Способ получения производных 6-замещенной метилен-1,1- диоксопенициллановой кислоты или ее солей с щелочными металлами, или ее сложных эфиров

 

Изобретение касается замещенных пенициллановой кислоты, в частности производных 6-замещенной метилен-1,1- -диоксопенициллановой кислоты (ПЦК) или ее щелочных солей, или пивалоилоксиметилового или аллилового эфиров, в которых в 6-положении может быть одна из следунэдих групп: тиазолш1-2} 4-метилтиазолил-2 J бензотиазолил-2; 6-метоксибензотиазолил-2} изотиазолил-3 л 2-метил-1,2,4-т{)иазолил-3 , 2-фенил-1,2,3-триазолил-5} 1,2,3-тиадиазолш1-4 5-метил-1,2,4-оксадиазолил-З; фурил-2; тиенил-2, 1-ацетилпиррол ил- 2 j пиридил-2 (или -3, или -4); пирадазинил-3; пиримидинил-4; пиразинил-2 или винил, которые могут быть использованы в медицине в сочетании с антибиотиками пиницилланового и цефалоспоринового рядов. Цель - создание новых усиливающих антимикробную активность веществ указанных антибиотиков . Синтез ПЦК ведут из соответствующей цефалоспориновой кислоты, содержащей в положении 6 указанную группу, присоединенную к группе chr, где R - Н или C(0)CHj, или ее алли-г, лового эфира, которую обрабатывают 1,5-диазабицикло 4,3,0 нон-5-еном в среде метиленхлорида или щелочной i солью неорганической кислоты в водной среде, или трифторметилсульфонил- -хлоридом при комнатной темпе атуре. Целевой продукт выделяют в виде свободной кислоты, ее соли или сложного эфира. Активность новых веществ в комбинации с указанными антибиотиками проявляется в отношение одного или нескольких микроорганизмов, т.е. они являются -лактамазными ингибиторами. 4 табл. i СО со СР О) со 05 ;О

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н IlATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTWI (21) 4027223/23-04 (62) 3844124/23-04 (22) 17.03. 86 (23) 28. 01. 85 (31) 575354 (32) 30. 01 . .84 (33) US (46) 15. 05, 88. Бюл. И, 18 (71) Пфайзер Инк.. (US) (72) Юхпинг Лианг Чен (TW) (53) 547. 789. 61. 07 (088. 8) (56) Патент США Р 4287181, кл. 424/114, опублик. 1981. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

6-ЗАИЕЩЕННОЙ МЕТИПЕН-1 1-ДИОКСОПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ ЕЕ СОЛЕЙ С ЦЕЛОЧНЫИИ МЕТАЛЛАМИ, ИЛИ ЕЕ СЛОЖНЫХ

ЭФИРОВ (57) Изобретение касается замещенных .пенициллановой кислоты, в частности производных 6-эамещенной метилен-1,1-диоксопенициллановой кислоты (ПЦК) или ее щелочных солей, или пивалоилоксиметилового или аллилового эфиров, в которых в 6-положении может быть одна иэ следующих групп: тиаэолил-2;

4-метилтиаэолил-21 бензотиазолил-2

6-метоксибензотиазолил-21 изотиазолил-3," 2-метил-1,2,4-триаэолил-3;

„,80„„1396969 А3. (51)4 С 07 D 499/00 // А 61 К 31/43

2-фенил-1,2,3-триазолил-5; 1,2,3-тиадиаэолил-4; 5-метил-1,2,4-оксадиазолил-3; фурил-2; тиенил-2, 1-ацетилпирролил-2; пиридил-2 (или -3, или

-4); пирадазинил-3, пиримидинил"4; пиразинил-2 или винил, которые могут быть использованы в медицине в сочетании с антибиотиками пиницилланового и цефалоспоринового рядов. Цель — создание новых усиливающих антимикробную активность веществ указанных антибиотиков. Синтез ПЦК ведут из соответствующей цефалоспориновой кислоты, содержащей в положении 6 укаэанную группу, присоединенную к группе CHR где R — Н или С(О)СН, или ее алли-б лового эфира, которую обрабатывают И

1,б-диаэабицикло(4,3,01иои-б-эком в среде метиленхлорида или щелочной солью неорганической кислоты в водной среде, или трифторметилсульфонил-хлоридом при комнатной температуре. Я Целевой продукт выделяют в виде свободной кислоты, ее соли или сложного эфира. Активность новых веществ в комбинации с укаэанными антибиотиками CO проявляется в отношение одного или (Ь нескольких микроорганизмов, т.е. они 1„ ф являются а-лактамаэными ингибиторами. ф

4 табл. 4Ф

9 2

1 139696

Изобретение относится к способу получения новых производных 6-замещенншй метилен-1,1-диоксопенициллановой кислоты или ее солей с щелоч-. ными металлами или ее сложных эфи- 5 ров, которые обладают свойством ингибиторов э-лактамазы и могут найти применение в медицине в сочетании с антибиотиками пенициллинового и це10 фалоспоринового рядов.

Цель изобретения — получение новых соединений, усиливающих противомикробную эффективность антибиотиков.

Способ осуществляют следующим образом.

Спектры ядерного магнитного резонанса, протонного и С измеряли при

60, 90, 250 или. 300 мГц для растворов в дейтерохлороформе (CDC1 ) окиси дейтерия (DgO), пердейтерированном

20 ацетоне (CD COCD ) или .пердейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-d <), причем положения пиков выражают-в

Ф миллионных долях (м.д. ) в сторону уменьшения поля от тетраметилсилана.

Использованы следующие сокращения:

S или с — синглет, d или д — дублет, dd или дд — пара дублетов, t или т — триплет, q или кв — квартет, m или м — мультиплет, bs или шир—

30 широкий синглет.

Пример 1. Бензил 6-(2-пиридил)оксиметилпеницилланат.

