Способ определения активности фагоцитоза в нейтрофилах

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии в норме и при патологии. Цель изобретения - повышение точности способа. :Дпя этого приготавливают и фиксируют исследуемые мазки в смеси этилового спирта и ледяной уксусной кислоты 3:1 в .течение 60-90 мин и последующего окрашивания их реактивом рива- . нол-802 в течение 30 мин при 4-б С с промыванием в сернистой воде и солянокислом спирте.

СОЮЗ С жТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК аю 01), ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР пО делАм изОБРетений и ОткРытий (21) 3573534/28-14 (22) 06.04.83 (46) 30.09.88. Бюл. 36 (71) Кабардино-Балкарский государственный университет (72) Б.С.Нагоев и Д.И.Габрилович (53) 616 (088.8) (56) Фрадки В.А. Аллергодиагностика ин витро.-М.:Медицина, 1975, с. 2730. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

ФАГОЦИТОЗА В НЕИТРОФИЛАХ др 4 С 01 N 1/28, А 61 В 10/00 (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии в норме и при патологии. Цель изобретения - повышение точности способа. .,Для этого приготавливают и фиксируют исследуемые мазки в смеси этилового спирта и ледяной уксусной кислоты

3 1 в,течение 60-90 мин и последующего окрашивания их реактивом риваа нол-SOz в течение 30 мин при 4-6 С с промыванием в сернистой воде и солянокислом спирте.. 1427214

Формула изобретения îï

ППН 100

Составитель Л.Стебаева

Техреду.Дидык Корректор С.Черни

Редактор Л.Пчолинская

Заказ 4844/37

Тираж 847, Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии.

Цель изобретения — повьппение точ" ности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

В силиконированные пробирки набирают кровь из пальца и смешивают с

0,1 мл 50%-ного раствора цитрата нат- 10 рия.

Кровь инкубируют с О, 1 мл бактериального аллергена (дизентерина) в термостате при 37 С в течение 1 .ч.

Из крови готовят мазки, которые фиксируют в течение 60-90 мин в смеси этилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1. Затем мазки окрашивают в водном растворе риванол-$0 а течение 20-30 мин при 20

4-6 С, промывают в сернистой воде в течение 3-5 мин и помещают в солянокислый спирт на 5-10 мин.

При микроскопировании цитоплазма нейтрсфилов люминисцирует желто-эе- 25 леным свечением.

Поврежденные лимфоциты имеют неправильную форму.

Ба мазке. подсчитывают количество измененных нейтрофилов на 100 клеток в опыте с аллергеном и в контроле без аллергена. Определение активности фагоцитоза рассчитывают по формуле: где ППН - показатель повреждения нейтрофилов;

N оп количество измененных нейт 4 рофилов в опыте;

N — количество измененньгх нейтрофилов в контроле.

Пример 1. Больной, 36 лет, диагноз: острая дизентерия.

Показатель повреждения нейтрофилов при расчете по предложенному ме" тоду в период разгара заболевания равен 0,64, в период затухания патологического процесса 0 51 в период реконвалесценции 0,38.

Следовательно, в период улучшения состояния и выздоровления показатель повреждения нейтрофилов (активности фагоцитоза) снижается, Предложенный способ позволяет более точно определить активность фагоцитоэа из-за лучшей дифференцировки люминисцирующнх нейтрофилов от других форменных элементов крови, что устраняет дополнительный фон свечения клеток.

Способ определения активности фагоцитоза в нейтрофилах путем Инкубации крови с бактериями, приготовления мазков, фиксации, окрашивания, люминисцентной микроскопии и определении активности фагоцитоза по количеству клеток с бактериямИ, о т л и ч а юшийся тем 9 что ф с целью повьппе ния точности способа, фиксацию проводят в течение 60-90 мин при этом в качестве фиксатора используют смесь этилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3: 1, а окрашивание проводят в течение 20-30 мин при ,- о

4-6 С в водном растворе риванол-$0, после окраски мазки промывают в сернистой воде и солянокислом спирте.