Способ определения резистентности эритроцитов

 

Изобретение относится к гематологии . Цель изобретения - повьшение чувствительности способа и его ускорение . Гепаринизированную кровь поч мещают в измерительную ячейку. Плавно увеличивая интенсивность ультразвука , облучают исследуемьй образец и контролируют его электропроводность . В момент начала увеличения электропроводности прекращают увеличение интенсивности ультразвука и осуществляют ее измерение. Измеренная интенсивность является парамет-. ром оценки резистентности эритроцитов . i (Л : ( 00

„.80„„1347013

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (59 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTHA

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21.) 3936923/28" 14 (22) 17.06.85 (46) 23.10 .87. Бюл. Р 39 (71) Томский политехнический институт им. С.M.Êèðoâà и Сибирский филиал Всесоюзного кардиологического научного центра AMH СССР (72) ЛЛ.Ананьев, С,П,Парахин, Я.С.Пеккер, В.Д.Слепушкин и О.С.Уманский (53) 616.07 (088.8) (56) Шепотиновский В.И., Микашино.вич 3,И., Фирсова И.В. Способ определения резистентности эритроцитов.

Авторское свидетельство СССР и 923525, кл. А 61 В 10/00, 06.06.79. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ (57) Изобретение относится к гемато- . логии. Цель изобретения — повьппение чувствительности способа и его ускорение. Гепаринизированную кровь по- мещают в измерительную ячейку, Плавно увеличивая интенсивность ультразвука, облучают исследуемый образец и контролируют его электропроводность. В момент начала увеличения электропроводности прекращают увеличение интенсивности ультразвука и осуществляют ее измерение. Измеренная интенсивность является парамет-. ром оценки резистентности эритроци- а тов.

1 134

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологическим исследованиям с целью диагностики заболеваний системы крови при токсикоэах, бронхопневмониях, церрозе печени.

Цель изобретения — повышение чув ствительности способа и его ускорение за счет монотонного увеличения интенсивности ультразвука при одновременном контроле электропронодности исследуемого образца.

Способ осуществляется следующим образом.

Гепаринизированную (или цитратную) кровь из любой сосудистой зоны помещают в измерительную ячейку, содержащую небольшое количество физиологического раствора, с целью уменьшения минимально необходимого объема исследуемой пробы. Затем, совместив ультразвуковой излучатель с поверхностью исследуемого образца, облучают его, плавно увеличивая интенсивность ультразвука, и одновременно контролируют его электропроводность. . В момент начала увеличения электропроводности прекращают дальнейшее увеличение интенсивности ультразвука и осуществляют ее измерение. Измеренная интенсивность, как минимально необходимая для инициации процесса гемолиза, является параметром оценки резистентности эритроцитов.

Устройство содержит измерительную ячейку, на противоположных стенках которой размещены электроды измерителя электропроводности, ультразвуковой прибор с выносным излучателем и измеритель интенсивности ультразвука, 1

Для определения резистентности эритроцитон исследуемую кровь н количестве 0,1 мп помещают н измерительную ячейку, содержащую 1 мл физиологического раствора. После этого внутрь ячейки вставляют ультразвуковой излучатель до соприкосновения его с поверхностью исследуемой пробы ,и облучают ее, плавно увеличивая интенсивность ультразвука с помощью ультразвукового прибора, начиная с уровня 0,01 Вт/см2. Одновременно посредством измерителя электропроводности контролируют электропроводность исследуемой пробы. В момент начала ее увеличения прекращают дальнейшее увеличение интенсивности ультразвука, которую измеряют измерителем интенсивности ультразвука. В момент време70 t 3

Калибронку устройства н целом на нижнем пределе интенсивности ультразвука (О, 01 Вт/см2 ) проводят тепловым методом.

Вместо примененных при реализации способа измерителя Е7-11, ультразвукового прибора "Ультразвук-Т5", вольтметра В7-27А могут быть использованы любые серийно выпускаемые приборы аналогичного назначения с близкими

55 техническими характеристиками, ни Т, интенсивность ультразвука J начиная с уровня 0,01 Вт/см, планно увеличивают до момента времени Т, когда зафиксировано увеличение элект) ропроводностиЖ . Затем измеряют значение интенсивности J которое служит н качестве показателя, характеризующего резистентность эритроцитов.

При реализации способа н качестве измерителя электропроводности используют универсальный иэмеритепь L С, R Е7-11 в режиме измерения сопротивления на переменном токе частотой

1000 Гц. Измерительную ячейку изготавливают из оргстекла, электроды из платиновой проволоки диаметром 1 мм.

