Способ определения нарушений внешнесекреторной функции поджелудочной железы

 

Изобретение относится к медицине , а именно к диагностике заболеваний поджелудочной железы. Цель изобретения - повышение точности и информативности способа путем определения скорости секре1цш холестеролэстеразы после гормональной стимуляции поджелудочной железы. Для этого исследование проводят натощак, двухканальным гастродуоденальным зондом, контролируемым рентгенологически . Непрерывно, раздельно откачивают желудочный сок, дуоденальное содержимое. Затем проводят стимулящпо поджелудочной железы (панкреозимин в/в - 2 ед/кг веса больного и секретин в/в - 1 ед/кг веса больного ). После стимуляции панкреозимином собирают дуоденальное содержимое (порция № 2), после введения секретина берут еще 3 порции (№ 3-5). Всего получают 5 порций, измеряют их объем и определяют активность холестеролзстеразы флюориметрически, используя в качестве субстрата холестериловый эфир О-кумаровой кислоты. По измерению прироста интенсивности флюоресценции определяют активность холестеролэстеразы. За ед. активности холестеролэстеразы условно принимают кол-во фермента, которое за I5 мин инкубации приводит к образованию 1 мкг О-кумаровой кислоты в 0,1 мл инкубационной смеси. (Л 00 vi 4

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

40 А1 (19) (И) (50 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОЬЬР СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПЮ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4035618/28-14 (22) 21.03.86 (46) 29.02.88. Бкл. И 8 (71) Центральный научно-исследова тельский институт гастроэнтерологии и Институт биологической и медицинской химии AMH СССР (72) А. С. Логинов, 3. С. Исакова, В. М. Садоков, Л, О. Шибаева, К. С, Планутис и И. В. Жмошина (53) 616.07(088,8) (56) Тимопп4на И. В. Клиническое значение ферментных .методов исследования внешнесекреторной функции поджелудочной железы. Автореф. канд. дис. N., 1981. э (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЙ

ВНЕШНЕСЕКРЕТОРНОЙ. ФУНКЦИИ ПОДЖЕЛУ

ДОЧКОЙ ЖЕЛЕЗЫ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний поджелудочной железы. Цель изобретения - повышение точности и информативности способа путем определения скорости секреции холестеролэстеразы после гормональной стимуляции поджелудочной железы. Дпя этого исследование проводят натощак, двухканальным гастродуоденальным зондом, контролируемым рентгенологически. Непрерывно, раздельно откачивают желудочный сок, дуоденальное содержимое. Затем проводят стимуляцию поджелудочной железы (панкреозимин в/в - 2 ед/кг веса больного и секретин в/в — 1 ед/кг веса больного). После стимуляции панкреоэимином собирают дуоденальное содержимое (порция Р 2), после введения секретина берут еще 3 порции (М 3-5).

Всего получают 5 порций, измеряют их объем и определяют активность холестеролэстеразы флюориметрически, используя в качестве субстрата холестериловый эфир О-кумаровой кислоты.

По измерению прироста интенсивности флюоресценции определяют активность холестеролэстеразы. 3а ед. активности холестеролэстераэы условно принимают кол-во фермента, которое за

15 мин инкубации приводит к образованию 1 мкг О-кумаровой кислоты в

0 1 мл инкубационной смеси.

1377740

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний поджелудочной .железы.

Целью изобретения является повы" шение точности и информативности способа путем определения скорости секреции холестеролэстеразы после гормональной стимуляции поджелудочной железы. 10

Пример 1. Больной К., 48 лет. Поступил с жалобами на тупые, ноющие боли в левом подреберье с иррадацией в спину, тошноту. Из анализа известно, что в течение 5 лет 15 страдает постоянными болями в верх ней половине живота опоясывающего характера. При осмотре: рост 168 см, масса тела 60 кг. При пальпации жи- вот мягкий, печень и селезенка не 20 пальпируются.

В анализе крови и мочи изменений нет. Амилаза, липаза и трипсин в сыворотке крови в норме. При дуоденографии отмечены косвенные признаки увеличения головки поджелудочной железы. УЗИ: повышение эхогенности поджелудочной железы. Проведено опреде.ление нарушений внешнесекреторной функции поджепудочной железы с опре- 30 делением в дуоденальном содержимом холестеролэстеразы по предлагаемому способу.

