Способ очистки низкомолекулярных белков

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

О П И С А Н И Е 953565

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свнд-ву (22)Заявлено 20.08.80 (21) 2981401/28-13 (51)Щ. Кд.

С 01 и 33/48 с присоелинением заявки.%

1Ьоудорстеенный комитет

СССР но делом нэооретеиий н открытий (23) Приоритет

Опубликовано 23. 08. 82 ° Бюллетень № 31

Дата опубликования описания 25.08.82 (53) УДК 547..9(088.8) (72) Авторы изобретения

Е.И. Вожжова, Т.А. Зыкова, Э.П. Козловская и Г.Б. Еляков

Тихоокеанский институт биоорганической мМи 1 ":-".;;;;,,:: ;.:!

Дальневосточного научного центра ЯН СС

ЬИБ. ИО „:- К с (71) Заявитель (54 7 СПОСОБ ОЧИСТКИ НИЗКОМОЛЕКУЛЯ РНЫХ Б ЕЛКОВ

Изобретение относится к химии белков и пептидов и касается получения чистых препаратов.

Известен способ очистки низкомолекулярных белков путем сорбционной хроматографии их растворов с после5 дующей элюцией продукта 1 1).

Однако известный способ длителен, так как он состоит из трех стадий, первая - обессоливание белка гель о фильтрацией на сефадексе или биогеле, вторая - концентрирование, которая включает сорбцию белка на ионообменнике в требуемых условиях и злюцию белка раствором хлористого натрия вы-15 сокой концентрации, третья - обессоливание белка гельфильтрацией на сефадексе или биогеле.

Цель изобретения вЂ” ускорение способа путем одновременной концентра- ю ции и обессоливания.

Эта цель достигается тем, что при осуществлении способа очистки низкомолекулярных белков путем сорбцион2 ной хроматографии их растворов с последующей злюцией продукта, в качестве сорбента используют политетрафтор. этилен, а элюцию ведут водным раст- вором этанола. .а

Пример 1 . Раствор нейтротоксина I из актинии Homostichantes

duerdemi (м.в. = 5000, 50 мкг/мл, 6000 мл) в 2 M хлористом натрии на" носят на колонку с политетрафторэтиленом (1Х20 см), уравновешенным водой. Элюцию проводят сначала 250300 мл дистиллированной воды, чтобы избавиться от следов соли, а затем белок элюируют 50 мл 403-ного водного этанола. Спиртовый раствор белка упаривают на роторном испарителе или диализом. Белок используют

B растворе (15 мг/мл, V=20 мл) или лиофилизуют 1 О.,оо =0,05 мг/кг.

Пример 2. Раствор нейтротоксина 11 из актинии Homostichantus

iduerdemi (м.в. = 5000, 1 мкг/мл, i10 мл) в 6М гуанидинхлориде наносят.3 95356 на колонку с политетрафторэтиленом (0,585 см), уравновешенным водой.

После нанесения смеси гуанидинхлорид элюируют 50 мл дистиллированной воды, а затем белок - 30 мл 403-ного эта- у нола. Этиловый спирт удаляют упариванием на роторном испарителе или диализом. белок используют в раство" ре (2 мг/мл, V 5 мл) или лиофилизуют.

LDqpp 0 08 мг/кг, о

Пример 3, Раствор токсина из Stofchactus helianthus (м.в.

16000, 100 мкг/мл, 200 мл) в 2 М хлористом натрии наносят на колонку (1Х10 см) с политетрафторэтиле- 1s ном, уравновешенным водой. Элюцию проводят сначала 50 мл дистиллированной:воды, а затем белок элюируют

30 -ным водным этанолом. Этиловый спирт удаляют уйариванием или диализом. 6елок используют в растворе (1,5 мг/мл, V-"13,5 мл) или лиофилизуют. LD o =8 мг/кг.

Предложенный способ прост, высокая,емкость сорбента позволяет быстро концентрйровать большие объемы разбавленных растворов и элюировать их небольшим количеством водного этанола °

Формула изобретения

Способ очистки низкомолекулярных белков путем сорбционной хроматографии их растворов с последующей элюцией продукта, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения способа путем одновременной концентрации и обессоливания белка, в качестве сорбента используют политетрафторэтилен, а элюцию ведут водным раствором этанола.

Источники информации, принятые во внимание при эКспертизе

1. The Tools Biochemisty, М1-J.

Т. Wiley and sons, 1977, РР 385-388.. ° г

Подписное

Заказ 2 9 73 Тираж 7

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, Составитель С. Малютина

Редактор А. Козориз Техред М. Рейвес Корректор". Король

Похожие патенты:

Способ определения глюкозы // 953564

Способ определения @ -глобулинов сыворотки крови // 953562

Способ определения компонентов кининовой системы гладкомышечного препарата при биотестировании // 953497

Способ диоптрографии органов и тканей // 953495

Способ обработки биопсийного материала,содержащего жир // 953494

Способ приготовления серийных разведений для микротитрования // 951138

Способ выявления белков // 951121

Способ определения содержания эндогенной воды в органе // 951120

Способ определения сульфгидрильных групп в белках // 951119

Способ контроля натуральности меда // 949500

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750