Способ определения этамбутола в сыворотке крови

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Для упрощения способа в пробу забавляют изоверин, проводят трифторацилирование. Смесь упаривают и растворяют в гептане. Вьщеляют анализируемое вещество на колонке с силикагелем PREP Silica (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан - изопропанол в объемном соотношении 88:12. 00 со 4ib

СОО3 СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИК (1Ю (11) (511 4 С 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3925109/28-14 (22) 04.07.85 (46) 30.08.87. Бюл. У 32 (71) Московский научно-исследователь- ский институт туберкулеза и Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии (72) Т.Н.Бессарабова,: Л.Ф.Линберг, С.А.Попов и А.С.Миримский (53) 612.015 (088.8) (56) J.Chromatograph, 1976, v.128,.

У 1., р. 188-192. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭТАМБУТОЛА

В CbIBOPOTKE КРОВИ (57) Для упрощения способа в пробу забавляют изовернн, проводят трифторацилирование. Смесь упаривают и раст-. воряют в гептане. Вццеляют анализируемое вещество на колонке с силикагелем PREP Silica (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан вЂ” изопропанол в объемном соотношении 88:12.

4084

Таблица 1

Влияние изменения соотношения в смеси гептан вЂ” изопропанол на конечный выход этамбутола

Соотношение гептан вЂ” изапропанол в элюирующей смеси, об. 7

Показатель

Г "Г85: 15 90: 10

-оОтносительное содержание этамбутола в элюате, 7

77 1

133

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клини-. ческой фармакологии при изучении метаболизма и фармакокинетики этамбутола, а также при выборе оптимальных доз при лечении туберкулеза .

Цель изобретения вЂ” упрощение способа эа счет того, что в пробу добавляют внутренний стандарт, выделяют анализируемое вещество, упаривают, проводят трифторацилирование с последующим гаэохроматографическим анализом, а также используют в, качестве внутреннего стандарта изоверин, выделение анализируемого вещества на колонке с силикагелем RSILPREP SILICA (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан вЂ” изопропанол в объемном соотношении 88: 12.

Способ осуществляют следующим образом.

В стеклянную ампулу вносят 0,02 мл сыворотки, 0,1 мп этанола с внутренним стандартом (0,05Х-ный раствор изоверина). После перемешивания смесь высушивают досуха в токе. азота. Добавляют 50 мкл ангидрида трифторуксусной кислоты, ампулу запаивают и проводят реакцию при 70 С 20 мин.

После этого содержимое упаривают в токе азота и сухой остаток растворяют в О, 2 мп гептана. Затем весь растворитель с содержащимися в нем трифторацильными производными ЭМБ переносят на микроколонку с 18+0,5 мг силикагеля RSIL PREP SILICA (2540 мкм) и продавливают через сорбент с помощью медицинского шприца на 2 мл. Затем на колонку наносят

0,2 мл элюирующей смеси гептан вЂ” изопропанол в объемном соотношении

88:12, продавливают через сорбент в чистую ампулу и 2 мкл вводят в хроматограф. Анализ проводят на набивной колонке длиной 1,8 м, внутренним диаметром 2 мм, наполненной сорбентом Chromosorb WAW 100-120 меш с жидкой фазой OV вЂ” 101 37., гаэ-носитель вЂ” азот, 20 мл/мин.

Хроматографические условия аналио за: Т инжектора 250 С, Т колонки

1б5 С, Т электронно-захватного детеко тора 350 С.

В табл.1 представлены данные, подтверждающие выбор оптимального соотношения в элюирующей смеси гептанизопр опанол.

Соотношение гептан-изопропанол

88:12 является оптимальным. При меньших количествах изопропанола ЭИБ не полностью элюируется с колонки, при больших количествах изопропанола элюирующая смесь становится более полярной и смывает с колонки наряду с. искомым соединением различные примеси, мешающие последующему хроматографическому определению. При этом относительное содержание ЭИБ в образ25 це снижается °

Способ позволяет при сохранении точности определения ЗМБ (табл.2) существенно упростить процесс.

Формула из обр ет ения зр

Способ определения этамбутола в сыворотке крови, включающий добавление в пробу внутреннего стандарта, выделение анализируемого вещества, упаривание, трифторацилирование с

ЗБ последующим газохроматографическим анализом, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве внутреннего стандарта ис4р пользуют изоверин, а выделение анализируемого вещества осуществляют на колонке с силикагелем RSIL PREP

БП.ТСА с размером частиц 25-40 мкм, при этом элюцию проводят смесью

45 гептан вЂ” изопропанол в объемном соотношении 88:12.

1334084

Та блица 2

Сравнение концентраций ЭМБ, определенных из

20 мкл сыворотки крови. больных по предлагаемому способу и способу-прототипу

Концентрация ЭМБ

Время взятия крови, ч

2-й больной

1-й больной

291 . 28

3 9

3,7

15,7

6,9

7,3

16,1

15,0

15,2

14,0

13 8

3,4

3,2

4,8

4,3

Составитель А.Агуреев

Техред Л.Сердюкова

Редактор А.Огар

Корректор А.Тяско

Заказ 3958/42 Тиразк 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий l13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 редлага- Прототип мый спооб

Предлага- Прототип емый способ

Способ определения этамбутола в сыворотке крови

Изобретение относится к медицине , предназначено для определения фосЛолипидов в лабораторной практике

Способ определения церебральных нарушений у доношенных новорожденных детей,родившихся в тяжелой асфиксии // 1334082

Изобретение относится к педиатрии

Способ микроинъекции пневматическим давлением // 1334081

Способ определения аллергенных свойств сорбированных гриппозных вакцин,содержащих яичный белок // 1334080

Изобретение относится к медицине , точнее к производству сорбированных гриппозных вакцин

Способ диагностики гемолитической болезни новорожденных // 1334079

Изобретение относится к медицине, точнее к педиатрии и акушерству, предназначено для ранней доклинической диагностики гемолитической болезни новорожденных (ГЕН)

Способ дифференциальной диагностики отечной и деструктивной форм острого панкреатита // 1334078

Изобретение относится к медицине , может применяться в клинической практике для диагностики различных форм острого п анкреатита: отечной и деструктивной

Способ диагностики тугоухости // 1332230

Изобретение относится к здравоохранению , предназначено для практической оториноларингологии и отоневрологии в дифференциальной диагностике сенсоневральной тугоухости и тугоухости при невриноме слухового нерва , с помощью серологических методов

Способ прогнозирования частых инфекционных заболеваний у детей // 1332229

Изобретение относится к медицине , точнее к иммунологии, предназначено для оценки состояния иммунной системы у детей о Цель изобретения - упрощение способа прогнозирования частых инфекционных заболеваний у детей

Способ определения фосфолипидов // 1332228

Изобретение относится к биохи- : мии, предназначено для биохимического анализа фосфолипидов биохимических препаратов и биологических объектов

Способ определения фосфолипидов и свободных жирных кислот в биологическом материале // 1332227

Изобретение относится к биологии и медицине, и предназначено для определения фосфолипидов и свободных жирных кислот (СЖК)

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750