Способ получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина

 

Изобретение касается гетероциклических соединений и, в частности, способа получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина формулы [R(O)COCH<SB POS="POST">2</SB>]<SB POS="POST">2</SB>CH - O - CH<SB POS="POST">2</SB>-N-CH=N-C=C-N=C(NH<SB POS="POST">2</SB>)-NH-C=O, где R-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">19</SB>-алкил или 1-адамантил, обладающих противовирусным действием. Цель изобретения - создание новых более активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения формулы [R(O)C-O-CH<SB POS="POST">2</SB>]<SB POS="POST">2</SB>CH-O-CH<SB POS="POST">2</SB>-N-CH=N-C=C-N-C(NHY)-NH-C=O, где R - указано выше

Y - тритилзащитная группа, с ледяной уксусной кислотой. Противовирусная активность новых веществ находится на уровне или выше активности известного вещества при токсичности ЛД *98 3320 - 4544 мг/кг. 3 табл.

СОЮЗ COBETCHHX

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„1553 12 i L4 вg j

ЛА;

Б.;,,;„<

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К flATEHTV

C с

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ (21) 3826798/23-04 (62) 3549200/23-04 (22) 17.12.84 (23) 31.01.83 (31) 344703 (32) 01.02.82 (33) (46) 23.03.90. Бюл. Ь" 11 (71) Синтекс (М).С.A.) Инк (пБ) (72) Жульен Пьер Енри Верхейден (SE) и Джон Чарльз Мартин (US) (53) 547.857.7.07(088.8) (56) 1. Патент СИА и 4199574, кл. C 07 D 473/38, 1978.

1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

9- (2-ПРОПОКСИМЕТИЛ) ГУАНИНА (57) eTeH e K 3G3eTcR гетероцикИзобретение относится к способу получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина, обладающих противовирусным действием.

Цель изобретения - способ получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина, обладающих более высокой противовирусной активностью.

Пример 1. 9-(1,3-Диацетилокси-2-пропоксиметил)гуанин.

Смесь 3,00 г 9"(1,3-диокси-2-пропоксиметил)гуанина, 300 мг 4-диметиламинопиридина и 100 мл ангидрида уксусной кислоты интенсивно перемешивают в течение 3 сут при комнатной температуре. Ангидрид уксусной кислоты затем удаляют упариванием при пониженном давлении, а остаток перекристаллиэовывают иэ метанола, получают (51) 5 С 07 D 473 1Ü А 61 К 31/>2

2 лических соединений и в частности, способа получения производных 9- (2"

-пропоксиметил) гуанина формулы (К (О) СОСН ) СН-О-СН -N-ОН=И- ;

= <,-N=C(NH )-NH-C=0 где h-C -С -ал< <9 кил или 1-адамантил, обладающих противовирусным действием. Цель изобретения — создание новых более активных соединений укаэанного класса.

Синтез ведут реакцией соединения фор" нуле (R(UJC-0-LH j UH-0-С<<<-É: =

= N-С=С-N-C(NHY)-NH-С=О, где R указано выше; Y — - тритилзащитная группа, с ледяной уксусной кислотой. Противовирусная активность новых веществ находится на уровне или выше активности известного вещества при токсичности ЛД > 3320-4544 мг/кг. 3 табл.

3,62 г (91 +) g- (1,3-диацетилокси-2пропоксиметил) гуанина с т.пл. 237239 С.

Пример 2. N -(4-метоксифенилдифенилметил)-9-(1,3-диацетокси-2-пропоксиметил)гуанин.

Раствор 3,3 г 9 (1,3-диацетокси-2-пропоксиметйл)гуанина, 7,0 г 4-метоксифенилдифенилметилхлорида, 7,0 мл триэтиламина и 300 мг 4-диметиламинопиридина в 50 мл сухого диметилформамида нагревают с перемешиванием с помощью магнитной мешалки при 50 С в течение 15 ч. Затем добавляют 5 мл метанола, раствор концентрируют при пониженном давлении до получения коричневого масла, которое хроматографируют на силикагеле с элюированием смесью метанола и метиленхлорида з 15530 (1; 12), получают маслянис.алый продукт.