А. Бензил-бром-6-(2-пиридил)оксиметилпеницилланат. 35

Раствор 9, 0 r (О, 02 моль) бен зил

6,6-дибромпеницилланата в 200 мл свежеперегнанного толуола охлаждают до

-78 С и по каплям прибавляют 9 мл

2,2 M раствора трет-бутиллития в пен-40 тане, смесь перемешивают в течение

30 мин, прибавляют 2,14 r (0,02 моль)

2-пиридинкарбоксальдегида и перемешивание продолжают еще в течение

40 мин. Реакцию гасят, прибавляя по 45 каплям раствор уксусной кислоты в толуоле. После перемешивания в течение

1 ч охлаждающую баню удаляют, смесь нагревают до -10ОС, разбавляют 200 мл толуола, промывают 5 раэ водой и сушат над безводным сульфатом натрия.

Толуольный раствор загружают в колонку с флорисилом (1 кг) и элюируют смесью толуол — этилацетат (2:1).

Фракции с продуктом объединяют, выпаривают псд вакуумом и получают 4,2 r коричневого сиропообразного соединения, которое используют на следующей стадии.

В. Коричневое сиропообразное соединение (4,2 г), полученное в разделе А, растворяют в 50 мл бенэола и прибавляют 2,65 r трибутиловогидрида.

Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч, прибавляют дополнительное количество (1,65 r) трибутиловогидрида и кипячение с обратным холодильником продолжают в течение. ночи. Растворитель выпаривают под вакуумом, остаток промывают гексаном, загружают в колонку, содержащую 500 г силикагеля, элюируют смесью толуол— этилацетат 2:1 и получают 425 г целевого соединения.

IH-SIMP (CDC1g), ч/млн (дельта):

1,35 (синглет, ЗН); 1,7 (синглет, ЗН); 4,0 (двойной дублет, 1Н); 4,5 (синглет; 1Н); 5,1 (синглет, 2Н);

5,2 (дублет, 1H); 5,4 (дублет, 1Н), 7,0-7,8 (мультиплет, ЗН); 8,5 (мультиплет, 1Н).

Пример 2. i 1-диоксид 6-(2-пиридил) оксиметилпенициллановой кислоты

А. Бензил 6-(2-пиридил) оксиметил-1,1-диоксопеницилланат.

К раствору 0,40 г бензил 6-(2-пиридил) оксиметилпеницилланата в 5 мл метиленхлорида прибавляют 0,20 r мета-хлорпербензойной кислоты и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Анализ, проводимый с помощью тонкослойной хроматографии, показывает, что смесь содержит некоторое количество сульфоксида.

Дополнительно прибавляют 0,2 г мета-хлорпербенэойной кислоты и смесь пе ремешивают в течение ночи. Смесь разбавляют метиленхлоридом, последовательно промывают насыщенным раствором тиосульфата натрия, водой, насыщенным раствором бикарбоната натрия, и орга-. нический слой концентрируют под вакуумом. К остатку прибавляют этилацетат, промывают раствором бикарбоната натрия, водой, раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Выпариванием растворителя получают 330 мг целевого бензилового сложного эфира в виде коричневого масла, которое очищают .хроматографированием на колонке с силикагелем, элюируя смесью этилацетат — гексан 11:9 и получают 60 мг желтого масла.

1Н-SIMP (СРС1 ),ч/млн (дельта): 1,25 (синглет, ЗН); 1,52 (синглет, ЗН)

4,1 (двойной дублет, 1Н); 4,5 (син45 шивают в атмосфере азота в течение

5 мин, смесь разбавляют 1 мл этилацетата и прибавляют 0,25 мл раствора

2-этилгексаноата натрия в этилацетате. После перемешивания при комнат55 ной температуре в течение 1 ч смесь фильтруют, осадок промывают этилацетатом, диэтиловым эфиром и полу-. чают 30 мг желтого твердого соединения. з 139 глет, 1Н), 4,72 (дублет, 1Н); 5,5 (дублет, 2Н); 5,8 (дублет, 1Н); 7,18,0 (мультиплет, ЗН); 8,5 (мультиплет, 1Н).

В. Суспензию 118 мг катализатора

10 . Pd/С в 10 мл тетрагидрофурана (ТГФ) и 4 мл воды предварительно гидрируют в течение 20 мин при давлении водорода 3 атм. К этой суспензии прибавляют 130 мг бензилового сложного эфира, полученного на стадии А, в 4 мл той же самой смеси ТГФ вЂ” вода, смесь гидрируют 3,5 кг/см в,течение 30 мин, Дополнительно прибавляют 129 мг 10 Pd/Ñ и гидрирование при 3,5 кг/см продолжают в течение

2 ч. Катализатор удаляют фильтрованием, растворитель выпаривают под вакуумом и остаток обрабатывают смесью воды и этилацетата, Водный слой лиофильно высушивают и получают 85 мг целевой кислоты.

1Н-ЯМР (CDClg),ч/млн (дельта):1,3 (синглет, ЗН), 1,5 (синглет, ЗН); 4,4 (синглет, 1H) 5,0"5,35 (мультиплет, 2Н); 5,9 (дублет, 1Н).

ИК-спектр (КВг) см : 1620, 1731, 3407.

С. Воспроизводят описанную выше. методику, но используют по стадии А мета-хлорпербенэойную кислоту в количестве, которое в целом равно 175 мг (эквимолярное количество), и выделяют продукт, который представляет собой смесь соответствующий альфа и бетасульфоксидов.

Пример 3, Аллил 6-(2-тиазолил) ацетоксиметил-1,1-диоксопеницилланат.

А. Ацилирование 0,5 r (1,29 моль) аллил 6-(2-тиаэолил) оксиметил-1,1-диоксопеницилланата с помощью 0,396 г (3„88 ммоль) уксусного ангидрида и

0,307 г (3,88 r) пиридина в 5 мл тетрагидрофурана проводят при перемешивании при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем смесь разбавляют метиленхлоридом, промывают. водой до нейтральной реакции (рН 6,0-6,5), органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель выпаривают и получают 0,688 r целевого ацетата.

