Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии

 

Изобретение относится к медицине , касается диагностики кожных заболеваний . Цель изобретения - ранняя диагностика и повышение точности. Для этого пробу крови из локтевой вены помещают в 2,7%-ный р-р этилендиаминтетрауксусной кислоты, предотв ращая свертывание. Исследуют мононуклеары крови, выделенные центрифугированием в градиенте плотности фиколла - верографина. Затем две пробирки (одна - контроль, другая - с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при 37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, образующиеся в присутствии теофиллина назьшают теофиллинустойчивыми или резистентными. При их уровне 350 клеток/мм и более определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл. i (Л с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (111 .

А1 5ц 4 G Ol N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4074071/28-14 (22) 05.05.86 (46) 23.07.88. Бюл. У 27 (71) Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт (72) В.Н. Мордовцев, Н.M. Мазина, Ж.И. Авдеева, М.К. Балтабаев и Т.С. Куршакова (53) 616. 07(088. 8) (56) Гржебин З.Н., Цераидис Г. С.

Основы гистопатологии кожи М.: Медгиз, 1960, с. 95-96. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЯЗВЕННОЙ ФОРMbI ХРОНИЧЕСКОЙ ПИОДЕРМИИ (57) Изобретение относится к медицине, касается диагностики кожных заболеваний. Цель изобретения — ранняя диагностика и повышение точности. Для этого пробу крови из локтевой вены помешают в 2,77-ный р-р этилендиаминтетрауксусной кислоты, предотв ращая свертывание. Исследуют мононуклеары кров и, выделенные цент рифу гиров а нием в градиенте плотности фиколла — верографина ° Затем две пробирки (одна — контроль, другая — с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при

37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, образуюшиеся в присутствии теофиллина называют теофиллинустойчивыми или резистентными.

При их уровне 350 клеток/мм и более

3 определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл.

1411071

Изобретение относится к области медицины, в частности к диагностике

:кожных заболеваний.

Цель изобретения — ранняя диаг5 костика и повышение т;, ности.

Способ осуществляют следующим об разом.

Для исследования берут 5-7 мл кро .ви из локтевой вены в 0,7-1,0 мл 1О ,2,7 -ного раствора динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты для, предотвращения свертывания. Объектом исслЕдования служат мононуклеары крови, выделенные методом центрифугирова-!5 ния в градиенте плотности фиколла-верографина (удельная плотность

1,077 г/мл). Для выделения мононуклеаров кровь разводят в 1,5 раза средой

199 и наслаивают на 2-3 мл фиколла- 20 верографина.

Кровь, наслоенную на смесь фиколла-верографина, центрифугируют при . 400 g в течение 30 мин. С интерфазной поверхности между слоями плазмы и фи-?5 колла-верографина собирают образовавшее кольцо из клеток в центрифужную пробирку и дважды отмывают раствором

Хенкса центрифугированием в течение

10 мин при 200 g. Осадок ресуспендируют в 1 мл среды 199..Число мононуклеаров доводят до конечной концентрации 2"10 клеток,в мл.

Для исследования в две круглодонные пробирки приливают по 0,1 мл при-35 готовленной суспензии .мононуклеаров.

Затем к первой пробирке добавляют

О,! мл раствора теофиллина (30 мг препарата следует растворить в 10 мл среды 199 при нагревании), ко второй — 0,1 мл среды (контрольная проба). Пробы инкубируют в течение

30 мин при 37 С, дважды отмывают сре дой 199 центрифугированием при 200 g в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов g5 ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана: к осадку приливают по 0,1 мл среды и

0 мл 0,5 .-ной суспензии эритроЦитов барана, смесь ресуспендируют, выдерживают при 37 С в течение 10 мин, центрифугируют при

200 g 5 мин и инкубируют при 4 С в . течение 1 ч. Затем осадок осторожно ресуспендируют, взвесь помещают на

55 предметное стекло, прикрывают покровным стеклом .и подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-POK) т.е. ядросодержащих клеток; окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Абсолютное количество E-POK вычисляют умножением относительного числа E-POK (в Ж) на число лимфоцитов 1 MM крови. Розет3 ки, образовавшиеся в присутствии теофиллина, называют теофилин устойчивыми или резистентными (ТР-РОК). Разность между общим количеством Е-POK (в контрольной пробе) и количеством

ТР-POK после обработки теофиллином принимают за теофиллинчувствительные

E-POK.

Пример 1. Больной Б., поступил с распространенными высыпаниями язвенного характера в области голеней и бедер. Беспокоили боли в очагах поражений и обильное гнойное отделяемое. При обследовании со стороны артериальных и венозных сосудов обеих ног патологии не выявлено. Язвы продолжали увеличиваться в размерах. При неоднократном обследовании отделяемого язв на грибы диагноз глубокого микоэа был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больного до лечения найдено повышенное содержание ТЧ-РОК (4бЖ и

В

850 кл/мм ), что дало основание поста-, вить диагноз хронической язвенной пиодермии. В дальнейшем диагноз был подтвержден на основании клинического наблюдения, гистологического исследования и результатами проводимой терапии.

