола, триазола, тетразола, пиримидина, оксадиазола) или гетероциклил (выбранный из морфолина, азетидина, пиперидина, тетрагидропирана и пиперазина), где R17 необязательно дополнительно замещен 1-2 заместителями, выбранными из (1-4C)алкокси, (1-4C)алкила, (1-5C)алкилсульфонила, гетероциклила (выбранного из морфолина), гетероциклил-(1-2C)алкила (где указанный гетероциклил представляет собой пиперазин); и причем, когда указанная заместительная группа содержит алкильную или гетероциклильную часть, указанная часть необязательно дополнительно замещена гидрокси, (1-2C)алкилом, (1-2C)алкокси или NReRf (где каждый из Re и Rf независимо выбран из (1-3C)алкила; каждый из R8 и R9 независимо выбран из водорода, (1-6C)алкила, (3-6C)циклоалкила, (3-6C)циклоалкил-(1-2C)алкила или гетероциклила (выбранного из тетрагидропирана, тетрагидрофурана, оксетана и пиперидина), гетероциклил-(1-2C)алкила (где гетероциклил представляет собой оксетан или тетрагидрофуран), и где R8 и R9 необязательно дополнительно замещены 1-2 заместителями, выбранными из гидроксила, фтора, CF3, (1-2C)алкила или (1-2C)алкокси; R7 и R10 независимо выбраны из водорода и (1-6C)алкила; при условии, что X представляет только N, когда Z представляет N; и R6 не представляет метокси, когда R1 представляет S(O)2R9, и R9 представляет гетероциклил.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой композицию на основе по меньшей мере одного пробиотика для применения с целью оказания лечебного действия на прибавку массы тела у человека с избыточной массой тела и/или для профилактики прибавки массы тела у человека, имеющего или имевшего избыточную массу тела, отличающуюся тем, что указанный пробиотик представляет собой Bifidobacterium animalis ssp.
Изобретение относится к медицине, а именно к колопроктологии, и может быть использовано для лечения свищей прямой кишки. Для этого проводят иссечение свища в пределах здоровых тканей и осуществляют открытое ведение послеоперационной раны.

Группа изобретений относится к медицине и касается штамма Lactobacillus gasseri 7/12 NBIMCC No. 8720.

Настоящее изобретение относится к способу получения синтетического гемоцианина фиссуреллы (KLH). Способ получения синтетического гемоцианина фиссуреллы (KLH), включающий следующие этапы: a) диссоциацию природного KLH для получения субъединиц, b) нанофильтрацию субъединиц, полученных на этапе а), с применением фильтров с размером пор от 15 до 35 нм; и c) ассоциацию субъединиц, полученных после нанофильтрации, с получением синтетического KLH.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам введения клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, что может быть использовано в медицине.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности производству гематогена. Гематоген содержит черный альбумин, носитель, компоненты для формования, корректоры вкуса и аромата, взятые в определенном соотношении, при этом черный альбумин находится в такой нативной форме, что его ИК-спектр поглощения имеет пик на 1655±2 см-1, площадь которого составляет от 35 до 80% от суммы площадей всех пиков в спектральной области от 1600 до 1700 см-1, и пик на 1628±2 см-1 с площадью от 5 до 40% от указанной суммы площадей.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой композицию для увеличения скорости метаболизма алкоголя, снижения уровня алкоголя в крови или облегчения одного или более нежелательных эффектов, ассоциированных с токсичностью алкоголя, содержащую смесь бактерий, включающую Pediococcus acidilactici, Pediococcus pentosaceus и Lactobacillus plantarum, где каждая из бактерий в смеси является индивидуально анаэробно ферментированной, собранной, высушенной и измельченной для получения порошка, имеющего средний размер частиц 295 микрон, с 60% смеси в диапазоне размеров от 175 до 840 микрон, и смесь имеет следующие характеристики: a) содержание влаги менее 5%; и b) конечная концентрация бактерий от 105 до 1011 колоний образующих единиц (КОЕ) на грамм композиции.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан вектор экспрессии CAR, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую химерный антигенный рецептор (CAR), и нуклеиновую кислоту, кодирующую иммуномодулирующий фактор Т-клетки, при этом нуклеиновая кислота, кодирующая иммуномодулирующий фактор Т-клетки, представляет собой нуклеиновую кислоту, кодирующую интерлейкин-7, и нуклеиновую кислоту, кодирующую CCL19.

Изобретение относится к микробиологии. Предложен штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310, который является продуцентом ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ и депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФБУН «МНИИЭМ им.

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к лечению коров, больных маститами. Препарат для лечения коров, больных маститами, включает 10% экстракт смеси прополиса и травяного сбора, в качестве экстрагента которых используется водно-пропиленгликолиевая смесь с соотношением воды и пропиленгликоля 1:1, а также следующие вещества при следующем соотношении компонентов, мас.%: арабиногалактан 20, бишофит 20, диметилсульфоксид 15.

Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для лечения рака у субъекта. Для этого субъекту вводят терапевтически эффективную дозу композиции, включающей нацеленную на опухоль наночастицу, где нацеленная на опухоль наночастица содержит нацеливающий на опухоль белок и металлированный коррол, включающий марганец или железо. Также предложен способ визуализации состояния у субъекта с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ), и фармацевтическая композиция для нацеленной доставки in vivo коррола. Группа изобретений обеспечивает лечение и диагностику рака у пациента. 3 н. и 28 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2017-11-09 2018-12-12T00:16:50
Наверх