1Н-ЯМР (CDC1 ), ч/млн (дельта):

1,52 (синглет, ЗН); t 70 (синглет, ЗН), 2,35 (синглет, ЗН); 4,4 — 4,6 (мультиплет, 2Н); 4,6-5,0 (мультиплет, ЗН); 5,2-6,4 (мультиплет, ЗН);

6969

6,65 (дублет, tH); 7,4 (дублет, tH)

7,8 (дублет, tH) .

Пример 4. Аллил 6-(2-тиазолил)метилен-1, 1-диоксопеницилланат и

era гидролиз с превращением в калиевую соль.

А. Полученный в примере 3 ацетоксильный сложный эфир (0,688 г, 1,29 ммоль) смешивают с 0,16 r (1,29 ммоль) 1,5-диазабицикло (4,3,0) нон-5-ена (ДБН) и 5 мл метиленхлорида и перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляют метиленхлоридом, промывают водой (2 х х 50 мл), сушат над безводнЫм сульфатом натрия, выпаривают растворитель и получают масло. Это масло хроматографируют на колонке с силикагелем, элюируя смесью этилацетат — гексан

1:1 и получают 0,189 r (39 ) светложелтого масла.

1Н-ЯМР (CDClg), ч/млн (дельта):

1,53 (синглет, ЗН); 1,65 (синглет, 25 ЗН); 4,33 (синглет, 1Н), 4,55 (дублет, 2Н); 5.,0-5,4 (мультиплет,2Н);

5,45 (синглет, 1Н); 5,4-6,0 (мультиплет, 1Н); 7,1 (мультиплет, tH); 7,75 (мультиплет, 1Н); 7,65 (дублет, 1Н).

30 В 1 идрОлизом аллилОВ О ro сложнО гО эфира, полученного на стадии А, применяя калий 2-этилгексаноат, получа" ют 6-(2-тиазолил)метилен-i 1-диоксопеницилланат калия с выходом в дан35 ной стадии, равным 84 7 . в виде желУ Э того твердого соединения.

1Н-ЯМР, 250 МГц (ДМСО-d ), ч/млн (дельта): f,40 (синглет, ЗН), 1,45 (синглет, ЗН), 3,80 (синглет, 1Н), 5,83 (синглет, 1Н), 7,66 (синглет, 1Н); 8,04 (мультиплет, 2Н).

С. 6 (Е) †(N-метилпиррол-2-ил)метилен-1,1-диоксопеницилланат натрия.

Раствор 46 мг аллил 6 (Е)-(N-метилпиррол-2-ил)метилен-1, 1-диоксопеницилланата, 5 мг тетракис (трифенилфосфин) палладия (О), 4 мг трифенилфосфина и 1 мл метиленхлорида переме96969

5 13

1Н-ЯИР (D 0) ч/млн (дельта):

1,50 (синглет, ЗН); 1,60 (синглет, ЗН), 3, 65 (синглет, ÇH); 4, 10 (синглет, 1H); 5,4 (синглет, 1Н); 6,1

6,5 (мультиплет, 1H) 7, О (шнрокий синглет, 2Н); 7,2-7,4 (м., 1H).

ИК-спектр (КВг) см : 1568, 1616, !

660, 1745, 3465.

Аналогично получают целевые продукты, выходы и физико-.химические характеристики которых приведены в табл. 1.

П.р и м е р 5. Смесь (Е)- и (Z)-изомеров 6-(бензотиазол-2-ил)метилен-1,1-диоксопенициллановой кислоты.

К раствору 400 мг (0,91 ммоль)

6-(бензотиазол-2-ил) ацетоксиметил-1,1-диоксопени4иллановой кислоты в

5 мл воды добавляют раствор 0,15 r (1,82 ммоль) бикарбоната натрия в

2 мл воды и полученную в результате смесь перемешивают в течение 2 ч.

Реакционную .смесь (рН 7,55) сушат вымораживанием. Затем лиофилат переносят в 8 мл воды, устанавливают рН равным 3 5 с помощью разбавленной хлористоводородной кислоты, экстрагируют этилацетатом, органические слои сушат (MgS04) и растворитель выпаривают в вакууме.

ЯИР-спектр полученного продукта показал, что он представляет собой смесь (Е) - и (Z) -изомеров в соотношении 60:40.

1Н-ЯМР (CDC1 g), ч/млн (дельта):

1,55 (синглет, 1,2 Н) q 1,6 (синглет, 1,8 Н); 1,65 (синглет, 1,2 Н); 1,67 (синглет, 1,8 Н); 4,55 (синглет, О,б H); 4,58 (синглет, 0,4 Н); 5,38 (синглет, 0,4 Н); 5,74 (синглет, 0,6 Н); 7,44 (синглет, 0,4 Н); 7,48 (синглет, О, 6Н); 7,5 (мультиплет, 4Н); 7,89 (дублет, 1H) 8,07 (дублет, 0,4 Н); 8,15 (дублет, 0,6 Н).

Пример 6. Смесь (Е)- и (Е)-изомеров б-(З-метил-1,3,4-триазол-2-ил)метилен- 1, 1-диоксопенициллановой кислоты в отношении (Е):(2) 60:40 получают аналогично примеру 5, исходя из соответствующего ацетоксиметильного производного., с выходом 84 .

1Н-ЯНР (DgO), ч/млн (дельта):

1,54 (синглет, ÇH); 1,62 (синглет, ЗН) 4, 04 (синглет, ЗН); 4,35 (синглет, 1Н); 5,7 (синглет, О,б Н); 5,95 (синглет, 0,4 Н); 7,26 (синглет, 0,6 Н); 7,55 (синглет, 0,4 Н); 8,09 (синглет, 2Н).

6

Пример 7. Получение пивало илокснметилового эфира.

