N, n @ -бис-(2-амидиноэтил)2-амино-4,6-диметил-3н-3- оксофеноксазин-1,9-дикарбоксамид дигидрохлорид, обладающий противоопухолевой активностью

 

СООЭ СОВЕТСКИХ сОцИАлистичесних

РЕСПУЬЛИН

„.,SU„„1088

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

НИ=С СН2(З2ИН

1 нс ик, с0

MHOH2GH20=MH

1 I

МН2 НИ

Н2 сн, ностbe

НИ=С(Н2("Мг Н

HCl. ИН2 СО

NHCHgOH20=NH

ИН2 Нй

NH2

0 сн>

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ по изОБРетениям и ОтнРытиям

ПРИ ГКНТ СССР (21) 3513743/04 (22) 22.11.82 (76) 23. 04.92. Бюл., N 15 (71) Ленинградский технологический институт им. Ленсовета и Всесоюзный онкологический научный центр (72) О.Ф. Гинзбург, F.Í. Глибин, M.À. Кривцова, F.Б. Попова, В.П. Софьина и Н.П. Яворская (53) 547.867.7.03 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

1: 677293 кл. С 07 С 119/00, 1977.

ЕН3 обладающий противоопухолевой активИзобретение относится к новому биологически активному соединенению

l а именно к N, N -би с — (2-амидиноэ т ил }обладающему противоопухолевой актив" ностью, (51)5 С 07 0 265/38 A 61 К 31/535

2 (54) N,N -БИС- (2»АМИДИНОЭТИЛ) -2-АМИН0-4,6-ДИМЕТИЛ-3Н-3-0КСОФЕНОКСАЗИН"

1э9 ДИКАРБОКСАМИД ДИГИДРОХЛОРИДэ ОБ"

ЛАДЙОЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВH0CTbl0

157) N, И -Бис- (2-амидинозтил) -2 "амино4,6-диметил-3Н-3-оксофеноксазин-1,9" дикарбоксамид дигидрохлорид формулы

2-амино-4,6-диметил-3Н" 3-оксофеноксазин-1,9-дикарбоксамид дигидрохлориду Формулы I указанное свойство позволяет предполагать возможность применения этого соединения в медицине.

3 108Р31с 4, известен актиноцил-бис-(-диметил- аминопропил)амин Формулы

HACH)))NCHzCH(CHzNH NHCHRGH2CH>N(CH3)2 (I

00 обладающий противоопухолевой активностью, Целью- изобретения является расширение арсенала соединений, обладающих противоопухолевой активностью., Эта цель достигается соединением

Формулы I, обладающим противоопухолевой активностью.

Соединение Формулы I получают путем конденсации N îêèñè 6-метилциклогекса-3а,5-диено(4,5-с1)изоксазолин3,7-диона, образующейся при обработке 2-нитро-3-окси-4-метилбензойной кислоты дициклогексилкарбодиимидом, с Р -аминопропионитрилом, превраще" нием продукта конденсации в гидрохлорид N-(2-амидиноэтил)-2-нитро-3окси-4-метилбензамида последовательными обработкамиНС1 в абсолютномспирте, насыщенным растворбм аммиака в абсолютном спирте и снова спирто- вым раствором НС1, восстановлением полученного гидрохлорида водородом в присутствии Pd-черни и окислением образующегося при этом гидрохлорида

N-(2-амидиноэтил)-2-амино-3-окси- }" .метилбензамида п-хиноном.

Пример. N-(2-Цианэтил)-2нитро-3-окси-4-метилбензаиид.

К раствору 1 г 2-нитро-3-окси-4метилбензойной кислоты в 10 мл этилацетата добавляют раствор 1,04 г дициклогексилкарбодиимида в минимальном обьеме этилацетата. При этом выпадает дициклогексилмочевина и раст" вор приобретает-яркую красно-оранжевую окраску (образование N-окиси б-метилциклогексена-3а, 5-диено " .,5дj-изоксазолин-3,7-диона). В реако ционную массу, охлажденную до 0-5 ь, добавляют в один прием 1,5 мл -аминопропионитрила, свежеполученного пиролизом дицианэтиламина при температуре ?00-230 С. Реакционную смесь перемешивают 1-2 ч, добавляют 0,1 н.

НС1 до рН 1 (50 мл), отфильтровывают осадок и далее целевое соелинение

50 ыдел ют из осадка и этилацетатного слоя. Осадок обрабатывают насыщенным раствором (-икарбоната натрия, отфильтровывают дициклогексилмочевину, маточник подкисляют и отфильтровывают N (?-цианэтил)-2-нитро-3-окси-4-метилбензамид. Вторую порцию этого соединения получают при упаривании этилацетатного слоя. Остаток от упаривания растворяют в бикарбонате натрия, профильтровывают через уголь" ную подушку, подкисляют и отфильтровывают целевое соединение. Общий выход 1,015 г (P0 ;). T.ïë. 169170,5 С (из воды 1:100). ХроматограФически однороден на пластинах Силуфол П -254 в системе бутанол — уксусная кислота — вода (?:1:1}.