Пример 2. Больной Б., поступил с распространенными кожными высыпаниями язвенного характера в клинику с предположительным диагнозом — глубокий микоэ. Гистологическое исследование биопсийного материала и неоднократные посевы отделяемого с поверхности язв на грибы не подтвердили вышеуказанный диагноз. При иммунологическом исследовании периферической крови больного до лечения процентное и абсолютное содержание ТЧ-POK (23X и 372 кл/мм ), что соответствовало

Э диагнозу хроническсгй яэвечной пиодермии. В дальнейшем диагноз подтвержден клиническим наблюдением и результатами проведенного лечения.

Пример 3. Больной О., поступил в клинику с язвенным дефектом кожи на тыльной поверхности левой кисти с диагнозом — хромомикоз кожин папилломатоэ кожи?

1411671

Т а б л и ц а 1

600

٠— н 579

493

С вЂ” в 867

533

Р— в 66

459

Д вЂ” и 913

Клинические обследования путем неоднократных биопсий кожи и посевов на грибы не подтвердили вышеуказанных диагнозов. Иммуиологическое же обсле5 дование периферической крови больного до лечения указало на наличие повышенного содержания теофиллинчувствительных клеток (36Х и 535 кл/мм ).

Специфическая терапия подтвердила 10 диагноз хронической язвенно-вегетирующей пиодермии.

Пример 4. Больная Ч., поступила с обширным язвенным дефектом кожи левой голени с предварительным 15 диагнозом — трофическая язва. Клинически отмечалось наличие обильного гнойно-геморрагического зксудата на поверхности очага поражения. Больную беспокоили мучительные боли, усили- 20 вающиеся при ходьбе. При обследовании венозной и артериальной систем пораженной конечности паталогии невыявлено. Диагноз трофической язвы был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больной до лечения было найдено повышенное содержание теофиллинчувствительных клеток (637. и 1147 кл/мм ), что

3 было характерно для язвенной формы 30 хронической пиодермии. Соответствующая терапия способствовала клиническому выздоровлению больной.

Различают следующие клинические формы язвенных пиодермий: язвенная, 35 язвенно-вегетирующая, вегетирующая гангренозная. Все указанные клинические формы представляют собой единый патологический процесс с различной степенью тяжести течения заболевания, 40

Для наглядной иллюстрации, что данный способ служит для диагностики всех форм язвенных пиодермий, клинические разновидности разделены на соответствующие 4 группы больных язвенной хронической (табл. 1), вегети рующей (табл. 2), язвенно-вегетирующей (табл. 3) и гангренозной.(фиг.4) пиодермией.

Таким образом, предлагаемый способ оценки чувствительности Т-лимфоцитов к теофиллину при язвенных формах хронической пиодермии может быть рекомендован в качестве диагностического способа при указанной патологии.

Предлагаемый способ прост, легко воспроизводим и не требует длительного времени (2 дня) в сравнении с известным, где исследование занимает 6-7 дней.

У 80-85Х больных предел колебаний

J теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов лежит в области 23-46Х или 350э

850 кл/мм, что в 2-3,5 раза превышает уровень предела колебаний у здоровых лиц. формула и э о б р е т е н и я

Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии путем клиникогистологического обследования больного, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики и повышения точности способа, дополнительно в периферической крови определяют количество теофиллинчувствительных клеток Т-лимфоцитов и при их уровне

350 клеток/ммз и более диагностируют язвенную форму хронической пиодермии.

1411671

1347

В - в

850

p — - х 609

444

650

361

Б-в

903

1333

А - в

509

5814

514

К-ва

410

Б-ва

224

0-ва

521

Ю-и

1046

611 д — р . 2206

357

378

429

229

К-в!

334

823

Ч-в

850

1341

Б - в

200+19

12,О+1,0

Ра0,001

Р<0,001

Ф.И.О.

Т - ва 226

С вЂ” в 475

450

554

778

131

С-в

596

Н-ла 737

Контрольная группа и= 30

М исто рии б< лезни

Продолжение табл. 1

32 7 1 4 590+30

Т а б л и ц а 2

14) 1671

Контрольная группа а 30 кл/ми (абсолютное (ТЧ-POK) Ф.И.О.

У истории болезни количество) 372

36

555

799

446

375

598

144

К - в

592

534+64

29,1+2,3

Контрольная группа п 30

1147

352

С-ва 627

Б -в 740

0 вЂ,н 341

M - в 2144

Г - н 368

С - н 484

 — ва 856

Ч вЂ” ва 403

Б - ва 297

Лродолхение табл.2

28 362

29 2+2 9 548+87

12,0+1,0 200+19

Рс0,001 Р 0,001

Т а б л и ц а 3

12,0+1,0 200+19

Р<0,001 Р40,001

Т а б л и ц а 4

141 1.671

Продолжение табл.4

634

К вЂ” н 328

К вЂ” к 517

А — ва 3231

П вЂ” и 813

 — в 132

1021

351

1125

370

36+5,9 7141119

Конт12,0+1,0 200+19

Р 0,001 Р 0,001 рольная группа и* 30

Составитель Л. Шилина

Редактор А, Ворович Техред Л.Олийнык Корректор В. Гирняк

Заказ 3649/41 Тираж 847 Подписное

В1(ИИПЙ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, )K-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое пред()риятие, r. Ужгород, ул, Проектная, 4