Способ получения фосфатов липидного ряда

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБ РЕТЕ Н ИЯ и АВТОРСКОМУ СВИДЕХЕЛЬС7ВУ (61) Дополнительное к авт. свид-sy— (22) Заввлеио 250178(21) 2573110/23-04 е присоединением заявки Нов

С 07 F 9/09

ГосударствеииыИ комитет ссср ио делам изобретений и открьпий (23) Приоритет

Опубликовано 150579. Бюллетень Щ 18 . (53) УДК 547. 26 118.07(088.8) Дата опублик©ваиия описании 1705.79 (72) Авторы

ИЗОбр8ТЮИИЯ Н. Н. Карпышев, A. С. Бушнев, Е. Н. Звонкова и Р. П. Евстигнеева

Московский ордена Трудового Красного Знамени институт (71) айВИт@Л тонкой химической технологии им. М. В . Ломоносова (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФО СФАТОБ ЛИПИДНОГО РЯДА

tl

R 0- Р— 0Н

OH

Изобретение относится к области химии фосфорорганических соединений, а именно к новому способу получения фосфатов липидного ряда общей формулы где R- остаток церамнда или диглицерида, которые являются ключевыми соединениями в синтезе природных фосфорсодержащих липидов разнообразного строения: сфингомиелинов, фосфатидилхолинов, фосфатидилэтаноламинов.

Известен способ получения Фосфатов липидного ряда путем фосфорили рования церамидов нлн диглицеридов дихлорангидридом ф,fb,P-трихлорэтилФосфорной кислоты в хлороформе при охлаждении с последующим гидролизом образующего диэфирохлорангидрида фосфорной кислоты и обработкой ,полученного продукта цинком в среде уксусной кислоты .в. присутствии пиридина при 67-70 С (1). ЭО

Недостатком этого способа является сложность процесса, связанная с необходимостью приготовления фосфарилирующего агента, а также с необходимостью снятия защитной группы восстановлением цинком в уксусной кислоте и в пиридине.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получейия; фосфатов липидного ряда, заключающийся в том, что церамид подвергают взаимодействию с 5-б-кратным избытком хлорокиси фосфора в присутствии пиридина при (-25)-(-30) С в течение 0,5-1 ч с прекращением реакции гидролизом путем прибавления смеси пиридин-вода. Этот процесс. приводит к образованию целевых продуктов с выходом 52% (2);

Недостатком описанного способа

--является образование в качестве побочного продукта реакции дицерамидоФосфата, который необходимо отделять путем длительного колоночного хроматографирования, а также недостаточно высокий выход целевого продукта.

Целью изобретения является увеличение выхода Фосфатов липидного ряда.

54 4 кагеля л 40/100pr в системе растворителей хлороформ-метанол-25Ъ ИН4ОН

10:6:0,5.

Найдено,Ъ: Р 3,83

С4 Н84NyОy Р, Вычислено, Ъ: P 3, 94.

Пример 3. Получение диаммонийной соли 3-бенэоил-2-карбобенэокси=час-сфинганин-l-фосфата.

К досфорилирующему агенту, полученному из 0,52 мл хлорокиси фосфора и 0,90 r имидазола в 25 мл хлороФорма и 1,8 мл пиридина, при (-25) С прибавляют за 30 мин раствор 0,60 г

3-бензоил-2-карбобенэокси-час-сфинганина в 25 мл хлороформа и перемешивают при этой температуре еще

30 мин. Добавляют 12 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают 2 ч при комнатной температуре, органический слой отделяют, промывают водой, упаривают., Остаток наносят на колонку с силикагелем

Л 100/160 р (60x25 мм) . Примесй вымывают системой растворителей хлороформ-метанол-25Ъ NH40Í, 15:5:1, а

3-бензоил-2-карбобензокси-час-сфинганин-1-фосфат (lв), элюируют системой растворителей хлороформ-метанол-25Ъ

НН4ОН, 5:5:I, Выход диаммонийной соли 9,51 r (69Ъ); т. пл. 114-118 C (иэ эфира-ацетона); Ry = 045 в тонком слое силикагеля Л 40/100р в системе растворителей хлороформ-метанол-25Ъ NH@OH, 10:6:0,5.

Яаидено,:: Р 4,55.

С»Н„язова Р

Вычислено,Ъ: Р 4,74.

Пример 4, Получение 1,2-дипальмитоиЛ-час-глицерин-3-фосфата.

K фосфорилирующему агенту, полученному иэ 0,43 мл хлорокиси фосфора, 0,76 r имидазола в 25 мл хлороформа и 1, 6 мл пиридина, при (-25) С прибавляют за 30 мин раствор 0,50 г

1,2-дипальмитоил-час-глицерина в 25 мл хлороформа и перемешивают при этой температуре еще 30 мин. Добавляют

10 мл концентрированной, соляной кислоты и интенсивно:,перемешивают 2 ч при комнатной температуре, органический слой отделяют, промывают водой,упаривают,остаток кристаллизуют из ацетона. Выход 1,2-дипальмитоил-час-глицерин-3-фосфата (1 г) 0,42:г (70Ъ ) р т. пл. б 1-62 С, Rp = О, 30 в тонком слое силикагеля Л 40/100 в системе растворителей хлороформ-метанол-25Ъ ИН ОН, 10:6: 0,5.

