Способ диагностики ревматизма путем выявления ревматического анамнеза
Изобретение относится к меди1у1- не, а именно к иммунологическим способам прогнозирования и диагностики заболеваний, в частности ревматизма. Целью изобретения является выявление ранних доклинических стадий ревматизма и повышения точности способа. Способ осуществляют следующим образом. У обследуемых лиц из крови выделяют мононуклеарные клетки (МНК), ресуспендируют их в 1 мл среды 199 и считают в камере Горяева, концентрацию МНК доводят до 2-4 тыс. 1 мкл и определяют HLA-фенотип и при наличии определенной ассоциации антигенов 1 класса комплекса диагностируют ревматизм .
„„SU„, 1380441
А1 (51) 5 G 01 N 33/48
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ, p*
, . Рж>З СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (46) 23.09.90.Бюл. NI 35 (21) 3942319/28-13 (22) 08;08.86 ,(71) Институт клинической иммунологии
СО АМН СССР (72) В.Ф. Прокофьев, В.И. Коненков и Ю.Н. Наумов (53) 616. 07 (088. 8) (56) Боневоленская Л.И. и др. Диагно, стические критерии ревматизма, предназначенные для эпидемиологических исследований, вЂ, Вопросы ревматизма, 1975, Р 3, с. 10-17. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕВИАТИЗМА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологическим способам прогнозирования и диагностики заболеваний, н частности ревматизма.
Целью изобретения является выявление ранних доклинических стадий ревматизма и повышения точности способа. Способ осуществляют следующим образом.
У обследуемых лиц из крови выделяют мононуклеарные клетки (ИНК), ресуспендируют их в 1 мл среды 199 и считают в камере Горяева, концентрацию
ИНК доводят до 2-4 тыс. 1 мкл и определяют Н1.А-фенотип и при наличии определенной ассоциации антигенов 1 класса комплекса диагностируют ревматизм.
1 380 > 1
ИзоГ>ретение относится к медицине, а именно к иммунологическим способам диагностики и прогнозирования ревMаT1<зма, 1(елью изобретения является выяв5 ление ранних доклинических стадий ревматизма и повышение точности способа.
Выявление ранних доклиническихстадий ревматизма и повыше><ие точности способа диагностики ревматизма обеспечивается за счет выявления ранее неизвестных ассоциаций HI,A-антигенов, 15
П р и и е р 1. И., -11 лет, учени ца школы. Во время профилактического осмотра выявлен очаг инфекции (хронический тонзиллит), частые заболевания В6рхних дыхательных путей, У обследуемой внутривенно забирают кровь 2,5-3 мл, которую дефибринируют и разводят в 1,5-2 раза эабуференным физиологическим раствором (ЗФР, рН 7,2-7,4). Далее методом фло- 25 тации на градиенте плотности фиколлверографина (rl=1,077 .г/см ) при ре>киме центрифугирования 400с1 в течение 40 мин выделяют мононуклеарные клетки (МНК), ИНК собирают с интерфазы и отмывают трижды ЗФР. Клетки ресуспендируют в 1мл среды 199 и счи1ают в камере Горяева. Концентрацию
МНК доводят до 2-4 тыс. в 1 мкл.
