Способ получения 7- @ 2- (2-аминотиазол-4-ил)- @ z @ -2-(2- карбоксипроп-2-оксиимино)ацетамидо @ -3- @ (1-метил-1- пирролидиний)метил @ -3-цефем-4-карбоксилата

 

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности 7- 2-(2-аминотиазол-4-ил)- гЗ-2-(2-карбоксипроп-2-оксиимино)аи,етамидо -3| ( 1-метил-1-пирролидиний)метил -3-цефем-4-карбоксилата (ЦК), проявляющего антибактериальную активность, который может быть использован в меди- 1цше. Цель - создание более активных веществ указанного класса. Получение ЦК ведут из а) смеси бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4- карбоновой кислоты, (2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино )-2:-(2- тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты , дициклогексилкарбодиимида и N- гидроксибензтриазола в среде органического растворителя с образованием бензгидрштового эфира З-хлорметил-7-

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЯ4АЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5D 4 С 07 D 501 46

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕКИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3910504/23-04 (62) 56080i/23-04 .(22) 14.06.85 (23) 03.03.83 (31) 357534 (32) 12.03.82 (33) US (46) 23.07.87. Бюл. К 27 (71) Бристоль-Мейерэ Компани (US) (72) Симпеи,Абураки, Хадэиме Камати, Юкио Нарита, Юн Окумура и Такаюки

Наито (JP} (53) 547-869.1.07(088.8) (56) Выложенная заявка ФРГ У 3037102, кл. С 07 11 501/46, опублик. 1981.

Европейский патент Р 0045937, кл. С 07 D 501/46, опублик.1982. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 7-(2-(2-АМИНОТИАЗОЛ-4-ил) -t Е )-2- (2-КАРБОКСИПРОП2-ОКСИИИ НО) АЦЕТАМ1ЩО )-3- t(1-МЕТИЛ1-ПИРРОЛИДИНИЙ) МЕТИЛ )-3-ЦЕФЕМ-4-КАРБОКСИЛАТА (57) Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности 7(2-(2-аминотиазол-4-ил)-(Еj-2-(2-карбоксипроп — 2-оксиимино)ацетамидо -3((1-метил-1-пирролидиний)метил)-3-цефем-4-карбоксилата (ЦК), проявляющего антибактериальную активность, который может быть использован в медицине. Цель — создание более активных веществ указанного класса. Получение

ЦК ведут из а) смеси бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4карбоновой кислоты, I Z)-2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-. (2-: тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты, дициклогексилкарбодиимида и Nгидроксибензтриазола в среде органического растворителя с образованием беизгидрилового эфира 3-хлорметил-7((Z)-2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп2-оксиимино)-2-(2 †тритиламинотиазол4-ил)ацетамидо)-3-цефем -4-карбоновой кислоты (ПР) или б) из смеси бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметил-3цефем-4-карбоновой кислоты с бис(триметилсилилил)ацетамидом и хлорангидридом (Z)-2"(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиаэол-4-ил)уксусной кислоты с получением ПР. Далее ПР обрабатывают NaI с получением бензгидрилового эфира

7-((Е3-2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп2-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиаэол4-ил)ацетамидо-3-иодметил1-3-цефем- 4карбоновой кислоты, который затем подвергают реакции с N-метилпирролидином в органическом растворителе и кислотному гидролизу. В последнем случае происходит снятие защитных групп. Выделяют ЦК с т.пл. 160 С (с разл.). Испытания ЦК показывают его активность в отношении грамм-положительных и грамм-отрицателЬных бактерий. Поэтому ЦК может быть использован для лечения инфекционных заболеваний животных и человека при суточной дозе 5005000 мг (для взрослого человека).

1 табл.

13261

Изобретение относится к химии гетероциклических соединений, в частности к способам получения нового 7 †j2(2-аминотиазол-4-ил) †jZ ) — 2-(2-карбо. . ксипроп-2-оксиимино)ацетамидоj-3- ((!в

5 метил-1-пирролидиний) метил)-3-цефем4-карбоксилата формулы

S 10

СОО

Н С CH 15

СООН плавящегося при 160 С (разл. ), прояв — ляющего высокую антибактериальную активность, который может найти примене-20 ние в медицине.

