Способ определения фертильности эякулята

 

Изобретение относится к медицине , точнее к биохимии, предназначено для установления степени нарушения сперматогенеза. Для этого спермальную плазму получают центрифугированием эякулята при 3000 об/мин. В спермальной плазме иммунологическим методом рассчитывают концентрацию простатического в-глобулина, лактоферина, кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического л-глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и по значению зтого показателя делают вьшод о состоянии эякулята - интерфильном, субфертильном или фертильном. 1 табл. G S

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (5И 4 G 01 И 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ и лвтоескомм свидкткпьствь (21) 4053456/28-14 (22) 09.04 ° 86 (46) 15.07 88. Бюл. N 26 (71) Астраханский государственный медицинский институт им. А.В.Луначарского (72) А.А.Николаев, Н.И.Аншакова и В.И.Мельман (53) 616.07 (088.8), (56) Коган С.А. Стерильность мужчин.

M. Медицина, 1974, с. 53. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕРЩЛЬНОСТИ

ЭЯКУЛЯТА (57) Изобретение относится к медицине, точнее к биохимии, предназначено

„„SU„„1409943 А 1 для установления степени нарушения сперматогенеза. Для этого спермальную плазму получают центрифугированием эякулята при 3000 об/мин. В спермальной плазме иммунологическим методом рассчитывают концентрацию простатического / -глобулина, лактоферина, кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического р --глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и по значению этого показателя делают вывод о состоянии эякулята— интерфильном, субфертильном или фертильном. 1 табл.

1409943

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано, в частности для установления степени нарушения сперматогенеза.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Пример 1, Больной Л., 30 лет. Получена сперма для исследования степени нарушения фертильности.

Определение проводится следующим образом. Спермальную плазму получают центрифугированием эякулята в течение 10 мин при 3000 об/мин.

На стеклянные пластинки размером

9 8 см заливают 10 мп агаразы, содержащей 5Х моноспецифической кроличьей антисыворотки к лактоферрину человека (стекло 1), 5Х моноспецифической антисыворотки к простатической кислой фосфатазе человека (стекло 2) и 10Х моноспецифической антисыворотки к простатическому бетаглобулину (стекло 3) соответственно.

После застывания агара в нем пробивают 12 лунок диаметром 30 м, в которые вносят пробу спермальной плазмы больного, а также при разведении

| стандартного препарата лактоферрина

1 (стекло 1) простатической кислой фосфатазы (стекло 2), простатического бета-глобулина (стекло 3).

Объем всех проб по 20 мкл. Пробу спермальной плазмы больного исходно разводят в 20 раз электродным буфе1 ром. Затем из этого раствора для определения простатического бета-глобулина готовят окончательные разведения 1:200, а для определения кислой фосфатазы (К)-1:300, лактоферрин определяют в исходном разведении.

После внесения проб пластинки по мещают в аппарат для электрофореза.

ПЗФ-3. Ванны заполнены веронал-мединаповым буфером, рН 8,6, на котором приготовлена и агароза. Злектрофорез проводят в направлении анода (в течение ночи) при напряжении

3 В/см.

Окончание эледстрофореэа оценивается визуально по завершению формирования ракетообраэных преципитатов стандартов. Затеи измеряют высоту пиков у соответствующих проб лунок больного и высоту пиков стандартных белков. По высоте пиков стандартных белков строят калибровочный график

f5

55 и вычисляют концентрации исследуемых белков.

У больного Л. концентрация про- | статического бета-глобулина равна

112 мгХ, лактоферрина — 28 мгХ, а простатической кислой фосфатазы—

706 MrX. Подставив эти данные в формулу, получают следующую величину

112+28 коэффициента фертильности 706

= 0,2 ° Вывод: эякулят инфертилен, данные цитологического исследования - объем 5,5 мл, желтоватая жидкость, сперматозоиды отсутствуют, через 45 мин полного разжижения нет, Азооспермия.

