Способ перфузионной фиксации головного мозга у экспериментального животного

 

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологическим методам исследования . Целью является повышение качества способа за счет улучшения фиксации сосудистой системы. Цель достигается тем, что перед фиксацией проводят новокаиновую двухстороннюю вагосимпатическую блокаду , а фиксирующий раствор вводят внутрисердечно при 37-38°С в количестве 1,5- 3,0 мл на 100 г массы животного. Данная фиксация позволяет исключить артефакты в структуре мозга. Ткань может быть использована для электронно-микроскопических исследований. о

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1636719 А 1 (i9) SU iii) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4442295/14 (22) 17.06.88 (46) 23.03.91. Бюл. № 11 (71) Ворошиловградский медицинский институт (72) М. Х. Абакаров и А. А. Виноградов (53) 616-0.88.8 (088.8) (56) Угрюмов В. М. Регуляция мозгового кровообращения. — Л.: Медицина, 1984, с. 138.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологическим методам исследования.

Цель изобретения — повышение качества способа за счет лучшей фиксации сосудистой системы.

Способ осуществляют следующим образом.

Животное наркотизируют. Далее вскрывают грудную клетку, каюлируют аорту.

В левое предсердие перфузируют 10 — 12%ный раствор нейтрального формалина, подогретого до 37 — 38 С. Перфузию осуществляют через 10 — Г5 мин после проведения двухсторонней новокаиновой вагосимпатической блокады. Фиксирующий раствор вводят со скоростью 100 мл в минуту из расчета 1 5 — 3 0 мл на 100 r массы животного. Перфузию прекращают после остановки сердечной деятельности.

Доза новокаина (0,1 мл/100 г - 0,25%r0 раствора) рассчитана на получение наименьшего токсического действия на центральную нервную систему, а также получение (51)5 G 01 N 1 28 G 09 В 23 28 (54) СПОСОБ ПЕРФУЗИОННОГ1 ФИКСАЦИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЖИВОТНОГО (57) Изобретение относится к медицине, а именно к гистологическим методам исследования. Целью является повышение качества способа за счет улучшения фиксации сосудистой системы. Цель достигается тем, что перед фиксацией проводят новокаиновую двухстороннюю вагосимпатическую блокаду, а фиксирующий раствор вводят внутрисердечно при 37 — 38 С в количестве 1,5—

3,0 мл на 100 г массы животного. Данная фиксация позволяет исключить артефакты в структуре мозга. Ткань может быть использована для электронно-микроскопических исследований. адекватной инфильтрации тканей без сдавления первых окончаний и венозных сосудов. В течение 10 в 15 мин наступает полный вагосимпатический блок, что позволяет выполнять черезкожную катетеризацию левого желудочка сердца.

Нагревание фиксирующего раствора до

37 — 38 С проводят для профилактики «холодового» раздражения проводящей системы сердца и синусокартодиодной зоны.

Введение фиксирующего раствора в количестве 1,5 — 3,0 мл на 100 г массы животного позволяет компенсировать увеличение объема сосудистого русла (за счет ди.патации дисимпатизированных сосудов) в условиях вагосимпатической блокады.

Пример. Экспериментальное животное массой 8,5 кг под общим обезболиванием (10%-ный раствор гексенала из расчета 20 мг/кг внутрь и брюшину введен гепарин (7500 м.е. кг) . Выполнена двухсторонняя новокаиновая вагосимпатическая блокада 0,25% ным раствором новокаина из расчета 0,1 мл/100 г массы животного

1636719

Формула изобретения

Составитель Л. Стебаева

Техред А. Кравчук Корректор Т. Малец

Тираж 395 Подписное

Редактор -I. Зайцева

Заказ 810

ВНИИГ!И Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат «Г!атент», г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 (8,5 мл). Через 15 мин внутри сердечно со скоростью 100 мл/мин введен 10@-ный раствор формалина на фосфатном буфере (pH 7,2 — 7,4) из расчета 3,0 мл/100 г (25,5 мл), нагреть1й до 37 — 38 С.

Сердечная деятельность не прекращалась, до окончания перфузии.

Головной мозг извлекался из черепа, биоптат из области крестообразной борозды взят на исследование, проведена дофиксация и изготовление блоков по Н. Н. Боголепову.

На электроннограммах видны четко контуры оболочек клеток, мембранные комплексы не разрушены, цитоплазматические органеллы выражены четко.

Особую контрастность приобретают структуры сосудистой системы, что позволяет получать объективные, информативные данные при излучении головного мозга.

Способ перфузионной фиксации головного мозга у экспериментального животного, путем внутрисердечного введения фиксирующего раствора, подогретого до 37 — 38 С, отличающийся тем, что, с целью повышения качества способа за счет улучшения фиксации сосудистой системы, перед фиксацией проводят двухстороннюю вагосимпатическую блокаду, а фиксирующий раствор вводят через 10 — 15 мин после блокады, при этом раствор вводят в количестве 1,5 — 3,0 мл на 100 г массы животного.