Способ осуществляют следующим образом. 35

Исследование проводят после 14 ч голодания. Дуоденальное содержимое получают двухканальным гастродуоденальным зондом (типа Лагерлофа). Положение зонда контролируют рентгено- 40 логически. Оливу, указывающую на положение конца дуоденального канала, устанавливают. в нижнегоризонтальном отделе двенадцатиперсной кишки. Непрерывно, раздельно откачивают желу- 45 дочный сок, дуоденальное содержимое с помощью водоструйного отсоса. После полной аспирации желудочного сока в течение 20 мин в пробирку, помещенную в контейнер со льдом, собирают 5 базальную порцию дуоденального содержимого (порция Р 1). Затем проводят стимуляцию поджелудочной железы. В качестве стимулятора применяют панкреозимин внутривенно в дозе 2 ед/кг веса больного и секретин внутривенно в дозе 1 ед/кг .веса больного. После стимуляции панкреозимином собирают дуоденальное содержимое в течение

20 мин (порция У 2), а затем еще три

20-минутные порции после введения секретина (порции Р 3-5). Всего получают 5 порций дуоденального содержимого, измеряют объем каждой порции и во всех определяют активность холестеролзстеразы. Активность холестеролэстеразы дуоденального содержимого определяют флюориметрическим методом, используя в качестве субстрата холестериловый эфир О"кумаровой кислоты. Растворяют 1 мг холестерилового эфира и смешивают с 40 мкл . тритона х-100. Добавляют 1 мп буферного раствора, содержащего 0,3 М фосфата калия и 5 мМ холата натрия (pH 6,6). Смесь тщательно перемешивают, избегая пенообразования. Полученная таким образом дисперсия субстрата стабильна в течение 1 сут, затем 0,02 мл субстратной смеси добавляют к 0,,2 мл указанного буферного раствора и .0,02 мл дуоденального содержимого. Инкубируют реакционную смесь при 37 С. Отбирают пробы по

0,1 мл и фиксируют их прибавлением

0,5 мл буферного раствора, содержащего 0,2 M К СО> и 0,2 М НзВОэ(рН

10,4). Затем добавляют 5 мл дистиллированной воды и измеряют прирост интенсивности флюоресценции на флюориметро-БИАН 130 при 365-470 нм. В конце измерений добавляют 1 мкг Окумаровой кислоты в кювету с целью определить, какое количество О-кумаровой кислоты соответствует единице показаний флюориметра.

Измеряют прирост интенсивности флюоресценции на линейном участке кинематической кривой за 15 мин инкубации реакционной смеси, По измерению прироста интенсивности флюоресценции определяют активность холестеролэстеразы. За 1 ед. активности . холестеролэстеразы условно принято такое количество фермента, которое за 15.мин инкубации приводит к об- . разованию l мкг О-кумаровой кислоты в 0,1 мл инкубационной смеси.

Оценка результатов исследования активности холестеролэстеразы дуоденального содержимого проводится по показателям скорости секреции, определяемой по формуле CV/Ò, где Сконцентрация фермента, ед.; Ч объем порции, мл; Т вЂ” время, за которое получена порция, мин.

1377740

Анализ крови, мочи и кала — без изменений. В сыворотке крови - повышение уровня липазы 2,2 ед. (н. 0,51,6 ед), содержание остальных ферментов не изменено. Рентгенологическое исследование желудка и двенадцатиперсной кишки: косвенные рентгеноСоставитель Л. Соловьев

Редактор Э. Слиган Техред Л.0лийнык Корректор Н. Король

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Б-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 865/40

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

У больного К. скорость секреции холестеролэстеразы составляет

0,2 ед/мин, что соответствует гипосекреции поджелудочной железы.

Следовательно, у данного больного скорость секреции холестеролэстераэы оказалась единственным измененным показателем, позволившим диагностировать хромический панкреатит с нарушением внешнесекреторной функции поджелудочной железы.

Пример 2. Больной Т., 37 лет. В течение 5 лет страдает частыми рецидивами болей в левом подреберье. Поступил спустя 3 недели после очередного приступа с жалобами на тупые боли в левом подреберье, иррадиирующие в спину. При осмотре рост 174 см, масса тела 61 кг. Язык обложен белым налетом. Печень и селезенка не пальпируются. При пальпации живота отмечается болезненность в области проекции поджелудочной железы. логические признаки увеличения голов ки поджелудочной железы.

Проведено исследование ферментов также в дуоденальном содержимом. Вьгявлено повышение уровня липазы,.амилазы, трипсина. При исследовании активности холестеролэстеразы установлено по методике, приведенной в примере 1, значительное повышение скорости секреции холестеролэстеразы (2,5 ед/мин). В предлагаемом способе определение скорости секреции холе-. стеролэстеразы позволяет подтвердить

15 диагноз хронического панкреатита с гиперсекреторной функцией поджелудочной железы.

Формула и э о б р е т е н и я

Способ определения нарушений внеш20 несекреторной функции поджелудочной железы путем исследования активности ферментов в дуоденальном содержимом, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и информа25 тивности, в дуоденальном содержимом определяют скорость секреции холестеролэстеразы с использованием в качестве субстрата холестерилового эфира, 0-кумаровой кислоты и при уровне сек30 реции 0,8 ед/мин и ниже определяют гипосекрецию поджелудочной железы, а при уровне 2,2 ед/мин и выше - ги»: персекрецию.