Бисульфитное производное (1-фенил-2-метилиндено /1,2- @ / пиррол-4-онил-3)глиоксаля обладающее противовирусной активностью

 

Бисульфитное производное

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

СОСН(ОН)80фа си! с,н, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3473600/23-04 (22) 19.07.82 (46) 30.12.85. Бюл. Ф 48 (71) Всесоюзный ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследоватЕльский химико-фармацевтический институт им. С.Орджоникидзе (72) А.Н.Гринев, И.Н.Нестерова, N.Â.Мезенцева, Г.Н.Першин, И.С.Николаева, Т.В.Пушкина и Е.А.Голованова (53) 547.759(088.8) (56) 1. P.V.Padamanabhan, К.1.Jagannadha Kao, D.V.Komana, S.V.Ramalas., "Synthesis of condensednitrogen

hetегоcycles" derived from indan

1,3 dione", Hetегоcycles 1981, v. 16,. и 1, р.р. 1-4.

2. Гринев А.Н. и др. Новый противовирусный препарат флореналь

"Химико-фармацевтический журнал"

1976, М 10, с.115 †1.

ÄÄSUÄÄ 1098228 . A @4 С 07 D 227/04 A 61 К 31/40 (54) БИСУЛЬФИТНОЕ ПРОИЗВОДНОЕ (1 -ФЕНИЛ-2-ИЕТИЛИНДЕНО(1,2-в)ПИРРОЛ-4-0НИЛ-З)ГЛИОКСАЛЯ, .ОБЛАДАЮЩЕЕ

ПРОТИВОВИРУСНОИ АКТИВНОСТЬЮ, (57) Бисульфитное производное (1 — фенил-2-метнлиндено(1,2-в)пиррол-4-онил-3)глиоксаля формулы обладающее противовирусной активностью.

1098228

COCH(05SO8Na

СБН, О

-д С6Н5 !

СОСН(ОН)БО Мо и О .-3 2 (zzz) Т. пл. 175-176 С (из метанола).

55 Найдено, Ж: С 83,74; Н 4,91;

N 5,39.

Изобретение относится к новому химическому биологически активному соединению класса производных индено(1,2-в)пиррола, а именно бисульфитному производному (1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)пиррол-4-онил-3)глиоксаля формулы обладающему противовирусной активностью.

Наиболее близким по структуре является соединение формулы

О биологической активности этого соединения- сведений нет $1).

В настоящее время в медицинской практике используется бисульфитное производное флуоренонилглиоксаля формулы

В качестве лекарственного препарата под названием флореналь Е 23.

Флореналь в опытах .in vitro обладает выраженным противовирусным действием в отношении вируса гриппа

A(PR)8) 34 (HON1), однако в отношении вируса герпеса в клеточной культуре его активность практически незначительна. Цель изобретения †. соединения ряда индено (1,2-в)пиррола, обладающие улучшенными противовирусными свойствами и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается бисульфитным производным (1-фенил"

-2-метилиндено(1,2-в)-пиррол-4-онил-3)глиоксаля формулы (1); кото5

1 5

50 рое получают. путем декарбэтоксилирования 1-фенил-2- етил-3-карбэтоксииндено(1,2-в)-пиррол-4-она под действием гидрохлорида пиридина при

200-220 С в атмосфере инертного газа (азота), ацилирования выделенного 1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)— пиррол-4-она хлористым ацетилом в среде бензола в присутствии хлористого алюминия при комнатной температуре, окислении полученного 1-фенил-2-метил-3-ацетилиндено(1,2-в)-пиррол-4-она двуокисью селена в среде водного диоксана при кипячении с последующей обработкой образующегося (1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)-пиррол-4-онил-3)глиоксаля водным раствором бисульфита натрия при

70-75 С.

Процесс может проходить как с выделением, так и без выделения промежуточного соединения У-(1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)-пиррол-4-онил-3)глиоксаля.

Пример. Получение бисульфитного производного (1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)пиррол-4-онил-3-глиоксаля (1) (без выделения промежуточного продукта).

1. Получение 1-фенил-2-метилиндено (1, 2-в) пиррол-4-она.

Смесь 3,3 г (0,01 моль) 1-фенил-2-метил-З-карбэтоксииндено(1,2-в)-пиррол-4-она и 3,31 г (0,03 моль) гидрохлорида пиридина перемешивают при 200 С в течение 1 ч в токе азота. Реакционную массу выливают в воду, подкисляют разбавленной соляной кислотой до рН 5, образовавшееся масло экстрагируют хлороформом (Зх50 мл). Органический слой промывают водой, растворитель упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 10 мл хлороформа и наносят на колонну (диаметр 30 мм, длина 180 мм) с силикагелем. Злюируют хлороформом.

Разделение веществ контролируют хроматографически.

Получают 0,6 г (23,27) 1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)-пиррол-4-она в виде кристаллов бордового цвета, растворимых в хлороформе, бензоле, ацетоне, при нагревании в спирте, N 5,21.

Вычислено, Ж: С 83,37, Н 5,05, 1098228

45

С„ Н„NO. Мол. вес 259,310.

2. Получение 1-фенил-2-метил-3-ацетилиндено(1,2-в)-пиррол-4-она.

К раствору 1,3 г (0,005 моль)

1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)-пиррол-4-она в 20 мл бензола при комнатной температуре и при перемешивании порциями прибавляют 1,9 г (0,015 моль) хлористого алюминия. Реакционную массу выдерживают при комнатной тем- 10 пературе в течение 20 мин, затем медленно прибавляют 1 мл (0,012 моль) хлористого ацетила. Смесь выдерживают при комнатной температуре в

0 течение 1,5 ч и затем при 50-55 С 15 в течение 30 мин. Реакционную массу выпивают в воду, подкисляют концентрированной соляной кислотой до рН 5. Органический слой отделяют, водный — экстрагируют бензолом (2 х 20 х 50 мл). Экстракты объединяют, про.мывают водой, растворитель отгоняют.

