Способ получения ферментного препарата асперазы
Союз Советских
Соцнапнс ткаческих
Респубпии
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К МтООСКОМ СВИДЕтЕЛЬСтвю
<л891777 (6l ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 2201,80 (21) 2878326/23-04 с присоединением заявки М (23) Приоритет
Опубликовано 23-1 281 Бюллетень М 47 (51)N. Кл.
С 12 и 9/624
А 61 К 37/48
1оеуаарствеииый коиитет
СССР (53) УДК577.15. .07(088.8) по лелем изебретеиий и открытий
Дата опубликования описания 23.1 281
В. Т. Чернобай, А. Г.Сорокин, В,Ф. Рудюк, и Н.ФЛаслова (72) Авторы изобретения
Харьковский научно-исследовательский 1химикс...- фармацевтический институт (7l ) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРИЕНТНОГО ПРЕПАРАТА
: АСПЕРАЗЫ
Изобретение относится к новому ,способу получения нового ферментнога препарата из поверхностной культуры
Aspergillus oryzae, который может найти применение в медицине и др.
5 отраслях.
Близкими по специфическому действию на субстраты являются химотрипсин и террилитин.
Известен способ получения фермент10 ного препарата амилолитического дейс твия — "Оразы" из поверхностной культуры Aspergi l lus oryzae, который включает экстракцию водой, осаждение этанолом при отношении объема 1:2, растворение полученного осадка в воде при отношении веса 1;3 и осаждение целевого продукта этанолом при отношении 1:(1-3).
Первый осадок в процессе по тучения "Оразы", .полученный осаждением этанолом при отношении I:2, содержит помимо целевого амилолитического фермента и протеолитплеский.
Полученный продукт — препарат "Ораза" обладает выраженным амилолитическим действием и используется как лекарственное средство для лечения желудочно-кишечных заболеваний(1)
Однако известный способ не обеспечивает возможности получения нового ферментного препарата — асперазы, хотя препарат "Ораза", получаемый из этого же сырья казанным способом содержит небольшие примеси продукта ферментативной природы, обладающего протеолитической активностью (4050 ед/г).
Таким образом, известный способ не обеспечивает возможности комплексного использования сырья, тогда как в принципе возможно получение препарата "Оразы" и препарата асперазы по единой технологической схеме.
Цель изобретения — разработка но" вого способа получения нового ферментного препарата асперазы, расширяющего арсенал лекарственных средств
891 777
Формула изобретения
Способ получения ферментного препарата асперазы, о т л и ч а ю щ и ис я тем, что поверхностную культуру
4О Asperg!llus oryzae подвергают экстракции водой, из полученного экстракта осаждают комплекс ферментов этанолом при отношении объема 1:2, осадок растворяют в воде при отношении
45 веса 1:(3-4) и осаждают асперазу этанолом при отношении объема 1:(0,40,6) с последующим перерастворением осадка в воде при отношении веса
1:1 и переосаждением этанолом при
so отношении объема 1:(0,9-1,1).
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Авторское свидетельство СССР
-587150, кл. С 12 0 13/!0, !976 (про у тотип).
Тираж 531 Подписное
Филиал ППП "Патент", r.Ужгород, ул.Проектная,4 и медико-биологических средств воздействия на живой организм, а такж комплексное использование сырья.
Указанная цель достигается способом получения нового ферментного препарата асперазы, который заключается в том, что поверхностную культуру Asperg 11 lus oryzae подвергают экстракции водой, из полученного . экстракта осаждают комплекс ферментов этанолом при отношении объема
1:2, осадок растворяют в воде при отношении веса 1: (3-4) и осаждают асперазу этанолом при отношении объема 1:.(0,4-0,6) с последующим перераспределением осадка в воде при отношении веса 1:1 и переосаждением этанолом при отношении объема
1:(0,9-1,1).
Аспераза относится к протеазам типа трипсина (КФ 3.4,4.4) .
Предлагаемый способ основан на выделении ферментного препарата асперазы из выращенной поверхностным способом культуры Aspergil lus оryzae (т.е, Амилоризина Пх).
Выход препарата составляет 0,220,257 от исходного сырья, протеолитическая активность — .150-160 ед/г °
Препарат представляет собой порошок от светло-желтого до буровато-серого цвета со слабым специфическим запахом, растворимый в воде и нерастворимый в этаноле, хлороформе, ацетоне, эфире и других органических растворителях.
Пример. 1 20 кг поверхностно выращенной культуры гриба Aspergil1us
oryzae загружают в батарею перколяторов и подвергают экстракции водопроводной водой. Из полученных 60 л экстракта осаждают сумму ферментов о. исчерпывающим объемом 96 -ного этанола (по объему) . Полученный осадок растворяют в дистиллированной воде в соотношении 1:4 по весу и фракционо но осаждают 0,5 объемами 96 -ного этанола (по объему), полученный осадок растворяют в дистиллированной воде 1:1 (по весу), удаляют нераство" рившуюся часть путем центрифугирования, а из фугата переосаждают одним объемом 96 -ного этанола целевой .продукт, который промывают этанолом и сушат на воздухе. Протеолитическая активность 150-160 ед/г, выход 295 r, ВНИИПИ Заказ lll52/39
Кроме получения нрепаряча и!я т«олитического действия, способ позволяет комплексно использовать сырье и повысить амилолитическую активность препарата "Оразы" до 280-340 ед/г, а также утилизировать отходы производства препарата "Оразы".
Проведенные фармакологические исследования показывают безвредность !
О препарата и его специфическое дейст— вне. Препарат асперазы обладает выраженным протеолитическим действи. ем, которое характеризуется способностью расщеплять белки, например !
З казеин до продуктов, не осаждаемых трихлоруксусной кислотой, а также может найти применение в ферментной и пищевой промышленности.
Ферментный препарат протеолитического действия проявляет выражен- ное лизирующее действие в отношении некротических биосубстратов: ожогово— го струпа, гнойно-воспалительного секрета гайморовой полости, сгустков крови и тромбов, прй внутрибрюшинном введении оказывает противовоспалительное действие, вызывая уменьшение экссудативных явлений, вызванных рядом флотогенных агентов и при
30 ингаляционном пути введения в дозах
0,4-1,6 ПЕ/кг не оказывает токсического, влияния на функциональное состояние жизненно важных органов.
