ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3545404/28-14 (22) 10.12.82 (46) 23.04.86. Бюл. ¹ 15 (71) ЛГУ им.А .А.Жданова (72) В.Ю.Васильев, Ю.А.Лазебник, В.А.Мищенко, Е.С.Северин и В.И.Мишин (53) 577.15.08 (088.8) (56) Clinica Chimica Acta, 1974, vol.56, № 3, р.221-234. .(54)(57) СОСТАВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИКЛИЧЕСКОГО АДБНОЗИН вЂ” 3,5-МОНОФОСФАТА, содержащий буфер, ингибитор э фосфодиэстеразы:, 8 . вЂ” Н-циклический

I I аденоэин-3,5 -монофосфат и цикличес-! кую аденоэин-3,5 -монофосфатэависимую протеинкиназу, о т л и ч а ювЂ” шийся тем, что, с целью повышения точности определения, в качестве ингибитора фосфодиэстеразы используют теофиютлин,а в качестве буферавЂ”

0,02-0,05 М цитратный буфер рН 4,44,8 при следующем соотношении компонентов, мас.X:

0,02-0,05 М цитратный буфер рН

4,4-4,8 0,42-1 05

Теофиллин О, 10-1, 39

8- Н-Циклический ! I аденозин-3,5 монофосфат

1226311

О., 42-1, 05

О, 10-1,39

0 9х10-

-7

1, 2х10

Составитель E.Æèòíèêîíà

Техред Л.Олейник Корректор M.Äåì÷èê

Редактор А.Шишкина

Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.,д.4/5

Заказ 2123/4 1

Производственно-полиграфическое предприятие„г. Ужгород, ул.Проектная, 4

Изобретение относится к молекулярной биологии и медицинской биохимии, в частности. к способам анализа биологически активных соединений, регулирующих ответ клеток на внешнее ноэдействие на уровне фосфорилирования белков цитоплазмы и генетического аппарата, и может быть яспользовано для определения содержания циклического аденозин-3 5 -монофосфата (цАМФ) в клетках и в тканях организма, а также в биопсийном материале, сыворотке, форменных элементах крови, ликворе и моче животных и человека.

Определение уровня цАМФ имеет диагностическое значение при болезнях эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной систем, при аллергических, инфекционных заболеваниях и злокачественных новообразованиях.

Цель изобретения вЂ” повышение точности определения.

Способ при использовании предлагаемого состава осуществляют следующим образом.

В серию пробирок вносят 100 мкл состава, содержащего мас.Е:

0,02-0,05 М цитратный буфер рН

4,4-4,8

Теофиллин

8- Н цАИФ цАМФ-зависимая протеинкиназа 0,010-0,015

Вода Остальное

В часть пробирок нносят 50 мкл анализируемого образца. Содержимое всех пробирок перемешивают и инкубируют в течение 2 ч при 2-4 С.

После проведения реакции для осаждения нуклеотид-белкового комплекса во все пробирки добавляют по 500 мкл насыщенного раствора сульфата аммония, охлажденного до 2 С, тщательно

0 перемешивают и через 10-15 мин центо рифугируют в течение 10 мин при 4 С.

Осадок растворяют. в 500 мкл воды. Иэ каждой пробирки отбирают по 400 мкл раствора для измерения радиоактивности нуклеотид-белконого комплекса.

Среднее значение радиоактивности н контрольных пробах беэ анализируемого образца (пробы 1-2) принимают за фоновую величину, которую вычитают из величины радиоактивности всех остальных проб. Среднее значение радиоактивности проб 3-4 обозначают как Со вЂ” это количество 8- H цАМФ, 3 связанное в отсутствии намеченного цАМФ. Значение радиоактивности в пробах 5-14 обозначают как С„. Рассчитывают отношение С /С» для каждой пробы. Строят калибровочную кривую, представляющую зависймость С /С» от количества цАМФ в анализируемых пробах,по ней находят количество цАМФ н анализируемых пробах.

Состав для определения циклического аденозин-3,5- монофосфата

Способ определения токсичности полимерного материала // 1224723

Способ приготовления гистологических срезов из обезвоженной ткани для растровой электронной микроскопии // 1224652

Способ прогнозирования невынашивания беременности у женщин с привычным невынашиванием "неясного генеза // 1223888

Способ определения степени кислотности слизистой оболочки желудка // 1223847

Способ оценки состояния лимфоцитарной системы организма больного легочными заболеваниями // 1223146

Способ определения титра антиэритроцитарных антител // 1222277

Устройство для подачи биологических жидкостей в анализатор // 1221600

Способ определения фармакологической активности препаратов // 1221599

Способ определения степени повреждения эритроцитов // 1220636

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750