Способ количественного определения метионина
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
- = 4У (Ч) 4 G ul N 21/78
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
К А BTOPCKOMV СВИД,ТЕЛЬСТВУ (21) 4166611/28-04 (22) 24.12.86 (46) 23.05.88.Бил. М 19 (71) Ленинградский научно-исследовательский институт гигиены труда и профессиональных заболеваний (72) В.П.Якимова (53) 543.42.062 (088.8) (56) Лаурс Ю.P., Захаранс В.Я., Банковский Ю.А. Определение S-содержащих функциональных групп в органических соединениях. Спектрофотометрическое определение метионина и некоторых его производных с использованием перйодатного окислителя.
Изв.АН Латв.CCP Сер.,Химия, 1982, У ), с.59-62.
Авторское свидетельство СССР
Ф 731362, клG 01 N 21/24, 1980.
„„Я0, 1 А1 (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИОНИНА (57) Изобретение касается аналитической химии, в частности определения метионина в фармацевтических препаратах. Для повьппения чувствительности анализ ведут последовательной обработкой пробы раствором ацетата или нитрата ртути (II), N,N-диметил-п-фенилендиамина и FeCI> в НС1 при нагревании на водяной бане. Затем полученный раствор фотометрируют. Способ позволяет увеличить в 4 раза чувствительность аналиэа при исключении использования токсичного растворителя. 4 табл.
) 397812
Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения метионина (Ы-амино-(— метилмеркаптомасляная кис5 лота) .
Целью изобретения является повышение чувствительности способа.
Пример. Точную навеску метионина (0,0400-0,2000 г) растворяют в мерной колбе емкостью 1 л в дистиллированной воде. R колориметрическую пробирку с пришлифованной пробкой вносят 0,5 мл 57.-ного раствора ацетата ртути (II),0,2-2,0 мл раствора метионина, осторожно перемешивают, доводят объем раствора до
8,5 мл дистиллированной водой и помещают пробирку в кипящую водяную баню на 10 мин. Раствор охлаждают до ком- 20 натной температуры, после чего приливают 0,5 мл хромогенного реагента (смесь 0,27-ного раствора N,N-диме-" тил-и-фенилендиамина гидрохлорида в концентрированной соляной кислоте и 25
47-ного раствора хлорида железа (III) в 2 н.растворе соляной кислоты, взятых в соотношении 3:1) . Раствор перемешивают и через 15 мин фотометрируют при длине волны 500 нм в кювете 30 с толщиной слоя 2 см относительно холостого раствора, который готовят одновременно и аналогично пробе.
Содержание метионина находят по градуировочному графику зависимости оптической плотности от содержания метионина в фотометрируемом объеме раствора,. Для построения градуиро-, вочного графика в серию колориметрических пробирок, содержащих по 40
0,5 мл 57-ного раствора ацетата ртути, вносят стандартный раствор метионина с концентрацией 0,1 мг/мл в количестве О; О,l 0,2; 0,4; 0,6; 0,8;
1,0, l,5 и 2,0 мл и доводят объем 45 растворов до 8, 5 мл водой. Градуировочные растворы обрабатывают и фотометрируют аналогично пробе. Линейность грудуировочного графика наблюдается в диапазоне 0-200 мкг метионина. Окраска устойчива в течение
4 ч. Результаты определения метионина обрабатывают методом математической статистики.
Результаты определения метионина в растворах представлены в табл.1, Тезультаты определения метионина в таблетках представлены в табл.2.
Данные о влиянии условий предварительной обработки анализируемых растворов хорошодиссоциированными солями ртути и времени нагревания проб в кипящей водяной бане на результаты измерения концентрации метионина приведены в табл.3.
Сравнительные данные, характеризующие чувствительность, селективность, достоинства и недостатки предложенного и известного способов, отражены в табл.4.
Предлагаемый способ определения метионина в сравнении с известным отличается более высокой чувствительностью (в 4 раза), селективностью, устраняет необходимость применения токсичного растворителя. формула и э о б р е т е н и я
Способ количественного определения метионина путем обработки пробы анализируемого вещества химическим реагентом при нагревании на кипящей водяной бане с последующим фотометрированием полученного раствора, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, обработку ведут последовательно сначала раствором ацетата или нитрата ртути (II) в воде, при нагревании на кипящей водяной бане, затем раствором К,й-диметил-п-фенилендиамина и хлорида железа (III) в соляной кислоте.
1397812
Т а б л и ц а 1
Метрологические критерии при р 0,95
Оптическая
Содержание метионина в растворе, мкг плотность, А, при и 6
ОтносительТочность прямого измерения ещk ° S 3
Среднее квадратичное от ное стандартное отклонение, S„ клонение
S I O
3,11
2,96!
5,16
5,41.20
4,86
4,63
3,87
3,68
4,00
3,82
4,47
4,26
I 00
6,28
5,98
150
5,92
5,64
200
Таблица 2
Взято на анализ раствора таблетки в 1 л
Оптичес- Найдено метионина
Метрологические кая плот ность хар-ки воды мл
Х0,2510
$0,0025
0,39
0,25
0,5
8 0,001
Заданная масса, г таблетки метионина в таблетке
0,045
0,090
0,181
0,269
0,359
0,450
0,671
0,889
0,559
0,565
0,569
0,571
0,560
0,066
0,057
0,025
О, 014
0,011
0,009
0,009
0,006 в 0,5 мл в таблетраствора, ке,г мкг
124,2 0,2480
125,6 0,25! 2
126,4 0,2528
126е9 Ов2538
124,4 0,2488
1397812
Таблица 3
Оптическая
Задано метиони
ПЛОТНОСТЬ
А при и 4 на, мкг
I0O
20-25
20-25
20-25
0,5
100
0,5
I O0
1,0
100
l 00
0,5
10Î
100
0 5
100
100
0,5
l 00
100
0,5
100
100
0,5
100
100
I,0
Таблица4
Способ
Нижний предел определения
Растворитель
Селективнос ть мкмоль мг/100 мл
С применением аллоксангидрата (иэвестный) Диметилфорамид (токсичный органический растворитель) Не указана
0,27
0,400
Предлагаемый
0,067 0,125 Вода
Определению метионина не мешают алании,аргинин,аспарагин,валин, глицин,лейцин, амины сахара, глицерин, жирные кислоты, спирты, альдегиды
Условия обработки растворов до прибавления хромогенного реагента
Добавлено соли ртути Температу- Время о (5X-ный раствор),мл ра, С экспоэиции>мин
Ацетат Нитрат
0,370
0,450
0,452
0,450
0,43б
0,449