А. К раствору 470 мл (1,28 ммоль) калий 6-(изотиазол-Ç-ил)-метилен-1,1-пиоксопеницилланата в 2 мл диаметилформамида добавляют 0,18 мл (1,28 ммоль) хлорметилпивалоата при комнатной температуре. Смесь выливают в воду, экстрагируют этиловым эфиром (3 х 20 мл). Экстракты сушат

Na>SO<, растворитель выпаривают, по" лучая 500 мг (88 ) темно-оранжевого масла.

Хроматография на колонке с силикагелем при элюировании смесью хлороформ — этилацетат 9:1 дает 315 мг пивалоилоксиметил 6-(изотиазол-3-ил) метилен-1,1-диоксопеницилланата (55 ) в виде светлого масла.

1Н-SIMP (СОС1g), ч/млн (дельта):

1,22 (м, 9Н); 1,5 (С, ÇH); 1,6 (с, 3H); 4,44 (с, 1Н); 5,64 (с. 1Н); 5,84 (АВ квартет, 2Н); ?,36 (с, 1Н); 7,38 (д, 1Н), 8,72 (д, 1Н).

Пример 8. Аллил 6-(фуран-2-ил)метилен-.1,1-диоксопеницилланат (Е)- и (Z)-изомеры.

К раствору 310 мг (0,84 ммоль) аллил 6-альфа(фуран-2-ил)-оксиметил-1,1-диоксопеницилланата в 5 мл метиленхлорида прибавляют О, 14 мл (1 ммоль) триэтиламина и 0 1 мл (0,924 ммоль) трифторметилсульфонилхлорида и смесь перемешивают в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию гасят водой, проводят экстрагирование метиленхлоридом, экстракты сушат над безводным сульфатом магния, растворитель выпаривают под вакуумом и получают

330 мг сырого продукта. После очистI ки колоночной хроматографией на силикагеле с использованием хлороформа в качестве элюента получают 130 мг продукта, который, как показывает анализ с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, представляет собой смесь 4: 1 (Е) и (Z)-изомеров. 1Н-SIMP (CDC1g), ч/млн (дельта):

1,47 (синглет, ÇH); 1,61 (синглет, ЗН); 4,47 (синглет, 1Н); 4,75 (дублет, 2Н); 5,1-6,2 (мультиплет, 4Н);

5,52 (двойной дублет, 1Н); 6,8 (мультиплет, 1Н); 7,15 (дублет, 1H); 7,6 (дублет, 1Н).

Пример 9. Аллил 6 (Е)-(Nацетилпиррол-2-ил)метилен-1,1-диоксопеницилланат.

7 13969

А. Лллил 6-(N-ацетилпиррол — 2-ил) ацетоксиметил-1,1-диоксопеницилланат.

Аллил 6-(N-ацетилпиррол-2-ил)оксиме тил-1 1-диоксипеницилланат (210 мг

»

0,51 ммоль) растворяют в 3 мл тетрагидрофурана, прибавляют 0,15 мл уксусного ангидрида и 0,2 мл пиридина и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакцию гасят водой, проводят экстрагирование метиленхлоридом, экстракты сушат, концентрируют и получают 17! мг (75@) желтых кристаллов.

1Н-SIMP (CDC13), Ч/MHH (дельTa): 15

1,4 (синглет, ÇH), 1,6 (синглет, ЗН);

2,15 (синглет, ÇH), 32,55 (синглет, 3H); 4,15-4,3 (двойной дублет, 1Н);

4 4 (синглет, 1H) 4 6 4 8 (мультиплет, ЗН); 5, 1-6,0 m (мультиплет, 3H); 6, 1-6, 6 (мультиплет, 2Н), 6,6—

7,4 (мультиплет, 2Н) .

В. N,О-диацетатный продукт (170 мг, 0,38 ммоль), полученный на стадии А, растворяют в метиленхлориде и при- 25 бавляют 47 мг (0,38 ммоль) 1,5-диазабицикло (4,3,0)нон-5-ена (ДБН).

Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Прибавляют воду и смесь экстрагируют метилен- З0 хлоридом. Экстракты сушат, концентрируют и получают 158 мг масла, которое очищают хроматографированием на силикагеле с использованием 27.— ного этилацетата в хлороформе в ка35 честве элюента, и получают 108 мг продукта в виде бледно-желтого масла.

1Н-ЯИР (СРС1 g) ч.млн (дельта): 1,5 (синглет, ÇH); 1,6 (синглет, ÇH);

2,55 (синглет, ÇH); 4,4 (синглет, iH) 4

4, 65 (дублет, 2Н); 5, 0-6, 0 (мультиплет, 4Н); 6, 3 (трипле т, 1Н); 6, 8 (двойной дублет, 1Н), 7,2 (мультиплет, 1H) »2 (дублет, 1Н)..

Аналогично получают целевые продукты в виде аллиловых эфиров, выходы и физико-химические характеристики которых приведены в табл. 2.

Пример 10. Исходя из аллиловых эфиров 6-R -метилен-1 1"диоксопе-50 нициллановой кислоты, полученных выше, получают натриевые соли или калиевые соли 6-R -метилен-1,1-диоксопенициллановой кислоты, выходы и физико-химические характеристики которых

55 приведены в табл. 3.

Пример 11. б-(E)-(1-метилимидазол-2-ил) -ме тилен-1, 1-диоксопеницилланат калия.

69 8

А. Аллил б — (1-метилимидазол-2-ил) оксиме тил-1, 1-диоксопеницилланат.

6- (1-Иетилимидазол-2-ил) оксиметил-1, 1-диоксопеницилланат (472 мг, 1,23 ммоль) ацилируют по методике, описанной на стадии А примера 9, и получают 392 мг (75K) аце токсисоедикения в виде смеси двух изомеров.

1Н-Е1Р (СРС1з)» ч. млн. (дельта):

1, 4 (синглет, 1, 5H), 1,5 (синглет, 1,5 Н); 1, 6 (синглет, 1,5 Н); "f, 7 (синглет-1Н); 2,2 (синглет, ÇH); 3, 7 (синглет, 1,5 Н); 3,75 (синглет, 1,5 Н); 4,0-6, О (мультиплет, 8Н);

6, 3-6,5 (мультиплет, 1Н); 6,8 (мультиплет, 1Н), 7, О (мультиплет, 1Н) .

