Способ диагностики ретинопатии

 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии. У больных сахарным диабетом из коньюктивы глаза осуществляют забор слезной жидкости, выявляют в ней уровень антител в реакции пассивной гемагглютинации к S-антигену. При уровне антиУел 1:32-1:64 диагностируют доклиническую стадию ретинопатии, а при увеличении титров 1 128 и выше или снижении титров 1:16 и ниже - диагностируют диабетическую ретинопатию По сравнению с известным способом точность увеличивается на 1,3% и появляется возможность выявления развития клинической формы диабетической ретинопатии.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4682842/14 (22) 24.04.89 (46) 23.09.91. Бюл, М 35 (71) Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца (72) Н. С. Зайцева, О. С, Слепова, Л. К, Дудникова, Л. С, Ли, О. И. Щербатова, И. В.

Цапенко, Г, P. Каламкаров, Т. Ф. Шевченко и M. А. Островский (53) 615.374(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

N 1573420, 1989, (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕТИНОПАТИИ

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для диагностики патологии сетчатки у больных сахарным диабетом.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Забор слезной жидкости проводят с помощью меланжера. Тканеспецифические антитела определяют в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Перед постановкой РПГА слезную жидкость инактивируют в водяной бане (30 мин при 56 С) и затем адсорбируют бараньими эритроцитами (18 ч).

РПГА проводят в микроимитаторе Такачи по общепринятой методике, диагностикум используют в виде 1%-ной взвеси сенсибилизированных эритроцитов в объеме 0,025 мл на 0,05 мл каждого разведения исследуемой слезной жидкости, начиная с 1:16, „„Я „„1679381 А1 (я)ю G 01 N 33/53 (57) Изобретение относится к медицине, а .именно к офтальмологии. У больных сахарным диабетом иэ коньюктивы глаза осуществляют забор слезной жидкости, выявляют в ней уровень антител в реакции пассивной гемагглютинации к S-антигену. При уровне антител 1:32-1:64 диагностируют доклиническую стадию ретинопатии, а при увеличении титров 1:128 и выше или снижении титров 1:16 и ниже — диагностируют диабетическую ретинопатию. По сравнению с известным способом точность увеличивается на

1,3% и появляется возможность выявления развития клинической формы диабетической ретинопатии.

В качестве сенситина используют S-антиген (очищенную от примесей водорастворимую фракцию наружных сегментов палочек (НСП) сетчатки, полученную иэ глаз крупного рогатого скота). НСП выделяют иэ сетчатки и очищают от примесей путем нескольких исследовательных центрифугирований в растворах сахарозы, содержащих

0,1 М KCI и буфер (0,05 М - трис HCI, рН =

7,4), Затем НСП подвергают осмотическому шоку в 10-кратном объеме дистиллированной воды и центрифугируют при 100000 g, надосадочную жидкость концентрируют диализом против 50%-ного раствора полиэтиленгликоля (м,в. 15000). Полученный раствор, содержащий водорастворимую фракцию белков НСП (1 мг/мл) — S àíòèãåí. используют для сенсибилизации эригроцитов. В качестве носителя антигена исполь- зуют 10% бараньи эритроциты, стабилизированные ацетальдегидом (в течение 20 сут, и танизированные в течение 15 мин при

1679381

20

37 С, которые сенсибилизируют S-антигеном в дозе 68 мкг/мл в течение 60 мин (рН среды 6,4, температура — 45 — 48 С). Сенсибилизированные эритроциты консервируют

0,3%-ным раствором формалина, Срок хранения диагностикума — до 2-х лет. Обнаружение у больных сахарным диабетом беэ клинических признаков диабетической ретинопатии, S-антител в слезной жидкости расценивается как показатель субклинических изменений в сетчатке, диагностируют доклиническую стадию диабетической ретинопатии (ДР). При высоких титрах антител (1:128 и выше) прогнозируют развитие ДР.

При титрах 1:64 и ниже, в том числе при отрицательных результатах, исследование повторяют в динамике через 4 мес. При стабильном поддержании титров 1:32 — 1:64 прогнозируют сохранение доклинической стадии. При подьеме титров до 1;128 и выше или падении до 1:16 и ниже прогнозируют прогрессирование ДР. Стабильно отрицательные результаты в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) расценивают как показатель интактности сетчатки.

