Способ выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба

Авторы патента:

G01N1/30 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

C12N1/14 - микробные грибки (культуры грибов A01G 1/04; грибы в качестве нового вида растений A01H 15/00); питательные среды для них

О П И С А Н И Е (,I) 53203I

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сома Соеетскня

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву № (22) Заявлено 20.01.75 (21) 2100148/13 с присоединением заявки № (51) М. Кл. G 01N 1/30

Совета Министров СССР ло левам изобретений и открытий

Опубликовано 15.10.76. Бюллетень ¹ 38

Дата опубликования описания 14.10.76 (53) УДК Е576.8.094.81 (088.8) (72) Авторы изобретения

Л. И. Израйлет и В. Л. Мардер

Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ

ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ И НЕЖИЗНЕСПОСОБНЫХ СПОР ГРИБА

B EAU VERI A BASS (ANA

ГосУаарственный комитет (23) Приоритет

Изобретение относится к микробиологии и касается способа окрашивания спор грибов.

Известен способ выявления жизнеспособных спор в воздухе с помощью высева спор на питательные агаровые среды (1).

Известно применение красителей вЂ” карболового фуксина Циля и метиленовой синьки для окрашивания нежизнеспособных спор бактерий и грибов по методу Ожешки (2j.

Однако известные способы трудоемки и не обеспечивают одномоментного выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор.

Целью изобретения является одномоментное выявление жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana.

По предлагаемому способу к суспензии спор добавляют смесь флуорохромных красителей родамина и аурамина и дифференцируют споры по окрашиванию в люминесцентном микроскопе.

Способ осуществляют следующим образом.

В течение 3 вЂ” 5 с смешивают равные объемы, например 0,1 мл суспензия спор H 0,1 мл смеси флуорохромных красителей. Затем общей взвесью заполняют камеру Горяева, производят подсчет спор в 10 больших квадратах с помощью люминесцентного микроскопа и дифференцируют споры на жизнеспособныевЂ” зеленое свечение и нежизнеспособные вЂ” оранжевое свечение.

Для статистической обработки подсчет спор производят в трех разных пробах боверина при одном разведении препарата.

На основании полученных данных строят калибровочную кривую, определяющую количество спор в весовой единице препарата.

Применение смеси флуорохромных красителей родампна и аурамина для раздельного окрашиванпя жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana позволяет

1р получить четкое раздельное окрашивание жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба, значительно ускорить (в 50 вЂ” 100 раз) метод определения концентрации спор гриба Bear eria Bassiana в воздухе.

Формула изобретения

Способ выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana, отличающийся тем, что к суспензпи спор

20 добавляют смесь флуорохромных красителей родамина и аурамина и дифференцпруют споры по окрашиваншо в люминесцентном микроскопе.

Источники информации, принятые во внп25 мание при экспертизе:

1. В. В. Скворцов и др. Выживаемость и индикация патогенных микробов во внешней среде, М., 1955 г., стр. 178.

2. Г. Я. Синай и др, Микробиологические

30 методы исследования при инфекционных заболеваниях, Л., 1941 г., стр. 54.