В ° Аллил 6- (Е) -(1-ме тилимидазол-2-ил) метилен 1, 1-диоксопиницилланат.

Продукт, полученный на стадии А (392 мг, 0,920 ммоль), 5 мл метиленхлорида и 0 115 мл 1,5-диазабицикло (4,3,0) нон-5-ена (ДБН) превращают в целевой сложный эфир с выходом 537. по методике стадии В примера 9.1Н-ЯМР (СРС1э), ч/млн, (дельта): 1,5 (синглет, ÇH); 1,6 (синглет, ÇH); 3,7 (синглет, ÇH); 4 35 (синглет, 1Н);

4,7 (мультиплет, 2Н); 5,0-6,1 (мультиплет, ÇH), 5,7 (дублет, 1Н); 6,9 (мультиплет, 1Н); 7,1 (дублет, 1Н);

7,2 (мультиплет, 1Н).

С. ABJ1HJIGHbIH сложный эфир, по лученный на стадии В (163 мг, 0,45 ммоль), превращают в целевую калиевую соль. Полученный продукт представляет собой 143 мг (87X) индивидуального (Е)-изомера.

1Н-SIMP (ДИСО)» ч/млн (дельта):

1,38 (синглет, ЗН); 1,45 (синглет, 3H), 3,8 (синглет, 4Н);5,68 (синглет, 1H); 7, 15 (синглет, 1Н); 7,35 (мультиплет, 2Н); 13С-ЯИР (ДАССО)» ч/млн (дельта): 18,5, 20,2, 32,5, 64,4, 66,2, 70,55, 1 15»2» 124» 6» 129 ° 9» 130,6, 141,2, 167,9, 169,0.

ИК-спектр (KBr) см : 1614, 1762, 3428.

Испытания in vitro p «лактамазной активности. у-лактамазную ингибирующую активность определяли путем сравнения результатов in vitro MHK испытаний для испытуемого соединения в комбинации с хорошо известным бета-лактамаым антибиотиком — ампициллином. -лактамазное ингибирование определяли степенью

9 13 синергизма комбинации в сравнении с непосредственно с ампициллином. Минимальные ингибирующие концентрации (МИК) определяли в микрограммах/мл, применяя спинно-мозговую вытяжку (ВН1) в агаре и расположенный в углу глаза репликационный аппарат.

Содержимое пробирок, выросшее в течение ночи, 100-кратно разбавляли, чтобы испольэовать как стандартный прививочный материал (20000-10000 клеток в приблизительно 0,002 мл имеющей место агарной поверхности:

20 мл ВН1 агар/чашка).

Осуществляли 12 2-кратных разбавлений испытуемого соединения, доводя концентрацию испытываемого лекарства до 200 микрограмм/мл. Простые колонии отбрасывали на счетные пластины спустя 18 ч при 37 С.

Чувствительность (NHK) подопытных микроорганизмов проявлялась при очень низких концентрациях испытуемого. соединения или комбинаций соединений, способных полностью ингибировать рост, о чем судят невооруженным глазомер

Результаты испытаний суммированы; в приведенной ниже табл. 4, из которой можно видеть, что каждое из соединений по изобретению обладает высокой степенью в-лактамазной активности против однрго или нескольких микроорганизмов, т.е. являются высоко эффективными ф-лактамазными ингибиторами.

При испытании соединений на беталактамазную активность они не вызывали серьезных признаков токсичности при испытуемых дозах и их следует от нести к категории соединений, обладающих степенью токсичности от низкой до умеренной.

Формула изобретения

Способ получения производных 6-за- мещенной метилен-1, 1-диоксопеницил96969 !О лановой кислоты или ее солей с щелочными металлами, или ее сложных эфиров формулы

О О ,Г

R2-СН $ СН3

10 где R, — водород или щелочный металл, пивалоилоксиметил или аллил;

R — тиазолил-2, 4-метилтиазолил-2, бензотиазолил-2, 6-метоксибензотиазолил-2, изотиазолил-3, 2-метил-1,2,4-триаэолил-3, 2-фенил-1,2,3-триазолил-5, 1,2,3-тиадиазолил-4,5-метил-1,2,4 оксадиаэолил-3 фурил-2, тиенил-2, 1-ацетилпирролил-2, пиридил-2, пиридил-3, пиридил-4, пиридазинил"3, пиримидинил-4, пираэинил-2 или винил, отличающийся тем, что соединение общей формулы

25

ORg g g снз

I, сн, " COOR

35 где R> — водород или ацетил;

К имеет указанные значения;

R — водород или аллил; обрабатывают 1,5-диазабицикло 14,3,0) нон-5-еном в среде метиленхлорида или щелочной солью неорганической кислоты в водной среде, или трифторметилсульфонилхлоридом при комнатноф температуре с последующим выделением

45 целевого продукта в виде свободной кислоты, ее соли с щелочным металлом или ее соответствующего сложного эфира, 12

1396969 л

Е

Э

Ц

"1 л х

»» .л а лЩ

0Х E

» Э ,а

С Ъ 4

ОЕ жХ е М л

-Ц0

4 л х

ХСЧ Э еч л5

Х л С л Е»

E « 4г е- х !;х

»- а а4 -а Д, л » л и ený .г Ц л

° 4(0 4

4 !

° °

0 Z

O .л а Х л О г л Х

° ° о не л а\О .а

° а л

Е» х е г ъ Ц

»

4 у л л л

О г» л Х

° — С ) !

3 уо

Х О, I

Э Э о !!!

Е

Ц Э еоо

Х л Э 0

P- 3

Ы л

t(о о

v л а

° л !»

e э!

:х !=

4 4

gin 3 о» и л

ОECO

Э Л л Ц л

4 б

«о

Е» н ф а л!

l е о

И Х

a O

ЬЯ

ИЕ о а Н ю!

