Способ диагностики саркоидоза

 

Изобретение относится к медицине, в частности к изучению иммунологического статуса у больных саркоидозом. Цель изобретения - повышение точности диагностики саркоидоза. Пробу с надосадком бронхо - альвеолярного смыва больного, а также контрольную пробу инкубируют с лимфоцитами крови больного в течение 30±1 мин. После чего в обеих пробах определяют процент розеткообразующих с эритроцитами барана клеток и при увеличении количества розеткообразующих клеток в опыте по сравнению с контролем диагностируют саркоидоз. По сравнению с прототипом точность диагностики увеличивалась в 2,19 раза.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ.

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 G 01 N 33/53

3 ЕИ33ИЧ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АBTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ПСНТ СССР

1 (21) 4190642/28-14 (22) 04.02.87 (46) 30.05.89. Бюл. Ф 20 (71) 1-й Московский медицинский институт им. И.N.Ñå÷åíîâà (72) А.И.Кудрявицкий, Д.В.Белокриницкий, Н.Н,Шаталов и Б.M.Kîðíåâ (53) 615.375(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 1119656, кл. А 61 В 10/00, 1982. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САРКОИДОЗА (57) Изобретение относится к медицине, в частности к изучению иммунологического статуса у больных саркои Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для диагностики саркоидоза, а также для оценки активности данного заболевания, контроля эффективности лечения.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим об-. разом.

Бронхоальвеолярный смыв получают при проведении бронхоальвеолярного лаважа. Через канал бронхоскопа по катетеру медленно вводят стерильный физиологический раствор, подогретый до 37 С, в количестве 150 мл. Объем аспирированной жидкости, получаемой при бронхоальвеолярном лаваже, составляет примерно 40Х от количества введенного физиологического раствора, т,е. в данном случае он был равен примерно 60 мл. Первые 50 мл аспирированной жидкости отбрасывают, „„SU 1483377 А 1 дозом. Цель изобретения — повышение точности диагностики саркоидоза.

Пробу с надосадком бронхоальвеолярного смыва больного, а также контрольную пробу инкубируют с лимфоцитами крови больного в течение 30+1 мин.

После чего в обеих пробах определяют процент розеткообразующих с эритроцитами барана клеток и при увеличении количества розеткообразующих клеток в опыте по сравнению с контролем диагностируют саркоидоз. По сравнению с прототипом точность диагностики увеличивалась в 2,19 раза, поскольку эта порция является бронхиальным, но не бронхоальвеолярным смывом.

Полученный у больного при проведе- Я нии бронхоальвеолярного лаважа бронмюа хоальвеолярный смыв фильтруют через капроновое сито для удаления слизи, затем центрифугируют при 1500 об/мин

15 мин, отбирают надосадок. СлР лимфоциты периферической крови по- © 1

; лучают из 3-4 мл гепаринизированной (25 Ж/мл) венозной крови после центрифугирования ее на градиенте плотности (d=I,077) при 1500 об/мин в течение 35 мин и последующего двухкрат-. ного отмывания клеток от плазмы и антикоагулянта средой 199, взвесь лимфоцитов разводят до концентрации 3.

2х10 клеток в 1 мл, В опытную и в контрольную пробы добавляют по 0 1 мл взвеси лимфоцитов, В опытную пробу добавляют 0,1мл надосадка бронхоальвеолярного смы- .

148337

30

35 ва, в контрольную пробу 0,1 мл физиологического раствора, приготовленного на фосфатном буфере (рН 7,2).

Каждую пробу тщательно перемешивают и инкубируют при 37 С 30 мин.

В опытную и в контрольную пробы добавляют по 0,1 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана, приготовленной на забуференном физиологическом раст- 10 воре. После перемешивания каждой пробы инкубируют их при 37 С 10 мин затем центрифугируют при 1000 об/мин

5 мин. После этого инкубируют пробы в холодильнике при 4 С 18 ч.,Образовавшийся осадок ресуспендируют, помещают в камеру Горяева и проводят подсчет розеткообразующих клеток в све товом микроскопе. Если процент розеткообразуюцих лимфоцитов в опытной пробе больше, чем в контрольной, диагностируют саркоидоз.