Целью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новых соединений, обладающих фармакологическими свойст- 25 вами.

Синтез 1.

Бензгидриловый эфир 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоновой кислоты.

К суспензии РС1 (8,3 г,40 ммоль) 30 в СН С1 (100 мл) добавляют пиридин (3,2 r, 40 ммоль) и смесь перемешивают в течение 20 минут при 20 С.К смеси добавляют бензгидриловый эфир 3гидроксиметил-7-фенилацетамидо-3-цефем-4-карбоновой кислоты (5,! r, 10 ммоль) при перемешивании при -40 С в виде одной порции. Смесь перемешивают при -10 С в течение 15 мин и оставляют стоять 7 ч при -10 С вЂ” †!5. ь

К охлажденному раствору (-20 С) добав-, ° ляют пропан- 1 3-диол (10 мл) и смесь оставляют стоять 16 ч при -20 С, а затем перемешивают 20 мин при комнатной температуре. Результирующий раствор промывают ледяной водой (2х 20мл) и насыщенным водным NaCl (10 мл), осушают над ISO и концентрируют в вакууме. Резиноподобный остаток (12 r) растворяют в смеси СНС1 и н-гексана (2:1) и подвергают хроматографированию с использованием колонки с силикагелем (200 r) и того же растворителя в качестве элюента ° Содержащие целевое соединение фракции упаринают в вакууме и остаток растирают с н-гексаном,йолучая целевой продукт (2,1 r,, 51X), температура плавления о 110 С (с разложением).

95 2

ИК-спектр 1 КВг, см- : 3400, 2800,.

1785, 1725.

УФ-спектр 3„«, (EtoH) 265 нм (E см 160) .

ЯМР d (ÄÌÑÎ-.сl +СРС1 ),млн ": 3.,65 (2Н, с); 4,43 (2Н, с); 5,09(1Н, д

3=4,5 Гц); 5,24 (IH, д, J=4,5 Гц), 6,87 (IH,ñ); 7,3 (10,м).

П р.и м е р 1. 7 — (2-(2-Аминотиазол-4-ил)-(Z7-2-(2-карбоксипроп-2оксиимино)-ацетамидо)-3- ((1-метил-1пирролидиний)метил)-3-цефем-4-карбоксилат.

А. Бензгидриловый эфир 3-хлорметил — 7-((Zj-2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламино-. тиазол"4-ил)ацетамидо3-3-цефем-4-карбоновой кислоты.

Методика l.

Смесь C Z) — 2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты (l,94 г, 3,6 ммоль) дициклокарбодиимида (ДЦК)(742, мг, 3,6 ммоль) и

N-гидроксибензтриазола (486, мг, 3,6 ммоль) в тетрагидрофуране (ТГФ) перемешивают при комнатной температуре в течение 45 мин, на протяжении которых отделяется дициклогексилмоченина. Дициклогексилмочевину удаляют фильтрованием и фильтрат смешивают с бензгидриловым эфиром 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоновой кислоты (1,5 r 3,6 ммоль). Смесь перемешивают па протяжении ночи при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. Остаточное масло растворяют в

С1!С1 (20 мл), промывают насыщенным водным ИаНСОЗ и насыщенным водным

NaCI, осушают над MgSO< и упаривают до сухого остатка. Остаток (3,9 r) растворяют в н-гексане: СНС1 (1:2)

3 и пропускают через колонку с силикагелем (40 г), используя ту же систему растворителей. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривают в вакууме с получением 1,3 г (39X) продукта плавящегося при температуре свыше 100 С (разл.).

ИК-спектр „,„„,. (KBr), см : 3990, 1790, 1715, 1690.

УФ-спектр i1»« (EtoH), нм: 240 (Е 280), 265 (Е 190).

ЯМР d (CDC1)), млн : 1,45 (9Н,с), 1,63 Е 1,66 (6Н, кажд. с), 3,49 (2Н, широкий с), 4,34 (2Н, с), 4,96 (1Н, д J=4,5 HZ), 5,90 (IH,д-д J=4,5 и

7 5), б 66 (1Н, с), б 86 (1Н, с), 1326195 з

7,0-7,5 (25Н, м), 8,23 (!Н, д 3 =

=7,5 й).

Методика 2.