Пример 1, Больная С., 41 год, Диагноз: сахарный диабет, инсулинзависимый, Длительность диабета 13 лет, При первичном обследовании клинически выраженных признаков патологии сетчатки при офтальмоскопии глазного дна не выявлено; при иммунологическом обследовании обнаружены высокие титры S-антител в слезной жидкости обоих глаз (1;256), что дало основание для прогноза развития ДР, При наблюдении в динамике в течение 2 лет в обоих глазах отмечалось стабильное поддержание высокого уровня S-антител (1;128, 1:256).

При офтальмоскопии глазного дна в обоих глазах отмечались микроневриэмы; геморрагии точечные, в правом глазу — пятнистые, в OS — мягкий экссудат.

Таким образом, обнаружение высоких титров S-антител в слезной жидкости предшествовало развитию клинически явной патологии сетчатки и явилось ранним прогностическим признаком ДР, Пример 2. Больной П., 13 лет.

Диагноз: сахарный диабет, инсулинэависимый, средней степени. Длительность диабета 4 года. Клинико-лабораторные обследования в динамике проводились в течение

2,5 лет, с интервалами в 6, 7 и 8 мес. На протяжении всего периода наблюдения клинических признаков ДР не выявлено.

Первичное иммунологическое обследование выявило S-антитела в слезной жидкости обоих глаз (в правом титр 1:64. в левом—

1:32), что дало основание предполЬжить субклиническое вовлечение сетчатки в патологический процесс.

При диспансерном наблюдении в динамике титры S-антител стабильно поддерживались на уровне 1:32 — 1:64 в обоих галаэах, данные ЭФИ без изменений.

Таким образом длительное поддержание умеренных титров S-антител явилось прогностическим признаком сохранности сетчатки при СД.

Пример 3, Больная С„10 лет. Диагноз; сахарный диабет, длительность диабета 2 r. При первичном обследовании изменений на глазном дне не выявлено, в слезной жидкости обнаружены S-антитела в умеренных титрах (1;64), что позволило предположить субклиническое вовлечение сетчатки в патологический процесс, уровень

S-антител в слезной жидкости правого глаза снизился до 1:16, в левом — антитела не обнаружены.

Падение титров S-антител с умеренных до минимальных позволило диагностировать состояние S-зависимого иммунодефицита и прогнозировать развитие ДР, При контрольном обследовании через 3,5 мес.

S-антител" в слезной жидкости обоих глаз не обнаруживались, при офтальмоскопии глазного дна отмечалось умеренное расширение и извитость вен, диагностирована диабетическая ангиопатия, Таким образом, падение первоначально умеренных титров S-антител в слезной жидкости предшествовало развитию клинически явной патологии сетчатки и явилось ранним прогностическим признаком ДР.

При стабильно отрицательных показателях или при длительном поддержании титров на уровне 1:32 — 1:64 клинически явная

ДР не развивалось (Р < 0,001), Переход из доклинической стадии ДР в клиническую и прогрессирование ДР были сопряжены с выраженным накоплением S-антител (титры

1:128 — 1;1024) или падением первоначально умеренных титров до минимальных (практически отрицательных).

Результаты иммунологического обследования, свидетельствующие о благоприятном прогнозе, при обнаружении умеренных титров S-антител и о пцизнаках прогрессирования ДР при уровнях, характеризующих аутоаллергические реакции (1;128 — 1;1024) или состояние иммунодефицита (падение титров до минимальных) были подтверждены также сравнительным анализом покаэателей электрофизиологического исследования (ЗФИ) в группах больных с различными уровнями S-антител в слезной жидкости.

Преимущество предлагаемого способа заключается в простоте и доступности его

1679381

95 ), Составитель В.Литовченко

Техред М.Моргентал Корректор М.Шароши

Редактор А.Шандор

Заказ 3210 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 проведения в широкой практике без сложного оснащения и неинвазивности исследования больных диабетом, Эти преимущества позволяют применять предлагаемый экспресс-метод при диспансерном обсле- 5 довании больных диабетом.

По сравнению с прототипом предлагаемый способ значительно (в 2-2,5 раза) сокращает трудозатраты на одного больного и повышает пропускную способность при об- 10 следовании больных, возрастает точность диагностики (по прототипу точность составляет 93 3 а по предлагаемому способу—

Формула изобретения

Способ диагностики ретинопатии у больных диабетом путем офтальмологического исследования, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа. осуществляют забор слезной жидкости, определяют в ней содержание антител к S-антигену сетчатки в реакции пассивной гемагглютинэции и при титрами 1:32 — 1 64 диагностируют субклиническую стадию диабетической ретинопатии, а при снижении титров 1;16 и ниже или их увеличении до

1:128 и выше диагностируют диабетическую ретинопатию.