Пример 5. Получение диаммонийной соли 3-бензоил-2-стеароил-час-сфингенин-l-фосфата.

Аммонийную соль 3-бензоил-2-стеароил-час-сфинг нин-1-фосфата (lд) получают из 0,5 r 3-бензоил-стеароил-час-сфингенина аналогично соединению (la}. Выход 0,41 г (60Ъ)у т. пл.

123-125 С (из хлороформа" ацетона);

3 6625

Поставленная цель достигается описываемым способом получения фосфатов липидного ряда, заключающимся в том, что церамид или диглицерид подвергают взаимодействию с диимидазолидохлорфосфатом при (-20) — (-30) С в хлороформе в присутствии пиридина с после- 5 дующим гидролизом образующегося продукта разбавленной соляной кислотой.

Отличительным признаком способа является, то, что в качестве хлорангидрида.фосфорной кислоты используют N диимидазолидохлорфосфат и гидролиз продукта взаимодействия его.с церамидом или диглицеридом проводят раз= бавленной соляной кислотой.

Описываемый способ позволяет полу-(5 чать целевые продукты с выходом

69- 75Ъ.

Ввиду того, что большинство образующихся фосфатов являются неустойчивыми соединениями, их выделяют _#_ и охарактер.,зовывают в виде диаммонийных солей.

Пример 1. Получение диаммонийной соли 3-бензоил-2-стеароил-час-сфинганин-1-фосфата.,25

К раствору 1,3 мл (14 ммоль) хлор- окиси уосфора в 4, О мл пиридина при

О C прикапывают за 30 мин раствор о

2,3 r (28 ммоль) имидазола в 60 мл хлороформа. Перемешивают при комнатной температуре lч,затем при 20-ЗОС С. прибавляют за 30 ьжн раствор 1,5 (2,2 ммоль) 3-бензоил-2-стеароил-час-сфинганина в 60 мл хлороформа и перемешивают при этой температуре еще 30 мин, Добавляют 20 мл концентрированной соляной кислоты, интенсивно перемешивают 2 ч при комнатной температуре, органический слой отде ляют, промывают водой, упаривают. остаток растворяют в 5 мл эфира, к раствору прибавляют смесь 20 мл ацетона и 2 мл 25Ъ-ного раствора аммиака, выпавший осадок аммонийной соли 3-бенэоил-2-стеароил-час-сфинганин-1-фосфата (lа) отделяют, сушат и пе- 45 рекристаллизовывают из смеси хлороФорм-метанол, 1:3. Выход 1,3 r (75%); т. пл. 136-138 C; Ry -" 0,45 в тонком слбе силикагеля Л 40/100 р в системе растворителей хлороформ-метанол- 50

-25Ъ NH4OHi 10:6:0,5.

Найдено,Ъ Р 3,80.

С4э Н84НэОТР

Вычислено,Ъ: P 3,94.

Пример 2. Получение диаммоний-55 ной соли трео-час-3-О-бенэоил-2-N-стеароил-2-аминооктадекан-1,3-диол-1-фосфата.

Аммонийную сбль трео-час-3-0-бен" зоил-2-N-стеароил-2-аминооктадекан- 60

-1,3-диол-l-фосфата (lб) получают иэ

0,5 г трео-час-3-0;бензоил-2-N-стеароил-2-амйнооктадекан-1,3-диола аналогично соединению (lа). Выход 0,41 r (71Ъ), т. пл. 71-74 С (из этилацетата} В1 0,45 в тонком слое сили5 б6255

Н 0,45 в тонкогг слое силикагеля

Л40/100I, ц в системе растворителей хлороформ-метанол-25Ъ NIGH, 10:б:0,5.

Найдено,Ъ: Р 3,88.

С4 Н Д ИЭО7 Р

Ьычислено, Ъ: Р 3, 95.

Формула изобретения

1. Способ получения фосфатов липидного ряда общей формулы 10 . О

II

В-0- Р-0К

ОН где Я вЂ” остаток церамида или диглицерида, взаимодействием церамида или диглицерида с хлорангидридом фосфорной кислоты )в хлороформе в присутствии пиридина при (-20) -(-30) С с последующим гидролизом продукта взаимодействия, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью увеличения выхода целевых продуктов, в качестве хлорангидрида фосфорной кислоты используют диимидазолидохлорфосфат и гидролиз проводят разбавленной соляной кислотой.

Источни.<и информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

М 598905, кл. С 07 F 9/09, 1976.

2.Enetigneeva R.Ð,2,vonkova Е.t(. 0 пчевttgation ОПЧИе Bgnttleeie oi sphingoplloep o C i pids " а Wi vie t a Э о йа па Зв Ие Sos1оп е Огареве ч. I-Ш SeptЕеЬгЕ, 1976.

Составитель N. Красновская

Ре акто Т. евятко Тех е 3.Фанта Корректор O.Êîâèíñêàÿ

Заказ 2639/29 Тираж 512 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Ра шская наб. . 4 5

4Млиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, .4