Раствор бензгидрилового эфира 7амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоно 5 вой кислоты (1,86 г, 4,49 ммоль) в

СН С1 (46,5 мл) обрабатывают БСА (3,33 мл, 13,5 ммоль) при комнатной температуре в течение 50 мин с полу- !О чением прозрачного раствора. К раствору добавляют раствор хлорангидрида кислоты, который получают из (Z)-2- . (2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) l5 уксусной кислоты (2,56 r, 4,49 ммоль) и РС1 (1, 12 г, 5, 38 ммоль) в метиленхлориде (26 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение получаса,. выливают в холодную во- 2 .ду (l00 мл) и экстрагируют зтилацетатом (Зх50 мл). Скомбинированные экстракты промывают водным NaC1 осушают и упаривают. Остаточный сироп (5 r) хроматографируют в колонке с силикаге-25 лем (100 r) злюированием 10:! смесью толуола и этилацетата. Фракции, содержащие целевое соединение, объединяют и упаривают с получением ,2,84 r (657) бензгидрилового эфира

3-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино-2(2-тритиламинотиазол-4-ил) ацетамидо3-цефем-4-карбоновой кислоты.

В. Бенэгидриловый эфир 7-((Zj-2(2-трет-бутоксикарбонилпроп-1-окси35 имино) -2- (2-тритиламинотиазол-4-ил) ацетамидо)-3-иодометил-3-цефем-4-кар-! боновой кислоты. F

Смесь бензгидрилового эфира 7- ((Е)-, 2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп-1-окси- 40 имина)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) ацетамидо )-3-хлорметил-3-цефем-4карбоновой кислоты (500 мг,0,53ммоль)

М NaI (240,мг, 1,6 моль) в ацетоне (3 мл) перемешивают 2 ч при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. К остатку добавляют СН С1 (20 мл) и воду (10 мл). Органический слой промывают 10 (об.) раствором тиосульфата натрия (5 мл) и водным

NaC1 (5 мл), осушают над MgSO< и упаривают до сухого остатка с получени" ем 540 мг (90 ) продукта в виде аморфа ного порошка, плавящегося при 106 С (разл ) 56

ИК-спектры 1„ (KBr), см 3350, 1790, 1690.

УФ-спектр Л „„„ (EtoH): 240 (Я „

270), 265 (Е",",:„ 190).

ЯМР " (СПС1 ),млн- : l,44 (9Н, с), 1,65 (6Н, с), 3,54 (IH, 4,28 (2Н,с), 4,98 (IH, д J=4,5 Н), 5,85 (!H, д-д, .Т=4,5 и 7,5H) 6,70 (IH,с), 6,90 (!Н, с), 7,1-7,5 (25Н, м).

С, 7-(2-(2-аминотиазол-4-ил-(Z)

2-(2-карбоксипроп-2-оксиимино)ацетамидо) — 3- ((!-метил-1-пирролидиний)метил- 3-цефем-4-карбоксилат. .. есь бензгидрилового эфира 7-((ZP

2-(2-трет-бутоксикарбонил-I-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацетамидо)-3-йодометил-3-цефем-4-карбоно-вой кислоты (538 мг, 0,51 ммоль) и

N-метилпирролидина (0,079 . мл, 0,076 ммоль) в СН. С (10,8 мл) оставляют стоять при комнатной температуре в течение получаса, а затем разбавляют эфиром (80 мл). Образующийся осадок собирают фильтрованием н промывают эфиром с получением 420 мг четвертичного продукта, который обрабатывают 907-ной трифторуксусной кислотой (ТФК)(4,2 мл) при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем реакционную смесь упаривают до сухого остатка. К остатку добавляют эфир с получением сырой ТФК-соли соединения (Х) (245 мг, количественный выход), который представляет собой смесь 1:4 изомеров д и Л . Сырой продукт подвергают очистке методом ЖХВТ ("Лихросорб RP-18", 4 х 300 мм, элюирование 0,01М аммоний-фосфатным буфером (рН 7,0), содержащим 107 СН ОН).

Фракцию, содержащую целевой продукт, собирают и упаривают до небольшого объема. Концентрат доводят до рН около 2 добавлением 1 М НС1 и пропускают через колонку "HP-20" (2х!5 см) для удаления неорганических солей.

