Способ количественного определения аминокислот

 

ОПИ tИЗОБРЕТЕНИ, (i i1 545354

Союз Советских

Социалистических

Республик

И АВТОРСИОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 21.03.75 (21) 2117855/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 05.02.77. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 03.03.77 (51) М. Кл.2 А 61К 31/195

Гесударствеииый комитет

Совета Министров СССР ла делам изобретений и открытий (53) УДК 612.398.192 (088.8), (72) Авторы изобретения ((71) Заявитель

А. А. Медведовский и Т. В. Ковальчук

Киевский научно-исследовательский институт фармакологии и токсикологии (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

АМИНОКИСЛОТ

Изсубретение относится к медицине и касается исследования лекарственных препаратов.

Известен классический метод Попа определения аминокислот, заключающийся в получении медного комплекса аминокислоты и последующего титрования образца с дальнейшей оценкой количества меди и пересчетом на, аминокислоту (1).

Однако известный способ не обеспечивает сселективного определения цистина. .С целью обеспечения селективного определения цистина в предлагаемом способе обра.ботку осуществляют перекисью водорода в присутствии сульфата меди в слабокиелой .среде и осаждают образовавшийся медный комплекс цистина в водно-метанольной среде.

Пр и мер 1. 0,01 — 0,03 r цистина (точная навеска) растворяют в 2 мл воды и прибавляют 0,3 мл раствора перекиси водорода. Через 1 мин прибавляют 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди, затем после растворения при взбалтывании быстро исчезающей мути прибавляют 8 мл метанола и оставляют при периодическом взбалтывании на 5 IHH. Далее прибавляют 10 мл воды, 0,05 г индикаторной смеси мурексида и титруют избыток меди

0,02 и. раствором трилона Б до слабого порозовения (при этом медь оттитровывают на

70 — 80% ) . Затем прибавляют по каплям

2%-ный раствор аммиака до побурения раствора и продолжают титровать раствором трилона Б до яркофиолетового окрашиванпя устойчивого не менее 1 мпн.

В контрольном опыте 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди после прибавления 10 мл воды и 0,05 г индикаторной смеси тптруют как указано выше.

Пример 2. 0,01 — 0,03 г цистина (точная навеска) растворяют в 2 мл воды н прибавля10 ют 0,3 мл раствора перекиси водорода. Через

1 мин прибавляют 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди, затем после растворения прп взбалтыванпи быстро исчезающей мути прибавляют 8 мл метанола и оставляют прп пе15 риодическом взбалтывании на 5 мпн. Затем смесь фильтруют прп разрежении под вакуумом через стеклянный фильтр № 4, промывают колбу и осадок — 60% метанолом 4 раза по 5 мл, каждый раз взмучивают осадок на

20 фильтре с помощью стеклянной палочки.

Фильтрат отбрасывают. Колбу-приемник промывают, а осадок растворяют в 5 мл разведенной серной кислоте и промывают на фильтре водой 4 раза по 5 мл. В соединенном

25 фильтрате растворяют 1,5 r йодпда калия и выделившийся йод сразу титруют 0,01 н. раствором тиосульфата натрия (индикатор, крахмал, выдержка 2 мин), 1 мл 0,01 н. раствора тиосульфата натрия соответствует

30 0,002422 г цистина.

Состав!!тс.и, С, Гйа.иотииа

Техрсд Б. Рыбакова

Коррек!ор Л. Денискина

Редактор Л. Гончарова

Заказ 242/9 Изд. М 407 Тираж 054 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР ио дела; изобретений и открытий

113035, Москва, )1(-35, Рау!пека!! паб., д. 4!5

Типографии, пр. Сапуновы, 2

Средняя относите;!ьие!я оп!ибк:: ири определении содержания цистги!и 3,7--1,3", ...

Предлагаемый способ позволяет определи п цистин в присутствии других аминокислот, применяющихся в смесях с цистином.

Формула изобретения

Способ количественного определения аминокислот путем обработки исследуемого вещества солями меди с последующим определением количества меди, о т л и и !о шийся тi xl, » !), с целью обеси("!0!!!!» се, !е!,т!!в!!Ого определен!кя цистииа, обр !ботку осу!цсствл»-! от перекисью водорода в присутств!ш су.!ьфата меди в слабокислой среде и осаждают образовавш;!йся медный комплекс цистина в к!дно-мстанольиой среде.

Источник ииформаиии, принятый во внимание ири экспертизе:

1. Руководство по клиническим лаборатор10 1ым >:.сслсдоваииям, изд. Медицина, 1964, с. 395 — 396.