Ука занное масло перекристалли зовывают из этилацетата и гексана, получают

5,42 г (65ь) N -(4-метоксифенилдифенилметил)-9-(1,3-диацетокси-2-пропоксиметил)гуанина с т.пл. 139-141 С.

4-Иетоксифенилдифенилметилхлорид можно заменить трифенилметилхлоридом, в результате чего получают соответст- 10 вующие трифенилметилзащищенные соединения. и -(4-Метоксифенилдифенилметил)-92 (1 3-диокси-2-пропоксиметил) гуанин.

В

Раствор 4,0 N -(4-метоксифенилдифенилметил) -9- (1,3-диа цетокси-2-пропоксиметил) гуанина в 100 мл метанола и 20 мл концентрированной гидроокиси аммония перемешивают с помощью магнитной мешалки при 22 С в течение 16 ч, а затем при 50 С в течение 2,5 ч. Затем добавляют еще 10 мл гидроокиси аммония и полученный раствор перемешивают еще 2,5 ч при 50 С. Затем раствор концентрируют при пониженном дав- 2 ленин и полученный твердый остаток перекристаллизовывают из метанола и этилацетата, получают 3,5 г (98 )

Ф-(4-метоксифенилдифенилметил) -9-(1, 3-диокси-2-пропоксиметил)гуанина с т.пл. 148-151 С.

- о

N -(4-Метоксифенилдифенилметил) -9- (1,3-ди-п-октаноилокси-2-пропоксиметил)гуанин.

К перемешиваемому с помощью магнитной мешалки раствору 1,05 г N -(4-метоксифенилдифенилметил)-9-(1,3-диокси-2-пропоксиметил)гуанина и 25 мг

4-диметиламинопиридина в 30 мп сухого пиридина по каплям добавляют раст- 40 вор 1,2 г И-октаноилхлорида в 10 мл метиленхлорида. Через 15 ч добавляют

1,5 мл воды и полученный раствор концентрируют при пониженном давлении.

Остаток хроматографируют на силикаге- 4 ле с элюированием с помощью смеси метанола и метиленхлорида (1:9), получают белое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из этилацетатагексана выход N -(4-метоксифенилдиЯ

50 фенилметил) -9- (1, 3-ди-и-октаноилокси-2-нропоксиметил)гуанина с т.пл.

180-181 С составляет 78Ф.

Аналогично этерифицируюT следующие соединения:

2" (4-метоксифенилдифенилмет ила мино) -6-мет окси -9- (1, 3-н-бут а ноилокси- 2-пропоксиметил) пурин;

12

2- (4-метоксифенилдифенилметиламино) -6-тио-9- (1, 3-ди (2, 2-диметилпропаноилокси) -2-пропоксиметил) пурин;

2- (4-метоксифенилдифенилметиламино) -6-тио-9- (1 3-ди(н-октаноилокси)-2-пропоксимети пурин;

2- (4-метоксифенилдифенилметиламино) -6-тио-9- (1, 3-ди (1-дамантилкарбокси)-2-пропоксиметил) пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-6-метилтио-9-(1,3-(н-гептаноилокси) -2-пропоксиметил) пурин;

2,6-ди (4-метоксифенилдифенилметиламино) -9- (1,3-ди (н-дека ноилокси ) -пропоксиметил) пурин;

2,6-ди {4-метоксифенилдифенилметиламино)-9- (1,3-ди(н-октаноилокси)-2-пропоксиметил) пурин>

2,6-ди(4-метоксифенипдифенилметил" амино)-9-(1,3-ди(2,2-диметилпропаноилокси) -2-пропоксиметил) пурин;

2,6-ди (4-метоксифенилдифенилметил амино) -9- (1, 3-ди (1-адамантилкарбокси) -2-пропоксиметил) пурин;

2-метиламино-6-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-9-(1,3-ди(н-тетрадеканоилокси)-2-пропоксиметил) пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-6-метиламино-9- (1,3-ди(н-гексадеканоилокси)-2-пропоксиметил)пурин;

6-хлор-2-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-9-(1,3-ди(н-октадеканоилокси)-2-пропоксиметил)пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-9-(1,3-ди(н-октаноилокси)-2-пропоксиметил1пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметиламино)-9- (1,3-ди(2,2-диметилпропаноилокси) -2-прап аксиметип1 пурин;