HLA-фенотип определяют в стандарт35 ном микропимфоцитотоксическом тесте с использованием набора иэ 92 тестовых анти-Hl,A-сывороток против 23 антигенов t класса Н1.Л комплекса. K<> lf И1;Л-типировпния производит РЦИТТ Ленингр".Itcêîãñ Н11И гематологии и перелива><ил крови и пр. Учет реакции фенотипировапия проводят под микроскопом при 100-150 увеличении. Для автоматического учета результат<>в реакции используют микроскоп-фотометр Y 55 ятное р»з ;<ти ревматизма. Рекомендуетг я I11< Пример 2. Я., 21 год, студент, Во время профилактического осмотра выявлен хронический тонзиллит, частые респираторные инфекции. Проведено HLA-фенотипирование: A2,10/B35, 40. Поскольку выявлено сочетание антигенов А10/В40, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Рекомендуется диспансерное наблюдение и проведение первичной профилактики ревматизма. Приме р 3. Н., 9 лет, ученица школы. Во время профилактического осмотра выявлено, что v девочки отмечаются частые распираторные инфекции, а ее сестра, 17 лет, больна ревматизмом. Проведено HLA-фенотипирование: А9, 11/В8, 17. Поскольку выявлено сочетание антигенов A11/ВВ, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Рекомендуется диспансерное наГ>людение и проведение первичной профилактики ревматизма. Пример 4. И., 16 лет, ученица школы. Во время профилактического осмотра выявлен xроничpский тонзиллит, частые обострения хронического ринита. Проведено НБА-феиотипиропание: А3, 2H/В5,35. Поскольку выявлено сочетание антигенов В5, 35, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Рекомс пдуется диспансерное наблюдение и проведение первичной профилактики ревматизма. Пример 5. >Калобы на слабость, одышку, сердцебиение, боли в области сердца и легого коленного сустава. В анамнезе частые ангины. Объективно: на основании диагностических критериев ревматизма — х<1рактерного начала заболевания, признаков кардита и полиартрита предположен диагноз ревматизма (регматизм вероятный). Производят Ш.А-фенотипирование: А1, 11/В8, 13. Поскопьку выявлено сочетание антигенов A11/HR, поставлен диагноз: ревматизм определенный. Пример 6. Больная С., 41 год. По данным анамнеза больна с 30 лет, когда после ангины дл«тельное время сохранялась субфеГ>риальная температура, слабость, cepni«(» Составитель Н. Кузенкова Техред N.пилык Корректор С. Шекмар Редактор Л. Волкова Тираж 510 ВИИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Заказ 3328 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Пр г> г»ая, тизм вероятный). 11роиэведено ИЕА-фенотипирование: А2,10/В5,40. Поскольку выявлено сочетание антигенов A10/840, поставлен диагноз: ревматизм определенный. Пример 7. Больная F 9 лет. Поступила с жалобами на боли в коленных суставах, одышку и сердцебиение, которые усилились вслед эа перене- . сенной носоглоточной инфекцией, Объективно на основании диагностических критериев ревматизма: характерного начала заболевания, признаков кардита и полиартрита предположен рев- 5 матиэм (ревматизм вероятный). Произведено HLA-феноткпирование: А2,3/В 12, 18. Поскольку выявле»о сочетание антигенов А2,3 и АЗ/В12, поставлен диагноз: ревматизм определенный. Пример 8. Больная К., 37 лет. По данным анамнеза заболела два года назад, когда после очередного обострения хронического тонзиллита длительное время сохранялась слабость, субфебриллитет, появились и нарастали боли в области сердца, беспокоили сердцебиения и одышка. В настоящее время предъявляет аналогичные жалобы. Объективно на основании диагностических критериев ревматизма: ревматического анамнеза, характерного начала заболевания и признаков кар> дита предположен ревматизм (ревматизм вероятный) е Ир>>изнeден» lit,Л фенотипированне: А2,9/И5,3 >. Лоск >вьку выявлено сочетание антигевов В 35, поставлен диагноз: ревматизм определенный. Предлагаемый способ диагностики ревматизма повысит диагности ескую точность до 99-1007. Высокая надежность метода определяется генетическими факторами, которые трактуются однозначно и не эавигят от формы, активности, характера течения заболевания. Способ позволяет выявлять ранние доклинические стадии ревматизма. формула и э о б р е т е и и я Способ диагностики ревматизма, путем выявления ревматического анамнеза, отличающийся тем, что, с целью выявления ра»них доклинических стадий ревматизма и повышения точности способа, определяют ассоциации антигенов 1 клаг..а HLA комплекса и гри наличии по крайней мере одного иэ комплексов A2,Â7, A10,В8;А1, 10; В7 ° 8 А1,88,Л2>3; АЗВ17 у людей до 15 лет и А9,10, А10,84 и В5,35 у людей после 15 лет прогнозируют ревматизм.