Колонку промывают Н О (1000 мл) и элюируют 307 СН ОН. Элюант упаривают и лиофилизуют с получением 21 мг (107) целевого продукта в виде бесцветного порошка ° T..пл. 160 С (разл.).

ИК-спектр )„,„, !КВг), см : 3400,.

1775, 1610.

УФ-спектр3«кс фосфатный буфер рН

7 н„ (! 237 (15700), 257 (155500) .

SIMP сР(D 0),мпн : 1,65 (6Н, с), 2,3 (4Н, м), 3,09 (ЗН, с), 3,6 (4Н,м), 4,0 (2Н, м), 5,44 (1Н, д, J=4,8Н), 5,94 (1Н» 7, 15 (IH, с) .

Фармацевтически допустимые соли соединений формулы (I) включают соли неорганических оснований, например соли щелочных металлов (в частности, О.

11

СНоОССН

СООН

5 13261 соли натрия и калия) и сопи щелочноземельных металлов (в .частности, соли кальция), соли аммония, соли органических оснований (например, с использованием триэтиламина, прокаина, фенетилбензиламина, дибенэилэтилендиамина и других органических основа ний, которые используются B производстве пенициллина и цефалоспоринов), и соли присоединения кислоты (напри- 10 мер соли с хлористоводородной, бромистоводородной, муравьиной, азотной, серной,. метансульфоновой, фосфорной уксусной или трифторуксусной кислотой) и других кислот, который исполь- 15 зуются в- производстве пенициллинов и цефалоспоринов. Физиологически гидролизуемые сложные эфиры включают сложные ацилоксиалкиловые эфиры, например (низше)алканоил)низше)алкило- 20 вые эфиры, такие как ацетоксиметиловый, ацетоксиэтиловьп, пивалоилокси" метиловый и т.п. Соли оснований и сложные эфиры могут быть образованы

I с любыми карбоксильными группами соединений формулы (I).

Соединения формулы (1) проявляют высокую антибактериальную активность в отношении грамм-положительных и грамм-отрицательных бактерий и пригодны для лечения бактериальных инфекций животных, а также человека. Соединения формулы (I) могут быть использованы для приготовления препаративных форм, предназначенных для упот- 35 ребления паэнтерально, обычным путем с применением известных фармацевтических носителей и эксЦиентов, и могут быть представлены в виде единичных дозировочных форм или в виде мно- 40 жественно-дозировочных форм. Композиции могут быть представлены в виде растворов, суспенэий или эмульсий в масляных или водных разбавителях и могут содержать обычные диспергир лощие, суспендирующие и стабилизирующие вещества. Композиции могут быть также представлены в виде сухого порошка, предназначенного для разбавления перед употреблением, например, стерильной водой, не содержащей пирогенных веществ. Соединения формулы (I) могут быть также приготовлены в виде свечей, использующих обычные для этой цели основы, например масло, 5 какао или другие глицериды. При необходимости соединения согласно изобретению могут быть предписаны в cov

95 6 четапии с другими антибиотиками, такими как пенициллины или другие цефалоспорины.

В случае приготовления в виде единичных доэировочных форм, композиции предпочтительно содержит 50—

1500 мг активного ингредиента формулы (I). Для лечения взрослых людей дозировка предпочтительно составляет

500-5000 мг в сут, в зависимости от частоты и способа приема. В случае внутримышечного или внутривенного введения взрослому человеку полная доза в норме обычно составляет от

750 до 3000 мг в сут в виде раздельных дозировок, хотя для некоторых соединений может потребоваться более высокая суточная доза в случае инфекций бактериями рода Psendomonas.

В ходе первичной оценки соединений согласно изобретению минимальную ингибирующую концентрацию (MHK) для соединений и двух соединений для сравнения (цефотаксим и цефтазидим) оп. ределяют методом двукратного разбавления arapa с использованием агара

Мюллера-Хинтона для 32 штаммов испытуемых организмов, поделенных на шесть групп. Геометрические средние значения МИК, определенные в этом эксперименте, приведены в таблице. Юеа сuq

, С вЂ” СОЫНр

ОСНЗ

ЦЕ@П1ПЗидиИ с — co a Е и о ь сн -м

О С0О

1 и С-С-СН

СООЯ

Проводят также испытания, для выявления организмов, резистентных к .соединению формулы (I), цефотаксиму и цефтазидиму. Значения МИК для этих трех соединений в отношении 240 штаммов Eutегоbacteriaqeae определяют в среде Мюллера-Хинтона, и значение

МИК, равное или превышающее 8 для не менее одного из испытуемых соединений, произвольно принимается за свидетельство резистентности организма.