2- (4-метоксифенилдифенилметиламино)-9- (1,3-ди(1-адамантилкарбокси) -2-пропоксиметил) пурин;

6- (4-мет оксифенилдифенилметиламино) -9- (1,3-ди (н-додеканоилокси) -2-пропоксиметил) пурин

Ф

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -9- (1,3-дипропаноилокси-2-пропоксиметил) гуанин;

N - (4-мет оксифенилдифенилметил) -9- (1,3-ди (н-бутаноилокси) -2-пропоксиметил)гуанин;

N †(4-метоксифенилдифенилметил)-9-(1,3-ди(2-метилпропаноилокси)-2-пропоксиметил) гуанин;

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -9а»

- (1,3- (н-пентаноилокси) -2-пропоксиметил1, уанин; - (4-метоксифенилдифенилметил) -9а

5 1553

- (1,3-ди (2,2-диметилпропаноилокси) -2-пропоксиметил) гуанин.

2, Ф

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -9-(1,3-(н-гексаноилокси)-2-пропоксиметил) гуанин;

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -92

1,3-ди (н-гептаноилокси) -2-пропокси-(,метил) гуанин;

N -(4-метоксифенилдифенилметил)- 1О

-9- t1,3-ди (н-дека ноилокси) -2-пропоксиметил) гуанин;

N - (4-метоксифенилдифенилметил)—

g»

-9- (1, 3-ди (н-додека ноилокси ) -2-п ропоксиметил) гуа нин;

N - (4-метоксифенилдифе нилметил)—

-9- Il,3-ди (н-тетрадеканоилокси) -2-пропоксиметил) гуанин;

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -9- (1,3-ди(н-гексадеканоилокси) -2-про- 20 поксиметил) гуа нин;

N -(4-метилфенилдифенилметил)-9l,3-ди(н-октадеканоилокси)-2-про-(,поксиметил) гуанин;

N -(4-метоксифенилдифенилметил)-9- 25

1,3-ди(н-ейкозаноилокси)-2-пропок-(,симет ил) rya ни н;

N - (4-метоксифенилдифенилметил) -92»

- (1,3-ди (1-адамантилкарбокси) -2-пропоксиметил)гуанин, т.пл. 201-203 С, 30 выход 73 ;

N -(4-метоксифенилдифенилметил)—

-9-(1,3-ди(бензилоксиацетилокси)-2-пропоксиметил)гуанин; ,2

N -(4-метоксифенилдифенилметил) -935

- (1, 3-ди (3-бензилоксипропа ноил ) -2-пропоксиметил) гранин.

9-(1,3-Ди(н»октаноилокси)-2-пропоксиметил)гуанин.

Раствор 0,969 r N †(4-метоксифе- 4о ,2 нилдифенилметил) -9- (1,3-ди (н-октанои— локси) -2-пропоксиметил) гуанина в

40 мл ледяной уксусной кислоты и

10 мл воды перемешивают при 75 С в течение 3 ч. Затем полученный раствор 45 концентрируют и остаток хроматографируют на силикагеле с элюированием с помощью смеси метанола и метиленхлорида (1:15), получают белое твердое вещест во. Полученный продукт пере крис- 5О таллизовывают из метанола, выход

0.385 r (614) 9- (1,3-ди (н-октаноилокси)-2-пропоксиметил) гуанина с т.пл.

165-166 С.

Пример 3. Двукратный стехиометрический избыток 34-ного хлористого водорода в метаноле добавляют к раствору 1,0 г 9- (1,3-ди (н-октаноилокси) -2-пропоксиметил) гуанина в 20 мл

012 6 метанола. Затем добавляют диэтиловый эфир до прекращения осаждения вещества. Полученный продукт фильтруют, промывают диэтиловым эфиром, высушивают на воздухе и перекристаллизовывают, получают гидрохлорид 9- (1,3-ди (н-октаноилокси) -2-пропоксиметил) гуанина.