/ (-

Р о

Х

Д О е о и

Е О

Э л !

» !Ц

6 !0 с ) el л

Е» t( е а

« o . у""° «0-

Х -л

«ОХ

E сч

ЭО л

4 (й у .0 . х

Р ) о ч» л л ф .-8

Х х Еч !

3 ф

5» щ !

»

Ц .а !>в Г»

Е х хо

-о л а \О

Е»

Э .а ! г

4Х

Х сч ж и

Е» е

С 1 аЪ E

° л Ъ х z

CV

I=o а о

Е» л 0

go

ЙЕ m e o

Р

И 4 Э сч Е

00 0 61 » Я

° a л х со м

i#i a »» о

° л ° °

aW.» »E ХР1

Э с»4 -

4 л Д л х Е-сч

Э л

1 О

° ф

Е» е х

\Q ь СО

Ц О Г л !»

2..5

aw лх е.

- лх .-л Ц»» л х е z

Э Е»

Э

Е, тз сО

Э k(л

Q - со Е» (! °

О !>з

u aX Х !

»»»» о26о

u u

oeE жЕ ЭО о! 6ээ4 оцоц !

»

Х Э аХ

Р 1 !» в- „

Е» 5 г ц 2

4 4-O Г» Ц

4 л

v 1! лХ 0 а(° С ) » . т»

° л

»» г»

0 а- a+ g ч» Г

iso u сЧЕ л

1О ф г W ф

-цх - о ц

4 cV aCI 4

--5 -Д 5 г 0 E CO 0 ф л а aW ! а

СЧ 4 Э Х О ааГ y л Л

e+ugQлх г Е»» !»

4 ° a Д у хсо Е- х и e1

Е, 00 Е» Ь W 1 Е» Э О Ж 1 Э

a g л а 0 Я 4»

» — 4 и ». 4

l 396969

l3! л

Е» л (:- Е" Х

4 Д(ц ! е о ф

CO ° ë O О л Х л Е-ю л д о ! Ц

° о о

Е» « Я»Х Е О с1 (л

4 Ф е. 5 «о

Щ ОХсо О

«» л

4 л «

О

f» х ° ° л ф С (,» х м о. ей

Щ

«-M 4Ì О Х л а aQ ("1 U л

Г л л (»

4 !

° лС! (сi ° a х счах л .л Ф

u w л, - Х U Х

» сч

Ц:) л («,! а л О л С:Е л л х с ) л

Е» (U (° л« .л(«! (») г л х «х с ъ « - л о

СО л л л (( х с"( о

«о л ° л л

Ц г Г Х

Р ) .с л

I! Р о 1 о Й о о ф х

° х

o e

I е о

Йо w

ОО,5

4 Е О охее х о и ф

« о" (C n л с»)

uD

«

О! !Х л

Д л

° Е 4 E Uс СО ф « л\О

Х w-- u с сЧ «- !» 1 E л -

О g (О CI О и л л(«ф Е» л ъО /) !

» LD Д» — 4 л « О ф л Ц Х (1 л

5 оr

CQ g Ц .л (С л CQ - Х - л

E м1 (» Х « »

Д a»â€” О- Х а л (« л « Х («! л Е» л «с!

° лсО Q) («! Е» л а . ъ — г-«g Ц Е Е» Е»

Х «О4.Ц Е Е

С«! л - Х.«4 (1

Е «сЧСЛU(X Х Х Х и !- r UE Е»

4 Е л «» л«г Д Д

О Х (Е» сч еи 55Щ "ле( л U Х «. л Ц л и f ЙЯ»-4Ф л

Е» е с ) !

» л

Д

-л Ъ

Хх в л

Ц

«Г О

CQ a л сГ),л с«! г л л (»1 («! г л л Х ал

° «о л Г (V лЩ л О л «» с«4 сО л ° л

U г х («4 сО л

a U о л Е» О Е

Ц

° 4 «

P- U в

Е О ф (» л

4 (-° л л х -

Р )

° л л ох (» (/ л ° л л а ! с 1 (( лО л

"Е О I г О (»1

Х а л счел

Г у

tA

° л и л о О ф л (Ч 4 .-1

С )

"О л»

Е» л е w

Ц

° л г хх о с л О Е» ф л сЧ 4

« i л б

С!

О

1О> л 4»

f» О б (Ц

4 л л Х сг)

Х iОCO

ХО- О в» лО1 а

Е-ю CQ л Р ф . a л (юхл

4 а ° °

ОХ Е ф М

М -42 ( ("Ъ Е» сч („оя

4 «- (1 - х о х (,л л л е х

Щ (и ((«4

4 а а .Ф

Ц

QО г х о лM «» лл

° л Е» Щ, «г е ax (Х л с Ъ 4 л Х л л х е л

Е Ц Х Е СО (л

4 4

2» °

UафUг сЧ Х 4

c4 ° CO М в

«Х U ag ч (» о л

Е» л л Е» а- ! С4

Щл!»Щщдg ° л (:О(Л(Ч Ех

4W I О «,сЧ 4W »ь Д Х

«о 4 - х Z 4Х -.! Ч О Х Е Х

О л Х Е Х U л g л Х

° «и u î е

Х л О Х л (»1 л 1О !» л

-г О E E» 1 б 4

«сч л "(: (: о л

«л

Д.л!.О Ой

3 ф а .л ° a g g Е л» х х Е- . е»х (:-. (! с 1 4 ЩХХ ДO 4 лсЧ Д

O Х (СЧСЧСО 4 аале «Юiо

СО Е» Х Й и" е»Х > ф и Х л л. л g ф U Х .«((1 Я Х

Ц«г Е Е» Е» л - гч г г ° л 4 Д ф ф 4 X .a л Х C4 g Х g CQ ч Х 0 «С4 AС,! а хо х л a) й- сч х О f» xo E e