Найдено,,: С 53,21; Н 4,62;

N 16,80

C«НИ КЬ04

Вычислено,",". С 53,00; Н 4,,2;

И 16,87. <

N-(2-Амидиноэтил)-2-нитро-3-окси"

4-метилбензамид.

0,25 г N †(2-цианэтил)-2-нитро-3окси-4-метилбензамида растворяют в 10 мл абсолютного спирта, насыщенного НС1 (9 н. }, оставляют на ночь.

Упаривают в вакууме. Следы НС1 удаляют прибавлением и упариванием по

15 мл абсолютного спирта и безводного бензола (3 раза). Получают светло-желтый кристаллический продукт иминоэфира, который растворяют в

10 мл абсолютного спирта, насыщают сухим аммиаком. Через 24 ч оранжевые кристаллы отфильтровывают, промывают спиртом, сушат. Выход 0,14 г (5М). Разлагаются без плавления при

237 С °

Найдено,З: С 48,49; Н 5,43;

N 21,22, С «Н,,Р,10,1

Вычислено,.",", С 49,52; Н 5,30;

N ?1,00.

Ы-(2-Амидиноэтил)-2-нитро-3-окси"

4-метилбензамид гидрохлорид.

Торможение роста опухоли, l на срок, после прививки, .дни

Разовая доза мг/кг/интер- .

BBл число введений

Продолжи - тельность эффекта, дни

Препарат

Дигидрохлорид актиноцил-бис-(?амидиноэтил)амина

?5/24x5 61

0,04/24x5 85

70

12

Актиномицин Д

Актиноцил-бис($-диметиламинопропил)амин

24,0

75/24х5

71,8

19,5

5 10883

0,103 г N-(2-амидиноэтил)-?-нитро3-окси-4-метилбензамида вносят в

5 мл абсолютного. спирта и добавляют

1 мл 9 н. спирта, насыщенного НС1, Образовавшиеся кристаллы отфильтровывают, промывают спиртом и эфиром.

Выход О,088 г (76О, ). Разлагается без плавления при 210-214 Г„

Найдено l: C1 11,75. 10

С

"Вычислено,й: С1 11,65 1 Nt-f>gg-(2-амидиноэтил)-2-амино4, 6-диметил-3Н-3-оксофенокса зин-1, 9дикарбоксамид дигидрохлорид(актиноцил"бис-(2-амидиноэтил)амин j °

0,46 г гидрохлорида N-(2-амидино- этил)-2-нитро-3-окси-4-метилбензамида восстанавливают водородом в присутствии Pd-черни в 70 мл спирта при 2О комнатной температуре и атмосферном, давлении. По завершении восстановления, о чем судят по поглощению расчетного количества водорода, катализатор отфильтровывают и к фильтрату добавляют раствор 0,242 г и-хинона в минимальном объеме спирта. На следующий день образовавшиеся кристаллы отфильтровывают, промывают спиртом и абсолютным эфиром, сушат, Выход

0,34? г (83,54 . Плавится с разложе" нием при р 300 С, Начало разложения ?70 C Кристаллизуют из спирта.

Хроматаграфически однороден на пластинах Силуфол IJV-?54 в системе хлороформ, насыщенный аммиаком, †. метанол 35

,9:1). о ццк,, нм (Е 10 ) (с = 3Х н10 моль/л, вода): 240 (3, 5), 43 (2,48) 4,50 (?,55) .

Найдено, i: С 45,78; Н 5,78;

С1-12,3?; N 20,92 4О

Cg@HZ6N@04 2 HC1 ° 2 Н О

18 6

Вычислено, : С 45,9?; Н 5,60;

С1 12,32; N 19,5..

Спектрофотометрическое титрование а ктиноцил-бис- (2-амидиноэтил) амина дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК) из селезенки крупного рогатого скота (марки Ь Олаинского завода химреактивов) в натрийфосфатном буфере (P 0,001) показало, что полученное нами соединение комплексообразует с ДНК: Pi> >< - -величина, характеризующая количество лиганда, приходящееся на пару нуклеотидов flHK при на" сыщении комплекса, - 1,?; Rett,1- - вели чина, характеризующая количество ли1-анда, связанного интеркаляционным путем, - 0,45.

Данные о противоопухолевой активности актиноцил-бис-(2-амидиноэтил)— амина получены в лаборатории экспериментальной химиотерапии ВОНЦ AMH

СССР 1ll чиччо на перевиваемой опухоли мышей аденокарциноме АК 755. Критерий активности - процент торможения роста солидной опухоли. Для сравнения приведены данные по торможению роста той же опухоли актиномицином Д и актиноцил-бис-(g-диметиламинопропил)амином. Приведенные в таблице данные свидетельствуют о том, что соединение формулы I rtpo" являет противоопухолевую активность на перевиваемой опухоли мышей АК 755, близкую к тактовой для актиномици" на Д и актиноцил-бис-(/-диметиламино" пропил)амина. При этом лечебный эфФект после окончания лечения дигидрохлоридом актиноцил-бис-(2-амидино .. этил)амина сохраняется дольше, чем это имеет место в случае лечения актиномицином Д и актиноцил-бис-(/диметиламинопрояил)амином.