Способ определения гистидина гидрохлорида

 

Изобретение касается аналитической химии, в частности определения гистидина гидрохлорида, применяемого для лечения гепатитов и язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Цель - повышение чувствительности определения и упрощение способа . Анализ ведут обработкой пробы цветореагентом - диалуровой кислотой в среде диметилформамида в присутствии ацетата натрия при нагревании до . Полученный окрашенный раствор фотометрируют. Чувствительность определения 860 мкг/мл. Способ позволяет сократить время анализа в 2,5 раза без использования токсичных реагентов . 4 табл..

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (50 4 G 01 N 21/78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A ВТОРСНОМ .К СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

llO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4145196/28-04 (22) 23.06.86 (46) 15.06 ° 88. Бюл. Р 22 (71) Запорожский медицинский институт (72) В. Д. Янчук, И. В. Павлючек и В. В. Петренко (53) 543.432(088.8) (56) Временная фармакопейная статья

42-603-76. -Субстанция гистидина. Полюдек-Фабини P. и др. Органический анализ. Л.: Химия, 1981, с. 174. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГИСТИДИНА

ГИДРОХЛОРИДА (57) Изобретение касается аналитической химии, в частности определения

„„SU„„1402866 А 1 гистидина гидрохлорида, применяемого для лечения гепатитов и язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Цель — повышение чувствительности определения и упрощение способа. Анализ ведут обработкой пробы цветореагентом — диалуровой кислотой в среде диметилформамида в присутствии ацетата натрия при нагревании до

100 С. Полученный окрашенный раствор фотометрируют. Чувствительность определения 860 мкг/мп. Способ позволяет сократить время анализа в 2,5 раза без использования токсичных реагентов. 4 табл.

1402866 г/с =D о

D 1250 Со о

D P 1

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения гистидина гидрохлорида, применяемого для лечения гепатитов, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Цель изобретения — повышение чувствительности определения и упрощение способа, 10

Способ осуществляют следующим образом, Пример 1. Количественное определение гистидина гидрохлорида.

Точную навеску в пределах подчиня- 15 емости закону Вера 1,6 — 2,8 мг (100 мл растворяют в 5 мл воды).прибавляют около 0,01 г безводного ацетата натрия и диметилформамидом полученный раствор переносят в мерную 20 колбу вместимостью 50 мл. Этим растворителем доводят до метки. К 1 мп разбавления прибавляют 0„5 мл 17.-ного раствора диалуровой кислоты в ДМФА и полу енну реакционну смесь выдер- 25 живают в кипящей водяной бане 5 мин.

Затем раствор охлаждают, прибавляют

1 мп 5%-ного водного раствора СаС1 и диметилформамидом переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Параллельно проводят опыт со стандартным раствором субстанции гистидина гидрохлорида (исходный раствор 0,04 r в 100 мп) и раствором — фоном, не содержащим исследуемого соецинения. 35

Величину оптической плотности анализируемых растворов измеряют на фоне контроля при помощи спектрофотометра при 480 нм в кюветах с толщиной слоя 1 см. 40

Расчет процентного содержания гистидина гидрохлорида проводят по формуле где D - оптическая плотность анализируемого раствора;

D — оптическая плотность стандартного раствора;

С, — концентрация стандартного спектрофотометрируемого раствора (0,0016 г в 100 мл};

Р— навеска, г.

В табл. 1 приведены результаты количественного определения гистидина гидрохлорида в субстанции.

Пример 2. Количественное определение гистидина гидрохлорида в

47.-ном растворе для инъекций. 1,00 мл

47.-íîãa раствора гистидина гидрохлорида переносят в мерную колбу вместимостью 100 мп, добавляют 100 мл воды и около 0,02 r безводного ацетата натрия, диметилформамидом доводят до метки. 1,00 разбавления помещают в пробирку, прибавляют 0,5 мл.17-ного раствора диалуровой кислоты, а затем поступают как в примере 1.

Расчет граммового содержания гистидина гидрохлорида в 1 мл раствора проводят по формуле

В табл. 2 приведены результаты количественного-определения гистиди" на гидрохлорида.

В табл. 3 приведены данные по применению различных солей кальция.

В табл. 4 представлена сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов.

Таким образом, предлагаемый способ количественного определения гистидина гидрахлорида по чувствитель- . ности превосходит известный способ примерно в 1,5 раза. Относительное стандартное отклонение для результатов анализа субстанции 0,0057, что свидетельствует о высокой точности разработанного способа. Кроме того, способ прост в выполнении и исключает применение высокотоксичных реагентов.

На реализацию способа времени затрачивается примерно в 2,5 раза меньше, чем в известном способе.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Способ определения гистидина ги- дрохлорида путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием полученного ок рашенного раствора, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения и упрощения способа, в качестве цветореагента используют диалуровую кислоту, обработку проводят в среде диметилформамида в присутствии ацетата натрия при нагревании на кипящей во- дяной бане и перед фотометрированием добавляют соль кальция.

1402866

A „„„,, Навеска, D нм г

С„, мг/100 мп айдено, Е

DÎ

Метрологические характеристики

480 0,0210 0,232 0,220 х = 110,16

0,0016

100 43

99,45

99,43

100,35

100,67

0,0330

0,361

$ = 0,5721

Sr = 0,0057

О, 220

0,0315 0,313 0,212

St = +1,47

0,572

0,0290

0,323

0,328

0,0255

0,421

0,0274

0,455 0,330

100,64

Таблица 2

С, мг/100 мл

Найдено, г/мл

Метрологические характеристики макс > нм

480 0,201

0,208

0,0016

090407

0,0420 х = 0,0416

0,198

S = 0,00086

0,0424

Sr = 0,0207

St Л О 0221

0 210

Смен °

Название соли

A мцк нм

6,95

3,50

3,47

6,96

3,50

6,95

0,205

0,210

0,200

СаС1<

Са(БО )

Са(СН 3СОО ), 480 2,75 1,44

480 2,75 1,43

480 2,75 1,44

0,0414

0,0424

0.0404

Т а б л и ц а 1

Таблица 3

1402866

Таблица 4

Способы

Сравниваемая характеристика предлагаемый : известный

Чувствительность способа, мкг/мл

1040

660

Диалуровая кислота Нингидрид

Применяемый реагент

Диметилформамид Метилцеллозольв

Использование растворителя

Применение высокотоксичных реагентов

Цианид калия

Отсутствует

Вр емя нагревания, мин

12

Время проведения анализа, мин

Составитель Л. Русанова

Редактор А. Ревин Техред Л.Сердюкова Корректор N. Демчик

Заказ 2847/30

Тираж 84/ Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4