° О\ U л g g л л U л Щ л л Щ л- E f»ло с> q E» О Nоо л »в Д Д 4 Щ л I 4»О -«CQ r g -СЧ О л Х (: Е О Х ф ° ° -, «л Q «« -«! Х ЕcO °

«Х л g g X л лX U Х Х л

4Х- -С â€” Е 5 ж

)396969

)6

Та блица 2

О 0

Rg СН.. S СН3 о СООСН СН2

Выход, 7 Силикагель 1Н-ЯИР (CDC1 ) ч/млн (дельта): элюант

))4 п/и (Е)-изомер: 1,5 (с, ЗН), 1.7 (d, ЗН);

4,5 (с., 1Н), 4,7 (д, 2Н); 5,5; (д. 1Н); 5, 1-6,2 (м, ЗН); 7, 3-7,5; (м, 2Н); 7,7-8,0 (м, 1Н), 8,53-8,83 (м, 2Н), (Е)-изомер: 1,48 (с, ЗН), 1,6 (с, ЗН);

4,5 (с, 1Н); 4,7 (д, 2Н), 5,25 (с, 1Н);

5,1-6,2 (м, ÇH), 6,88 (с,!Н), 7,2-7,5 (м, 1Н); 8,43-9,0 (м, ÇH) 22 (E) Этиловый

19 (Z) эфир

2 36

Смесь изомеров: 1,45 (с, ЗН); 1,62 (с,ÇH);

4,5 (с, 1Н), 4,7 (д, 2Н); 5 2 б 2 (м,4Н);

6,75 (с, 0,3 Н), 7,2-7,5 (м, 1,7 Н), 7,67,85 (м, 1Н); 8,5-8,83 (м, 2Н).

1,45 (с, ÇH); 1,6 (с, ÇH)у 4,4 (c, ЗН);

4,7 (д, 2H); 5,0-6,2 (м, ÇH); 5,25 (д, 1Н); 7,0-7,65 (м, 4Н)

1,45 (с, ЗН); 1,65 (с, ÇH); 3,7-4,2 (м, 1H); 4,45 (с, 0,6Н); 4,5 (с, 0,4 Н) 4,75 (д, 2Н), 5,1-6,4 (м, 7Н)

1,48 (с, ЗН); 1,63. (с, ЗН); 4,45 (с, 1Н);

4,73 (д, 2Н); 5, 1-6,2 (м, ЗН); 5,77 (д, 1Н) 7,27 (д, 1Н), 7, 1-8, 1 (м, ÇH); 8,6 (м, )Н) .

Этилацетат:гексан (1: 1) 3 (Я 14

CCHHCC11ç

4 СН2= СН вЂ” 18

СНС1, 5 Ql) N

Этилацетат: гексан (1: 3) О О

СБЗ "CO0R, Таблица 3

И)<(Щг) см- 1H-3HP (D О), ч/млн (дельта):

Изомер Выход, Х 2 и/и

4 5

1 2 3

1621, 1678, 1764, 2979, 3402, 3472

Уг) It 3:1 47

О (е): () (250 NHz спектр) 1,5 (с, ЗН); (с, ЗН); 4,25 (с, 1Н); 5,57 (с, 0,25H); 5,9 (с, 0,75Н);

6,65 (м, 1Н); 7,0 (д, 1Н); 1,17 (д, 0,25H); 7,36 (с, 0,75H);

7,78 (м, 1Н) (60 HHz спектр): 1,56 (с, ЗН);

1,65 (с, ÇH); 2,68 (с, ЗН);

4,25 (с, iH); 5,88 (с, 1Н);

6,5 (т, 1Н); 7,0 (д, 1Н) 7„68,0 (м, 1Н); 8,2 (с, 1Н) 2

1 (Е) 56

1 0 3

1622, 1728

1764, 3438

1396969

1623, 1778

3462

1303, 1623

17619 3445

1623, 1778

3448

1619, 1773

3425

1620, 1773

3430

9 К (Е) 1614, 1770

3406

1590, 1621

1770, 3454

1 1 з

4 +Q 1 г (Е) . 91 уО 1 (К)+(К) 93

6 NCl () (е) 33

10 < (E) l8

Продолжение табл.3

1,55 (с, ÇH); 1,62 (с, ЗН), 4,23 (с, 1Н); 6,05 (с, 1Н), 7,4-8,8 (м, 5Н)

1,55 (с, ÇH), 1,65 (с. ÇH);

4,3 (с, 1Н); 5,6 (с, 1Н) 6,96 (с, 1Н); 7,1-9,0 (м, 4Н)

1,5 (с, ЗН); 1,6 (с, ÇH); 4,3 (с, 0 ÇH); 5 55 (с, 0 ÇH); 6 0 (д, 0,7Н); 6,95 (с, О,ÇH); 7,27,8 (м, 4,7Н).

1,55 (с, ÇH); 1,60 (с, ÇH); 4,2 (с, 1Н); 5,8 (с, 1Н); 7,0-7,9 (м, 4Н)

1,59 (с, ÇH); 1,60 (с, ÇH);

4 22 (с, 0 6H); 4 3 (с, 0 4Н), 5,53 (с, 0,4Н); 5,75 (с, 0,6Н);

5,5-6,2 (м, ЗН)

1 5 (с, ÇH); 1 6 (с, ÇH); 2 5 (с, ÇH); 4,28 (с, 1Н)) 6,05 (д, 1H) 7,2-7,35 (м, 2Н); 7,4 (д, 1Н); 7, 67 (т. 1Н); 13С-ЯИР (Р О) ч.млн (дельта): 20,719;

22,436; 26,032; 68,386; 68,533;

74,489; 120,794; 128,334;

132,843; 140,670; 152,549;

163,012; 174; 041; 175, 657:. (D F0+DMSO): 1, 5 (с, ЗН ) 4, 1 (с, 1Н); 5,9 (д, 1Н); 7,5 (д, 1H). 8,5-9,0 (м, ÇH) (D<0): 1,50 (с, ÇH); 1, 60 (с, ЗН), 4,23 (с, 1Н), 5,90 (д,1Н);

7,1-8,0 (м, 4Н); 8,57 (м, 1Н) l9

1396969

0 0

8 Снз („Г сн

COOR1 го

Таблица 4

R2 Сн

R - Н,Na К

Штамм Только одно АИФ + соед. Синерсоединение 1:1 гизм АИФ

Радикал К

Организм

200 с 20

+NI

78 +PS

>100 +NI

6,25 +N

01А400

200

3 Е.Coli

>200

200

> 200

<20

+NI

>100 +NI

25 +S

100 +S

> 100 +NI

6 Ps. aerug.

7 К1eb . pneum.