Пример 2. Больной Б., 23 года. Получен эякулят для исследования степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Концентрации исследуемых белков у больного: простатического бета-глобулина—

137 мгХ, лактоферрина — 36 мгХ, простатической кислой фосфатазы—

522 мгй. Подставив эти данные в формулу, получают величину коэффици.137 + 36 цента фертильности = 0,33 °

Вывод:; эякулят инфертилен. Данные цитологического исследования: 0,5 мл беловатой жидкости, сперматозоиды отсутствуют, разжижение через 45 мин полное. Азооспермия.

Пример 3. Больной М, Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следуюшие концентрации белков: простатического бета-глобулина — 130 мгХ, лактофферина—

35 мгХ, кислой фосфатазы — 470 мгХ.

Подставив эти значения в формулу, получают следующее значение коэффициен130 + 35 та фертильности 470 = 0,35

Эякулят субфертилен. Цитологическое исследование: 2,0 мл беловатой жидкости, сперматозоиды 0-3-5, слабоподвижны, разжижение через 45 мин полное. Олигоэоспермия.

П р и и е р 4. Больной M. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации исследуемых белков: простатического бета-глобулина 156 мгХ, лакто943

Совпадение заключений,X

Пр едл ага е мый способ

Известный способ

Заключения

126

87,3

110

Фер тиль ный

96,8

185

179

Субфертильный

161

93,8

151

Стерильный

3 1409 феррина — 40 мг7., кислой фосфатазы

390 мгХ. Подставив эти значения в формулу, получают следующее значение

156+ 40» коэффициента фертильности = 5

= 0,5. Эякулят субфертилен. Цитологическое исследование; 5 0 мл белесой жидкости, вязкая, сперматозоиды

30-50, слабоподвижны, характер движе- 10 ния поступательный, разжижение через

45 мин полное. Олигоэоспермия.

Пример 5. Больной С,, 26 лет. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. 15

Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации исследуемых белков: простатического бета-глобулина—

222 мг7., лактоферрина — 46 мг%, кислой фосфатазы — 358 мгЕ. Подставив эти значения в формулу, получают ко222 + 46 эффициент фертильности

= 0,75. Эякулят фертилен. Цитологическое исследование: 25 мл, сперматозоиды 50-65-80, подвижны, движения вращательно-поступательные. Нормозооспермия.

Пример 6. Больной К. Полу- 30 чен эякулят для выяснения степени, нарушения сперматогенеэа. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации белков: простатического бетаглобулина — 242 мгЖ, лактоферрина—

52 мг7., кислой фосфатаэы — 326 MrX.

Подставив эти значения в формулу, получают коэффициент фертильности

242 + 52

0,9. Эякулят фертилен.

Цитологическое исследование 13231:

5,0 мл белесой жидкости, сперматозоидов много, хорошо подвижны, разжижение через 45 мин полное. Нормо, зооспермия.

Предлагаемый способ дает возможность установить степень нарушения сперматогенеза. При этом нет необходимости в.получении эякулята непосредственно перед исследованием, чем решается ряд организационных и этических проблем. Способ лишен субъективизма в оценке, унифицирован, позволяет одномоментно исследовать несколько образцов, прост в осуществлении °

Исследовано с вычислением коэффициента фертильности в общей сложнос ти 456 проб спермальной жидкости.

Учитывая, что известный способ не поддается количественной оценке, можно только оценить совпадение сделанных заключений (см.таблицу), Различия по предлагаемому способу между коэффициентами фертильности, по которым делается разное заключение, следующие: между минимальным коэффициентом, при котором эякулят считают фертильным 0,7, и высшим, при котором эякулят уже субфертилен

0,5, достоверность значима (P (0;01) то же касается и различия между коэффициентами инфертильности и стерильного зякулята. В промежутке

0,7-0,5 и 0,33-0,35 во всем исследованном материале коэффициент не получался ни разу.

Формула изобретения

Способ определения фертильности эякулята путем исследования спермы, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в спермаль" ной плазме иммунологически онределяют концентрацию простатического бета-глобулина, лактоферрина и кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического бета-глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и при показателе, равном 0,2-0,33, оценивают эякулят инфертильным, 0,35-0,5 — субфертильным, 0,750,9 — фертильным.