Способ диагностики почечной недостаточности
Изобретение относится к урологии . Цель изобретения - повьппение точности и специфичности способа. Сыворотку кррви обрабатывают 10%-ной трихлоруксусной кислотой и центрифугируют . В супернатанте дансилируют пептиды по E-NH,j-лизину и ОН-тирозину с последующим кислотным гидролизом . При хроматографии дансильных производных аминокислот вьщеляют пептиды среднемолекулярного веса. Определяют их уровень по интенсивности флюоросцеисии дансиллизина. При увеличении содержания пептидов среднемолекулярного веса по сравнению с нормой диагностируют почечную недостаточность 2 табл. ю о со
СОЮЗ СО8ЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
М А BTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3605519/28-14 (22) 06.04.83 (46) 30.06.86. Бюл. Р 24 (71) Институт биоорганической химии
АН, УЗССР (72) Ш.И. Салихов, LI.Ã. Мухамедиева, Ж.А. Абдурахманова, Н.П. Пак, .У.А. Арипов и А.С. Садыков (53) 61.6.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
Ф 931171, кл. А 61 В 10/00, С 01 N 33/48, 1982. (54) СПОСОБ. ДИАГНОСТИКИ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ (57) Изобретение относится к урологии. Цель изобретения — повышение
„„SU„„1240413 А1 g 4 А 61 В 10/00 G 01 N 33/48 точности и специфичности способа.
Сыворотку крови обрабатывают 107.-ной трихлоруксусной кислотой и центрифугируют. В супернатайте дансилируют пептиды по Е-NH -лизину и ОН-тиро1 зину с последующим кислотным гидролизом. При хроматографии дансильных производных аминокислот выделяют пептиды среднемолекулярного веса. Определяют их уровень по интенсивности флюоросценсии дансиллизина.
При увеличении содержания пептидов среднемолекулярного веса по сравнению с нормой диагнос тируют почечную недостаточность
2 табл.
1240413
Изобретение относится к мединице, а именно к урологии.
Цель изобретения — повышение точности и специфичности способа путем определения концентрации пептидов 5 среднемолекулярного веса по лизину.
Способ осуществляют следующим образом.
После обработки сыворотки крови
10Х-ной трихлоруксусной кислотой и отделения центрифугированием выпавших в осадок высокомолекулярных белков дансилируют пептиды, оставшиеся в супернатанте по Е"NH -лизину и ОНтирозину. При кислотном гидролизе пептидов с последующим хроматографи-. рованием дансильных производных аминокислот на пластинке с тонким слоем силикагеля определяют концентрацию . пептидов среднемолекулярного веса по интенсивности флюоресценции дансиллизина (Е-DNS-лизина) при
Ъ365 ммк. Результаты применения предлагаемого способа приведены в табл. 1. 25
Пример ° Больной Р. При поступлении состояние тяжелое, больно го беспокоит тошнота, рвота, слабость, в контакт вступает с трудом, положение в постели вынужденное, кож- Зб ные покровы бледные, выраженный цианоз носогубного треугольника; А/Д
110/60, в легких хрипы. Несмотря на проведение программного гемодиализа, состояние остается тяжелым, больной возбужден, кричит, бредит. У больного констатировав психоз.
Обследование: мочевина 347 мг/7., креатинин 25,1 мг/ ., клубочковая фильтрация 1,8 мл/мин, реабсорбция 737.40
Эр. 1810000, Нв. 30 ед.
Диагноз: хронический диффузный гломерулонефрит, терминальная стадия хронической почечной недостаточности, состояние тяжелое. Содержание пепти- 45 дпв при определении предлагаемым способом колебалось от 8,0 до 9,0 нм, при определении известным способом, от 1,3 до 1,8 усл. ед.
При обследовании больных на наличие пептидов средней молекулярной массы известным способом у 45 больных из 50 были обнаружены повышенные по сравнению с нормой значения (табл. 2).
При обследовании больных предложенным способом у 23 больных пептидов средней молекулярной массы не обнаруживали. У всех этих больных при обследовании стандартными методами: по уровню мочевины и креатинини в крови и моче и данным по реабсорбции и клубочковой фильтрации, почечная функция оказалась в норме.
У 5 больных обнаружено незначительное увеличение содержания пептидов.
У этих больных обнаружили латентную стадию заболевания почек, поскольку значения стандартных биохимических анализов были в верхних границах допустимой нормы. У 22 больных обнаружено повышенное значение содержания пептидов.
Формула изобретения
Способ диагностики почечной недостаточности лутем обработки сыворотки крови 10Х-ной трихлоруксусной кисло.той с последующим центрифугированием и исследованием супернатанта, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности и специфичности способа, в супернатанте дансилируют пептиды по Е-NH -лизину и ОНтирозину с последующим кислотным гидролизом, далее путем хроматографии полученного раствора выделяют пептиды среднемолекулярного веса, определяют их уровень в ультрафиолетовом свете и при увеличении их содержания по сравнению с нормой диагностируют почечную недостаточность.
1240413
Таблица I
Результаты применения способа диагностики почечной недостаточности
Диагноз
Статический покаP
Количество больных
Периоды болезни затель концентрации пептидов М м, нм Здоровые доноры .
Обострение забо2,75 0,17.(0,001 левания
Ремиссия заболе14
0,001
1,16 + 0,14 вания
До применения ге-. модиализов 16 (0,001
6,93 0,24 недостаточности
4,5 0,22 (0,001
После пересадки почки 4
0,5. 2 0,08
В момент криза отторжения
5,63 + 0,28 (0,001
P — статическая достоверность по отношению к норме (здоровым донорам) Пиелонефрит, умеренное нарушение
:,функции почек
Терминальная стадия хронической почечной
При применении программного гемодиализа 16
1240413
Т а блица ?
Содержание пептидов средней молекулярной массы у больных с различной патологией
Количество больных
Количество больных
Концентрация пептидов, выявленная при использовании
23 5
0,0
0 180-0,290
0,450-1,40
Составитель M. Поздняк
Техред Л.Олейник
Редактор Л. Пчелинская;
Корректор Г. Решетник
Заказ 3425/3
Тираж 660
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Подписное
Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 известного способа, у сл ° ед
Концентрация пептидов, выявленных предложенным способом, нм
1,0-2,0
2,0-8,0