) 200

> 200

8 Serr. mar.

> 200

>200

9 Enter. cloa

> 200

10 Morg. morg

+PS (20

> 200

+NI

1,56

> 200

+PS

100

> 200

6,25

) 200

200 (20

> 200

>100

+NI

12,5 . +PS

>200

63А095

>200

+PS

) 100

+NI

)200

67В009

97А001

>200

10

1 Staph aureus 01А005

t 2 «ее»

51А129

51А266

5 1А470

52А104

ЗЗА079

63А095

67В009

97А001

01А005

01А400

51А129

51А266

51А470

52А104

53А079

4 5 6

N Я вЂ” Я

>20

+NI

6,25 +S

+NI

> гоо

>100

) 200

6,25 +N

100

2О

+NI (к)+(к) > 200

> 100

+NI

) 200

) 200

1ОО

) 200

»оо

+NI

) 200

) 200

01A005

i 2О +NI .39 +PS

50 +PS

3,12 +N

) 200

01А400

> 200

> 200

200

<20

+NI

> 200

) 100 +NI

3, 12 +PS

25 +PS

1ОО +A

3,12 +PS

»оо

> 200

>2оО

>гоо

> 200 с 20

+NI

) гоо

+PS

> 200

+PS

3,12 .+N (20 +NI

> 100 +NI

> 200

> 200

22 1396969

1 2 ) 3 1 4

01A005

01А400

51А129

5 1А266

51А470

52А104

53А079

63А095

678009

97А001

51А129

51А266

51А470

52А104

53А079

63А095

67В009

97А001

01А005

01А400

51А129

51А266

51А470

52А104

22

Продолжение табл. 4

1396969

> 200

> 200

> 200

10

) 200 (ig

> 200 (20

>200

+PS

>200

+PS

> 200

5 1А470

100

> 200

> 200

> 200

>200

> 200

> 200

> 200

) 200

СОСН 3

> 100

+NI

> 200

51А470 (20

+NI

100

) 200

) 200

)200

)200

+PS

) 200

53А079

63А095

67В009

97А001

01А005

01А400

51А129

5 1А266

52А104

53А079

63А095

67В009

97А001

01А005

01А400

51А129

51А266

52А104

53А079

63А095

67В009

97А001

Продолжение табл. 4

6.25 +PS

6,25 +PS

3,12 +PS

3.12 +Я (20 +NI

>100 +NI

3,12 +PS

6,25 +PS

100 +А

6,25 +PS (20 +NI

25 +S

3,12 +N

)100 +NI

50 .+А

50 +PS

) 100 +NI

25

1396969

5 ) 6

> 2O0

> 200

) 200

> 200

+Ni

<20

200

>200

200

> 200

) 200

) 200

+NI (20

> 200

> 200

) 200

) 200

100 с 20

+NI

) 200

> 200

) 200

>200

) 200

) 200

) 200

) 200

)200 (20

+NI

) 200

) 200

01А005

01A400

51А129

5 1А266

51А470

52А104

53А079

63А095

6?8009

97А001

01А005

01А400

51А129

51А266

5 1А470

52А104

5 ЗАО79

63А095

678009

97А001

01А005

01A400

51А129

51А266

5 1А470

52А104

Продолжение табл. 4 (20 +NI

i2,5 +А

)100 +NI

3,12 +N

> 100 +NI

50 +А

50 +PS

100 +S

12,5 +PS

12,5 +PS

> 100 +NI

3,12 +NI

>100 +NI

50 +К

50 +PS

100 +А

25 +PS

20 +NI

6,25 +PS

)100 +NI

3,12 +N

)100 +NI

l396969

53А079

63А095

67В009

97АОО!

> 200

25 +S

25 +PS

>100 +NI

> 200

>200

> 200

> 200

410 +NI

3,12 +8

>200

) 200

>50

+NI

> 200

3,12 +N

> 200

<10

+NI

> 200

>50 +NI

>200

+А

) 200

50 +S

>50 +NI

12,5 +А

67В009

> 200

97А001

> 200

> 200 а20

+NI

>200

>200

25 +PS

1,56 +А

>200

100

<20

+NI

>100 +NI

6,25 +PS

12,5 +N

50 . +PS

3,12 +PS

> 200

>200

>200

>200

>200

01А005

01А400 с 20

+NI

100

+PS

100

j 2 j 3 j 4

01А005

01А400

51А129

51А266

51А470

52А104

53А079

63А095

01А005

01А400

5 1А129

51А266

51А470

52А104

53А079

63А095

67В009

97А001

28

Продолжение табл. 4

5 6

1396969

Продолжение табл;4

100 +S

6,25 +N

> 200

51А129

5 1А266

51А470

52А104

53А079

63А095

67В009

97А001 (Е)+(Е) >200

200

<20

+NI

> 100 +NI

25 +А

50 +S

> 100 +АТ

> 200

>200

>200

>200

>200

+А

П р и м е ч а н и е: В .табл. 4 использованы следующие сокращения: АМФ - ампициллин, PS — ясновыраженный синергизм; S — синергиэм;

А — дополнительный эффект; N — отсутствие эффекта; AT— антагонизм; NI — нет интерпретации.

Составитель ЗеЛатыпова

Редактор А.Доиииич Техред Д.Сердюкова КорРектор Г.Решетиик

Заказ 2508/59 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосквар Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4