Пример, Больной 3., 49 лет,, болен с апреля 1985 года, когда появился сухой кашель, одьппка, слабость,25 недомогание. При обследовании в стационаре проведена рентгенография грудной клетки, обнаружены мелкоочаговые тени диаметром 2-3 см, увеличенные прикорневые и паратрахеальные лимфатические узлы усиление легоч) ного рисунка, Было высказано предположение о наличии гранулематозного процесса в легких. С целью уточнения диагноза 30,10,85 года проведена бронхоскопия с бронхоальвеолярным лаважом и пункцией внутригрудных лимфатических узлов. Обследование больного по данному способу дало следующие результаты: процент розеткообразующих лимфоцитов в контрольной пробе 39%, в опытной пробе 49%, коэффициент, представляющий собой частное от деления показателя опытной пробы на показатель контрольной пробы со- 45 ставлял 1,29, Таким образом, у больного выявлена экспрессия фенотипа лимфоцитов периферической крови надосадком бронхоальвеолярного смыва.

Подобные результаты позволили сформулировать диагноз следующим образом.

Саркоидоз с поражением внутригруд— ных лимфатических узлов и легких, активная фаза течения. Изучение гистологической картины пунктата лимфатических узлов подтвердило диагноз саркоидоза (обнаружена эпителиоидноклеточная гранулема). Наличие высокой активности патологического про7 4 цесса было подтверждено последующими исследованиями, выявившими наличие выраженного лимфоцитарного альвеолита (процент лимфоцитов в бронхоальвеолярном смыве 28%, норма до 10%), повышенную экскрецию кальция с мочой (Зб0 мг s сутки, норма до

120 мг), ускоренную СОЭ вЂ” 18 мм/ч, высокий уровень иммунного глобулина G в сыворотке (19 г/л, норма до 14 г/л).

Таким образом, обследование больного по данному способу дало возможность поставить правильный диагноз, подтвердившийся при морфологической верификации, а также дать оценку активности течения заболевания, что позволило своевременно начать курс лечения кортикостероидными препаратами.

Приведенный клинический пример подтверждает эффективность и диагностическую ценность предлагаемого способа диагностики саркоидоза.

Было проведено сравнение точности прототипа и данного способа. Точность прототипа составляла 50-б0%, однако при морфологической верифика-. ции диагноза и сопоставления с уточненными клиническими данными она снижалась до 42%. Точность предложенного способа составляла 92%. Таким образом, предлагаемый способ в 2,19 раз точнее прототипа, что подтверждает его большую чувствительность и диагностическую информативность по сравнению с прототипом.

Предлагаемый способ прост, не требует наличия сложной аппаратуры, все реактивы, необходимые для его . осуществления, производятся в СССР.

Он основан на известных теоретических предпосылках и обоснован клиническими исследованиями, что позволяет испольэовать его в пульмонологических отделениях и клиниках для диагностики саркоидоза, определения его активности и прогнозирования течения, выбора надлежащего лечения и контроля

его эффективности.

Формула изобретения

Способ диагностики саркоидоза путем исследования биологических жидкостей больных, о т л и ч а,ю шийся тем, что,,с целью повьппения точности

1 способа, у больных берут бронхоальвеолярный смыв, центрифугируют его вы5 1483377 6 деляют надосадок, инкубируют с ауто- зующих клеток и при увеличении их логйчными лимфоцитами в течение 3Q числа по сравнению с контролем, не, 1,0 мин, добавляют эритроциты барана содержащим бронхоальвеолярный смыв, и определяют количество розеткообра- диагностируют саркоидоэ.

Составитель В.Литовченко

Редактор Н.Горват Техред М.Дидик Корректор А.Обручар

Заказ 2822/42 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский .комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101