Аналогично основания других соединений могут быть переведены в соответствующие соли хлористо-водородной, бромисто-водородной, серной, фосфорной, уксусной, пропионовой, гликоленой, пировиноградной, щавелевой, малоновой, янтарной, яблочной, малеиновой, фумаровой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансуль" фоновой, этансульфоновой, п-толуолсульфоновой кислот .

tl р и м е р 4. 1,0 г гидрохлорида

9- (1,3-ди(н-октаноилокси) -2-пропоксиметил) -гуанина в 50 мл диэтилового эфира перемешивают с двукратным стехиометрическим избытком разбавленного водного раствора карбоната калия до полного растворения соли. Затем органический слой отделяют, промывают его два раза водой, сушат сульфатом магния и упаривают, получают 9- (1,3-ди(н-окта ноилокси) -2-пропоксиметил) гуанин в виде свободного основания. р и м е р 5. Получение лекарст" венных форм 9- (1,3-ди (2,2-диметилпро" паноил) -окси-2-пропоксиметил) гуанина. форма для местного применения:

Действующее соединение 0,2-2 г

Спан 2 г

Твин 60 2 r

Минеральное масло 5 г

Вазелин 10 г

Мет ил па ра бе н Оу15 г

Пропилпарабен 0,05 r

БОА (бутилированный оксианисол) 0,01 г

Вода До 100 мл

Все компоненты (за исключением воды) при перемешивании íàгревают до

60 С, затем к однородной массе при

60 С добавляют воду в количестве, достаточном для получения 100 г крема и охлаждают .

Раствор для внутрибрюшинного и внут римышечного введения:

Дейст вующее соединение 0,5 г

Пропигенгликоль .20 r

Полиэтилен гли коль 20 г

Твин 80 1 г

Хлорид натрия (0,94-ный) До 100 мл

1553012

Действующее вещество растворяют в пропиленгликоле, полиэтиленгликоле

400 и твине 80. Затем при перемешивании добавляют рас твор хлорида натрия до 100 мл, полученный раствор фильтруют через пористый фильтр (0,2 мк) и разливают в стерильных условиях.

Раствор для внутривенного введе" ния:

0,1 г

0,1 r

Действующее соединение

Полисорбат 80

Пропиленгликоль или полиэтиленгликоль ф00

Вода

3,0 г

До 100 мл

Действующее вещество добавляют к смеси полисорбата и 80 и пропиленгликоля или полиэтиленгликоля 400 в

20 мл воды и перемешивают. Полученный раствор разбавляют водой до

100 мл и фильтруют через пористый фильтр )0,2 мк).

Таблетки, мас.ч.:

Действующее соединение 200 25

Стеарат магния 3

Крахмал 30

Лактоза 116

Поливинилпирролидон 3

Ингредиенты смешивают и гранули- щ руют с .помощью метанола как растворителя. Гранулы высушивают и таблетируют в таблетки с содержанием действующего вещества 200 мг.

Пример 6. Противовирусные свойства соединений., Для заражения испольэовали вирус

Herpes simplex 2 штамм С, выращенных на клеточных культурах НЕР-2. Вирус в течение 1 ч наносят на клеточные

40 культуры, а затем на клетки помещают свежую среду и инкубируют при 35 С до заражения всех клеток. Далее клеточную взвесь замораживают при -70 С, оттаивают и центрифугируют для удале- 45 ния остатков клеток. Надосадочную жидкость делят на порции и хранят при

-70 С ° Раэбавлением 10 тэтой жидкости получают 504-ную инфекционную дозу клеточной культуры (ССТР НЕр-2) и разбавлением 10 1 получают дозу

503-ной летательности (?д) ) при тесте на иммунитет у мышей.

Группы по 20 мышей-самок штамма

Swiss Websr. r весом 15-17 r заража55 лись внутрибрюшинным введением 0,2 мл препарата, содержащего 1/10 LD< /

/мышь. Мыци, заглаженные вирусами в дозе 10 + 10 LDso, служат контролем вирулентЖсти. Введение испытуе" мых соединений начинают через 6 ч после заражения мышей. Мышей разделяют на группы по 20 грызунов, которым вводят соединение в растворе хлористого натрия (подкожно) из расчета

20 мг/кг. Группе из 20 мышей (контрольная) вводят только раствор хлористого натрия. Введение соединений nos. торяют через 24, 48, 72 и 96 ч после заражения °

Противовирусное действие предлагаемых соединений у мышей, зараженных вирусом HSV-2, приведено в табл. 1.