В качестве ультразвукового прибора используют серийно выпускаемый аппарат для ультразвуковой терапии "Ультразвук-Т5" с выносным излучателем активной площадью 1 см и незначительным изменением, заключающимся в замене ступенчатой регулировки интенсивности ультразвука на плавную. Эта модерниэация свелась к замене в принципиальной схеме аппарата линейки сопротивлений R27 — R36 на одно переменное сопротивление величиной

100 кОм, и установкой. его на внешней панели прибора. Оценку интенсивности ультразвука осуществляют путем измерения напряжения в цепи обратной связи высокочастотного генератора ульт35 разнукового прибора "Ультразвук Т5 пропорционального напряжению, прикладынаемому к обкладкам пьезопреобразователя с помощью вольтметра В7-27А.

При введении ультразнуковых колеба40 ний и образец крови с использованием аппарата "Ультразвук-T5" н котором .применен пьезопреобразователь из титаната бария, указанные константы юмеют следующие значения: С„

=4,6.10 м/с; 1э =16,7 /В м, f

=880 кГц; р =1, 13 10э кг/мэ Со

=1500 м/с, Формула и з о б р е т е н и я

Составитель M.Øåðñòíåâ

Редактор А.Козориз Техред А.Кравчук Корректор N.Äåì÷èê

Заказ 5116/43 Тираж 775 Подпис ное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 13470

Испытания .и эксперименты, проведенные на нормальной и патологической крови, а также при исследовании действия мембранотропных препаратов, показали, что применение предлагаемого способа позволяет сократить более чем в 10 раз время и в 5 раз объем пробы, необходимые для проведения анализа одного образца, а также павы- 10 сить чувствительность и точность в результате исключения из процедуры анализа апераций разведения и необходимости использования в качестве вспомогательного параметра показателя 15 гематокрита.

О п ы т 1. Образец крови, взятый от беспородной крысы в количестве

О, 1 мл, помещают в измерительную ячейку, содержащую 1 мп физраствора и электроды, соединенные с универсальным измерителем Е7-11, включенным в режим измерения сопротивления переменноиу току на частоте 1000 Гц. Затем посредством соответствующих pery- 2б лировочных ручек измерителя, вынесенных на переднюю панель, стрелку гальванометра выставляют на отметку "0".

После этого внутрь ячейки вставляют выносной излучатель ультразвукового аппарата до соприкосновения излучающей поверхности с поверхностью жидкости. Ручку потенциометра, который . включен в ультразвуковом аппарате вместо линейки сопротивлений R 26—

R 37, в крайнее левое положение.

Включают кнопку "Сеть" ультразвукового аппарата и начинают плавно вращать ручку потенциометра по часовой стрелке. При этом одновременно контролируют положение стрелки гальванометра измерителя Е7-11. В момент ухода стрелки с нулевой отметки шкалы прекращают дальнейшее вращение ручки потенциометра, т.е. увеличение интен- сивности ультразвука, и снимают показания вольтметра. На образцах крови, взятой от 15 беспородных крыс, средний вес которых составлял 18013

200 г, они равны 141+ 5 В. Соответствующие интенсивности ультразвука составили 0,08+5 10 Вт/см .

О п ы т 2. В образец крови, взятый от животного, используемого в опыте 1, в количестве 0,2 мл, вводят

10 мкл трифторперазина (концентрация

10 моль/л) . После перемешивания извлекают 0,1 мл исследуемой массы и помещают в измерительную ячейку, содержащую 1 мп физраствора. Дальше анализ проводят по опыту 1.

Величина интенсивностей ультразвука, вводимого в исследуемый образец, необходимая для инициации гемолиза, составила в данном опыте 0,04+

+7 .10 з Вт/смг

Таким образом, введение в кровь трифторперазина (концентрацией

10 моль/л) в соответствующей пропорции вызывает снижение реэистентности эритроцитов.

Эксперименты, проведенные на тех же образцах крови известным способам, показали, что выход гемоглобина при анализе цельной крови составляет

15+1,5 rЖ, а при анализе образцов, обработанных трифторперазином предлагаемым способом, — 16+1tX, что подтверждает высокую чувствительность последнего.

Способ определения резистентности эритроцитов путем их разрушения ультразвуком возрастающей интенсивности, отличающийся тем, что, с целью повьппения чувствительности способа и его ускорения, разрушение проводят с монотонным законом увеличения интенсивности ультразвука при одновременном контроле электропроводности исследуемого образца и по увеличению электропроводности относительно исходного уровня определяют резистентность эритроцитов.