Получают 1,07 r (627) 1-фенил-2-метил-3-ацетилиндено(1,2-в)пиррол-4-она в виде кристаллов оранжевого 25 . цвета, растворимых в хлороформе, бензоле, ацетоне и при нагревании— в спирте, т. пл. 223-224 С (из метанола).

Найдено, 7: С 79,65; Н 5,20;

N 4;83.

Вычислено, Ж: С 79,72; Н 5,02;

N 4,65.

С о Н ь ИО . Мол. вес 301,348.

К раствору 0,6 г (0,005 моль) двуокиси селена в 5,5 мл смеси, состоящей из 5 мл диоксана и 0,5 мл воды, при 60-65 С при перемешивании добавляют раствор 1,5 г (0,005 моль) 1-фенил-2-метил-3-ацетилиндено(1,2-в)-пиррол-4-она в

35 мл диоксана. Реакционную массу кипятят 3,5 ч, затем охлаждают, отфильтровывают от селена. Маточник упаривают в вакууме. Остаток содержит (1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)— . пиррол-4-онил-3)глиоксаль. Продукт выделен в виде, кристаллов розового цвета, т. пл. 222-224 С (из 60Х спирта).

Найдено, 7: С 72,12, Н 4,45; N 4,05.

Вычислено, 7.; С 72, 13; Н 4,53;

N 4,20.

С о Н, ИО, Н, О. Мол. вес 350,35.

Далее остаток растворяют в 15 мл

407-ного этилового спирта и при 7075 С прибавляют к нему 1,75 мл

40Х.-ного раствора бисульфита натрия.

Реакционную массу охлаждают до комнатной температуры и выдерживают

2 ч, затем приливают 30 мл воды, охлаждают до 0 минус 5 С, выпавший осадок отфильтровывают, сушат.

Получают 0,81 r (40X) бисульфитного производного (1-фенил-2-метилиндено(1,2-в)пиррол-4-онил-3)глиоксаля (1) в виде кристаллов красного цвета, растворимых в спирте и при нагревании в воде.

Найдено, 7: С 56,98, Н 3,37;

N 3,38, S 7,77.

Вычислено, 7: С 57,22, Н 3,36

N 3,34; S 7,64.

С о H,ö ИОь Na. Мол. вес 419,393.

Исследования биологической активности предлагаемого соединения проводились в лаборатории химиотерапии инфекционных заболеваний ВНИХФИ.

Биологическую активность соединения изучали в опытах с вирусом гриппа A(PR)8)34 (HON1) и вирусом герпеса простого 1 типа штамм 1-С.

В опытах с вирусом гриппа вещество 1 в концентрациях 1000, 100, 10 и 1 мкг/мл соединяли с 1,10 и !00 стопроцентными эмбриональными инфекционными дозами вируса (ЭИД< ).

Смеси выдерживали в течение 1 ч при 14 С и вводили в аллантоисную полость 9-дневных куриных эмбрионов, через 48 ч инкубации эмбрионов в термостате при 37 С определяли титр вируса гриппа в аллантоисной жидкости с помощью реакции гемагглютинации.

Биологическую активность заявляемого соединения сравнивали в опытах

in vitro с активностью известного биологического аналога-флореналя (?1?).

Результаты сравнительного биоло». гического исследования приведейы в таблице.

1098228

Концентрация соединений, мкг/мл

Соединения, 10

1000

100

Флореналь (1) 100

10

100

100

100.

: Составитель И. Герасимов

Редактор Л.Письман Техред С.Мигунова Корректор Г. Решетник

Тираж 383 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 8137/4

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,, 4

Как видно из таблицы, полученное соединение оказывает выраженное вирулицидное действие в отношении вируса гриппа A(PR)8)34 (HON1) .

Далее исследовали действие данного соединения на вирус герпеса простого, выращенного в клеточной культуре ФЭК.

В пробирки с клеточной культурой вводили по 0,4 мл 1, 10 и 100 пятидесятипроцентных тканевых цитопатических доэ (ТЦЦзо) указанного вируса. После часового контакта с клетками культуры при комнатной температуре вирус сливали и вводили по

1 мл вещества 1 в максимально переносимой (2,5 мкг/мл), а также в меньшей (2, 1 мкг/мл) концентрации.

Через 48 ч инкубации клеточной кулье туры в термостате при 37 С результаты учитывали по отсутствию нли наличию цитопатического действия (ЦПД) у исследуемого соединения по сравнению с контролем.

Установлено, что предлагаемое соединение (1) инактивирует 10 ТЦДзо

I вируса в концентрации 2,5 мкг/мл, l5 в то время как флореналь — в концентрации 5 мкг/мл. Данные исследования свидетельствуют о повышенной эффективности соединения (1) в отношении вируса герпеса простого 1

20 тина штамм 1-С.

Токсичность соединения (1) изучена на белых нелинейных мышах массой 18-20 г. Вещество вводили

per os в 0,5 мл 1Х крахмального ге25 ля однократно. Наблюдение за выживаемостью и состоянием животных проводили в течение 14 дней.

Токсичность для мышей при однократном введении составляет для

3О соединения (1) ЛДзо- 875 мг/кг, для флореналя — ЛД О-1025 мг/кг.

Таким образом, соединение (1) малотоксично и обладает выраженной противовирусной активностью, превосходящей флореналь по силе действия, в отношении вируса герпеса простого

1 типа штамм 1-С и сопоставимой активностью с флореналем в отношении вируса гриппа A(PR)8) 34 (HON1) .