Из 240 штаммов 27 оказались резистентными не менее, чем к одному из испытуемых соединений. Соединение

О н с сн>

СООН

0+ сн;м! соо сн

Испытуемые организмы

МИК, мкг/мл, соединения соединение цефотаксим цефтазидим (О (G+) -Ia (5 штаммов) .

1,0

5,1

2,2

33 (G+) -П (5) (G-) -T.à (5) (G-) -Ib (6) (С-)-п (5) (G-)-ИI (6) (С+) -Ia

0,066

0,015

0,070

0 35

1,7

0,79

2,6

4,1

1,2

4,0

1,8

Чувствительный (5 штаммов) (G+)-Ib

Чувствительный (5 штаммов) 7

1326 (I) активнее цефотаксима в отношении группы (G ) 1 испытуемых организмов и намного активнее цефотаксима в отношении группы (G-) — (III) qcnsnyeФ

5 мых организмов (Ps.aerugrnosa). Оно активнее цефтазидима в отношении всех групп грамм-положительных испытуемых организмов, исключая (G-) (III) (Ps. aeruginosa), которые несколько чувствительнее к цефтазидиму.

Таким образом, предлагаемый спо- . соб позволяет получить соединение (I), обладающее ценными фармакологическими свойствами.

Формула изобретения

Способ голучения 7-(2-(2-аминоти20 .азол-4-ил)-(Z)-2-(2-карбоксипроп-2оксиимино)ацетамидо)-3- ((1-метил-!в пирролидиний)метил)-3-цефем-4-карбок1 силата, плавящегося при 160 С (разл.):

$25 отличающийся тем, что, смесь бензгидрилового эфира 7- амино3-хлорметил-3-цефем-4-карбоновой кис;!

95 8 лоты, ГЕ )-2- (2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-ок сиимино) -2- (2-три тила ми нов тиазол-4-ил) уксусной кислоты, дициклогексилкарбодиимида и Л -гидроксибензтриазола подвергают взаимодействию в органическом растворителе с получением бензгидрилового эфира 3— хлорметил-7-(j Z)-2-(2-трет-бутоксикарбонилпрon-2-оксиимино) -2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацетамидо)-3--цефем-4-карбоновой кислоты (соединение

II) или смесь бензгидрилового эфира

7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоновой кислоты и бис(триметилсилил) ацетамида подвергают взаимодействию с хлорангидридом (Е.1-2-(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты с получением соединения (II), после чего соединение (II) подвергают взаимодействию с йодистым натрием с получением.бензгидрилового эфира 7- ЦЕ)-2-(2-трет-бутоксикарбонилнроп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацетамидо-3-йодметил-3цефем-4-карбоновой кислоты (соединение III), и далее соединение (III) подвергают взаимодействию с М-метилпирролидином в органическом растворителе с последующим снятием защитных групп кислотным гидролизом и выделением целевого продукта, плавящегося при 160 С (раэл. ) .

1 к пенициллину S aureus к пенициллину S.aureus

132á195

Продолжение таблицы

Г

° « ° М Ю

ИИК мкг/мл соединения

Испытуемые организмы (G-)-Ха (G-)-Ib — среднее значение 5 экспериментов.

Составитель Н.Нарышкова

Редактор А.Ворович Техред Н.Глущенко Корректор 31.Патай

Заказ 3129/58 Тираж 371 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д,4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,г.ужгород,ул.Проектная,4 (С-}-II (G-1)-III соединение цефотаксим цефтазидим (I) Чувствительный к цефалотину Е.coli (2 штат а) К-l.pneumoniae (1 штамм) и

Pr mirabilis (2 штамма).

Резистентный цефалотин Е.coli (3 штамма) и Кl.pneumoniae (3 штамма) Pr.morganii (I штамм) Ent.ñioàcàå (2 штамма) и Ber.macescens (2 штамма)

Рз,aeruginosa (G штаммов)1