Способ определения меланоцитстимулирующей активности гормональных препаратов
j953567
ОЛ ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советскик
Социалистическми
Республик
1 (6i ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12.01,81 (21) 3236695/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет
Опубликовано 23 08 82. Бюллетень № 31
Дата опубликования описания 23.08.82 (51)NL. Кл.
G 01 Й 33/48
3Ьеударетввиныв квюитвт
СССР ие авлви взвбрвтввкк и открытий (53) УД К616.087 (088.8) B. А. Гопиченков, О. В. Бурлакова, Е. Н. Капистратова,,Б B П 3 А С (72) Авторы (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕЛАНОБИТСТИМУЛИРУЮШЕЙ
АКТИВНОСТИ ГОРМОНАЛЬНЫХ ПРЕ ПАРАТОВ
Изобретение относится к фармакопо гии, а именно опредепению активности гормональных препаратов.
Известен способ определения меланоцитстимулируюшей активности гормонапь5 ных препаратов путем оценки. биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата (1).
Однако известный способ трудоемок и длителен (5 сут) и требует дорогосто- 10 яших животных, Бель изобретения — ускорение способа.
Uemü достигается тем, что согласно способу определения меланоцитстимулируюшей активности гормональных препаратов путем оценки биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата, в качестве пабора« торных животных используют личинки травяной лягушки Race 1ет огсц,при этом 10 их помешают в темноту, далее отбирают посветлевших личинок, разделяют их на группы и погружают в водные растворы испытуемого препарата разных концентра2 ций, затем вновь помещают в темноту на 30-35 мин и по степени потемнения кожи в отдельных группах личинок определяют активность препарата.
Пример 1. При определении azтивности препарата кортикотропина берут головастиков травяной лягушки, приготавливают ряд водных разведений препарата разной активности, Ед./мп: 2; 1,75; 1,50; 1,25; 1,00, исходя иэ того, что исходная активность кортикотропина маркирована как 40 Ед/мл.
Головастиков помещают s темноту и посветлевших личинок погружают в приготовленные растворы по 7-9 штук в каждый и снова помещают в темноту. Через 30 мин после начала опыта головастиков просматривают. Потемнение личинок происходит только в группе, погру женной в раствор, где активность кортикотропина составляет 2 Ед./мл. Отсюда делают вывод, что порог активности, вы-, зывающий потемнение головастиков, 1,82,0 Ед/мл.
Составитель С. Малютина
Редактор А. Козориз Техред М,Жйвес Корректор И Муска
Заказ 6269/73 Тираж 887 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, K-35, Раушская наб., д, 4/5
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, уп, Проектная, 4
3 9535
Н р и м е р 2. При определении мепаноцитстимулируюшей активности субпимированного сырья (цельные свиные гипофизы) приготавливают экстракты сублимированного сырья разной концентрации. 3 ,Бля этого измельченный порошок сублимированного сырья перемешивают в воде на магнитной мешалке в течение,1 ч.
Объем воды и навеску порошка подбирают таким образом, чтобы концентрация исследуемого вещества составила 100О мгlмл.
Через 1 ч экстракт фильтруют через два слоя марли и готовят растворы, концент-. рация исследуемого сырья в которых составляет мг/мл: 10; 5i 2,5; 1, Голо- 15 вастиков, предварительно посветлевших в темноте, разделяют на группы по 79 шт. ь каждой и помешают в приготовленные растворы. Через 30 мнн головастиков просматривают. 20
Показано, что потемнение происходит в растворах с концентрацией 2,5 и 1,0 мг/мл.
Отсюда делают вывод, что активность препарата 3-5 мг/мл.
Предложенный способ позволяет умень-25 шить затраты на содержание и приобретение экспериментальных животных. Рабочее время на проведение одной пробы сокрашается примерно s 25 раз.
Форм ула изобретения
Способ определения меланоцитстимулируюшей активности гормональных препаратов путем оценки биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата, о т л и ч аю ш и и с я тем, что, с целью ускорения способа, в качестве лабораторных животных используют личинки травяно лягушки Ксща teynpovapiпри этом их п мешают в темноту, далее отбирают по светлевших личинок, разделяют их на группы и погружают в водные раство испытуемого препарата разных концентраций, затем вновь помешают в темноту на 30-35 мин и по степени потемнения кожи в отдельных группах пичинок определяют активность преларата.
Источники информации, принятые во внимание прй экспертизе
1. Биологический метод определения
АКТГ. Государственная фармакопея СССР, изд, IX, Медгиз, 1961, с. 837.