Пример 7. Испытание на острую токсичность у мышей.

Группам 5 мышей-самцов Swiss-Mvbsca (Simonsen) весом 25 г каждая подкожно вводят соединения, приведенные в табл. 2. Испытуемое вещество вводят лишь на первый день опыта.

Затем в течение 21 сут определяют число павших животных.

fl р и м е р 8. Концентрация в плазме при оральном введении.

Мышей-самцов весом 25-30 г помещают в клетки со свободньи доступом к корму и воде. Накануне введения медикамента корм убирают и мышей больше не кормят до истечения 3 ч после введенияя меди ка мент а .

Испытуемую дозу каждого соединения вводят орально. Все оральные дозы взвешивают в носителе, состоящем иэ I карбоксиметилцеллюлоэы натрия (0,53), хлористого натрия (0,9 ), твин 80 (0,44), бензилового спирта (0,9 ) и воды (97,3 ). Каждое соединение вводят через желудочный зонд в объеме дозы, эквивалентной 30 мг/кг предлагаемого соединения.

Концентрация в плазме каждого соединения в пересчете на предлагаемое соединение, взятом в качестве эталона, приведена в табл. 3.

Формула и э о б р е т е н и я

Способ получения производных 9-(2-, -пропоксиметил)гуанина. общей формулы

) ир ц -сн оси-сн осой

4,осоя где к - С,-С,>-алкил или 1-адамантил, о;, и ч а ю шийся тем, что соединение общей формулы

Таблица 1

-СН ОСК-CH ОСОЦ н,асов

-С/O/R

Средняя выживаемость, сут, на 21 сут после заражения

Оральная доза, м г/кг»

SSV

»ФIf»

Соединения

8,6+1,0

8,6+1,0

8,6+1,0

8,6+1, 0

11 7+2,8

12,1+1,5

13,6+4,3

13,4g5,6

12,5+4,4

8,3+0,9

14, 7+2,1

11,1i2,3

8,310,9

8,3+0,9

10, 4+1,4

9,6+1, 0

9, 7+1,0

9,0+1 1

10, 0+1,8

8,8+1,8

8,8+1,8

8,8+1,8

8, 8+1,8

20

20

8,9+2,1

Введение осуществляют ежедневно в течение 4 сут.

»"" Заражение вирусами HSV-2 (штамма С) путем внутрибрюшинного введения.

«»" Увеличение выживаемости по сравнению с контрольными мышами, обработанными только SSV во всех случаях оказываются статистически показательным. """ Средство, содействующее суспендированию (SSV).

»»»»»Одно стандартное отклонение.

»»"""» Соединение по (1$ .

0 „

)я М-СН,-О HCH ÎÑOÖ ,OCOR

Диацетилокси

Дипропаноилокси

Дибутаноилокси

Дигексаноилокси ди-2-,2-диметилпропаноилокси

Ди-1-адамантилкарбонилокси

Водород »" "" "

Ди-Н-октаноилокси

Ди-Н-деканоилокси

Ди-Н-додеканоилокси

Ди-Н-тетрадеканоилокси

Ди- Н- гексадеканоилокси

1553012 1О где R имеет указанные значения;

Y — тритилэащитная группа, подвергают вэаимодейст вию с ледяной уксусной кислотой.

12

Таблица 2

1553012! x)

Ж ж-сн,осн-си,ocoR н,асов

-С/О/К

Количество мышей

ВведеДоза, мг/кг

Количество погибших осо1" 511 э мг/кг ние бей

Подкожно

Контроль

Ди-2, 2-диме" тилпропаноилокси

Ди-2,2-диметилпропаноилокси

415

То же 3320

830

Подкожно

То же 1660

11

Ди-1-адамантилкарбонилокси 568

То же 1136

11

2272

II

4544

Ди - Н-дека ноилокси

То же

13320

II

11 !

11

>4544

497

994

1988

- 3376

I1 !

11

11.> 3976

Табли ца 3

-С/О/R

Значение концентрации

1,23

1,48

1115

Водород

Диацетил

Дипропионил

Дибутирил

Составитель В. Волкова

Редактор И. Бобкова ТехредМ.Моргентал Корректор T. Малец

Заказ 342

Тираж 323

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, W-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул.Гагарина, 101